Research Progress on Pathogens of Main Diseases of Dictyophora rubrovalvata and Their Occurrence

Dictyophora rubrovalvata is an edible fungus with rich nutritional value.It contains various nutrients and bioactive components,and has immunomodulation,anti-tumor,anti-oxidation,anti-fatigue,anti-aging,anti-inflammation and alcoholic hepatitis-protection effects.With the continuous expansion of planting area of Dictyophora,the disease problem has become a major problem affecting the development of Dictyophora industry.In this paper,the pathogens,harmful symptoms and causes of main diseases in Dictyophora were summarized,so as to provide reference for comprehensive control of Dictyophora diseases and promote the high-quality development of Dictyophora industry.

贵州岩溶地区土壤-红托竹荪(Dictyophora rubrovalvata)系统Cd迁移累积特征及其影响因素研究

为探究岩溶区土壤-红托竹荪(Dictyophora rubrovalvata)系统中重金属Cd的迁移累积特征及其影响因素,采集了红托竹荪种植区土壤和红托竹荪样品,分析了土壤中Cd含量及其赋存形态、红托竹荪中Cd含量及富集特征,并采用主成分分析探讨了土壤中Cd迁移累积的影响因素。结果表明:红托竹荪种植区土壤总Cd含量为0.24~4.23 mg·kg^(-1),平均值为0.96 mg·kg^(-1),是GB 15618—2018《土壤环境质量农用地土壤风险管控标准(试行)》中农用地土壤污染风险筛选值的3.2倍,是贵州省土壤背景值的1.45倍。土壤Cd形态以可还原态为主,其含量占比为20.87%~63.81%,平均值为41.64%,Cd各形态占比为可还原态>残渣态>弱酸可溶态>可氧化态。红托竹荪中Cd含量为0.07~0.39 mg·kg^(-1)(以鲜样计),平均值为0.18 mg·kg^(-1),低于GB 2762—2017《食品安全国家标准食品中污染物限量》标准值(0.20 mg·kg^(-1))。富集系数和转运系数分别为0.50~21.91和0.31~8.89。红托竹荪种植区土壤pH值与弱酸可溶态Cd含量呈显著负相关(r=-0.435,P<0.05,n=26),与可还原态Cd含量(r=0.469,P<0.05)、土壤总Cd含量(r=0.392,P<0.05)呈显著正相关。红托竹荪中Cd含量(r=-0.670,P<0.01)、Cd的富集系数(r=-0.724,P<0.01)与土壤pH值呈极显著负相关关系。主成分分析表明,土壤pH值和K、Ca、Fe、Cu含量是红托竹荪富集Cd的主要影响因素。

干燥方式对红托竹荪品质特性和微观结构的影响

以新鲜红托竹荪为原料,研究传统煤火干燥(Coal Fire Drying,CFD)、空气源热泵干燥(Air Source Heap Pump Drying,ASHPD)、真空微波-电热鼓风组合干燥(Microwave Vacuum Drying in Combination with Forced Air Drying,MVD+FAD)和真空冷冻干燥(Vacuum Freeze Drying,VFD)四种干燥方式对其外形、色泽、营养成分、氨基酸组成和含量、质构特性和微观结构的影响。结果表明:VFD可以最大限度地保持竹荪菌柄和菌裙外形,其蛋白质、粗纤维和总氨基酸含量最高,色泽与鲜品最接近(ΔE=3.60);ASHPD制备的竹荪菌柄和菌裙外形保持较好,脂肪含量最高,蛋白质保留效果较好。竹荪的鲜甜味/苦味的值为VFD组(4.99%)>MVD+FAD组(4.66%)>ASHPD组(4.50%)>CFD组(4.37%)。VFD制备的竹荪组织结构较脆,组织内部结合力较小,与鲜品相似,而另三种干燥方式制备的竹荪内部结合力较大,抵抗受损能力较强,吞咽前需要更多的能量才能嚼碎。此外,VFD和ASHPD制备竹荪的细胞状结构明显,VFD更好的保持了竹荪原有的细胞状结构。干燥方式的综合评价结果为VFD>MVD+FAD>ASHPD>CFD。综上,VFD为红托竹荪较理想的干燥方式,但其应用成本较高;在实际生产中,ASHPD是比较有推广价值的干燥方式。

