Dicranostigma leptopodum (maxim) fedde induced apoptosis in SMMC-7721 human hepatoma cells and inhibited tumor growth in mice

Dicranostigma Leptopodum (Maxim) Fedde (DL- F), which had been previously documented to suppress oxidative hemolysis of erythrocytes and enhance immune functions of murine peri- toneal macrophages, was investigated for its effect on anti-tumor activity. Of alkaloids extracted from DLF, five have been identified with employment of chromatographic analysis. An antiproliferative role of these alkaloids was determined on SMMC-7721 Human Hepatoma Ce- lls in an apoptosis-inducing manner, through MTT assaying, Trypan blue exclusion assaying and cytometric analysis of cell cycle distribution. To further examine their inhibitory effects on tumor progression, murine H22 cells were inoculated into Kunming mice to determine the role of these alkaloids of DLF in inhibiting tumor growth in the tumor-implanted mice. It was found that these alkaloids of DLF enhanced the tumor shrinkage effectively wherein its tumor inhibitory rate and immunohistochemistry stain- ing of the tumor were determined and profiled, respectively.

红茂草注射液对免疫低下小鼠免疫功能的影响

研究红茂草注射液对小鼠实验性免疫功能低下的影响．以地塞米松(DEX,0．8 mg／kg)造成免疫功能低下的动物模型,用3个不同质量分数的红茂草注射液(50,100,200 mg／(kg·d)×4 d)分别予以治疗后,采用碳粒廓清法、溶血素测定法、器官指数测定等有关免疫指标．红茂草注射液可使小鼠的廓清指数K值、吞噬指数α值、器官指数、血清溶血素及溶菌酶活力增高,尤以100 mg／kg剂量组效果显著．红茂草注射液对实验性免疫功能低下小鼠有明显的免疫增强作用,这为其应用于临床治疗提供了一定的实验依据．

秃疮花提取物对红细胞氧化性溶血的抑制机制

目的探讨秃疮花提取物对鼠红细胞氧化性溶血的影响及其机理。方法以H2O2诱导体外鼠红细胞发生氧化性溶血,以乙酰苯肼引发小鼠体内溶血性贫血,观察不同浓度或剂量秃疮花对鼠红细胞溶血率,细胞形态、小鼠体内红细胞、白细胞数量,血红蛋白含量,血浆丙二醛含量,以及红细胞内各种抗氧化酶活性的影响,并分析其作用机理。结果外秃疮花提取物对H2O2诱导的鼠红细胞溶血的抑制率可达78%。小鼠腹腔注射秃疮花提取物后,与模型组比较,红细胞数目增加,血红蛋白含量提高,白细胞数目减少,血浆丙二醛含量降低,四项指标均接近正常组(腹腔注射DLF 1.5 g/(kg.d),红细胞数目为8.49×1012/L);损伤小鼠腹腔注射秃疮花提取物后,红细胞内超氧化物歧化酶活性和血浆总抗氧化力无明显改变,而过氧化氢酶和谷胱甘肽过氧化物酶的活性显著提高,葡萄糖6磷酸脱氢酶活性上升极显著(较损伤组提高44.7%)。结论秃疮花提取物在体内外可分别抑制由H2O2和乙酰苯肼引发的鼠红细胞氧化性溶血,效果明显。小鼠腹腔注射秃疮花提取物后,红细胞内抗氧化酶活性普遍提高,提示秃疮花提取物通过增强红细胞的自由基清除能力而使细胞膜免受氧化性损伤,其中葡萄糖6磷酸脱氢酶活性的上升尤为显著,据此推测秃疮花提取物有可能通过抑制乙酰苯肼对葡萄糖6磷酸脱氢酶的干扰而缓解鼠红细胞的氧化性溶血。

秃疮花提取物对CCl_4诱导的小鼠急性肝损伤的影响

目的探讨秃疮花提取物(DLE)对CCl_4诱导的小鼠急性肝损伤的影响。方法给予小鼠不同剂量的DLE灌胃,连续10 d。小鼠腹腔注射CCl_4造成急性肝损伤,16 h后测定血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)活性;制备肝组织匀浆测定丙二醛含量及超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性;同时进行肝组织病理观察。结果与模型组相比,不同剂量的DLE给药组小鼠血清ALT、AST活性显著降低,肝组织匀浆中丙二醛含量显著减少;SOD、GSH-Px活性显著升高;病理切片表明DLE作用后肝组织损伤不同程度减轻,其中剂量为2.0 g生药/kg体重时,肝组织的损伤程度较轻。结论DLE对CCl_4诱导的小鼠急性肝损伤具有很好的保护作用,其作用机制可能与DLE抑制抗氧化酶活性和抗自由基活性有关。

