DichotomideⅫ通过HIF-1α/NLRP3通路抑制LPS诱导的BV2小胶质细胞炎性反应及作用机制研究

目的:通过LPS/ATP诱导BV2小胶质细胞炎症模型,探讨DichotomideⅫ在小胶质细胞炎症反应中的作用及机制。方法:实验分为空白对照组、模型组(1μg/mL LPS+5 mmol/L ATP)、DichotomideⅫ(1.25、2.5、5μmol/L)组。采用MTT法检测各组细胞存活率;ELISA法检测各组细胞中炎症因子IL-1β、TNF-α的含量;Hoechst 33342/PI染色,荧光显微镜观察细胞焦亡状况;免疫荧光法检测NLRP3在各组细胞中的表达;Western Blot法检测DichotomideⅫ对HIF-1α、NLRP3、ASC、Caspase-1、cleave-Caspase-1、IL-1β、cleave-IL-1β、GSDMD、GSDMD-N蛋白表达的影响。结果:DichotomideⅫ能显著抑制LPS/ATP诱导的BV2细胞炎症反应,减少细胞焦亡,显著降低NLRP3的表达,使炎性因子IL-1β、TNF-α及NLRP3/ASC/Caspase-1信号通路蛋白表达水平显著降低,其作用可被磷酸酶抑制剂抑制。结论:dichotomideⅫ具有抗神经炎症作用,其机制与抑制HIF-1α/NLRP3炎性体介导的炎症信号通路有关。