红托竹荪菌丝体多糖饮料的制备及其对小鼠运动耐力的影响

为研制红托竹荪菌丝体多糖饮料,采用单因素和正交试验优化饮料组分的最佳配比,并考察其对小鼠运动耐力的影响。结果表明,红托竹荪菌丝体多糖饮料的最佳配方为:红托竹荪菌丝体多糖添加量10%,蔗糖添加量3%,柠檬酸添加量0.06%,羧甲基纤维素钠添加量0.8%,采用该配方制得的饮料感官评分为(86.2±1.7)分。运动耐力实验结果表明,与空白对照组相比较,红托竹荪菌丝体多糖饮料(中、高剂量)能够明显延长小鼠的爬杆时间与游泳力竭时间,并显著降低运动后血清中乳酸与尿素氮的含量,表明该饮料有助于提高机体的运动耐力,从而可为相关运动食品的开发提供参考。

海藻糖与巨菌草草屑对红托竹荪菌丝液体培养影响研究

[目的]研究红托竹荪液体培养基中碳源、氮源及培养条件对其生长的影响,以建立红托竹荪高效液体培养体系。[方法]以红托竹荪固体母种菌丝为对象,采用液体培养基振荡培养的方法,通过测定液体培养后菌丝生长量及其在新培养基的恢复生长率等指标,研究预培养时间、不同碳源与氮源对液体培养效果的影响。[结果]液体培养中,接种块预培养6~8 d有助于菌丝球的形成与生长;菌丝生长最适碳源为浓度2.5%海藻糖,菌丝生长量与液体培养菌丝在栽培种培养基上的恢复生长能力均高于所用其他糖类处理;菌丝生长最适氮源为蛋白胨与巨菌草粉,蛋白胨2.0 g/L+巨菌草粉70.0 g/L的组合菌丝生长量、液体培养菌丝在栽培种培养基上的恢复生长能力分别达到0.7 g/L、100%。[结论]对液体菌种在红托竹荪及其他食用菌上的应用具有借鉴作用。

黔产红托竹荪绿霉病病原菌的分离鉴定及绿色药剂筛选

为明确贵州省纳雍县红托竹荪绿霉病的病原菌种类,并探究杀菌剂对病原菌的室内抑菌效果及红托竹荪菌丝的安全性,以期为红托竹荪绿霉病的田间防治提供理论依据。本研究对贵州省纳雍县乐治镇黄家寨黔产红托竹荪种植基地具有典型症状的红托竹荪绿霉病子实体进行病原菌的分离和纯化,利用科赫氏法则对所得病原菌进行致病性测定,并结合形态学特征、18S rDNA和TEF1基因序列分析及系统发育树进化分析鉴定病原菌株。同时选取了8种不同类型的杀菌剂对病原菌进行室内毒力测定以及杀菌剂对红托竹荪菌丝安全性评价。结果表明:引起红托竹荪绿霉病的病原菌为哈茨木霉(Trichoderma harzianum);室内毒力测定结果显示,对哈茨木霉菌丝生长抑制作用最强的是450 g/L咪鲜胺水乳剂和10%苯醚甲环唑水分散粒剂,其EC50值分别为0.005 3 mg/L和0.000 7 mg/L;8种药剂对红托竹荪的室内安全性测定结果表明,80%代森锌可湿性粉剂、75%百菌清可湿性粉剂对红托竹荪菌丝的抑制率最低,EC50值分别为12.285 4 mg/L和10.893 9 mg/L;其次是25%腐霉·福美双可湿性粉剂,其EC50值为1.845 2 mg/L。综上所述,25%腐霉·福美双可湿性粉剂不仅对红托竹荪绿霉病病原菌有较高的抑制效果,并且对红托竹荪菌丝的安全性也较高,可作为进一步田间试验的首选药剂。

