微小RNA加工剪切酶Dicer 1 rs1057035多态性与乳腺癌相关性研究

目的探讨微小RNA加工剪切酶Dicer 1 rs1057035多态性与中国汉族人群乳腺癌的相关性。方法收集176例女性乳腺癌患者和216例健康体检女性的外周静脉血,运用二代测序技术分析Dicer 1 rs1057035多态性在乳腺癌患者和健康体检者中的分布频率。结果Dicer 1 rs1057035基因型分布在女性乳腺癌患者和女性健康体检者中差异无统计学意义(P>0.05)。Dicer 1 rs1057035基因型分布与乳腺癌雌激素受体、孕激素受体、临床分期、肿瘤大小、淋巴结转移无关(P均>0.05)。结论Dicer 1 rs1057035可能不是中国汉族人群乳腺癌发病的易感位点。

DICER1 rs13078和RAN rs3803012基因多态性与妊娠期高血压疾病发病风险的病例对照研究

目的探讨DICER1 rs13078和RAN rs3803012基因多态性与妊娠期高血压疾病发病风险的关系。方法选取2021年6月至2022年3月在本院住院单胎妊娠且诊断为妊娠期高血压疾病的患者321例作为研究对象,其中妊娠期高血压患者147例(妊娠期高血压组),子痫前期患者174例(子痫前期组),同时选取同期在本院分娩的正常孕妇180例作为对照组。对比分析三组患者的临床资料及基因测试序列结果。结果妊娠期高血压组和子痫前期组的年龄显著高于对照组(P<0.05),妊娠期高血压组和子痫前期组的分娩孕周低于对照组(P<0.05),收缩压和舒张压高于对照组,糖尿病史和家族妊娠期高血压疾病史占比明显高于对照组(P<0.05);对照组、妊娠期高血压组和子痫前期组DICER1 rs13078位点有T和A两种基因,TT、TA、AA三种基因型;对照组、妊娠期高血压组和子痫前期组RAN rs3803012位点有A和G两种基因,AA、AG、GG三种基因型;对照组、妊娠期高血压组和子痫前期组DICER1 rs13078和RAN rs3803012位点基因型的实际值和预测值均符合Hardy-Weinberg平衡检验(P>0.05);对照组、妊娠期高血压组和子痫前期组DICER1 rs13078和RAN rs3803012位点基因型基因分布情况比较,差异具有统计学意义(P<0.05);校正其他混杂因素,包括年龄、孕周、收缩压、舒张压和糖尿病史和家族妊娠期高血压疾病史,DICER1 rs13078 T<A基因是子痫前期发病的发病危险因素(P<0.05);而RANrs3803012 A<G基因是妊娠期高血压疾病发病的危险因素(P<0.05)。结论DICER1 rs13078 T<A基因与子痫前期发病相关,RANrs3803012 A<G基因与妊娠期高血压的发病相关,携带DICER1 rs13078 T<A和RAN rs3803012 A<G基因的患者发生妊娠高血压和子痫前期的风险较高。

miR-107靶向调控Dicer1促进卵巢癌细胞系侵袭转移

目的检测microRNA-107(miR-107)在卵巢癌中的表达水平,探讨其对卵巢癌细胞系侵袭转移的调控作用及分子机制。方法 qRT-PCR法比较卵巢癌组织、正常卵巢组织、卵巢癌细胞系和正常卵巢上皮细胞中miR-107表达差异,用生物信息学的方法特异预测出miR-107靶基因Dicer1后,通过双荧光素酶报告体系进行验证。上调miR-107表达后,Western blot检测Dicer1的表达变化;划痕实验、Tr-answell实验观察卵巢癌细胞运动和侵袭能力的改变;qRT-PCR及Confocal观察EMT相关分子E-cad-herin、β-Catenin、N-cadherin、Vimentin、Fibronectin、ICAM-1、MMP-9的表达。结果 miR-107在上皮性卵巢癌组织的表达较正常卵巢组织显著升高(P<0.05);双荧光素酶报告基因系统验证预测结果正确。上调miR-107后,Western blot结果显示Dicer1蛋白质水平被显著抑制,卵巢癌细胞系SKOV3细胞形态发生间质细胞样转变,间质标志分子β-Catenin、N-cadherin及MMP-9表达上升;体外实验表明卵巢癌细胞的运动和侵袭能力得到明显促进。结论本研究表明miR-107促进卵巢癌侵袭转移的分子机制是通过下调miRNA加工机器Dicer1,从而介导卵巢癌细胞EMT的发生;抑制miR-107或恢复Dicer1水平可能成为上皮性卵巢癌治疗的有效手段。

