基于MAPK信号通路探讨双醋瑞因对IL-1β诱导软骨细胞退变的干预作用

目的基于丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)信号通路,从细胞分子水平探讨双醋瑞因对膝骨性关节炎(osteoarthritis,OA)的抗炎机制。方法选取2~3月龄新西兰兔5只,提取并培养软骨细胞至第2代软骨细胞,使用白细胞介素1β(interleukin 1 beta,IL-1β)进行干预后获得退变软骨细胞模型。将分离培养的软骨细胞分为空白对照组、IL-1β组、双氯芬酸钠组和双醋瑞因低浓度组、双醋瑞因中浓度组、双醋瑞因高浓度组。空白对照组不进行任何干预,其他组选用IL-1β诱导的退变软骨细胞模型。双氯芬酸钠组采用1.6 mg/L双氯芬酸钠处理退变软骨细胞;双醋瑞因低、中、高浓度组分别采用0.1、1、10 mol/L的双醋瑞因处理退变软骨细胞。采用酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测各组细胞上清液基质金属蛋白酶13(matrix metalloproteinase 13,MMP-13)、IL-17、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor alpha,TNF-α)浓度,分别采用实时荧光定量反转录聚合酶链式反应(reverse transcription quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)和Western blot检测各组细胞中p38、c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)、细胞外信号调节蛋白激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)、p65、MMP-13 mRNA及蛋白表达水平。结果ELISA结果显示,与空白对照组相比,IL-1β组细胞上清液中MMP-13、IL-17、TNF-α浓度显著升高(P均<0.05);与IL-1β组相比,双氯芬酸钠组和双醋瑞因低、中、高浓度组细胞上清液中MMP-13、IL-17、TNF-α浓度显著降低(P均<0.05);与双氯芬酸钠组相比,双醋瑞因高浓度组MMP-13、IL-17、TNF-α浓度明显降低(P均<0.05);与双醋瑞因低浓度组相比,双醋瑞因高浓度组细胞上清液中MMP-13、IL-17、TNF-α浓度显著降低(P均<0.05)。RT-qPCR、Western blot结果显示,与空白对照组相比,IL-1β组p38、JNK、ERK、p65、MMP-13 mRNA表达和蛋白水平显著升高(P<0.05);与IL-1β组相比,双氯芬酸钠组和双醋瑞因低、中、高浓度组p38、JNK、ERK、p65、MMP-13 mRNA和蛋白表达水平显著降低(P均<0.05);与双氯芬酸钠组相比,双醋瑞因高浓度组p38、JNK、ERK、p65、MMP-13 mRNA和蛋白表达水平明显降低(P均<0.05);与双醋瑞因低浓度相比,双醋瑞因高浓度组p38、JNK、ERK、p65、MMP-13 mRNA和蛋白表达水平显著降低(P均<0.05)。结论MAPK信号通路在IL-1β诱导的新西兰兔退变软骨细胞中过表达。双醋瑞因可以通过调控MAPK信号通路,起到保护IL-1β诱导的新西兰兔退变软骨细胞的作用。

大黄酸及其衍生物的生物活性研究进展

大黄酸是中药大黄的主要成分之一,临床可用于治疗骨关节炎、糖尿病肾病等疾病,并且具有协同抗肿瘤的作用。本文综述了大黄酸在抗炎、抗肿瘤等方面的药理活性及作用机制,并讨论了其母核取代的衍生物、氧杂蒽醌的类似物和酯衍生物的生物活性。

合成双醋瑞因的新方法

以芦荟素为原料,经脱苷、氧化反应得到大黄酸(4);4经三氟甲磺酸锌催化的乙酰化反应合成了双醋瑞因,总收率86.2%,其结构经1H NMR,IR和MS确证。

双醋瑞因的合成及质量研究

以芦荟大黄素为起始原料,经KMnO4氧化、Ac2O乙酰化两步反应合成了双醋瑞因。与现有工艺相比,该方法操作简便,收率高,纯度高,且降低了原料药的合成难度。

双醋瑞因治疗疼痛性膝骨关节炎的疗效和安全性研究

目的评价双醋瑞因胶囊治疗疼痛性膝骨关节炎的疗效和安全性。方法通过随机、双肓、双模拟、阳性药(双氯芬酸钠)平行对照方法,观察双醋瑞因和双氯芬酸钠治疗42例疼痛性膝骨关节炎患者的疗效和安全性。结果双醋瑞因胶囊治疗组和双氯芬酸钠对照组均能明显改善20 m步行痛、关节触痛症状、WOMAC骨关节炎指数、健康状况、关节肿胀指数。两组治疗前后比较差异均有统计学意义,两组间比较差异无统计学意义,两者疗效相当。同时两组间的患者和医生对疗效和耐受性的总体评价相当；安全性亦相仿,主要是一过性胃肠道不良反应。结论双醋瑞因是一种新型的治疗疼痛性膝骨关节炎的有效和安全的药物。

双醋瑞因人体生物等效性

目的:评价2种双醋瑞因制剂在人体内的生物等效性。方法:20例男性健康志愿者随机交叉单剂量口服试验制剂和参比制剂,利用液相-质谱联用法(LC-MS/MS)法测定大黄酸体内的血药浓度。结果:试验制剂和参比制剂的主要药动学参数如下:AUC_(0-t)分别为(25 205.6±15 694.9)μg·h·L^(-1)和(24 927.7±15 869.8)μg·h·L^(-1);AUC_(0-∞)分别为(26 266.3±17021.4)μg·h·L^(-1)和(25 961.7±16 592.5)μg·h·L^(-1);C_(max)分别为(4 276.8±2 391.8)μg·L^(-1)和(4 352.8±2 415.4)μg·L^(-1);t_(max)分别为(2.3±0.7)h和(2.3±0.8)h;t_(1/2)分别为(4.5±1.4)h和(4.4±0.9)h;经方差分析和双单侧t检验显示,主要药动学参数无显著差异,以AUC_(0-t)计算大黄酸的相对生物利用度为(105.2±22.6)%。结论:试验制剂与参比制剂具有生物等效性。