红托竹荪菌盖多糖的提取及抗氧化能力的研究

研究了不同因素对竹荪菌盖多糖提取效果的影响,并对菌盖多糖的抗氧化能力进行了评价,通过正交试验设计方法对水提竹荪菌盖多糖的工艺条件进行了优化。结果表明,菌盖多糖的最佳提取条件为:提取温度85℃,料液比1∶25(g∶mL),浸提时间2.5 h。在此最佳工艺条件下,竹荪菌盖多糖得率为8.25%。菌盖多糖主要由葡萄糖、甘露糖和半乳糖组成,其中葡萄糖质量分数最高(58.19%)。菌盖多糖具有较强的还原能力和抑制羟基自由基能力。随着菌盖多糖质量浓度的升高,还原能力和抑制羟基自由基能力相应提高。但是,菌盖多糖对超氧阴离子的抑制能力较弱。

红托竹荪多糖抗氧化活性的研究

本文采用DPPH自由基、羟自由基及超氧阴离子自由基体系对红托竹荪多糖的抗氧化活性进行了研究,并同Vc和BHT进行了比较。结果表明,在0.2～1.2 mg/mL质量浓度范围内,红托竹荪多糖对DPPH自由基、羟自由基、超氧阴离子自由基的半数清除率(EC50)值分别为1.468、2.580和2.330,抗氧化活性稍强于BHT,但弱于VC。

红托竹荪多糖抗衰老和降血糖作用研究

目的:考察红托竹荪多糖(Dictyophora rubrovalvata polysaccharide,DRP)的抗衰老和降血糖作用。方法:采用水提醇沉法提取DRP。采用皮下注射D-半乳糖的方法构建衰老模型小鼠,同时DRP按低剂量(100 mg/kg·d)和高剂量(300 mg/kg·d)灌胃,35 d后测定各组小鼠血清和肝脏中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽-过氧化物酶(GSH-PX)活性和丙二醛(MDA)含量;给正常小鼠测血糖后皮下注射四氧嘧啶造高血糖模型小鼠,DRP按低剂量(100 mg/kg·d)和高剂量(300 mg/kg·d)灌胃,连续4周,每周测一次空腹血糖值;两组实验均设空白对照组和模型组。结果:给药300 mg/kg·d DRP可以显著增加D-半乳糖所致衰老小鼠血清和肝脏中SOD和GSH-PX活性,显著降低小鼠血清和肝脏中MDA水平;DRP能降低高血糖模型小鼠的空腹血糖,但效果不明显。结论:DRP具有延缓衰老的作用,但降血糖作用不明显。

红托竹荪多糖抗疲劳和耐缺氧作用研究

考察红托竹荪多糖(Dictyophora rubrovalvata polysaccharide,DRP)抗疲劳和耐缺氧活性。采用水提醇沉法提取DRP,建立小鼠负重游泳模型和耐缺氧模型,同时灌胃不同剂量的DRP溶液,15 d后测定小鼠力竭游泳时间、耐缺氧时间以及小鼠力竭游泳后血乳酸(BLA)、血尿素氮(BUN)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和肝糖原、肌糖原含量。实验结果表明DRP能延长负重小鼠的游泳时间,降低疲劳小鼠BLA、BUN、MDA含量,升高SOD、肝糖原和肌糖原含量,延长小鼠常压耐缺氧存活时间。

