抵当汤及其拆方对深静脉血栓形成大鼠高速泳动族蛋白B1影响的研究

目的:观察抵当汤及其拆方对DVT大鼠高速泳动族蛋白B1(HMGB1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)的影响。方法:将150只Wistar雄性大鼠随机分为5组,抵当汤组、大黄桃仁组、水蛭地龙组、模型组、假手术组,每组30只。采用Reyers法建立下腔静脉结扎模型,术后第1、3、7天灌胃2 h后,腹腔麻醉开腹,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)、蛋白质免疫印迹法检测高速泳动族蛋白B1(HMGB1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)水平,苏木精-伊红(HE)染色观察大鼠下腔静脉的病理变化,免疫荧光(IF)、实时逆转录PCR(Realtime RT-PCR)检测大鼠下腔静脉中的HMGB1表达。结果:模型组下腔静脉内皮细胞损伤严重并大量脱落,细胞肿胀明显,形成血栓,内膜形态不规则、管壁组织肿胀,胶原纤维增生,伴有炎症细胞浸润,抵当汤组、大黄桃仁组、水蛭地龙组等用药组内皮细胞不同程度损伤和炎症细胞浸润;模型组HMGB1荧光表达较假手术组明显增多,其余用药组HMGB1荧光表达不同程度减少;与假手术组比较,模型组大鼠的高速泳动族蛋白B1(HMGB1)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)血清水平、高速泳动族蛋白B1(HMGB1)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、蛋白表达、mRNA表达明显升高(P<0.01)。与模型组比较,抵当汤组、大黄桃仁组、水蛭地龙组等用药组HMGB1、IL-6、TNF-α血清水平、蛋白表达、mRNA表达明显降低(P<0.05,P<0.01)。抵当汤组、大黄桃仁组、水蛭地龙组等用药组比较,HMGB1、IL-6、TNF-α血清水平、高速泳动族蛋白B1(HMGB1)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、蛋白表达、mRNA表达比较差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01),术后第1、3、7天比较,HMGB1、IL-6、TNF-α血清水平、蛋白表达、mRNA表达比较差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论:抵当汤及其拆方通过降低DVT大鼠的HMGB1、IL-6、TNF-α表达,发挥对DVT的治疗作用。

通腑逐瘀法指导下抵当汤加减可抑制大鼠急性脊髓损伤后胶质瘢痕的形成

背景:急性脊髓损伤具有较高的致残率和致死率,在急性期进行积极有效的治疗对预防继发性损害具有重要意义。目的:观察通腑逐瘀法指导下抵当汤加减治疗大鼠急性脊髓损伤后水肿和肢体功能恢复的疗效,探讨通腑逐瘀法治疗急性脊髓损伤的作用机制。方法:将60只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、抵当汤组、TGN-020组以及抵当汤+TGN-020组,每组12只。假手术组行椎板切除术,不予脊髓打击,其余各组均采用纽约大学打击器制造急性脊髓损伤模型。造模成功后,假手术组和模型组不采取任何治疗措施,抵当汤组术后给予5.04 g/kg抵当汤灌胃;TGN-020组术后给予5 mg/kg TGN-020(水通道蛋白4特异性抑制剂)腹腔注射;抵当汤联合TGN-020组术后采用5 mg/kg TGN-020腹腔注射联合5.04 g/kg抵当汤灌胃处理,1次/d,持续7 d。分别于术后1,3,5,7天评估BBB评分和Reuter评分,术后第7天取材进行脊髓组织大体观察和含水率检测,苏木精-伊红染色观察组织受损程度,免疫荧光检测各组脊髓组织中水通道蛋白4和胶质原纤维酸性蛋白共表达细胞个数,Western Blot法检测各组脊髓组织中水通道蛋白4、胶质原纤维酸性蛋白、硫酸软骨素蛋白聚糖、增殖细胞核抗原蛋白的表达量。结果与结论:(1)行为学评分结果显示,与模型组相比,各用药组BBB评分均显著升高(P<0.05),Reuter评分均显著降低(P<0.05),且各用药组之间无显著差异(P>0.05);(2)脊髓组织含水率结果显示,与模型组相比,各用药组脊髓组织含水率均显著降低(P<0.05),且各用药组之间无显著差异(P>0.05);(3)苏木精-伊红染色结果显示,模型组脊髓组织结构离乱,大量瘢痕组织和脊髓空洞形成;与模型组相比,各用药组可见组织结构较完整,可见少量瘢痕组织增生和脊髓空洞,组织形态得到有效改善;(4)免疫荧光结果显示,与模型组相比,各用药组水通道蛋白4和胶质原纤维酸性蛋白共表达细胞数量较少,亮度较低,细胞肿胀程度减轻(P<0.05),且各用药组之间无显著差异(P>0.05);(5)Western Blot结果显示,与模型组相比,各用药组脊髓组织中水通道蛋白4、胶质原纤维酸性蛋白、硫酸软骨素蛋白聚糖、增殖细胞核抗原蛋白的表达均显著降低(P<0.05),且各用药组之间无显著差异(P>0.05);(6)提示通腑逐瘀法指导下抵当汤加减可促进急性脊髓损伤大鼠肢体功能恢复,其作用机制可能通过抑制水通道蛋白4表达减轻急性脊髓损伤大鼠损伤处水肿,从而有效抑制反应性星形胶质细胞的活化和增生,减少胶质瘢痕的形成。

