断奶仔猪腹泻病因分析

为了解云南省断奶仔猪腹泻的致病性原因,通过对30个发生断奶仔猪腹泻猪场的210份粪便、60份饮用水,总计270份样品,进行病毒及致病性细菌分析。研究结果表明,致病性大肠杆菌严重污染饮用水,致病性大肠杆菌在饮用水中检出40株,阳性率为66.7%,粪便中检出100株,阳性率47.6%;致病性沙门氏菌在饮用水中检出10株,阳性率为16.7%,粪便中检出24株,阳性率为11.4%,均对亚胺培南敏感。在粪便中猪流行性腹泻病毒（porcine epidemic diarrhea virus,PEDV）、猪圆环病毒2型（porcine circovirous type 2,PCV2）、猪伪狂犬病病毒（pseudorabies virus,PRV）、猪瘟病毒（classical swine fever virus,CSFV）、猪繁殖与呼吸综合征病毒（porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV）及猪轮状病毒（porcine rotavirus,PoRV）的PCR扩增阳性率为5.2%~13.0%,在饮用水中未检出。通过对云南省断奶仔猪腹泻进行病因分析,了解断奶仔猪腹泻的具体原因,本试验结果为从病因入手防制该病提供更合理、更切合实际情况的理论依据与试验参考。

抗仔猪腹泻产肠毒素大肠杆菌疫苗的研究进展

仔猪腹泻(piglet diarrhea)是国内外养猪业面临的一大难题,每年因此造成的经济损失十分巨大。导致仔猪腹泻的主要致病菌是产肠毒素大肠杆菌(enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC),其致病过程依赖黏附素和肠毒素的共同作用。随着研究手段的创新,国内外学者在研制ETEC疫苗方面已取得了突破性进展。作者介绍了ETEC的致病特点,并对各类ETEC疫苗的研究进展作一综述。

大肠杆菌耐热肠毒素b及其致动物腹泻的机理

介绍了大肠杆菌耐热肠毒素b(STb)的编码基因、理化性质、免疫学特征、分泌特征、毒性相关氨基酸残基、空间结构、膜受体以及STb致动物腹泻的机理。认为STb是一种十分重要的肠毒素,应进一步加强对STb及其致腹泻机理的研究。

嗜水气单胞菌分离株的鉴定与菌株肠毒素及致病性研究

目的对嗜水气单胞菌进行鉴定并进行肠毒素检测与致病性分析。方法采用常规法分离培养,电子显微镜观察形态,用法国梅里埃VITEK32全自动微生物鉴定仪进行系统鉴定。乳鼠灌胃法测定热稳定性肠毒素(ST),小白鼠腹腔注射法测定其毒力。结果检出的嗜水气单胞菌均产热稳定性肠毒素(ST),具备较强的致病性。结论分离的嗜水气单胞菌具有较强毒力,与致病性密切相关。

金黄色葡萄球菌在儿童腹泻病人中的检出及致病性分析

目的 分析儿童腹泻病人中金黄色葡萄球菌(Sau.)的检出率及致病性。方法 对比儿童(就诊于儿科)和成人腹泻病人便培养结果,分析细菌谱构成和Sau检出率(其中儿童335例,成人1682例);进一步将儿童腹泻病人便培养检出的Sau进行肠毒素(SEs)和肠毒素基因(ses)检测。借此分析Sau在儿童腹泻中发挥的作用。结果 Sau在儿童腹泻病人中的检出率显著高于成人;儿童腹泻患者粪便中检出的Sau其肠毒素(SEs)表达率为(58.82%),SEs基因携带率亦为58.82%。结论 Sau与儿童腹泻密切相关,应引起临床和实验室的重视。

集约化猪场PWD病原性大肠杆菌毒力因子分析

探索浙江省集约化猪场仔猪断奶腹泻(PWD)病原性大肠杆菌血清型和毒力因子特征,为PWD防治及耐药性研究提供资料.从10个规模化猪场以直肠棉拭子采集PWD病料,经细菌分离纯化、革兰氏染色、生化试验和小鼠致病性试验等,对病原进行鉴定.采用11种猪源大肠埃希氏菌常见O型抗原血清、应用K88及F18菌毛单因子血清对分离菌进行玻板凝集试验和PCR方法分析黏附素及肠毒素类型.分离鉴定的56株病原性大肠杆菌O抗原定型了33株,共覆盖了11种血清型,其中O149、O139、O8为优势血清型,共17株,占定型菌株的51.5%;菌毛单因子血清玻板凝集试验和PCR测得病原性大肠杆菌中产肠毒素大肠杆菌(ETEC)比例较高,占病原性大肠杆菌分离总数的67.92%(36/53),肠毒素中含STa、STb、STa+STb、LT和SLT-2 e分别占总检测菌株数的30.19%(16/53)、35.85%(19/53)、18.9%(10/53)、1.89%(1/53)和9.43%(5/53).黏附素类型主要有K88和F18两种,分别占总检测菌株数的24.53%(13/53)和28.30%(15/53).结果表明,浙江省PWD病原性大肠杆菌至少覆盖了包括优势血清型O149、O139、O8在内的11种血清型;大肠杆菌中以产肠毒素型为主,主要毒力因子包括黏附素F18及K88和肠毒素STa、STb、SLT-2 e等.

