Dicranostigma leptopodum (maxim) fedde induced apoptosis in SMMC-7721 human hepatoma cells and inhibited tumor growth in mice

Dicranostigma Leptopodum (Maxim) Fedde (DL- F), which had been previously documented to suppress oxidative hemolysis of erythrocytes and enhance immune functions of murine peri- toneal macrophages, was investigated for its effect on anti-tumor activity. Of alkaloids extracted from DLF, five have been identified with employment of chromatographic analysis. An antiproliferative role of these alkaloids was determined on SMMC-7721 Human Hepatoma Ce- lls in an apoptosis-inducing manner, through MTT assaying, Trypan blue exclusion assaying and cytometric analysis of cell cycle distribution. To further examine their inhibitory effects on tumor progression, murine H22 cells were inoculated into Kunming mice to determine the role of these alkaloids of DLF in inhibiting tumor growth in the tumor-implanted mice. It was found that these alkaloids of DLF enhanced the tumor shrinkage effectively wherein its tumor inhibitory rate and immunohistochemistry stain- ing of the tumor were determined and profiled, respectively.

红茂草注射液对免疫低下小鼠免疫功能的影响

研究红茂草注射液对小鼠实验性免疫功能低下的影响．以地塞米松(DEX,0．8 mg／kg)造成免疫功能低下的动物模型,用3个不同质量分数的红茂草注射液(50,100,200 mg／(kg·d)×4 d)分别予以治疗后,采用碳粒廓清法、溶血素测定法、器官指数测定等有关免疫指标．红茂草注射液可使小鼠的廓清指数K值、吞噬指数α值、器官指数、血清溶血素及溶菌酶活力增高,尤以100 mg／kg剂量组效果显著．红茂草注射液对实验性免疫功能低下小鼠有明显的免疫增强作用,这为其应用于临床治疗提供了一定的实验依据．

红茂草生物碱抑菌活性的测定

用醇提法提取红茂草生物碱,经石英色谱柱层析分离、结晶后测定了红茂草生物碱对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草杆菌、粪肠球菌的体外最小抑菌浓度(MIC)、抑菌率和半数抑菌浓度(IC50)。结果显示,红茂草生物碱对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草杆菌、粪肠球菌的MIC分别是0.22、0.18、0.18、0.30mg/mL;对这4种供试菌的IC50分别是0.180 7、0.140 70、.140 70、.260 5 mg/mL。表明,红茂草生物碱对这4种细菌具有明显的抑制作用。

秃疮花提取物对红细胞氧化性溶血的抑制机制

目的探讨秃疮花提取物对鼠红细胞氧化性溶血的影响及其机理。方法以H2O2诱导体外鼠红细胞发生氧化性溶血,以乙酰苯肼引发小鼠体内溶血性贫血,观察不同浓度或剂量秃疮花对鼠红细胞溶血率,细胞形态、小鼠体内红细胞、白细胞数量,血红蛋白含量,血浆丙二醛含量,以及红细胞内各种抗氧化酶活性的影响,并分析其作用机理。结果外秃疮花提取物对H2O2诱导的鼠红细胞溶血的抑制率可达78%。小鼠腹腔注射秃疮花提取物后,与模型组比较,红细胞数目增加,血红蛋白含量提高,白细胞数目减少,血浆丙二醛含量降低,四项指标均接近正常组(腹腔注射DLF 1.5 g/(kg.d),红细胞数目为8.49×1012/L);损伤小鼠腹腔注射秃疮花提取物后,红细胞内超氧化物歧化酶活性和血浆总抗氧化力无明显改变,而过氧化氢酶和谷胱甘肽过氧化物酶的活性显著提高,葡萄糖6磷酸脱氢酶活性上升极显著(较损伤组提高44.7%)。结论秃疮花提取物在体内外可分别抑制由H2O2和乙酰苯肼引发的鼠红细胞氧化性溶血,效果明显。小鼠腹腔注射秃疮花提取物后,红细胞内抗氧化酶活性普遍提高,提示秃疮花提取物通过增强红细胞的自由基清除能力而使细胞膜免受氧化性损伤,其中葡萄糖6磷酸脱氢酶活性的上升尤为显著,据此推测秃疮花提取物有可能通过抑制乙酰苯肼对葡萄糖6磷酸脱氢酶的干扰而缓解鼠红细胞的氧化性溶血。

