糖尿病大鼠缺血再灌注脑组织核转录因子-κB的表达及意义

目的观察糖尿病大鼠缺血再灌注脑组织NF-κBp65的表达及意义。方法89只Wistar大鼠随机分为正常对照组、假手术组、正常血糖缺血再灌注组(nIR)和糖尿病缺血再灌注组(dIR),观察时间点为再灌注0小时、6小时、12小时、24小时,每个时间点各5只。用小剂量链脲佐菌素(STZ)腹腔注射诱发形成糖尿病大鼠模型,采用线拴法复制大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型,应用免疫组化的方法测定NF-κBp65的表达。结果dIR组和nIR组NF-κBp65主要表达于缺血周边区,dIR组再灌注0小时、6小时、12小时、24小时NF-κBp65阳性细胞百分率分别为24.7±4.2、53.4±8.0、72.4±7.2、60.7±5.0,与nIR组同一时间点比较,差异有显著性(P<0.05)。结论糖尿病大鼠缺血再灌注脑组织NF-κBp65表达增加和表达时间提前可能是糖尿病加重脑缺血再灌注损伤的机制之一。

NF—KBp65在糖尿病大鼠脑缺血再灌注中的表达

目的：通过观察糖尿病大鼠局灶性脑缺血再灌注后转录核因子NF-kBp65表达的动态变化，以探讨糖尿病在脑缺血再灌注损伤中的可能机制。方法：将SD大鼠随机分为正常对照组（A组）、假手术组（B组）、脑缺血再灌注组（C组）、糖尿病脑缺血再灌注组（D组），链脲佐菌素腹腔注射制作糖尿病模型，线栓法制作大鼠大脑中动脉缺血2h再灌注模型，免疫组织化学方法观察再灌注第3、第6、第24、第48小时脑组织中NFxBp65表达的动态变化。结果：脑缺血再灌注后，C组在第6小时、D组在第3小时即可见到NF-kBp65免疫阳性细胞，随着再灌注时间的延长，NF—KBp65免疫阳性细胞表达增加，第24小时达高峰，第48小时开始下降；NF_xBp65表达在各个缺血再灌注时间点上，D组较c组增加（P〈0．05）。结论：糖尿病可促进NF-kBp65活化加重脑缺血再灌注损伤。

糖尿病大鼠缺血再灌注脑组织NF-κB和ICAM-1的表达及意义

目的观察糖尿病大鼠缺血再灌注脑组织核转录因子(NF-κBp65)和细胞间粘附因子(ICAM-1)表达及意义。方法将89只Wistar大鼠随机分为对照组、假手术组、正常血糖缺血再灌注组(nIR)和糖尿病缺血再灌注组(dIR),观察时间点为再灌注0、6、12、24h,每个时间点各5只,用小剂量链脲佐菌素(STZ)腹腔注射诱发形成糖尿病大鼠模型,采用线栓法复制大鼠大脑中动脉闭塞再灌注模型,应用免疫组化的方法测定NF-κBp65和ICAM-1的表达水平。结果dIR组和nIR组NF-κBp65和ICAM-1主要表达于缺血周边区,dIR组再灌注0、6、12、24h NF-κBp65阳性细胞百分率分别为(24.7±4.2)、(53.4±8.0)、(72.4±7.2)、(60.7±5.0)%,与nIR组同一时间点比较差异有显著性(P<0.05);dIR组再灌注0、6、12、24h ICAM-1阳性微血管数分别为(0.8±0.8)、(2.4±1.6)、(5.1±2.1)、(3.6±1.6)条/8个400倍视野,与nIR组同一时间点比较0h组之间差异无显著性(P>0.05),而6、12、24h差异有显著性(P<0.05);缺血周边区脑组织NF-κBp65与ICAM-1的表达有明显的时间依从性。结论糖尿病大鼠缺血再灌注脑组织NF-κBp65和ICAM-1表达增加和表达时间提前可能是糖尿病加重脑缺血再灌注损伤的机制之一。

