核糖体蛋白L5在Diamond-Blackfan贫血伴发唇腭裂中作用机制的研究进展

核糖体蛋白L5(RPL5)是核糖体大亚基的一部分,携带RPL5基因突变的Diamond-Blackfan贫血患者会伴发多种畸形,包括唇腭裂等颅面畸形以及心脏缺陷等躯体畸形。但是在RPL5突变导致核糖体生物发生缺陷的情况下,唇腭裂发生的机制仍然知之甚少。本文综述了近年对于RPL5的研究,并讨论了突变的RPL5核糖体蛋白与唇腭裂发生的可能机制。

Diamond-Blackfan贫血患儿的临床分析

目的 分析Diamond-Black fan贫血（DBA）患儿的临床特征、诊断方法及治疗方案.方法 选取2003年7月至2013年7月于中国医学科学院北京协和医学院血液病医院（血液学研究所）儿童血液病诊疗中心确诊为DBA的61例患儿作为研究对象.对DBA患儿的临床资料进行回顾性分析.本研究遵循的程序符合中国医学科学院北京协和医学院血液病医院（血液学研究所）人体试验委员会所制定的伦理学标准,得到该委员会批准,征得受试对象监护人的知情同意,并与之签署临床研究知情同意书.通过本院儿童血液病诊疗中心采集61例DBA患儿的血液标本;对其中26例患儿采用体外造血祖细胞集落形成细胞（CFC）实验检测其红系细胞集落形成单位（CFU-E）,红系细胞爆式集落形成单位（BFU-E）;对其中18例患儿进行9种核糖体蛋白基因全外显子捕获测序;并对BFU-E,CFU-E减低与无减低患儿糖皮质激素反应率的比较,及核糖体蛋白基因突变呈阳性与突变呈阴性患儿糖皮质激素反应率的比较进行统计学分析.结果 ①61例DBA患儿中位发病年龄为3个月（0～39个月）,15例（24.5％）患儿伴有躯体畸形.②61例DBA患儿初诊时,中位血红蛋白（Hb）水平为49 g/L（15～80 g/L）,中位红细胞计数为2.15＆#215;1012/L [（1.15～4.30）x10^12/L],平均红细胞体积（MCV）中位值为87.3 fl（69.0～105.0 fl）;其中,21例DBA患儿行红细胞生成素（EPO）水平检测,90.5％（19/21）患儿EPO水平升高;42例DBA患儿行骨髓形态学检查,中位红系细胞比例为2％（0～17.5％）;26例患儿行体外造血祖细胞CFC实验,50.0％（13/26）患儿B-FUE与C-FUE减低,23.0％（6/26）患儿为正常,26.9％（7/26）患儿为增高.③18例DBA患儿行9种核糖体蛋白基因全外显子捕获测序,50.0％（9/18）患儿突变呈阳性,分别为RPS19基因突变为5例（27.8％）,RPL11、RPL5、RPL35a及RPS7基因突变各为1例（5.6％）.44.4％ （4/9）核糖体蛋白基因突变呈阳性患儿具有躯体畸形,22.2％（2/9）患儿生长发育迟缓.④50例DBA患儿接受口服泼尼松治疗,反应率为64.0％（32/50）,其中15例患儿获得缓解.经激素治疗无反应与未获得缓解患儿中20例患儿加用环孢素A治疗,2例获得缓解.接受随访的56例DBA患儿中,经糖皮质激素、红细胞输注及异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）治疗方案后缓解率为33.9％（19/56）,死亡比例为5.4％（3/56）.BFU-E及CFU-E减低的患儿经糖皮质激素治疗的反应率（54.5％,6/11）低于BFU-E及CFU-E无减低的患儿（66.7％,6/9）,但差异无统计学意义（P=0.425）.核糖体蛋白基因突变呈阳性的患几经糖皮质激素反应率（77.8％,7/9）高于突变呈阴性的患儿（55.6％,5/9）,但差异亦无统计学意义（P=0.342）.结论 DBA患儿发病多＜1岁,约25％患儿伴有躯体畸形;EPO水平检测、体外造血祖细胞CFC实验与核糖体蛋白基因突变对DBA诊断、治疗及预后均具有一定指导意义;口服糖皮质激素为DBA的首选治疗方案,红细胞输注及allo-HSCT亦为有效治疗方案.