红茂草生物碱正交提取工艺模式优化及清除自由基作用的研究

为研究红茂草(Dicranostigma leptodum(Maxim.)Fedde)生物碱的正交提取工艺条件及其清除自由基作用。采用单因素水平测定,从10种相关因素中筛选出乙醇体积分数、超声波作用时间、液料比、回流时间、浸提液pH值、浸泡时间共6种主要影响因素,按照L25(56)正交表进行正交试验,用SPSS 17.0软件进行统计分析,优选出最佳正交提取工艺模式;将正交提取浓缩液进行HPLC检测,并测定其对羟自由基(.OH)和氧自由基(O2.-)的清除作用。结果表明:红茂草生物碱最佳提取工艺条件为乙醇体积分数65%、超声波作用时间20min、液料比15∶1、回流时间2.5h、浸提液pH=8、浸泡时间4h;在最佳提取工艺条件下红茂草提取液中生物碱的含量为9.2794%;红茂草生物碱在25.0和1.8mg.mL-1时,对.OH和O2.-清除效果显著,其清除率为58.70%和49.26%,IC50为23.50和1.75mg.mL-1。该工艺方法简便、可靠、提取率高,提取液清除自由基作用显著。

秃疮花提取物对CCl_4诱导的小鼠急性肝损伤的影响

目的探讨秃疮花提取物(DLE)对CCl_4诱导的小鼠急性肝损伤的影响。方法给予小鼠不同剂量的DLE灌胃,连续10 d。小鼠腹腔注射CCl_4造成急性肝损伤,16 h后测定血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)活性;制备肝组织匀浆测定丙二醛含量及超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性;同时进行肝组织病理观察。结果与模型组相比,不同剂量的DLE给药组小鼠血清ALT、AST活性显著降低,肝组织匀浆中丙二醛含量显著减少;SOD、GSH-Px活性显著升高;病理切片表明DLE作用后肝组织损伤不同程度减轻,其中剂量为2.0 g生药/kg体重时,肝组织的损伤程度较轻。结论DLE对CCl_4诱导的小鼠急性肝损伤具有很好的保护作用,其作用机制可能与DLE抑制抗氧化酶活性和抗自由基活性有关。

罂粟科3种植物叶片生物碱抗氧化活性比较

为比较罂粟科3种植物叶片中生物碱的抗氧化活性,采用体积分数为80%乙醇浸提博落回、角茴香和秃疮花3种植物叶片中的总生物碱,用常见生物碱显色反应检测,利用硅胶柱层析纯化,并且用邻苯三酚自氧化法测定其超氧阴离子的清除效果,番红花红O-Mn2+-H2O2光度法测定其对羟基自由基的清除效果,总生物碱的还原性。结果表明,3种总生物碱对这两种自由基有较好的抗氧化活性,角茴香对羟基自由基的清除作用较强,IC50为0.170 g/L。当质量浓度为1 g/L时,秃疮花对超氧阴离子的清除率92.09%,3种植物的总生物碱都有还原性,但效果都不如硫脲。

山西霍山罂粟科植物花粉形态

利用光学显微镜和扫描电子显微镜对山西霍山罂粟科白屈菜属白屈菜、紫堇属延胡索、角茴香属角茴香、秃疮花属秃疮花 4种的花粉形态进行了观察和比较研究 ,以上 4种花粉差异大。角茴香花粉粒近球形 ,具合沟 ;延胡索花粉粒长球形 ,表面纹饰较光滑 ;白屈菜花粉粒长球形或近球形 ;秃疮花花粉粒近球形。角茴香花粉表面纹饰为刺状纹和细网状纹的复合纹 ,白屈菜花粉表面纹饰为细网状纹和颗粒状纹的复合纹 ,秃疮花花粉表面纹饰为细颗粒状纹。延胡索、白屈菜、秃疮花花粉粒的萌发沟均为三沟 。

秃疮花生物碱成分分析及药理作用研究进展

秃疮花[Dicranostigma Leptopodum(Maxim.)Fedde,DLF]为罂粟科秃疮花属二年生或多年生草本植物,在甘肃省秦岭地区、渭水流域分布广泛。秃疮花生物碱主要为:异紫堇碱、原阿片碱、紫堇碱、异紫堇啡碱、木兰碱。具有抗菌、抑菌、抗溶血和改善微循环、对中枢和平滑肌有抑制、提高机体免疫力等作用,对心肌细胞和小鼠肝损伤有保护作用等,其药用价值有广阔的开发和应用前景。

