红茂草生物碱抑菌活性的测定

用醇提法提取红茂草生物碱,经石英色谱柱层析分离、结晶后测定了红茂草生物碱对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草杆菌、粪肠球菌的体外最小抑菌浓度(MIC)、抑菌率和半数抑菌浓度(IC50)。结果显示,红茂草生物碱对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草杆菌、粪肠球菌的MIC分别是0.22、0.18、0.18、0.30mg/mL;对这4种供试菌的IC50分别是0.180 7、0.140 70、.140 70、.260 5 mg/mL。表明,红茂草生物碱对这4种细菌具有明显的抑制作用。

红茂草生物碱正交提取工艺模式优化及清除自由基作用的研究

为研究红茂草(Dicranostigma leptodum(Maxim.)Fedde)生物碱的正交提取工艺条件及其清除自由基作用。采用单因素水平测定,从10种相关因素中筛选出乙醇体积分数、超声波作用时间、液料比、回流时间、浸提液pH值、浸泡时间共6种主要影响因素,按照L25(56)正交表进行正交试验,用SPSS 17.0软件进行统计分析,优选出最佳正交提取工艺模式;将正交提取浓缩液进行HPLC检测,并测定其对羟自由基(.OH)和氧自由基(O2.-)的清除作用。结果表明:红茂草生物碱最佳提取工艺条件为乙醇体积分数65%、超声波作用时间20min、液料比15∶1、回流时间2.5h、浸提液pH=8、浸泡时间4h;在最佳提取工艺条件下红茂草提取液中生物碱的含量为9.2794%;红茂草生物碱在25.0和1.8mg.mL-1时,对.OH和O2.-清除效果显著,其清除率为58.70%和49.26%,IC50为23.50和1.75mg.mL-1。该工艺方法简便、可靠、提取率高,提取液清除自由基作用显著。

罂粟科3种植物叶片生物碱抗氧化活性比较

为比较罂粟科3种植物叶片中生物碱的抗氧化活性,采用体积分数为80%乙醇浸提博落回、角茴香和秃疮花3种植物叶片中的总生物碱,用常见生物碱显色反应检测,利用硅胶柱层析纯化,并且用邻苯三酚自氧化法测定其超氧阴离子的清除效果,番红花红O-Mn2+-H2O2光度法测定其对羟基自由基的清除效果,总生物碱的还原性。结果表明,3种总生物碱对这两种自由基有较好的抗氧化活性,角茴香对羟基自由基的清除作用较强,IC50为0.170 g/L。当质量浓度为1 g/L时,秃疮花对超氧阴离子的清除率92.09%,3种植物的总生物碱都有还原性,但效果都不如硫脲。

药用植物红茂草化学成分及抗炎作用研究进展

红茂草民间多用于治疗开放性淋巴结核和各类创伤性炎症,富含紫堇碱、异紫堇碱和异紫堇啡碱等多种异喹啉类生物碱。红茂草提取物具有抗菌、抑菌、抗溶血和改善微循环、提高机体免疫力、保护心肌和修复肝损伤等作用,并对各种结核病及炎症有显著疗效,其药用价值具有广阔的开发和应用前景,本文综述了红茂草主要化学成分及其生物活性,从抗菌、抗病毒、保肝、提高免疫细胞活性和细胞因子分泌、促进创伤和炎症愈合等方面归纳了红茂草的抗炎研究进展。

秃疮花生物碱成分分析及药理作用研究进展

秃疮花[Dicranostigma Leptopodum(Maxim.)Fedde,DLF]为罂粟科秃疮花属二年生或多年生草本植物,在甘肃省秦岭地区、渭水流域分布广泛。秃疮花生物碱主要为:异紫堇碱、原阿片碱、紫堇碱、异紫堇啡碱、木兰碱。具有抗菌、抑菌、抗溶血和改善微循环、对中枢和平滑肌有抑制、提高机体免疫力等作用,对心肌细胞和小鼠肝损伤有保护作用等,其药用价值有广阔的开发和应用前景。

红茂草总生物碱酸水提取工艺试验

利用生物碱盐酸盐易溶于水这一特性,用稀盐酸溶液进行红茂草总生物碱的提取试验。先分别进行提取时间、料液比、pH值和温度对红茂草总生物碱提取率影响的单因素试验,在此基础上再从每个单因素中选出3个较好水平进行正交试验,从而得出酸水提取红茂草总生物碱的最佳条件。按照正交试验所确定的最佳提取条件进行总生物碱的提取。以红茂草中主要生物碱异紫堇碱为指标,对提取物进行HPLC检测。结果表明,在温度90℃,提取时间5h,料液比1∶40,pH值1.5为提取红茂草总生物碱的最佳条件。HPLC检测结果显示,提取物中异紫堇碱含量为9.28%。分别占分离菌株的25.6%、27.9%。本试验为该区猪源肺炎克雷伯杆菌的防治提供理论基础。