胃癌源性外泌体对HLA-DR^(neg)leukocytes中Dicer1、PTEN基因的调控

目的通过观察胃癌源性的外泌体对HLA-DR^(^(neg))leukocytes中Dicer1、PTEN基因表达的影响,探讨肿瘤源性外泌体调控机体免疫抑制功能的机制。方法提取胃癌患者血清外泌体并鉴定,免疫磁珠法分选HLA-DR^(neg)leukocytes,吖啶橙染色后的外泌体与CFSE染色后的HLA-DR^(neg)leukocytes在37℃,5%CO_2条件下共培养12 h;采用QRT-PCR和Western blot方法分别检测共培养后胃癌患者与健康对照组中Dicer1、PTEN基因和蛋白的表达。结果成功分离胃癌患者外周血外泌体;同时观察到外泌体被HLA-DR^(neg)leukocytes有效摄取。QRT-PCR检测结果显示Dicer1 m RNA、PTEN m RNA的相对表达量分别是健康对照组的0.46±0.19、0.48±0.27倍(P<0.05);Western blot结果显示Dicer1、PTEN蛋白表达量是健康对照组的0.15±0.11、0.33±0.19倍(P<0.05)。结论胃癌来源的外泌体可以抑制HLA-DR^(neg)leukocytes中Dicer1、PTEN基因的表达,为今后进一步研究肿瘤来源的外泌体的免疫调控作用提供线索。

血清miR-103和Dicer1表达及在结直肠癌中的诊断价值

目的:探讨结直肠癌患者血清miR-103和Dicer1表达情况,分析miR-103联合Dicer1检测在结直肠癌诊断中的应用前景。方法:72例经病理确诊的结直肠癌患者为实验组,72例健康体检者为对照组。应用实时定量PCR法检测实验组和对照组血清miR-103和Dicer1表达水平。分析两种生物标志物联合诊断结直肠癌的价值。结果:与对照组相比,miR-103在实验组患者血清中表达水平显著上调(P<0.01),Dicer1水平显著下调(P<0.05)。miR-103表达水平与结直肠癌临床分期、肿瘤转移情况以及Dicer1水平密切相关(P均<0.05)。miR-103与Dicer1联合在结直肠癌检测的敏感度和特异度最高可达82.1%和95.6%,Logistic分析受试者工作特征曲线(ROC)曲线下面积(AUC)为0.754。结论:miR-103高表达与结直肠癌分期、转移及Dicer1表达关系密切,与Dicer1联合有望成为结直肠癌的早期诊断指标。