纯红细胞再生障碍性贫血临床特点与RPS19、RPL5、RPL11基因突变之多中心研究

目的通过对纯红细胞再生障碍性贫血的临床回顾与RPS19、RPL5、RPL11基因突变的检测,分析比较先天性纯红细胞再生障碍性贫血与获得性纯红细胞再生障碍性贫血的临床异同和RPS19、RPL5和RPL11基因突变情况。方法 20例来自多中心的儿童纯红细胞再生障碍性贫血,先天性14例,获得性6例,分析临床资料并比较两组发病年龄、外周血细胞计数和对治疗的反应。Sanger双脱氧链终止法对患儿RPS19、RPL5和RPL11基因测序。结果先天性纯红细胞再生障碍性贫血42.8%伴有先天畸形,与获得性纯红细胞再生障碍性贫血比较,网织红细胞较低(P<0.05),外周血WBC、HGB和PLT无差异。激素治疗有效率分别是:先天性78.6%、获得性100%(P<0.05)。先天性纯红再障7.1%检出RPS19点突变,获得性纯红再障未发现RPS19突变。先天性纯红再障和获得性纯红再障RPL5和RPL11基因均未发现突变。结论先天性纯红再障42.8%合并畸形,网织红细胞均低于获得性纯红再障,RPS19突变率低于国外文献报道。RPS19突变可能与先天性纯红再障有关。获得性纯红再障发病与RPS19、RPL5和RPL11基因异常可能无关。

Diamond-Blackfan贫血临床和分子生物学研究进展

Diamond—Blackfan贫血（DBA）为一种少见的先天性骨髓衰竭性疾病，是一种源于骨髓红系细胞显著减少或缺如所致的纯红细胞性贫血，因Diamond和Blackfan于1938年首先报道4例此类疾病而得名。其发病率为5／1000000～7／1000000。据美国DBA登记处统计，每年美国及加拿大仅有25—30例发病，尚无此病在我国发病情况的相关报道。近期有关本病发病机制的研究提示，本病为第一个与核糖体突变相关联的遗传性疾病，由此引起了国内外研究者的广泛重视。现就DBA的临床及实验室研究现状作以简单介绍。

先天性纯红细胞再生障碍性贫血6例患儿的临床观察

目的 探讨先天性纯红细胞再生障碍性贫血的早期诊断。方法 观察临床表现、周围血象和骨髓象。结果 贫血发病年龄早 ,生后 10天～ 4个月起病 ,网织红细胞降低 ,白细胞和血小板正常 ,多数患儿骨髓选择性地红系造血障碍 ,部分病儿有遗传性。结论 婴儿早期出现红细胞减少 ,应作网织红细胞计数和骨髓检查 ,以确定诊断 ,避免滥用补血药。

EPO、甲强龙在先天性纯红细胞再生障碍性贫血中的疗效观察

目的观察重组人促红细胞生成素(Epo)和大剂量甲泼尼龙在小儿先天性纯红细胞再生障碍性贫血(DBA)中的治疗作用。方法将初诊的DBA患儿随机分为2组,分别采用Epo和大剂量甲强龙治疗,观察两药的治疗效果。结果 Epo和甲泼尼龙对部分患儿有效,两药短期应用均无严重的不良反应。结论 Epo和甲泼尼龙可试用于DBA的试验性治疗。