FUT1基因对猪生产性能的影响分析

FUT1基因与断奶后仔猪腹泻和水肿病之间有着密切关联,与猪的生产性能紧密相关。笔者等就FUT1基因的分子结构及其对猪产仔性能、生长发育、抗病育种、免疫等性状的影响方面进行综述,揭示FUT1基因对猪生产的影响,通过多态性分析,从理论上阐述其影响的机制及其与各性能之间的相关性,以期为猪的抗病育种奠定理论基础。

蜡样芽胞杆菌毒素的最新研究进展

蜡样芽胞杆菌为人畜共患的食源性条件致病菌。该菌分泌的呕吐毒素与腹泻型肠毒素可致宿主出现呕吐或腹泻的临床症状。毒素的产生及毒性的强弱受多种因素共同调控,毒性较强时可导致宿主发生死亡。目前可知该菌的毒力在逐渐增强,宿主种类也在逐渐增多。本文对蜡样芽胞杆菌的cereulide、Hbl、Nhe、CytK及HlyII等毒素的结构、功能及致病机制进行阐述,以期能为今后蜡样芽胞杆菌的研究提供理论基础。

Occurrence and characterization of toxigenic Bacillus cereus in food and infant feces

Objective: To investigate the true incidence of Bacillus cereus(B. cereus) in food and children diarrhea cases. Methods: A total of 110 samples of various dairy products such as raw milk, long life pasteurized milk, yoghurt and infant powdered milk formulas, raw rice, and feces were examined for the presence of B. cereus by selective plating on mannitol-egg-yolk-polymyxin agar. Confirmation of B. cereus was carried out by biochemical tests and PCR. Identification of non-B. cereus isolates was carried out by 16 S r DNA sequencing. Antimicrobial susceptibility was done by disk diffusion method.Results: Overall 35 samples(31.8%, n = 110) yielded Bacillus-like growth. Of which 19 samples(54.28%) were positive for B. cereus. All isolates were positive for enterotoxin production. No psychrotolerant B. cereus strains were detected in all samples. All B. cereus isolates were resistant to penicillin G, but susceptible to vancomycin, erythromycin and clindamycin. Conclusions: The results of this study confirm the importance of including B. cereus in disease control and prevention programs, as well as in routine clinical and food quality control laboratories in both Saudi Arabia and Egypt.

原花青素在防控分泌性腹泻中的研究进展

原花青素具有抗氧化、抗分泌性腹泻等功能,可作为防控断奶仔猪腹泻的重要物质。本文综述了原花青素的结构与活性、分泌性腹泻的发生机制及原花青素抗分泌性腹泻的作用机理,为原花青素在防控断奶仔猪腹泻上的应用和研究提供理论依据。

抗仔猪腹泻重组复合多价疫苗的抗原制备及其条件优化

研究旨在探究重组复合多价抗腹泻疫苗主要抗原的制备工艺条件并进行优化。结果表明,采用优化后的提取和纯化方法能够有效提高疫苗抗原之一重组三价肠毒素的纯度和产率;使用改良Minca培养基能够使菌毛抗原产肠毒素大肠杆菌F4和F5菌毛蛋白表达量更高,等电点沉淀法可将菌毛蛋白纯度提至约100%。通过上述优化方法制备复合多价疫苗所需的重组肠毒素蛋白抗原和菌毛蛋白抗原纯度较高,可用于后期疫苗的制备。

云南边防部队产酸克雷伯菌生化特性与致病性研究

目的对从云南边防部队腹泻患者中分离的产酸克雷伯菌进行鉴定,并对其进行生化特性鉴定、肠毒素检测及致病性和药敏分析研究。方法在SS琼脂平板上分离获纯培养菌,光学显微镜和电子显微镜观察形态,常规生化鉴定并用VITEK32全自动微生物生化分析仪进行系统鉴定并做药敏分析,乳鼠灌胃测定热稳定性肠毒素(ST),小白鼠腹腔注射测定毒力。结果分离的产酸克雷伯菌产热稳定性肠毒素(ST),致病性较强。结论本次分离的产酸克雷伯菌是具有较强毒力的菌株,与临床症状密切有关,应继续加强菌株感染率和毒力监测。