抵当汤调节线粒体自噬对脑出血后神经损伤的保护作用及机制

目的基于线粒体自噬研究抵当汤(DDT)对脑出血(ICH)后神经损伤的保护作用及机制。方法应用自体血注入法建立ICH大鼠模型,氯化钴(CoCl_(2))诱导PC12细胞建立神经细胞缺氧模型,并应用DDT进行治疗。随机分为假手术(Sham)组、ICH组、脑血康(NXK,0.64 mg/100 g)组、ICH+DDT低、中、高剂量(0.13、0.26、0.52 g/100 g)组、线粒体自噬诱导剂CCCP阳性对照(CCCP,4 mg/kg)组、CoCl_(2)(150μmol/L)组、CoCl_(2)+DDT低、中、高剂量(50、100、200μg/ml)组。Longa评分法观察DDT对ICH大鼠神经功能缺损的保护作用,通过检测超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和丙二醛(MDA)含量探索DDT保护神经细胞氧化损伤的作用。利用Tunel染色和流式细胞术检测细胞凋亡,免疫荧光染色法观察线粒体膜电位变化,Western印迹和免疫组化法检测DDT对线粒体自噬的调控作用。结果DDT可以改善ICH神经功能评分,促进ICH后神经功能恢复;DDT能显著促进SOD、CAT及GSH-Px水平,显著降低MDA含量(P<0.05,P<0.01);DDT能显著减轻ICH病灶组织细胞凋亡,并能显著降低CoCl_(2)诱导PC12细胞的凋亡率(P<0.01,P<0.001);DDT能恢复CoCl_(2)诱导PC12细胞线粒体膜电位;DDT显著上调Parkin、PTEN诱导激酶(Pink)1和微管相关蛋白轻链(LC)3Ⅱ表达,显著抑制P62蛋白表达(P<0.05,P<0.01)。结论抵当汤能够调控线粒体自噬抑制神经细胞氧化损伤和细胞凋亡。

抵当汤改良方抗家兔实验性PTCA术后再狭窄的作用机理

目的 :探讨抵当汤改良方对家兔实验性PTCA术后再狭窄的防治作用机理。方法 :运用血管内皮拉伤后再喂饲高脂饲料的方法 ,造家兔实验性PTCA术后再狭窄模型 ,观察抵当汤改良方对其相关指标的影响。结果 :抵当汤改良方能有效降低血清TC等含量 ,提高血SOD活性及NO水平 ,降低血MDA含量及ET浓度 ,降低主动脉病变血管处平滑肌细胞PCNA的表达。结论 :抵当汤改良方抗PTCA术后再狭窄具有较充足的实验依据。

抵当汤改良方对实验性动脉粥样硬化家兔抗氧化活性及神经酰胺含量的影响

目的:观察抵当汤改良方对实验性动脉粥样硬化家兔抗氧化活性及神经酰胺含量的影响。方法:运用微量快速法检测血浆超氧化物歧化酶活性,运用改良八木国夫法检测血浆丙二醛含量,运用薄层扫描法检测主动脉神经酰胺含量。结果:抵当汤改良方对实验性动脉粥样硬化家兔能有效提高血浆超氧化物歧化酶活性,降低血浆丙二醛含量,降低主动脉神经酰胺脂质含量。结论:抵当汤改良方抗实验性动脉粥样硬化作用与提高机体抗氧化酶活性及降低神经酰胺含量有关。

抵当汤对血脂异常大鼠ET-1 mRNA、VCAM-1 mRNA表达影响

目的:观察抵当汤不同剂量对血脂异常大鼠血脂、黏附因子及内皮功能影响。方法:采用经典喂养法复制大鼠血脂异常的模型,喂高脂饲料,同时每天灌胃抵当汤。连续喂养8周。实验结束断头取血,测定血清TC、TG、HDL-C、LDL-C。取主动脉采用RT-PCR方法测定组织中ET-1 mRNA、VCAM-1 mRNA表达。结果:血清TC、TG、LDL明显降低,HDL显著升高;主动脉组织ET-1 mRNA、VCAM-1 mRNA表达显著降低。结论:抵当汤具有调节血脂,保护内皮功能的作用,是防治血脂异常理想的药物。