先天性纯红细胞再生障碍性贫血斑马鱼模型相关microRNA的组学研究

目的探讨先天性纯红细胞再生障碍性贫血(DBA)相关microRNA的表达特征及其调控机制。方法利用morpholino技术建立核糖体蛋白基因Rps19表达不足的DBA斑马鱼模型和Rps19与p53同时表达不足的斑马鱼模型,利用新一代高通量测序(RNA-seq)技术,研究DBA斑马鱼模型的microRNA表达谱的特征及p53在其中的调控作用。结果 Rps19 MO的斑马鱼胚胎的循环血细胞明显减少,且尾部呈现出向腹侧弯曲的异常形态。而在p53敲低之后,斑马鱼的形态异常得到了一定程度的恢复。通过对microRNA表达谱的比较分析发现,在Rps19不足的斑马鱼胚胎中约1/4的microRNA表达量显著偏低,这些异常表达的microRNA可能影响到斑马鱼的正常发育过程。而在p53敲低之后,部分microRNA的表达恢复到正常水平。最终确定了47个在DBA发病过程中可能受p53调控的microRNA。结论 DBA斑马鱼模型的microRNA普遍低表达,其中部分microRNA受到p53的表达水平的调控。

21例先天性纯红细胞再生障碍性贫血核糖体蛋白基因突变分析

本研究旨在探讨先天性纯红细胞再生障碍性贫血(Diamond-Blackfan anemia,DBA)患者的核糖体蛋白基因突变。对我院2008年12月至2012年4月期间诊治的21例DBA患者进行9个与本病相关的核糖体蛋白基因(RPS19、RPS24、RPS17、RPL5、RPL11、RPS7、RPL35a、RPS10和RPS26)检测。结果表明,在21例患者中,有8例发生了核糖体蛋白基因突变,突变率为38.1%,其中RPS19基因突变3例,RPS24、RPS7、RPL5、RPL11、RPL35a突变各1例。在本组患者中未检测到RPS17、RPS10和RPS26基因突变。RPL11及RPL5突变患者分别伴有六指畸形、足趾畸形,1例RPS19突变患者伴有尿道下裂。结论:本研究中DBA患者核糖体蛋白基因突变发生率低于西方国家,部分RPS19突变患者可发生尿道下裂,RPL11及RPL5突变与指趾畸形相关。

45例先天性纯红细胞再生障碍性贫血临床分析

本研究旨在探讨先天性纯红细胞再生障碍性贫血(Diamond-Blackfan anemia,DBA)的诊断和治疗。对我院1994年2月至2011年7月期间诊治的45例DBA患者进行回顾性分析,总结其临床表现、实验室检查特点及治疗、预后情况。结果表明,45例DBA患者的发病年龄为1-15个月,其中男23例,女22例,14例(31.1%)患儿合并身材矮小及躯体畸形;实验室检查表明,血红蛋白及网织红细胞均下降,平均红细胞体积正常34例(75.6%),增大11例(24.4%);骨髓检查红系增生低下;胎儿血红蛋白(HbF)检查29例,13例(44.8%)增高;骨髓红系干细胞培养25例,12例(48%)增生正常,13例(52%)增生低下;红细胞生成素(EPO)检测17例,均明显增高;染色体核型检查28例,均为正常核型。36例患儿服用糖皮质激素治疗,其中6例联合服用了环孢菌素A;30例(83.3%)患儿对激素治疗反应良好,10例患儿一直应用小剂量糖皮质激素维持治疗,20例停药后有15例(75%)复发,再次应用激素仍有效,但有2例进展成再生障碍性贫血,1例应用环孢菌素A及抗淋巴细胞球蛋白等治疗无效死亡;6例激素无效,1例加用环孢菌素A后获得缓解,其他患儿间断输血,3例需加用去铁治疗。结论:临床特征、血像及骨髓像,EPO和HbF检测有助于DBA患儿诊断,糖皮质激素治疗效果良好,但大部分停药复发,需要小剂量维持,激素治疗无效者可间断输血加去铁治疗。