Dicer1在卵巢癌间质成纤维细胞中调控DNA损伤修复相关基因

目的:检测Dicer1在卵巢癌间质肿瘤相关成纤维细胞中的表达情况,探讨其对DNA双键断裂损伤(DSB)修复相关基因的影响。方法:应用基因集合富集分析(GSEA)方法分析卵巢癌间质和正常卵巢间质基因表达公共数据库GSE40595,探索Dicer1对DSB修复相关通路及关键基因的调控作用,并筛选出相关差异基因。应用重组人转化生长因子β1(h TGFβ1)细胞因子诱导成纤维细胞系MRC5细胞活化成为肿瘤相关成纤维细胞(CAFs),即MRC5-CAFs。以靶向Dicer1基因的siRNA转染MRC5-CAFs,下调其Dicer1表达水平。qRT-PCR、Western blot法分别检测Dicer1及分析所得相关基因,如XRCC6、TP53BP1、H2AFX、BRCA1、ATR、RAD51 mRNA水平及Dicer1和DSB损伤修复关键基因γ-H2AX(磷酸化H2AX)、RAD51蛋白水平。荧光共聚焦检测细胞核蛋白γ-H2AX表达;采用CCK8试验检测细胞活性。结果:GSEA分析结果显示,Dicer1表达水平与DSB(NES=1.7942109,FDRq=0.0067545176)及DNA损伤修复(NES=2.4433048,FDRq=0)显著正相关,进一步通过相关分析筛选出在上述通路中与Dicer1表达正相关的显著基因集。沉默MRC5-CAFs细胞中Dicer1表达后,DSB相关基因,如XRCC6、TP53BP1、H2AFX及损伤修复相关基因BRCA1、ATR、RAD51均较对照组显著下降,与GSEA分析结果一致。荧光共聚焦显微镜检测到沉默Dicer1 MRC5-CAFs细胞内聚集较少的DSB。CCK8试验结果显示,MRC5-CAFs细胞在20μmol/L顺铂作用下,Dicer1-si组不同时间梯度的细胞活性率均低于NC-si组。结论:Dicer1在卵巢癌间质成纤维细胞中正向调控DNA损伤修复相关基因,抑制Dicer1表达后其对顺铂敏感性显著增加。

Dicer1转基因小鼠模型的建立

目的建立Dicer1转基因小鼠模型。方法构建pcDNA3.1-Dicer1转基因构件,经酶切、纯化后通过显微注射方法导入BDF1小鼠受精卵原核并移植到同期受孕的ICR受体母鼠输卵管内。出生后仔鼠用PCR和Southern方法检测鼠尾DNA鉴定基因型,通过免疫组化检测Dicer1基因表达。结果显微注射172枚卵,移植119枚卵于3只受体输卵管中,2只怀孕,共产仔15只,经PCR检测获得6只阳性鼠,Southern检测6只均为阳性。对Southern检测阳性转基因小鼠子代进行RT-PCR检测和免疫组化分析证明Dicer1基因在肝脏、肾脏、肺内均有表达。对腹腔肿胀的转基因阳性1号鼠解剖发现肝脏、脾脏明显增大,胚胎发育异常。结论成功建立Dicer1基因表达的转基因小鼠模型,该模型为进一步研究DICER1基因功能及miRNA的表达及功能等奠定基础。

DICER1在急性髓细胞白血病中的表达及其与预后关系的探讨

目的检测DICER1基因在急性髓细胞白血病(AML)中的表达水平,探讨其表达与AML预后的关系。方法 Real-time PCR方法检测AML患者中DICER1 mRNA的表达水平;Western blot方法检测AML患者中DICER1的蛋白表达水平;采用Logistic相关分析DICER1表达与临床特征的相关性;采用Kaplan-Meier生存曲线分析DICER1表达与患者总生存期的关系。结果成人AML骨髓标本中DICER1表达水平显著高于正常对照组(P<0.05)。DICER1 mRNA高表达与初诊时高白细胞数、初次化疗效果差相关(OR值分别是7.51、0.058;P分别为0.032、0.003)。DICER1高表达组患者(中位总生存期17.9个月)较低表达组(中位总生存期29.3个月)总生存期短,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 DICER1在AML中高表达,其高表达可能是AML的不良预后因素。

急性髓系白血病细胞中DICER1基因的表达及其功能研究

目的:检测急性髓系白血病细胞株HL-60、KG-1细胞中DICER1基因的表达水平,研究DICER1基因沉默对HL-60、KG-1细胞增殖、凋亡的影响,探寻DICER1在白血病发病机制中的作用。方法:应用Real-time PCR和Western blot检测DICER1在白血病细胞株HL-60、KG-1中mRNA和蛋白的相对表达水平。用LipofectamineTMLTX将DICER-shRNA载体转染HL-60、KG-1细胞,Real-time PCR和Western blot的方法从mRNA和蛋白水平检测DICER1的干扰效率。CCK-8法检测DICER1干扰后对白血病细胞增殖的影响,流式细胞仪检测DICER1干扰后白血病细胞凋亡率。结果:以正常HEK293细胞为对照,白血病细胞株HL-60、KG-1中DICER1 mRNA和蛋白的表达水平显著高于正常HEK293细胞(P<0.05)。DICER1-shRNA转染HL-60、KG-1细胞5天后,DICER1 mRNA和蛋白表达水平显著下降,干扰效果显著(P<0.05);CCK-8实验结果表明:与对照组细胞相比,DICER1干扰后白血病细胞增殖力显著降低(P<0.05);流式细胞分析表明:与正常细胞和对照组细胞比较,DICER1干扰后白血病细胞凋亡显著增加(P<0.01)。结论:DICER1在白血病细胞株HL-60、KG-1中高表达,具有促进白血病细胞增殖,抑制凋亡的作用。