红托竹荪菌托和冬荪菌托的营养价值评价及抗氧化能力分析

目的 评价红托竹荪菌托和冬荪菌托的营养价值,并进行抗氧化能力分析。方法 分别对基本营养成分、氨基酸含量、类黄酮和总酚进行了测定,采用国际通用标准对其蛋白质营养价值进行评价,通过2,2’-联氮-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸[2,2’-azino-bis(3-ethylbenzothiaziline-6-sulfonic acid),ABTS]自由基法和1,1-二苯基-2-三硝基苯肼[1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl radical 2,2-diphenyl-1-(2,4,6-trinitrophenyl)hydrazyl,DPPH]自由基法测定其体外抗氧化能力。结果 两种鬼笔科食用菌菌托中含有丰富的蛋白质、粗纤维、氨基酸及8种人体必需氨基酸。菌托中的必需氨基酸/总氨基酸(essential amino acid/total amino acid, EAA/TAA)和必需氨基酸/非必需氨基酸(essential amino acid/non-essential amino acid, EAA/NEAA)比值均高于联合国粮食与农业组织和世界卫生组织(Food and Agriculture Organization of the United Nations/World Health Organization, FAO/WHO)的推荐模式值,有3~5种必需氨基酸的氨基酸评分(amino acid score, AAS)分值高于FAO/WHO标准蛋白模式值。两种食用菌菌托的呈味氨基酸均以鲜甜味为主,谷氨酸含量最高,蛋氨酸是其第一限制氨基酸。对比发现,竹荪菌托中的蛋白质含量、总氨基酸含量、必需氨基酸含量和呈味氨基酸含量分别是冬荪的2.77、2.83、2.85和2.75倍, EAAI、生物价(biological value, BV)和营养指数(nutritional index, NI)值均高于冬荪菌托。此外,竹荪菌托中类黄酮含量、总酚含量大于冬荪菌托,该结果可以解释竹荪菌托具有较强ABTS自由基和DPPH自由基清除能力的原因。结论 红托竹荪和冬荪的废弃物菌托中均含有丰富的营养物质和生物活性物质,与冬荪菌托相比,红托竹荪菌托具有更高的营养价值和生物活性。本研究为红托竹荪和冬荪副产物高附加值利用和产品开发提供了理论依据。

红托竹荪的研究进展

对红托竹荪的生物学特性、菌种制作与栽培、活性物质提取以及深加工方面进行了综合评述。

红托竹荪的食品安全分析

红托竹荪是一种名贵食用真菌,不仅风味独特,而且具有极高的营养价值,但近年来由于人工栽培规模逐渐扩大,病虫危害日益严重,由此引发农药的大量使用,带来了严重的食品安全问题。本文分析了影响红托竹荪食品安全的主要原因,并提出保障竹荪食品安全的综合措施和根据当地条件使用生物源复合制剂来防治红托竹荪病虫危害的思路。

不同方法对红托竹荪多糖的脱蛋白效果

为保证多糖的药理活性,以蛋白脱出率和多糖损失率为考察指标,比较Sevag法、TCA法、木瓜蛋白酶法和酶-Sevag联用法对红托竹荪粗多糖脱蛋白的效果。结果表明:木瓜蛋白酶法脱蛋白效果最佳,其最佳脱蛋白条件为木瓜蛋白酶浓度4%、酶解温度55℃、酶解时间3h,酶液pH 6.0,在此条件下,蛋白脱出率为77.97%,多糖损失率为19.31%。该法用于脱除红托竹荪多糖蛋白质的工艺简单,成本低,具有一定的应用价值。

红托竹荪的生物学特性研究

对红托竹荪(Dictyophora rubrovalvata M.Zang)的生物学特性进行了研究,描述了子实体、双核菌丝和担孢子的形态及芽殖;证明了其能利用葡萄糖、蔗糖和可溶性淀粉等作碳源,能利用无机氮和有机氮作氮源。菌丝生长的最适碳氮比为30:1,最适温度为23～25℃,适宜的酸碱度为pH5.0～6.0,最适为pH5.5;菌丝生长的最适宜空气相对湿度为81％,最适宜的料水比为1:2.2,光照对菌丝生长具有抑制作用,且蓝光对生长抑制作用最大,橙光最小。菌丝在CO_2浓度为0.03～0.33％的范围内均能生长,以浓度0.13％时生长最好。菌丝体生长时分泌的纤维素酶的活力极弱,几乎不能崩解滤纸。喷施0.1％和0.5％的葡萄糖以及0.15％的亚油酸可促进子实体原基的形成。