药用植物红茂草化学成分及抗炎作用研究进展

红茂草民间多用于治疗开放性淋巴结核和各类创伤性炎症,富含紫堇碱、异紫堇碱和异紫堇啡碱等多种异喹啉类生物碱。红茂草提取物具有抗菌、抑菌、抗溶血和改善微循环、提高机体免疫力、保护心肌和修复肝损伤等作用,并对各种结核病及炎症有显著疗效,其药用价值具有广阔的开发和应用前景,本文综述了红茂草主要化学成分及其生物活性,从抗菌、抗病毒、保肝、提高免疫细胞活性和细胞因子分泌、促进创伤和炎症愈合等方面归纳了红茂草的抗炎研究进展。

红茂草总生物碱酸水提取工艺试验

利用生物碱盐酸盐易溶于水这一特性,用稀盐酸溶液进行红茂草总生物碱的提取试验。先分别进行提取时间、料液比、pH值和温度对红茂草总生物碱提取率影响的单因素试验,在此基础上再从每个单因素中选出3个较好水平进行正交试验,从而得出酸水提取红茂草总生物碱的最佳条件。按照正交试验所确定的最佳提取条件进行总生物碱的提取。以红茂草中主要生物碱异紫堇碱为指标,对提取物进行HPLC检测。结果表明,在温度90℃,提取时间5h,料液比1∶40,pH值1.5为提取红茂草总生物碱的最佳条件。HPLC检测结果显示,提取物中异紫堇碱含量为9.28%。分别占分离菌株的25.6%、27.9%。本试验为该区猪源肺炎克雷伯杆菌的防治提供理论基础。

秃疮花药材质量标准研究

目的建立甘肃省地方习用药材秃疮花的质量标准。方法采用性状鉴别、显微鉴别及薄层色谱法建立秃疮花的定性鉴别方法,采用高效液相色谱法建立秃疮花中异紫堇碱含量测定方法,按《中国药典》(2015年)附录方法测定秃疮花中水分、总灰分、酸不溶性灰分、水溶性浸出物及醇溶性浸出物。结果优化的薄层色谱条件,可以特征性地实现12批秃疮花药材的定性鉴别,且样品均显示有异紫堇碱的斑点。12批秃疮花药材的异紫堇碱在1.9~406.0 mg/mL内呈良好的线性关系(r=0.9999),加样回收率为94.15%~102.54%,RSD=0.39%~1.42%;水分、总灰分、酸不溶性灰分、水溶性浸出物、醇溶性浸出物、异紫堇碱分别为2.22%~7.63%、6.29%~10.51%、0.23%~0.76%、17.12%~23.34%、9.04%~14.32%、0.118%~0.940%。结论建立的薄层色谱法可以实现甘肃省地方习用药材秃疮花的定性鉴别,高效液相色谱法简便、可行,可用于秃疮花中异紫堇碱的含量测定,为秃疮花质量标准的建立提供依据。

三种不同红茂草制剂治疗羊口疮对比试验

用羊口疮强毒株感染试验羊只,建立羊口疮病理模型,分别用红茂草乙醇制剂(Ⅰ组)、盐酸盐制剂(Ⅱ组)和水制剂(Ⅲ组)进行对比治疗试验。结果表明,试验Ⅰ组溃疡愈合率极显著高于Ⅱ组和Ⅲ组(P<0.01),Ⅱ组也极显著高于Ⅲ组(P<0.01)。治疗4 d后Ⅰ组羊口疮平均愈合率为91.2%,Ⅱ组为80.4%,Ⅲ组为65.1%。

秃疮花水溶性外用制剂抗菌试验

为了确定秃疮花水溶性外用制剂的临床应用剂量标准,试验采用甘肃省畜牧兽医研究所研制的秃疮花水溶性外用制剂,以寇氏法进行了体外抗菌试验。试验结果表明秃疮花水溶性外用制剂对大肠杆菌、葡萄球菌和链球菌的IC50分别为0.98±0.16、2.54±0.39和1.60±0.34(含N量mg/mL)。这说明秃疮花水溶性外用制剂对大肠杆菌、葡萄球菌和链球菌有一定的杀菌抑菌功能。