红茂草生物碱TLC检测技术的建立及抑菌活性研究

利用醇提法提取红茂草中生物碱,并对其进行TLC检测,建立红茂草生物碱TLC检测技术;用红茂草浓缩液对3种供试菌进行体外抑菌活性研究,测定其最小抑菌浓度(MIC)。结果以95%乙醇:冰乙酸:水:浓氨水(15:0.5:2.5:0.5)为展开系统,分离效果最好,斑点清晰;对供试菌MIC测定结果分别为:大肠埃希氏杆菌0.18mg/mL、金黄色葡萄球菌0.14mg/mL、粪肠球菌0.26mg/mL。红茂草具有明显的抑菌作用。TLC检测技术可作为红茂草提取物中生物碱质量控制方法,且该法重现性好、准确度高。

酸性染料比色法测定红茂草中总生物碱含量

采用酸性染料比色法测定红茂草中总生物碱含量。以异紫定堇碱为标准品,酸性染料比色法的显色条件为:pH值4.0、波长415 nm、溴甲酚绿1.5 mL,得到标准曲线:y=0.032 x-0.033,R2=0.977 0,生物碱检测浓度在21.6-54.0 mg/mL范围内与吸收度线性关系良好,红茂草中总生物碱含量为1.386%。该方法灵敏度高、准确度好、重现性好。

红茂草总生物碱酸水提取法研究

用酸水提取法提取红茂草总生物碱。先分别进行提取时间、料液比、pH值和温度对红茂草总生物碱提取率影响的单因素实验,在此基础上从每个单因素中选出3个较好水平进行正交试验,从而得出酸水提取红茂草总生物碱的最佳条件。结果表明,温度80℃、提取时间4 h、料液比1∶50、pH值1.5为提取红茂草总生物碱的最佳条件。

利用模拟生物膜识别红茂草黄酮类化合物的药物效能

以红茂草中提取的黄酮类化合物(芦丁)为研究对象,经红外光谱、紫外光谱和差热-热重检测分析后,利用玻碳电极支撑的磷脂双层膜(s-BLM)作为生物膜模型,以Fe(CN)_6^(3-/4-)为探针分子,循环伏安(CV)与扫描电化学显微镜(SECM)结合,研究了芦丁对磷脂双层膜电化学行为的影响。结果发现,s-BLM与芦丁之间可以发生比较强烈的相互作用,使s-BLM的通透性发生变化,探针分子可以通过s-BLM到达电极表面。结果表明,红茂草中提取的黄酮化合物(芦丁)对卵磷脂双层膜电化学行为存在一定的影响,进一步揭示了红茂草药材的生物活性及疗效机理。

HPLC同步测定秃疮花中5种生物碱的含量

目的:建立HPLC(1525-2707TCM-2489色谱系统)同时测定秃疮花中5种生物碱含量方法。方法:采用工业乙醇超声辅助法提取秃疮花全草干粉制得乙醇提取物,再用等量石油醚、氯仿、正丁醇依次萃取,然后采用柱层析法逐步分离得到紫堇丁碱、异紫堇丁碱、黄连碱、木兰花碱、小檗碱,采用HPLC测定其含量。采用HPLC、柱型C18、甲醇(A)-水(B)为流动相,梯度洗脱(0~5 min,10%A;5~35 min,10%A→100%A;45~48 min,100%A→10%A,48~50 min,10%A),上样量1 mL,进样体积10μL,每个样品运行检测时间50 min;柱温30℃,检测波长260 nm。结果:紫堇丁碱的含量是7.90 mg/g,异紫堇丁碱的含量是13.30 mg/g,黄连碱的含量是1.36 mg/g,木兰花碱的含量是1.15 mg/g,小檗碱的含量是0.76 mg/g。结论:紫堇丁碱和异紫堇丁碱是秃疮花酸化氯仿相的主要生物碱类活性成分,黄连碱和木兰花碱是秃疮花正丁醇相中的主要生物碱类活性成分。该试验为定量测定药用植物中单体化合物的含量奠定了实验基础,可为同源植物系统研究提供理论参考。