先天性纯红细胞再生障碍性贫血患儿肥胖发生情况及影响因素分析

目的探讨先天性纯红细胞再生障碍性贫血(Diamond-Blackfan anemia,DBA)患儿的体重指数分布情况,并分析DBA患儿肥胖发生的相关因素。方法选取2003年1月至2020年12月于中国医学科学院北京协和医学院血液病医院儿童血液病诊疗中心就诊的DBA患儿为研究对象,收集患儿的临床资料、治疗方案,以及于随访时间点前后1周内测量的身高、体重并计算体重指数,分析DBA患儿肥胖发生的影响因素。结果129例DBA患儿中,男性80例(62.0%),女性49例(38.0%),中位测量年龄为49(范围:3~189)个月,肥胖发生率为14.7%(19/129)。多因素logistic回归分析发现,无核糖体蛋白基因突变与DBA患儿肥胖发生关系密切(调整后OR=3.63,95%CI:1.16~11.38,调整后P=0.027)。在激素依赖DBA患儿中,肥胖发生与激素开始治疗年龄、激素治疗时间、激素维持剂量无关(P>0.05)。结论DBA患儿肥胖发生率较高,无核糖体蛋白基因突变与DBA患儿肥胖的发生密切相关。

先天性纯红细胞再生障碍性贫血患儿临床表现及基因检测

目的探讨先天性纯红细胞再生障碍性贫血(DBA)的临床特点及其致病基因。方法回顾分析2例DBA患儿的临床资料以及基因检测结果,同时复习相关文献。结果两例患儿均为女性,分别为3月龄和4月龄;均以面色苍黄就诊。血常规红细胞偏低、血红蛋白低、网织红细胞计数低;血清铁及铁蛋白均升高;红细胞脆性实验未见异常。骨髓细胞学均提示髓象幼红细胞罕见。基因检测,例1的RPS19存在c.91C>T(p.P31S)杂合突变,其父母未见突变,该突变为新发突变,经验证为致病基因;例2的RPL5基因存在c.472_473del缺失突变(p.K158fs),为已知致病基因。结论 DBA患儿多在出生早期发病,临床表现为红系缺乏,RPS19及RPL5基因突变较常见,相关基因检测有利于早期诊断;c.91C>T(p.P 31 S)杂合突变为未见报道的新突变。

Diamond-Blackfan贫血诊断及治疗的研究新进展

先天性纯红细胞再生障碍性贫血(PRCA),又被称为Diamond-Blackfan贫血(DBA),是先天性骨髓衰竭综合征(IBMFS)的亚型之一,主要累及红系造血。该病的临床特征主要有红系造血衰竭、先天发育异常和肿瘤易患性。DBA临床十分罕见,临床医师对该病尚缺乏系统认识,易导致该病的漏诊、误诊,并且治疗方式不一。为了进一步指导DBA的临床诊断及治疗,笔者主要对该病的发生机制、临床特点、实验室检查结果、诊断,以及药物治疗、输血及去铁治疗、造血干细胞移植(HSCT)与基因治疗的最新研究进展进行阐述。

RPL35A基因突变相关先天性纯红细胞再生障碍性贫血诊治研究

目的 探讨儿童核糖体蛋白L35A(ribosomal protein L35A,RPL35A)基因突变所致先天性纯红细胞再生障碍性贫血(Diamond-Blackfan anemia,DBA)(RPL35A-DBA)的临床表现及基因型特征。方法 收集近15年国内外既往资料基本完整的儿童RPL35A-DBA相关文献,归纳、比较和分析其中病例的临床表现、基因测序结果及药物疗效等特征。结果 共收集儿童RPL35A-DBA病例资料50例。统计分析儿童RPL35A-DBA主要特征为:①年龄、性别:90%的病例1岁以内起病,中位发病年龄为3个月;诊断年龄较滞后,平均为2周岁;男女发病率无显著差异(P>0.05)。②造血系统病变:主要表现为中重度贫血,54%(27/50)依赖输血,且多数(68%,34/50)伴粒细胞减少,而血小板水平均正常。③基因突变:大缺失型(n=22)较非大缺失型(n=28)表型更严重,造血系统异常、免疫缺陷、智力障碍、颅面畸形及骨骼发育不良等发生率显著增高(P<0.05)。④药物治疗:主要治疗药物为糖皮质激素(glucocorticoid,GC),并需酌情予成分输血结合袪铁疗法,必要时需行异基因造血干细胞移植(allogeneic hematopoietic stem cell transplantation,allo-HSCT)。结论 RPL35A-DBA多于患儿生后早期起病,基因缺失程度与临床表现严重程度密切相关。对于部分病例,GC疗效显著,但需最低维持剂量,严重者需行allo-HSCT。对RPL35A-DBA可疑病例,应及时进行基因检测,有助早期明确诊断和进行有效临床干预。