罂粟科3种植物叶片生物碱抗氧化活性比较

为比较罂粟科3种植物叶片中生物碱的抗氧化活性,采用体积分数为80%乙醇浸提博落回、角茴香和秃疮花3种植物叶片中的总生物碱,用常见生物碱显色反应检测,利用硅胶柱层析纯化,并且用邻苯三酚自氧化法测定其超氧阴离子的清除效果,番红花红O-Mn2+-H2O2光度法测定其对羟基自由基的清除效果,总生物碱的还原性。结果表明,3种总生物碱对这两种自由基有较好的抗氧化活性,角茴香对羟基自由基的清除作用较强,IC50为0.170 g/L。当质量浓度为1 g/L时,秃疮花对超氧阴离子的清除率92.09%,3种植物的总生物碱都有还原性,但效果都不如硫脲。

山西霍山罂粟科植物花粉形态

利用光学显微镜和扫描电子显微镜对山西霍山罂粟科白屈菜属白屈菜、紫堇属延胡索、角茴香属角茴香、秃疮花属秃疮花 4种的花粉形态进行了观察和比较研究 ,以上 4种花粉差异大。角茴香花粉粒近球形 ,具合沟 ;延胡索花粉粒长球形 ,表面纹饰较光滑 ;白屈菜花粉粒长球形或近球形 ;秃疮花花粉粒近球形。角茴香花粉表面纹饰为刺状纹和细网状纹的复合纹 ,白屈菜花粉表面纹饰为细网状纹和颗粒状纹的复合纹 ,秃疮花花粉表面纹饰为细颗粒状纹。延胡索、白屈菜、秃疮花花粉粒的萌发沟均为三沟 。

秃疮花生物碱成分分析及药理作用研究进展

秃疮花[Dicranostigma Leptopodum(Maxim.)Fedde,DLF]为罂粟科秃疮花属二年生或多年生草本植物,在甘肃省秦岭地区、渭水流域分布广泛。秃疮花生物碱主要为:异紫堇碱、原阿片碱、紫堇碱、异紫堇啡碱、木兰碱。具有抗菌、抑菌、抗溶血和改善微循环、对中枢和平滑肌有抑制、提高机体免疫力等作用,对心肌细胞和小鼠肝损伤有保护作用等,其药用价值有广阔的开发和应用前景。

红茂草总生物碱酸水提取工艺试验

利用生物碱盐酸盐易溶于水这一特性,用稀盐酸溶液进行红茂草总生物碱的提取试验。先分别进行提取时间、料液比、pH值和温度对红茂草总生物碱提取率影响的单因素试验,在此基础上再从每个单因素中选出3个较好水平进行正交试验,从而得出酸水提取红茂草总生物碱的最佳条件。按照正交试验所确定的最佳提取条件进行总生物碱的提取。以红茂草中主要生物碱异紫堇碱为指标,对提取物进行HPLC检测。结果表明,在温度90℃,提取时间5h,料液比1∶40,pH值1.5为提取红茂草总生物碱的最佳条件。HPLC检测结果显示,提取物中异紫堇碱含量为9.28%。分别占分离菌株的25.6%、27.9%。本试验为该区猪源肺炎克雷伯杆菌的防治提供理论基础。

秃疮花药材质量标准研究

目的建立甘肃省地方习用药材秃疮花的质量标准。方法采用性状鉴别、显微鉴别及薄层色谱法建立秃疮花的定性鉴别方法,采用高效液相色谱法建立秃疮花中异紫堇碱含量测定方法,按《中国药典》(2015年)附录方法测定秃疮花中水分、总灰分、酸不溶性灰分、水溶性浸出物及醇溶性浸出物。结果优化的薄层色谱条件,可以特征性地实现12批秃疮花药材的定性鉴别,且样品均显示有异紫堇碱的斑点。12批秃疮花药材的异紫堇碱在1.9~406.0 mg/mL内呈良好的线性关系(r=0.9999),加样回收率为94.15%~102.54%,RSD=0.39%~1.42%;水分、总灰分、酸不溶性灰分、水溶性浸出物、醇溶性浸出物、异紫堇碱分别为2.22%~7.63%、6.29%~10.51%、0.23%~0.76%、17.12%~23.34%、9.04%~14.32%、0.118%~0.940%。结论建立的薄层色谱法可以实现甘肃省地方习用药材秃疮花的定性鉴别,高效液相色谱法简便、可行,可用于秃疮花中异紫堇碱的含量测定,为秃疮花质量标准的建立提供依据。