红茂草生物碱对小鼠毒性实验研究

考察红茂草药物的安全性,将不同剂量红茂草生物碱提取物肌肉注射BALB/c小鼠,后在不同时间采集小鼠心、肝、脾、肺、肾和注射部位肌肉组织,制作切片,用H.E染色法进行染色后镜检,未发现典型性病理变化。进行小鼠半数致死量测定,其LD50为(16.39±0.04)g/kg、FL为14.51-18.93 g/kg。结果表明,红茂草生物碱具有良好的安全性。

红茂草总生物碱醇提取法与酸水提取法比较研究

试验利用乙醇溶液和稀盐酸溶液分别进行红茂草总生物碱的提取。重量法计算总生物碱的提取率(得率),并对试验结果进行t检验。结果表明,乙醇提取法提取红茂草总生物碱得率极显著高于酸水提取法(P<0.01)。

红茂草生物碱对金黄色葡萄球菌的抑菌作用研究

研究红茂草生物碱对金黄色葡萄球菌的抑菌作用,测定其生长曲线、最小抑菌浓度、抑菌率及半数抑菌浓度,并检测了金黄色葡萄球菌膜通透性和形态变化。结果表明,红茂草生物碱对金黄色葡萄球菌具有较强的抑菌作用,其最小抑菌浓度为0.35 mg/m L,半数抑菌浓度为0.214 mg/m L。红茂草生物碱可改变金黄色葡萄球菌的细胞形态,显微观察发现菌体变形缢裂。

红茂草异紫堇碱对小鼠实验性肝脏损伤的保护作用

研究红茂草异紫堇碱对小鼠实验性肝损伤的保护作用。给予小鼠不同剂量的红茂草异紫堇碱灌胃10 h,后腹腔注射四氯化碳(CCl4)诱导小鼠急性肝损伤病理模型,16 h后测定小鼠肝指数、小鼠血清中谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、肝脏中丙二醛(MDA)的含量及超氧化物歧化酶(T-SOD)的变化。采用环磷酰胺诱导小鼠免疫性肝损伤病理模型,用不同浓度的异紫堇碱灌服10 h,测定小鼠肝指数、血清中IL-1β、IL-2、INF-γ和TNF-α含量变化,同时进行肝脏组织结构和病理变化观察。结果发现,与模型组相比,不同剂量的异紫堇碱给药组血清中AST、ALT活性显著降低(P<0.01),肝组织匀浆MDA含量显著减少(P<0.01);抗氧化酶T-SOD活性显著升高(P<0.01);血清中IL-2和INF-γ含量显著升高(P<0.01),病理切片显示红茂草异紫堇碱作用后肝组织损伤有不同程度地减轻,高剂量的异紫堇碱(330.96 mg/kg)对肝组织的保护程度最为明显。说明红茂草异紫堇碱对实验性肝损伤具有很好的保护作用,其机制与DLF调节细胞因子水平,抑制抗氧化酶活性,清除自由基,抑制脂质过氧化相关。

秃疮花生物碱类化学成分研究

目的为明确秃疮花Dicranostigma leptopodum的药效物质基础,系统研究秃疮花生物碱类化学成分。方法利用普通硅胶柱色谱对秃疮花的生物碱类化学成分进行提取、分离和纯化,并利用超导核磁共振等现代光谱和波谱技术鉴定化合物的结构。结果从秃疮花中发现11个异喹啉类生物碱,其中2个萘菲啶类、1个吗啡烷类、4个阿扑菲类和4个普罗托品类生物碱化合物,结构分别鉴定为:二氢血根碱(1)、6-丙酮基-5,6-二氢血根碱(2)、青风藤碱(3)、秃疮花红碱(4)、异紫堇碱(5)、紫堇碱(6)、N-甲基莲叶桐文碱(7)、顺式普罗托品季铵盐(8)、反式普罗托品季铵盐(9)、原阿片碱(10)、别隐品碱(11)。结论除化合物5、6、10和11,其余化合物均为首次从该植物中分离得到。

RP-HPLC法测定异紫堇碱的含量和相关物质

目的:建立异紫堇碱HPLC含量测定和有关物质检查方法。方法:采用SinoChrom ODS-BP C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈-三乙胺调至pH 6.02的0.2%磷酸水溶液(50∶50)为流动相,检测波长为270 nm,流速为1.0 mL·min-1,柱温30℃。结果:异紫堇碱与其相关物质峰完全分离,在30～300μg·mL-1浓度范围内呈良好线性关系(n=6),相关系数r=0.9999,定量限为0.03 ng,最低检测限为0.0075 ng,平均回收率99.4%,RSD=2.9%(n=5)。结论:该方法可准确地进行定性、定量检测且专属性好,精密度、准确度符合要求,方法可靠,可用于异紫堇碱的含量及其相关物质的测定。