儿童先天性纯红细胞再生障碍性贫血诊疗进展

先天性纯红细胞再生障碍性贫血（Diamond-Blackfan anemia,DBA）（MIM 105650）是以红系造血衰竭为特点的先天性骨髓衰竭综合征（inheritedbone marrow failure syndromes,IBMFS）的一种。发病率在欧美国家约5/106-7/106,日本为12/106[1],男女发病率无差别。约93%的患儿1岁以内起病[2]。DBA多数为散发,也可为常染色体显性遗传[3]。

先天性纯红细胞再生障碍性贫血的诊断及治疗

先天性纯红细胞再生障碍性贫血是临床上罕见的红细胞发育不良性疾病。因缺乏此种疾病完整的自然演变信息，对其诊断、治疗及预后评估尚无统一认识，尤其在国内，更缺乏对该病系统的认识。该文主要综述该病的诊断标准，评价可行性治疗方法，包括激素等药物治疗及输血和造血干细胞移植等。

先天性纯红细胞再生障碍性贫血的临床及基因特点

目的探讨先天性纯红细胞再生障碍性贫血(DBA)的临床及致病基因特点。方法回顾性分析2例DBA患儿的临床及致病基因特点,并进行文献复习。结果 2例患者(2~3个月的婴儿)均呈慢性重度正细胞正色素贫血,不伴白细胞及血小板计数异常,网织红细胞计数均降低,血清铁、血清铁蛋白轻度升高,骨髓细胞学提示红细胞比例明显降低、幼红减少或缺如,1例DBA致病基因检测发现已报道的RPS19基因致病性杂合突变:c.212G>A(p.Gly71Glu),其父母未见突变;另1患儿检测到新的RPL5基因杂合突变:c.740T>C(p.I247L),其父母未见突变,生物信息学分析该突变可能致病。结论 DBA患儿多在婴儿早期发病,以红系缺乏为表现,编码核糖体亚基蛋白的基因突变为常见病因,进行分子检测有利于DBA早期诊断。

25例儿童先天性纯红细胞再生障碍性贫血的临床分析

目的分析先天性纯红细胞再生障碍性贫血(PRCA),即Diamond-Blackfan贫血(DBA)患儿的临床表现、实验室检查、基因检测结果、疗效及生长发育评估结果,为其诊断与治疗提供更多的临床思路。方法选择2011年4月至2019年2月于郑州大学第一附属医院诊治的25例DBA患儿为研究对象。其中男性患儿为13例,女性为12例,中位发病年龄为3个月。按照治疗方法不同,将其分为激素治疗组(使用泼尼松治疗,n=18)和非激素治疗组(使用对症支持治疗,n=7)。采用回顾性研究方法,收集患儿一般临床资料、实验室检查结果、疗效、生长发育评估结果等。2组间缓解率等比较,采用Fisher确切概率法。不同疗程、年龄患儿身高、体重百分位比较,采用Kruskal-Wallis秩和检验。本研究遵循的程序符合2013年修订的《世界医学协会赫尔辛基宣言》要求。结果①本研究25例DBA患儿的中位发病年龄为3个月,男、女性别构成比为1.08∶1。伴先天性疾病患儿为5例(20%),其中4例患儿合并≥2种先天畸形。②血常规结果显示,患儿血红蛋白(Hb)值均降低,64%(16/25)患儿网织红细胞计数减少。骨髓细胞学检查显示,患儿均有核细胞增生活跃,红系增生低下。12例行Hb电泳患儿中,胎儿血红蛋白(HbF)增高患儿为2例。13例行基因检测患儿中,4例患儿DBA相关基因突变,包括RPS19基因突变者3例和RPL5基因突变者1例。③激素治疗组和非激素治疗组患儿缓解率分别为88.9%(16/18)和42.9%(3/7),2组比较,差异有统计学意义(P=0.032)。④20例DBA患儿生长发育评估结果显示,短疗程激素治疗者(激素治疗时间<6个月,n=7)、长疗程激素治疗者(激素治疗时间≥6个月,n=8)与未使用激素治疗者(n=5)在治疗远期体重、身高百分位数的中位数分别比较,差异均无统计学意义(χ2=2.456,P=0.293;χ2=0.460,P=0.795);小年龄激素治疗者(接受激素治疗时患儿年龄<12个月,n=8),大年龄激素治疗者(接受激素治疗时患儿年龄≥12个月,n=7)与未使用激素治疗者(n=5)治疗远期体重、身高百分位数的中位数分别比较,差异亦无统计学意义(χ2=1.390,P=0.499;χ2=0.624,P=0.732)。结论DBA通常于出生早期发病,其诊断需依靠血常规及骨髓细胞学检查。DBA患儿中RPS19及RPL5基因突变较常见,相关基因检测有利于该病的早期诊断和激素治疗。DBA患儿身高、体重的生长发育情况与是否使用激素及激素使用疗程,以及接受激素治疗时患儿年龄无显著关系。