三种不同红茂草制剂治疗羊口疮对比试验

用羊口疮强毒株感染试验羊只,建立羊口疮病理模型,分别用红茂草乙醇制剂(Ⅰ组)、盐酸盐制剂(Ⅱ组)和水制剂(Ⅲ组)进行对比治疗试验。结果表明,试验Ⅰ组溃疡愈合率极显著高于Ⅱ组和Ⅲ组(P<0.01),Ⅱ组也极显著高于Ⅲ组(P<0.01)。治疗4 d后Ⅰ组羊口疮平均愈合率为91.2%,Ⅱ组为80.4%,Ⅲ组为65.1%。

秃疮花水溶性外用制剂抗菌试验

为了确定秃疮花水溶性外用制剂的临床应用剂量标准,试验采用甘肃省畜牧兽医研究所研制的秃疮花水溶性外用制剂,以寇氏法进行了体外抗菌试验。试验结果表明秃疮花水溶性外用制剂对大肠杆菌、葡萄球菌和链球菌的IC50分别为0.98±0.16、2.54±0.39和1.60±0.34(含N量mg/mL)。这说明秃疮花水溶性外用制剂对大肠杆菌、葡萄球菌和链球菌有一定的杀菌抑菌功能。

秃疮花水溶性外用制剂抗病毒试验

为了确定秃疮花水溶性外用制剂的临床应用剂量标准,试验用甘肃省畜牧兽医研究所研制的秃疮花水溶性外用制剂,以Reed-Muench法进行了体外抗病毒试验。试验结果表明秃疮花水溶性外用制剂对GPV的IC50=2-6.5倍个外用制剂试验单位(8.8mg/mL外用制剂干物质);对CPDV的IC50=2-7.2倍个外用制剂试验单位(5.4mg/mL外用制剂干物质)。这说明秃疮花水溶性外用制剂对GPV和CPDV有一定的抑制功能。

红茂草总生物碱酸水提取法研究

用酸水提取法提取红茂草总生物碱。先分别进行提取时间、料液比、pH值和温度对红茂草总生物碱提取率影响的单因素实验,在此基础上从每个单因素中选出3个较好水平进行正交试验,从而得出酸水提取红茂草总生物碱的最佳条件。结果表明,温度80℃、提取时间4 h、料液比1∶50、pH值1.5为提取红茂草总生物碱的最佳条件。

不同浓度红茂草乙醇制剂治疗羊口疮试验研究

将30只健康羊只随机分为6组,每组5只,用羊口疮强毒感染试验羊只,建立羊口疮病理模型,用不同浓度的红茂草乙醇制剂进行对比治疗试验,以确定最适药物浓度。试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组分别用浓度7.5 mg/m L、15 mg/m L、30 mg/m L、60 mg/m L、120 mg/m L的红茂草乙醇溶液进行治疗,Ⅵ组为对照。结果表明,Ⅲ组、Ⅳ组、Ⅴ组溃疡面愈合率分别与Ⅰ组、Ⅱ组之间有极显著性差异(P<0.01);Ⅰ组与Ⅱ组之间差异极显著(P<0.01);Ⅲ组、Ⅳ组、Ⅴ组组间差异不显著(P>0.05)。红茂草制剂治疗剂量与溃疡面愈合率之间的回归方程为:y=1.6756x+3.488,R2=0.958 3,其EC50为7.986 6 mg/m L。

秃疮花制剂在兽医外科疾病上的治疗试验

为了验证秃疮花制剂的临床应用效果,本试验以临床治疗的方法,将不同的秃疮花剂型和组方应用于兽医外科的几种疾病的治疗过程中,结果表明秃疮花中药制剂对动物外科创伤、瘘管、疥癣和Orf有良好的治疗作用。