应用Dicer1转基因小鼠建立黑色素瘤模型的研究

目的应用D妇r1（编码蛋白属于RNA酶Ⅲ家族）转基因小鼠建立黑色素瘤模型。方法将小鼠黑色素瘤细胞株分别移植于Dicer1转基因鼠和C57BL／6J小鼠前肢腋下，观察两种小鼠的荷瘤情况，包括移植瘤生长情况、移植瘤生长曲线。结果与C57BL／6J小鼠组肿瘤比较，Dicer1转基因小鼠组的肿瘤成瘤时间短、肿瘤生长速度快、肿瘤体A（P〈0．05）。结论应用Dicer1转基因小鼠建立了黑色素瘤模型，结果显示Dicer1基因对黑色素瘤荷瘤有明显影响。

Dicer蛋白与Wig-1蛋白的相互作用的研究

Dicer是RNA干扰中起核心作用的一种dsRNase,Wig-1是受p53诱导的、与dsRNA特异结合的一种锌指蛋白。本研究初步证实了Dicer蛋白与Wig-1蛋白存在相互作用。GST pull-down实验表明Dicer蛋白能与GST-Wig-1结合,而Wig-1蛋白能竞争性干扰Dicer与GST-eIF2C1的结合;Far-western分析证实Dicer蛋白可以与结合在硝酸纤维素膜上的GST-Wig-1蛋白结合;进一步发现Wig-1能有效促进重组Dicer的dsRNase酶切活性。这些结果揭示Dicer蛋白和Wig-1蛋白很可能通过相互作用共同参与了dsRNA调控相关的生理过程。

Dicer1在宫颈肿瘤组织中的表达及意义

目的:探讨Dicer1在正常宫颈上皮、宫颈上皮内瘤变和宫颈鳞癌的表达及意义。方法:Western blot和RT-PCR法检测正常细胞系(End1/E6E7)、宫颈内瘤变细胞系(S12)及宫颈癌细胞系(Ca Ski、He La、Si Ha和C33A)中Dicer1蛋白及其mRNA表达水平,免疫组织化学技术检测Dicer1在正常宫颈、宫颈上皮内瘤变和宫颈鳞癌中的表达水平。结果:正常宫颈上皮细胞系Dicer1表达水平低于宫颈癌细胞系表达量。随着恶性程度增加,Dicer1呈驼峰状表达,即在正常宫颈组织及Grade III级宫颈鳞癌中表达较低,但在宫颈上皮内瘤变及高分化宫颈肿瘤(grade I级)中表达较高。结论:Dicer1在正常宫颈、宫颈上皮内瘤变和宫颈鳞癌中的表达有差异,为进一步研究Dicer1在宫颈癌发生发展中的作用及分子机制提供依据。

前列腺特异的转录因子NKX3.1上调Dicer1基因的表达

目的:研究前列腺特异转录因子NKX3.1对Dicer1基因表达的影响。方法:转染pcDNA3.1-NKX3.1至前列腺癌PC3细胞,通过G418筛选,有限稀释法克隆培养获得NKX3.1稳定转染的PC3细胞-PC3(+);采用基因芯片检测NKX3.1对前列腺癌PC3细胞基因组表达谱的影响。进一步应用RT-PCR、Western blot-ting进行验证。为进一步检测Dicer1表达增高、促进microRNA的成熟作用,构建了microRNA let-7a-1靶序列-报道基因融合质粒,转染PC3细胞和PC3(+)细胞,通过报道基因检测成熟microRNA let-7a-1对其靶序列的作用。结果:基因组芯片显示,NKX3.1稳定表达的PC3(+)细胞中,Dicer1表达明显高于PC3细胞。RT-PCR、Western blotting结果验证PC3(+)细胞中Dicer1mRNA和蛋白质的表达水平均高于PC3细胞。microRNA let-7a-1靶序列-报道基因融合质粒,转染PC3细胞和PC3(+)细胞后,报告基因检测,PC3(+)细胞中荧光素酶活性明显低于PC3细胞。结论:NKX3.1可上调前列腺癌PC3细胞中Dicer1的表达,促进microRNA的成熟及作用。