红托竹荪多糖的提取工艺及其体外抗氧化活性

为探明红托竹荪多糖的提取工艺及其体外抗氧化活性,采用水提醇沉法提取多糖,以多糖提取率为考察指标,通过单因素试验和正交试验,确定红托竹荪多糖的提取工艺条件;采用分光光度法测定多糖对羟自由基和超氧阴离子自由基的清除作用以及还原能力。结果表明,红托竹荪多糖提取的最佳工艺条件为料液比1∶25(g/mL),在80℃下提取3h,提取2次,红托竹荪多糖具有较好的还原能力,对.OH和O2-.具有较强的清除作用,其IC50值分别为0.51mg/mL和0.83mg/mL。结论:红托竹荪多糖具有明显的体外抗氧化活性。

红托竹荪不同部位多糖提取及体外抗氧化活性研究

目的:研究红托竹荪多糖提取工艺和红托竹荪三个部位多糖含量及其体外抗氧化活性。方法:通过单因素和正交实验优化红托竹荪多糖提取工艺,并在此条件下测定红托竹荪三个部位多糖含量;采用铁氰化钾还原法、邻苯三酚自氧化和邻二氮菲-Fe2+氧化法研究三个部位多糖的抗氧化活性。结果:红托竹荪多糖最佳提取条件为水提温度90℃,料液比1∶20(g/mL),水提时间2h,酒精浓度为70%;在此条件下,红托竹荪菌盖、菌柄、箘托中多糖含量分别为8.25%、8.97%、10.89%;抗氧化实验结果表明,从红托竹荪三个部位中提取多糖均有抗氧化活性,其抗氧化能力与其质量浓度有量效关系。结论:红托竹荪多糖的提取工艺稳定可行,菌托中多糖含量最高、体外抗氧化活性最强。

红托竹荪菌托多糖提取工艺优化及其泡腾片的制备

为提高红托竹荪菌托中多糖的提取率,制备红托竹荪多糖泡腾片。该文考察提取时间、提取温度、料液比、提取功率对多糖得率的影响。在单因素试验的基础上,采用响应面法Box-Behnken设计,优化红托竹荪菌托多糖的提取工艺,并以提取出的多糖为原料,采用酸碱分开制粒混合压片的方法制备泡腾片。结果表明:红托竹荪菌托多糖提取的最佳工艺参数为提取时间51 min、提取温度60℃、料液比1∶48(g/mL)、提取功率400 W,测得实际多糖得率为13.86%。竹荪菌托多糖泡腾片最佳配比组成为竹荪菌托多糖2%、泡腾崩解剂总量45%、酸碱比(柠檬酸∶碳酸氢钠)1.5∶1、黏合剂(3%PVP水溶液)2%、润滑剂(PEG 6000)2%、甜味剂(阿斯巴甜)1%。所得泡腾片质量稳定,重现性好,符合2020版《中国药典》规定。