红茂草治疗羊口疮试验研究

将50只健康羊只随机分为10组,每组5只。用羊口疮强毒感染试验羊,建立羊口疮病理模型。试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组分别用浓度7.5 mg/m L、15.0 mg/m L、30.0 mg/m L、60.0 mg/m L、120.0 mg/m L的红茂草乙醇制剂进行治疗。试验Ⅵ、Ⅶ、Ⅷ、Ⅸ组分别用浓度5.0 mg/m L、10.0 mg/m L、20.0 mg/m L、40.0 mg/m L的红茂草总生物碱盐酸盐制剂进行治疗,Ⅹ组为对照。结果表明,Ⅲ组、Ⅳ组、Ⅴ组羊口疮愈合率分别与Ⅰ组、Ⅱ组之间均存在极显著差异(P<0.01);Ⅰ组与Ⅱ组之间也存在极显著差异(P<0.01);Ⅲ组、Ⅳ组、Ⅴ组之间相互差异不显著(P>0.05),剂量与溃疡面愈合率之间的回归方程为:y=1.675 6x+3.488,R2=0.958 3,其EC50=7.986 6mg/m L。盐酸盐制剂羊口疮愈合率除了Ⅷ组和Ⅸ组之间差异不显著(P>0.05)外,其余各组两两之间均存在极显著差异(P<0.01),剂量与溃疡面愈合率之间的回归方程为:y=1.709 3x+3.547 7,R2=0.977 2,其半数效应浓度EC50=7.073 7 mg/m L。

红茂草水提取物腹腔注射对小鼠半数致死量的测定

用寇氏法测定了红茂草水提取物腹腔注射小鼠的半数致死量(LD50)。取70只昆明系小白鼠,雌雄各半,体重(20±2)g,按序贯法测出红茂草水提取物腹腔注射小鼠100%致死率的最小剂量和0%致死率的最大剂量,染毒测定其LD50。结果红茂草水提取物腹腔注射小鼠的LD50为1777.5 mg/kg,95%可信限为1585.7mg/kg^1992.5 mg/kg。

地方习用药材红茂草规范化种植标准操作规程(SOP)

按照《中药材生产质量管理规范(》GAP)规范化种植生产的技术要求,对红茂草生产中的选地、种植、田间管理、病虫害防治、采收加工、包装、贮运、质检、材料归档等各环节等进行规范化研究,并制定了标准操作规程。

红茂草中黄酮类提取工艺优化及体外抑菌研究

以红茂草为研究对象,在单因素水平筛选测定的基础上,通过响应面法优化其提取工艺。提取物采用Diamonsil C18(4.6mm×150mm,1.8μm)色谱柱为固定相,甲醇-0.2%磷酸(65∶35,v/v)为流动相,流速1.0mL/min,检测波长280nm;并对提取物进行抑菌活性测定,以大肠埃希氏杆菌和金黄色葡萄球菌为供试菌,进行体外抑菌活性研究和透射电镜观察。结果显示,红茂草中黄酮类化合物最佳提取工艺条件为:液料比15mL/g、超声时间35min、回流时间2.5h、乙醇体积分数65%,在此工艺下红茂草中黄酮类化合物含量为2.60%,HPLC检测重现性好;其提取物对大肠埃希氏杆菌和金黄色葡萄球菌的MIC为0.28g/mL和0.20g/mL,MBC为0.26g/mL和0.10g/mL,IC50为0.2162g/mL和0.1805g/mL,在透射电镜下观察抑菌效果显著。研究表明,响应面法对红茂草中黄酮类化合物提取工艺的优化比较合理。

秃疮花针剂在山羊体内的药物动力学研究

研究秃疮花在山羊体内的药物动力学。结果表明,山羊肌注秃疮花针剂后,秃疮花提取物在山羊体内的药动学配置均符合有吸收因素二室开放模型特征,其最佳药-时曲线方程分别为：C=7.344 3e^（-0.148 8t）＋1.803 3 e^（-0.058 3t）-9.147 6 e^（-1.628 3t）。主要药物动力学参数：制剂吸收半衰期t（1/2ka）为（0.425 8±0.006 5）h,分布相半衰期t（1/2α）为（4.680 6±0.358 2）h,消除半衰期t（1/2β）为（12.684 8±3.685 0）h,药-时曲线下面积AUC为（73.307 0±0.732 9）μg/（mL·h）峰质量浓度为（6.753 8±0.060 8）μg/mL,达峰时间为（1.690 0±0.015 5）h。提示秃疮花提取物在山羊体内分布较广,吸收快,消除较慢,血药浓度维持时间较长。