microRNA-1抑制心肌特异性Dicer基因缺失小鼠心脏病理性重构

目的探讨microRNA-1(miR-1)对他莫昔芬(tamoxifen,TMX)诱导的心肌特异性Dicer基因缺失小鼠心脏结构重构及心功能的影响。方法采用Myh6-Cre/Loxp重组系统,通过Dicerloxp/loxp小鼠和Myh6-cre ERT小鼠杂交,获得Myh6-cre ERT/Dicerloxp/loxp小鼠。将18只8周龄雄性Myh6-cre ERT/Dicerloxp/loxp小鼠按随机数字表法分为对照组、模型组、miR-1治疗组。采用腹腔注射20 mg/mL TMX溶液(0.1 mL),连续注射5 d,建立心肌特异性Dicer基因缺失心力衰竭小鼠模型,对照组腹腔注射玉米油;模型建立后,miR-1治疗组通过尾静脉注射miR-1类似物(miR-1 mimic)10 nmol/只,对照组给予同等剂量生理盐水,模型组给予miRNA阴性对照试剂,2次/周。1周后,经胸二维超声心动图检测各组小鼠舒张末期左室内径(LVIDd)、收缩末期左室内径(LVIDs)、舒张末期左室容积(EDV)、收缩末期左室容积(ESV)、射血分数(EF)及左室短轴缩短率(FS),然后收集心肌标本,通过HE染色、Masson三色染色及天狼猩红染色观察小鼠心肌结构重构程度;利用原位缺口末端标记法(terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated d UTP nick-end labeling,TUNEL)免疫荧光染色检测心肌组织细胞凋亡情况;通过细胞增殖指标Ki67免疫组化染色评估细胞增殖水平。结果建模后1周,模型组小鼠心功能明显下降,LVIDs及ESV均高于对照组(P<0.05),EF及FS则显著低于对照组(P<0.05),miR-1治疗后上述指标均较模型组明显改善(P<0.05)。组织病理学检测结果显示,与对照组相比,模型组小鼠心肌细胞排列紊乱,细胞肥大,炎症细胞浸润明显,心肌纤维化显著,而治疗组小鼠心肌细胞形态正常,无明显肥大和炎性浸润,未见明显的间质纤维化;TUNEL免疫荧光染色及Ki67免疫组化染色结果显示,miR-1治疗组小鼠较模型组心肌组织凋亡比例增加(P<0.05),且存在较明显的细胞增殖(P<0.05)。结论 miR-1可抑制TMX诱导的心肌特异性Dicer基因缺失心力衰竭模型中心肌细胞的固有改变和间质的改变,抑制心脏结构重构,维持心功能。

肺癌中长链非编码RNA DICER1-AS1的表达变化及意义

目的检测肺癌组织以及细胞系中lncRNA DICER1-AS1的表达情况,并结合临床数据分析其临床应用价值。方法收集39例经病理诊断确诊肺癌患者的组织样本;培养肺癌细胞系A549、H1299以及二倍体人胚肺细胞系KMB17;实时荧光定量PCR检测lncRNA DICER1-AS1mRNA表达量。结合临床数据比较不同患者的lncRNA DICER1-AS1表达差异。结果肺癌组织中DICER1-AS1表达量0.98 (0.53,1.72)高于癌旁组织0.64(0.40,0.92)(P <0.05)。肺癌细胞系A549以及H1299的DICER1-AS1表达量分别为(23±2.7)、(42.3±0.48)均高于KMB17的(5.84±1.07)(P <0.05)。而不同性别、年龄、肿瘤大小、TNM分期与DICER1-AS1在组织中的表达高低间差异无统计学意义(P>0.05)。结论肺癌组织中DICER1-AS1的表达高于癌旁组织,其高表达可能会是促进肿瘤发生以及发展的重要因素,有助于临床肺癌对患者的诊断以及治疗。