茉莉酸甲酯结合氯化钙对红托竹荪贮藏品质的影响

本研究旨在探究茉莉酸甲酯结合氯化钙对红托竹荪贮藏品质的影响。本实验以红托竹荪为试材,研究不同处理(对照组为采前喷施蒸馏水(CK);采前喷施3%氯化钙(S1);采前喷施0.3 mmol/L茉莉酸甲酯(S2);采前喷施0.3 mmol/L茉莉酸甲酯结合3%氯化钙(S3))在温度(1±0.5)℃条件下对红托竹荪贮藏品质的影响。结果表明,与CK组比较,不同处理组均能够抑制红托竹荪失重率和呼吸强度的上升,降低红托竹荪剪切力和丙二醛含量,保持红托竹荪游离氨基酸含量、蛋白质含量、多糖含量和黄酮含量,维持红托竹荪SOD活性、CAT活性和POD活性。在贮藏期12 d时,CK组、S1组、S2组和S3组的红托竹荪腐烂率分别为32.56%、28.32%、19.85%、14.64%,失重率分别为5.62%、3.89%、2.89%、2.21%。综合比较,茉莉酸甲酯结合氯化钙能够显著推迟红托竹荪的劣变进程,延缓红托竹荪贮藏品质的下降。因此,采前用茉莉酸甲酯结合氯化钙处理红托竹荪最好,能够更好地保持红托竹荪的贮藏效果。本研究可为红托竹荪的保鲜研究提供理论参考和技术支撑。

MAPK通路在红托竹荪多糖诱导人胃癌MKN-45细胞凋亡中的作用机制研究

目的:研究红托竹荪多糖对人胃癌MKN-45细胞增殖与凋亡的影响,并基于丝裂原激活的蛋白激酶(MAPK)信号通路探讨其可能的作用机制。方法:体外培养MKN-45细胞,分为对照组,红托竹荪多糖低、中及高剂量组,采用终浓度分别为0、4、6及8 mg/mL的红托竹荪多糖作用于细胞48 h后,采用细胞计数法检测红托竹荪多糖对人胃癌MKN-45细胞增殖的影响;采用倒置显微镜观察不同浓度的红托竹荪多糖作用于人胃癌MKN-45细胞48 h后细胞形态学的变化。设立实验组的红托竹荪多糖终浓度为8 mg/mL,采用膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素/碘化丙啶双染色流式细胞技术检测细胞的凋亡率;采用流式细胞术检测细胞周期分布;采用蛋白质印迹法检测红托竹荪多糖作用胃癌细胞后p38蛋白激酶(p38)、磷酸化p38蛋白激酶(p-p38)、细胞外调节蛋白激酶(ERK)、磷酸化细胞外调节蛋白激酶(p-ERK)、C-JUN氨基末端激酶(JNK)、磷酸化C-JUN氨基末端激酶(p-JNK)、B淋巴细胞瘤-2蛋白(Bcl-2)和活化的半胱氨酸蛋白酶-3(cleaved Caspase-3)蛋白的表达,即与3-磷酸甘油醛脱氢酶(GADPH)灰度值比值。结果:作用48 h后,不同浓度的红托竹荪多糖(4、6及8 mg/mL)对人胃癌MKN-45细胞增殖的抑制率分别为(8.27±5.99)%、(21.83±5.77)%和(56.95±5.21)%;在检测的浓度范围下,随着浓度的升高,红托竹荪多糖对MKN-45细胞增殖的抑制率逐渐升高。倒置显微镜下显示,经8 mg/mL的红托竹荪多糖作用48 h后,MKN-45细胞密度与对照组相比明显减少。流式细胞术检测结果显示,与对照组相比,实验组人胃癌MKN-45细胞凋亡率显著升高(P<0.05);细胞周期结果显示,实验组G_(1)期细胞比例明显减少(P<0.05),G_(2)期细胞比例明显增多(P<0.05),S期细胞比例明显减少(P<0.05);蛋白质印迹法结果显示,与对照组相比,实验组MKN-45细胞中cleaved Caspase-3的表达有升高趋势(P<0.05),Bcl-2的表达有降低趋势(P<0.05),p-P38/P38比值、p-ERK/ERK比值与p-JNK/JNK比值均低于对照组(P<0.05),上述差异均有统计学意义。结论:红托竹荪多糖在体外能抑制人胃癌MKN-45细胞增殖并诱导细胞凋亡,使肿瘤细胞阻滞在G_(2)/M期,其作用可能通过调控MAPK信号通路实现。