先天性纯红细胞再生障碍性贫血基因型与表型及疗效的相关性

目的 分析具有明确致病基因突变的先天性纯红细胞再生障碍性贫血（Diamond-Blackfan anemia,DBA）患儿基因突变与临床表型及治疗反应的相关性.方法 回顾分析DBA中国及首都医科大学附属北京儿童医院2009年12月至2017年10月诊治及随访的42例具有明确致病基因突变的DBA患儿的临床资料及基因检测结果,统计分析其相关性.结果 42例患儿中位随访40个月（1～ 136个月）,尚无成功停药患儿.检测到RPL5、RPL11、RPL35a、RPS17、RPS19、RPS24和RPS26共7种突变,最常见的基因突变是RPS19（42.9％）,其次是RPL11（19.0％）、RPS17（11.9％）、RPS26（11.9％）、RPLS（7.1％）和RPL35a（4.8％）.发病时血红蛋白中位水平为42.5 g/L,12例患儿存在身体畸形,以心脏畸形及手指畸形最为常见.37例患儿接受激素治疗,初期总反应率为89.2％（33/37例）,激素无效患儿中1例使用环孢素（CSA）治疗有效,其余3例予输血治疗.结论 DBA患儿基因突变以RPS19最为常见,RPS17突变以拷贝数变异为主,在进行DBA基因检测时需注意大片段缺失可能.RPL5突变患儿畸形发生率高,各组患儿在发病年龄、发病时血红蛋白水平、畸形发生率及激素治疗有效率方面差异无统计学意义.

先天性纯红细胞再生障碍性贫血的诊断与治疗

先天性纯红细胞再生障碍性贫血是一种罕见的，以单纯红系造血衰竭为特点的先天性骨髓衰竭综合征。临床上以骨髓红系〈0．05的大红细胞贫血，而其他两系正常为特征。治疗采用输血、祛铁、糖皮质激素、环孢素及造血干细胞移植治疗。

先天性纯红细胞再生障碍性贫血分子诊断研究进展

先天性纯红细胞再生障碍性贫血(Diamond-Blackfan anemia,DBA)是一种罕见的遗传性贫血,约90%的病例在婴儿期出现症状。70%~80%病例存在基因异常,主要是常染色体显性遗传,少数呈隐性或X连锁遗传。DBA的基因突变主要为核糖体蛋白基因的突变和缺失,编码核糖体的RP基因中已发现20余个与DBA相关的突变基因,其中RPS19基因突变最为常见。另外还有与核糖体功能有关的TSR2基因以及与DBA样表型相关的非RP基因,如GATA1、EPO和ADA2基因。这些基因均在红系细胞的分化和增殖中起关键作用。分子诊断是最终确诊和区别经典型和非经典DBA的重要标准。该文对DBA的遗传学、基因突变和分子诊断的研究进展进行综述。