干扰lncRNA DICER1-AS1通过调控miR-206抑制肺癌细胞增殖、迁移

目的:探讨lncRNA DICER1-AS1对肺癌细胞增殖、迁移的影响及分子机制。方法:收集2018年1月至2020年1月杭州市萧山区中医院23例肺癌和癌旁组织标本,采用RT-qPCR检测lncRNA DICER1-AS1和miR-206的表达水平;将A549细胞随机分为si-NC组、si-lncRNA DICER1-AS1组、si-lncRNA DICER1-AS1+anti-miR-NC组、si-lncRNA DICER1-AS1+anti-miR-206组;RT-qPCR检测各组细胞中lncRNA DICER1-AS1和miR-206的表达水平;MTT法检测细胞存活率;克隆形成实验检测细胞克隆形成数;Transwell检测细胞迁移;Western blot法检测蛋白表达;荧光素酶报告实验检测lncRNA DICER1-AS1和miR-206的靶向关系。结果:肺癌组织中lncRNA DICER1-AS1呈高表达,miR-206呈低表达(P<0.05)。荧光素酶报告实验显示lncRNA DICER1-AS1直接靶向调控miR-206。干扰A549细胞中lncRNA DICER1-AS1表达,miR-206表达水平升高,细胞存活率降低,克隆形成数减少,迁移细胞数减少,Ki67、N-cadherin表达水平降低,E-cadherin表达水平升高(P<0.05)。抑制miR-206表达可逆转干扰lncRNA DICER1-AS1对肺癌细胞增殖、迁移的抑制作用。结论:干扰lncRNA DICER1-AS1可能通过上调miR-206表达抑制肺癌细胞增殖、迁移。

miRNA-186上调Dicer1的表达影响胃癌细胞侵袭和迁移的作用机制研究

目的探讨miRNA-186上调Dicer1的表达影响胃癌细胞侵袭和迁移的作用机制。方法取40例胃癌患者的胃癌组织及相应的癌旁组织;将转染pLVTHM-mimic-miRNA-186和pLVTHM-mimic-NC的慢病毒感染液分别转染BGC-823细胞,得到过表达BGC-823-mimics-miRNA-186细胞、阴性对照BGC-823-mimics-NC细胞。定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测不同组织和细胞中miRNA-186的相对表达量;Transwell小室检测细胞侵袭能力,划痕实验检测细胞迁移能力;间接免疫荧光法(IFA)检测Dicer1相关分子神经型钙黏蛋白(N-cadherin)的阳性表达情况,双荧光素酶报告基因实验验证miRNA-186和Dicer1的靶向关系,Western blot检测各细胞Dicer1的相对表达量。结果胃癌组织中miRNA-186的相对表达量明显低于癌旁组织(P﹤0.01)。胃癌细胞BGC-823和BGC-823-mimics-NC中miRNA-186的相对表达量均明显低于正常胃黏膜上皮细胞RGM-1,且BGC-823-mimics-miRNA-186细胞中miRNA-186的相对表达量明显高于胃癌细胞BGC-823及BGC-823-mimics-NC,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。BGC-823-mimics-miRNA-186细胞侵袭数目少于胃癌细胞BGC-823和BGC-823-mimics-NC,细胞迁移率低于胃癌细胞BGC-823和BGC-823-mimics-NC,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。过表达miRNA-186的BGC-823-mimics-miRNA-186细胞中N-cadherin阳性表达率低于胃癌细胞BGC-823和BGC-823-mimics-NC(P﹤0.05)。mimics-miRNA-186能明显抑制野生型psi-CHECK-Dicer1-wild的荧光素酶活性,而对突变型psi-CHECK-Dicer1-mutant的荧光素酶活性无明显影响。胃癌细胞BGC-823和BGC-823-mimics-NC中Dicer1蛋白的相对表达量均明显低于正常胃黏膜上皮细胞RGM-1,且BGC-823-mimics-miRNA-186细胞中Dicer1的相对表达量明显高于胃癌细胞BGC-823和BGC-823-mimics-NC,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。结论miRNA-186通过靶向正调控Dicer1的表达,下调N-cadherin的表达可抑制胃癌细胞的侵袭和迁移能力。