新疆北疆地区致犊牛腹泻大肠杆菌的分离鉴定及部分生物学特性

为研究确定新疆北疆地区规模化奶牛场犊牛腹泻病原性大肠杆菌的优势血清型、致病性及毒力因子特征。采用细菌学、免疫学及分子生物学的方法对从新疆呼图壁、石河子、奎屯3个主要奶牛生产基地14个规模化奶牛场10日龄内腹泻犊牛直肠棉拭子样品进行了大肠杆菌的分离与鉴定、O血清群、黏附素及肠毒素的测定。结果从302份样品中分离并经生化鉴定获得180株呈β溶血的大肠埃希菌,其中94株对小鼠有致病性;对其中53株代表菌株的O血清型、黏附素及肠毒素测定,结果为8株携带K99菌毛及STa毒素基因,6株携带F41菌毛基因,6株产生LT毒素;28株分离株分布于16个O血清型,其中O101,O6,O114,O78为优势血清型,占被测菌株的50%。结果表明,新疆北疆主要奶牛养殖区致犊牛腹泻大肠杆菌是以携带K99、F41和产ST的溶血性大肠杆菌为主,其研究结果为犊牛大肠杆菌性腹泻的免疫防治提供病原学依据。

人产肠毒素大肠杆菌基因工程疫苗的研究进展

产肠毒素大肠杆菌(ETEC)是引起腹泻的主要致病菌之一,在世界范围内,每年可导致数亿人发生腹泻,尤其是发展中国家的婴幼儿和儿童。目前,世界各国通过构建新型的ETEC基因工程疫苗预防ETEC引起的腹泻。将ETEC的肠毒素基因和菌毛蛋白基因转化至无毒的受体菌中,构建出基因工程疫苗,免疫人体后可有效预防ETEC引起的腹泻。本文就ETEC的致病机理及国内外ETEC基因工程疫苗的最新研究进展作一综述。

浙江省台州市儿童腹泻132例沙门菌耐药性检测及肠毒素基因的相关分析

目的 分析浙江省台州市儿童腹泻沙门菌的耐药性及相关肠毒素基因型.方法 将因发热、腹泻等症状就诊且经粪便培养证实为沙门菌感染的儿童132例,检测沙门菌血清分型并对菌株进行10种抗生素耐药性分析,同时检测菌株肠毒素基因（spvA、spvB、rck）.结果 分离出的132例沙门菌经血清学鉴定,共有10种血清型,其中以鼠伤寒沙门菌以及肠炎沙门菌最为多见;分离出的132株沙门菌对氨苄西林（51.82％）以及氨苄西林/舒巴坦（51.52％）的耐药性最高,而对亚胺培南、厄他培南无耐药,在132株沙门菌中,其中单耐药菌株27株（20.45％）,其余均对两种及以上药物耐药;在分离出的132株沙门菌中,132株均呈spvA阳性（阳性率100.00％）,38例呈spvB阳性（阳性率28.79％）,45例呈rck阳性（阳性率34.09％）;spvB检出阳性儿童其发热率、便血率以及脱水发生率均显著高于spvB检出阴性儿童（χ^2分别为6.022、6.661、6.978,均P〈0.05）,rck检出阳性儿童其发热率、便血率显著高于rck检出阴性儿童（χ^2分别为9.134、12.673,均P〈0.05）.结论 浙江省台州市沙门菌感染腹泻儿童主要以鼠伤寒沙门菌以及肠炎沙门菌感染为主,菌株耐药率较高,菌株肠毒素spvB基因与沙门菌感染儿童发热、便血以及脱水发生率明显相关,而rck基因与沙门菌感染儿童发热、便血明显相关.

黑龙江地区断奶仔猪腹泻大肠杆菌种系类群、血清型和毒力基因分析

揭示黑龙江地区集约化猪场仔猪断奶腹泻(PWD)直肠棉拭子分离到的123株大肠埃希菌所属种系分类群、O血清型及其与毒力基因的特征。采用常规凝集试验进行测定,种系分类群标记的chuA、yjaA基因和TSPE4.C2DNA片段及肠毒素基因STa、STb、LT、SLT2e采用PCR方法检测。在123株分离菌株中,除21株未定型、10株自凝外,测定出92株分离的血清型,覆盖18个血清型,其中以O 8、O 9、O 149 3种血清型为主,共57株,占定型菌株的61.96%。环境共生的种系进化A群113株占91.87%,肠外强致病D种系进化群2株占1.63%。肠毒素检出菌株74,占分离株的60.16%,其中以STa、STb为主,共占肠毒素检出株的94.59%。结果显示黑龙江省PWD病原性大肠埃希菌优势血清型为O 8、O 9、O 149,大肠埃希菌肠毒素主要毒力因子为STa、STb,种系进化群为A。