秃疮花水溶性外用制剂抗病毒试验

为了确定秃疮花水溶性外用制剂的临床应用剂量标准,试验用甘肃省畜牧兽医研究所研制的秃疮花水溶性外用制剂,以Reed-Muench法进行了体外抗病毒试验。试验结果表明秃疮花水溶性外用制剂对GPV的IC50=2-6.5倍个外用制剂试验单位(8.8mg/mL外用制剂干物质);对CPDV的IC50=2-7.2倍个外用制剂试验单位(5.4mg/mL外用制剂干物质)。这说明秃疮花水溶性外用制剂对GPV和CPDV有一定的抑制功能。

秃疮花针剂抗GPV和CPDV试验

为了确定秃疮花针剂的抗病毒临床应用剂量标准,试验用甘肃省畜牧兽医研究所研制的秃疮花针剂,以Reed-Muensch法进行了细胞毒性试验及抗山羊痘和羊传染性脓疱皮炎病毒试验。试验结果表明,秃疮花内用针剂在一定的剂量范围内对GPV和CPDV均有抑制作用,半数抑制浓度分别为8.8mg/mL和5.4mg/mL。该试验结果为探索秃疮花针剂的抗病毒机理和秃疮花针剂的临床应用奠定了实验基础。

红茂草总生物碱酸水提取法研究

用酸水提取法提取红茂草总生物碱。先分别进行提取时间、料液比、pH值和温度对红茂草总生物碱提取率影响的单因素实验,在此基础上从每个单因素中选出3个较好水平进行正交试验,从而得出酸水提取红茂草总生物碱的最佳条件。结果表明,温度80℃、提取时间4 h、料液比1∶50、pH值1.5为提取红茂草总生物碱的最佳条件。

红茂草生物碱TLC检测技术的建立及抑菌活性研究

利用醇提法提取红茂草中生物碱,并对其进行TLC检测,建立红茂草生物碱TLC检测技术;用红茂草浓缩液对3种供试菌进行体外抑菌活性研究,测定其最小抑菌浓度(MIC)。结果以95%乙醇:冰乙酸:水:浓氨水(15:0.5:2.5:0.5)为展开系统,分离效果最好,斑点清晰;对供试菌MIC测定结果分别为:大肠埃希氏杆菌0.18mg/mL、金黄色葡萄球菌0.14mg/mL、粪肠球菌0.26mg/mL。红茂草具有明显的抑菌作用。TLC检测技术可作为红茂草提取物中生物碱质量控制方法,且该法重现性好、准确度高。

不同浓度红茂草乙醇制剂治疗羊口疮试验研究

将30只健康羊只随机分为6组,每组5只,用羊口疮强毒感染试验羊只,建立羊口疮病理模型,用不同浓度的红茂草乙醇制剂进行对比治疗试验,以确定最适药物浓度。试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组分别用浓度7.5 mg/m L、15 mg/m L、30 mg/m L、60 mg/m L、120 mg/m L的红茂草乙醇溶液进行治疗,Ⅵ组为对照。结果表明,Ⅲ组、Ⅳ组、Ⅴ组溃疡面愈合率分别与Ⅰ组、Ⅱ组之间有极显著性差异(P<0.01);Ⅰ组与Ⅱ组之间差异极显著(P<0.01);Ⅲ组、Ⅳ组、Ⅴ组组间差异不显著(P>0.05)。红茂草制剂治疗剂量与溃疡面愈合率之间的回归方程为:y=1.6756x+3.488,R2=0.958 3,其EC50为7.986 6 mg/m L。

酸性染料比色法测定红茂草中总生物碱含量

采用酸性染料比色法测定红茂草中总生物碱含量。以异紫定堇碱为标准品,酸性染料比色法的显色条件为:pH值4.0、波长415 nm、溴甲酚绿1.5 mL,得到标准曲线:y=0.032 x-0.033,R2=0.977 0,生物碱检测浓度在21.6-54.0 mg/mL范围内与吸收度线性关系良好,红茂草中总生物碱含量为1.386%。该方法灵敏度高、准确度好、重现性好。