原发性DICER1相关中枢神经系统肉瘤1例

患者男,29岁,无明显诱因间歇性头痛3月余;既往体健。查体及实验室检查均未见明显异常。头颅MRI:右额叶5.5 cm×5.2 cm×5.7 cm肿块,呈T1WI低信号(图1A)、T2WI稍高信号,内见囊变,瘤周见水肿(图1B),弥散加权成像(diffusion weighted imaging,DWI)呈稍高信号,表观弥散系数(apparent diffusion coefficient,ADC)为0.88×10^(-3)mm^(2)/s(图1C),增强T1WT肿块呈明显不均匀强化。

微小RNA-186上调Dicer1抑制乳腺癌细胞MCF-7侵袭转移的机制研究

目的探讨微小RNA-186(miR-186)通过调控Dicer1对乳腺癌细胞MCF-7侵袭转移的影响及其作用机制。方法收集2018年1月至2019年2月于山东省威海市中心医院经手术切除后病理证实为乳腺癌的组织标本及其对应的癌旁正常组织标本各40份,实时荧光定量聚合酶链反应法检测miR-186在乳腺癌组织及对应的癌旁正常组织标本、人乳腺癌细胞株MCF-7以及正常人乳腺上皮细胞MCF10A的表达情况;Transwell法检测miR-186对乳腺癌细胞株MCF-7侵袭能力的影响;划痕实验检测miR-186对乳腺癌细胞株MCF-7迁移能力的影响;生物信息学预测及双荧光素酶报告基因实验验证miR-186和Dicer1的靶向关系;蛋白质印迹法检测Dicer1在各细胞株中的表达。结果乳腺癌组织中miR-186的表达水平显著低于癌旁正常组织[(0. 38±0. 11)比(0. 98±0. 24)](P <0. 05);miR-186在人乳腺癌细胞株MCF-7中的表达水平显著低于正常人乳腺上皮细胞MCF10A[(0. 14±0. 05)比(1. 04±0. 27)](P <0. 05)。过表达miR-186后,MCF-7-mimic-miR-186细胞穿过Matrigel基质胶的数量及覆盖划痕区域少于MCF-7和MCF-7-mimic-NC(均P <0. 05)。经www. microRNA. org网站预测发现miR-186和Dicer1有互补结合序列,双荧光素酶报告实验证实二者的靶向结合关系。人乳腺癌细胞株MCF-7中Dicer1表达水平显著低于正常人乳腺上皮细胞MCF10A,MCF-7-mimic-miR-186中Dicer1表达水平明显高于MCF-7和MCF-7-mimic-NC(均P <0. 05)。结论 miR-186通过靶向正调控Dicer1的表达,抑制人乳腺癌细胞株MCF-7的侵袭迁移能力。

儿童囊性肾瘤伴DICER1基因突变1例并文献复习

目的分析1例儿童囊性肾瘤伴DICER1基因突变患儿的临床资料并复习相关文献,以提高对此类疾病的认识。方法收集2020年11月1例儿童囊性肾瘤伴DICER1基因突变患儿的临床资料,总结临床特点、影像学表现、手术经过、病理和基因结果。通过PubMed、中国知网、万方等数据库检索相关文献,检索时间截至2021年5月。结果本例患儿术前B超、CT及MRI均提示左肾巨大囊实性肿块,边界尚清,患儿接受左瘤肾切除术,术中未发现肿大淋巴结,术后病理考虑囊性肾瘤,患儿血液及肿瘤组织均发现DICER1基因突变,随访6个月无肿瘤残余及复发。中文文献尚无儿童囊性肾瘤伴DICER1基因突变的病例报告,英文文献中,同时检测到胚系和体细胞突变的仅有6例报道。结论儿童囊性肾瘤较为少见,其发生机制与DICER1基因突变有关,手术切除是主要治疗方式,DICER1基因突变可致多种肿瘤,术后长期随访监测非常重要。