肠毒素性大肠杆菌菌毛抗原CS6和霍乱毒素B亚基在人伤寒沙门菌中的共表达及其免疫学效果观察

目的 :构建表达肠毒素性大肠杆菌菌毛抗原基因CS6和霍乱毒素B亚基 (CTB)基因的细菌性腹泻基因工程多价疫苗。方法 :以基因工程减毒的人伤寒沙门菌为抗原载体 ,利用基于asd基因功能互补的宿主染色体_质粒平衡致死表达系统 ,实现了在没有抗生素选择压力的条件下 ,CS6和CTB在人伤寒沙门菌中的稳定表达。结果与结论 :检测结果表明 ,CS6和CTB的表达虽对宿主菌的生长有一定影响 ,但经过一段时间的培养 ,重组菌株仍可达到高密度生长。动物免疫结果显示 ,重组菌株在家兔体内均可诱生相应抗体 ,但从诱生的抗体效价、抗体持续时间方面评价 ,单独表达CS6与CTB的重组菌株的免疫学效果均好于两者共表达的重组菌株 ,提示在以后的疫苗研究实践中 ,可以考虑将分别表达CS6与CTB的重组菌株按一定比例混合 ,组成联合疫苗 ,用于细菌性腹泻的免疫预防。本研究结果对于细菌性腹泻基因工程多价疫苗的构建有指导意义。

1995～2010年滕州市腹泻病人致泻性大肠杆菌检测结果分析

[目的]探讨滕州市致泻性大肠杆菌病原学特征,为制定相关措施提供依据。[方法]对1995-2010年滕州市级索、西岗镇腹泻病监测点及市财贸医院、市中心人民医院腹泻病门诊腹泻病人资料进行分析。[结果]共检测腹泻病人粪便标本2 756份,检出致泻性大肠杆菌482株,检出率为17.49%。其中ETEC占61.20%,EPEC占22.20%,EIEC占16.60%。病原菌检出率,男性为55.37%,女性为44.63%（P〉0.05）;0-4岁为26.64%,5-19岁为20.32%,ETEC肠毒素类型呈以ST为主（LT〉ST〉ST/LT）。[结论]致泻性大肠杆菌在引起婴幼儿腹泻病中占有一定重要地位。

肠聚集性大肠杆菌热稳定肠毒素1(EAST1)的研究进展

肠聚集性大肠杆菌热稳定肠毒素1(enteroaggregative Escherichia coli heat-stable enterotoxin 1,EAST1)是一种新型致病性肠毒素,对人类和动物肠道健康具有潜在威胁,由astA基因编码。EAST1最早在肠聚集性大肠杆菌(enteroaggregative Escherichia coli,EAEC)中被发现,然后在肠道病原性大肠杆菌(enteropathogenic Escherichia coli,EPEC)、肠产毒性大肠杆菌(enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC)中被检测到,只含有EAST1唯一毒素的大肠杆菌定义为肠聚集性大肠杆菌热稳定性肠毒素1大肠杆菌(enteroaggregative Escherichia coli heat-stable enterotoxin 1 Escherichia coli,EAST1EC)。astA基因存在多种基因型,不同astA基因型表达的EAST1毒性不同。EAST1的致病机理与Ⅰ型热稳定肠毒素(heat-stable enterotoxinⅠ,STa)具有相似性。笔者对EAST1的流行情况、不同astA基因型及EAST1的致病机理进行综述,目的是为astA基因的分型和EAST1的致病能力研究提供理论依据。

大肠杆菌Ⅱ型不耐热肠毒素快速检测方法的建立与应用

为了建立新型、快速的大肠杆菌Ⅱ型不耐热肠毒素(LT-Ⅱ)的检测方法,试验采用LT-Ⅱ家族的保守序列设计交叉引物等温扩增技术(cross priming amplification,CPA)和环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)的特异性引物,分别对这两种方法的反应温度、Bst聚合酶浓度和扩增时间进行优化,进一步对反应的特异性和敏感性进行研究,最后用这两种方法检测156份犊牛大肠杆菌临床腹泻样本,并以实时荧光定量PCR方法作为参照进行对比。结果表明:建立的LAMP和CPA方法对LT-Ⅱ基因具有很好的特异性,LAMP和CPA方法的最低检出限分别为6. 7×102cfu/m L和6. 7×101cfu/m L,CPA法具有更高的敏感性。对156份犊牛大肠杆菌临床腹泻样本的检出率为7. 7%(12/156),CPA、LAMP和实时荧光定量PCR三种检测方法的一致性为100%。说明建立的CPA方法不仅具有较高的特异性和敏感性,且不需要昂贵的仪器即能在短时间内完成靶基因的检测。