高频重复经颅磁刺激预处理对全脑缺血大鼠再灌注损伤的影响

目的研究高频重复经颅磁刺激(rTMS)预处理对脑缺血再灌注大鼠神经功能缺损、血脑屏障以及脑源性神经营养因子(BDNF)、磷酸化酪氨酸激酶受体B(pTrkB)的影响。方法将40只雄性SD大鼠按随机区组法分为对照组、模型组、rTMS预刺激3次组、rTMS预刺激7次组,每组10只。采用改良四血管阻断法(4-VO)制作全脑缺血再灌注损伤模型,改良神经功能缺损评分(mNSS)测量神经功能缺损,Western blotting检测脑组织BDNF和pTrkB蛋白表达。结果rTMS预处理3次组和7次组大鼠的mNSS评分分别为(7.42±1.76)分、(5.38±1.91)分,较模型组的(9.87±1.23)分明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05);rTMS预处理7次组伊文思蓝含量为(17.538±1.984)μg/g,较模型组的(29.829±8.633)μg/g明显下降,BDNF和pTrkB蛋白表达分别为23.247±1.782、16.876±1.873,较模型组的12.093±1.289、4.211±0.078明显增加,差异均有统计学意义(P<0.05);rTMS预处理3次组大鼠的BDNF和pTrkB蛋白表达分别为16.683±1.492、8.830±1.142,较模型组的12.093±1.289、4.211±0.078明显增加,差异均有统计学意义(P<0.05);rTMS预处理7次组大鼠的mNSS评分为(5.38±1.91)分,较rTMS预处理3次组的(7.42±1.76)分明显降低,BDNF和pTrkB蛋白表达分别为23.247±1.782、16.876±1.873,较rTMS预处理3次组的16.683±1.492、8.830±1.142明显增加,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论高频rTMS预处理可以改善全脑缺血再灌注大鼠血脑屏通透性,上调BDNF和pTrkB蛋白表达,降低缺血再灌注神经功能损伤。

葛根总黄酮对糖尿病合并脑缺血再灌注大鼠血液生化的影响

目的探讨葛根总黄酮(PLIS)对糖尿病合并脑缺血再灌注损伤大鼠模型的影响。方法采用四氧嘧啶成功建立糖尿病模型,在此基础上通过结扎ECA建立脑缺血再灌注大鼠模型,创建糖尿病合并脑缺血再灌注损伤大鼠模型。通过测定血糖、糖化血清蛋白、NO、NOS、SOD、MDA水平的变化,分析大鼠模型神经症状评分,探讨葛根总黄酮对糖尿病合并脑缺血再灌注损伤大鼠模型的影响。结果葛根总黄酮能降低模型大鼠血糖、糖化血清蛋白水平,降低NO、NOS、MDA水平,显著提高SOD水平,神经症状评分下降,病理损伤得到明显改善。结论PLIS有降低糖尿病模型大鼠血糖和保护脑缺血再灌注损伤的作用。

自噬和PI3K-Akt-mTOR信号转导通路参与缺血预处理对糖尿病大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的探讨自噬和磷脂酰肌醇3激酶-(phosphatidylinositol 3 kinase-protein kinase,PI3K)-蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)-雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)信号转导通路在缺血预处理(ischemic preconditioning,IPC)对糖尿病大鼠心肌缺血再灌注损伤(ischemia/reperfusion injury,IRI)保护中的作用。方法 60只SD大鼠,高脂高糖饮食喂养1周后腹腔注射链脲佐菌素制备糖尿病大鼠模型,随机分为糖尿病空白对照组(DS组)、糖尿病IRI对照组(DC组)、雷帕霉素+糖尿病IRI组(Ra+DIRI组)、渥曼青霉素+糖尿病IRI组(Wo+DIRI组)、雷帕霉素+糖尿病IPC组(Ra+DIPC组)和渥曼青霉素+糖尿病IPC组(Wo+DIPC组)各10只。实验中连续监测心率、动脉收缩压、平均动脉压,计算心率和收缩压乘积;记录缺血期和再灌注30min内心律失常评分;再灌注120min检测血清心肌肌钙蛋白I、肌酸激酶心肌型同工酶浓度;再灌注结束后处死大鼠,计算心肌梗死面积,采用Western blot法检测心肌微管相关蛋白1轻链3-Ⅱ、Beclin-1、mTOR、PI3K和磷酸化Akt(phosphorylated Akt,P-Akt)/Akt表达。结果与DC组比较,再灌注60、120min时Wo+DIPC组平均动脉压、心率和收缩压乘积明显增高;DC组、Ra+DIRI组缺血期室性心动过速和心室颤动发生率及缺血期室性心律失常评分明显高于Wo+DIPC组(P<0.05);Wo+DIPC组心肌梗死面积[(71.8±6.0)%]、肌酸激酶心肌型同工酶浓度[(9.70±2.03)μg/L]明显低于DC组[(75.4±7.1)%、(11.51±2.35)μg/L]和Ra+DIPC组[(77.8±6.9)%、(11.32±2.33)μg/L](P<0.05);Wo+DIPC组Beclin-1表达(0.26±0.03)明显低于DC组(0.34±0.08)(P<0.05),mTOR、PI3K表达和P-Akt/Akt比值(0.36±0.04、0.37±0.03、0.68±0.05)明显高于DC组(0.26±0.08、0.29±0.04、0.49±0.10)(P<0.05)。结论渥曼青霉素激活PI3K-Akt-mTOR信号转导通路可抑制自噬,改善IPC对糖尿病大鼠IRI的保护作用。