抵当汤对糖尿病兔腹主动脉球囊损伤后血管重构的研究

目的 :探讨抵当汤对糖尿病兔腹主动脉球囊损伤后血管重构的作用及机制。方法 :首先建立糖尿病兔模型,分为假手术组、模型组、抵当汤低剂量组、抵当汤高剂量组、Y-27632组,除假手术组外,其他各组兔接受球囊损伤手术,建立糖尿病实验兔腹主动脉球囊损伤模型。模型组接受生理盐水胃管注入;Y-27632组接受Y-27632胃管注入,给药剂量为70 mg/(kg·d);抵当汤低剂量组、抵当汤高剂量组分别给予8.1 g/(kg·d)、16.2 g/(kg·d)的抵当汤胃管注射。术后通过血管影像学、病理学方法观察抵当汤对糖尿病实验兔腹主动脉球囊损伤后血管内径、内膜、中膜、血流速度等的影响。结果:与假手术组比较,模型组动脉内径和血流速度均明显降低,管腔面积和内膜包绕面积显著减少,内膜面积和中膜面积显著增加,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01),说明以动脉内膜增殖及管腔狭窄为特征的糖尿病实验兔腹主动脉球囊损伤后动脉损伤模型造模成功。与模型组比较,Y-27632组的动脉内径显著升高,抵当汤高剂量组和抵当汤低剂量组的动脉内径和血流速度均显著升高,Y-27632组、抵当汤低剂量组、抵当汤高剂量组的中膜面积显著降低,抵当汤低剂量组和抵当汤高剂量组的内膜包绕面积均增加,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。与Y-27632组比较,抵当汤高剂量组血流速度显著升高,内膜面积和中膜面积显著降低,内膜包绕面积显著增加,差异均有统计学意义(P<0.05)。与抵当汤低剂量组比较,抵当汤高剂量组血流速度显著升高,内膜面积和中膜面积显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论:抵当汤可以改善糖尿病实验兔腹主动脉球囊损伤后的血管重构。

加味四妙抵当汤治疗慢性前列腺炎40例观察

目的:观察加味四妙抵当汤治疗慢性前列腺炎的临床疗效。方法:将2008年7月～2010年7月的80例门诊患者按就诊先后顺序随机分为中药治疗组和西药对照组各40例,治疗组采用加味四妙抵当汤,对照组采用左氧氟沙星和盐酸特拉唑嗪治疗,两组疗程均为4周,观察临床疗效、NIH-CPSI积分及前列腺液白细胞计数变化。结果:治疗组与对照组比较有效率无显著性差异(P>0.05),但愈显率比较有极显著性差异(P<0.01),两组治疗后NIH-CPSI疼痛、生活质量和总积分、前列腺液白细胞计数变化有显著性差异(P<0.05)。结论:加味四妙抵当汤治疗慢性前列腺炎有较好效果。

经方新用辨机论治风湿病

《伤寒杂病论》所载方剂是久经临床重复验证的效方,经方的变通应用,当以准确把握病机为前提,不能执方不变。抵当汤者,瘀热互结之病机为其应用的依据;半夏厚朴汤者,其病机在气滞痰凝;而桂枝加龙骨牡蛎汤,凡阴阳失调、营卫不和者,皆可辨证灵活运用。故抵当汤治抗磷脂综合征、半夏厚朴汤治干燥综合征、桂枝加龙骨牡蛎汤治产后风湿,均为“谨守病机,辨机论治”而用经方之明证。古方今用,活法在人,或用其方,或师其法,或取其意,辨机施治,加减有度,不拘古今之病名,开辟新用途,可提高复杂难治病的疗效。

含抵当汤脑脊液对海马神经元阿尔茨海默病细胞模型Bcl-2、Bax基因表达的影响

目的 研究含抵当汤脑脊液对离体海马神经元阿尔茨海默病（Alzheimer＇s Disease,AD）模型Bcl-2、Bax基因表达的影响.方法 选用体外培养成熟的大鼠海马神经细胞,经Aβ25～ 35老化处理为AD细胞模型,用含不同浓度抵当汤的脑脊液进行干预后,提取总RNA.应用RT-PCR和琼脂糖凝胶电泳方法测定Bcl-2、Bax mRNA的表达.结果 含抵当汤脑脊液能上调Bcl-2 mRNA、下调Bax mRNA表达水平,以含中剂量抵当汤脑脊液组（1g·mL-1）效果优于高剂量组（2g·mL-1）、低剂量组（0.5·mL-1）和维生素E组.结论 含抵当汤脑脊液对经Aβ25 ～35老化处理的海马神经元AD细胞模型Bcl-2、Bax的mRNA表达有影响.

抵当汤及其拆方对糖尿病大鼠心肌TGF-β_1,TGF-βRⅡ及Smad7蛋白表达的影响

目的:探讨糖尿病对大鼠心肌转化生长因子-β1(TGF-β1),转化生长因子-β受体Ⅱ(TGF-βRⅡ)及人信号转导分子7(Smad7)蛋白表达的影响及抵当汤及其拆方的干预作用。方法:105只SD雄性大鼠单次腹腔注射链脲佐菌素(STZ)建立糖尿病模型。成模后分为模型组、抵当汤干预组、水蛭虻虫组、桃仁大黄组和缬沙坦组,以12只正常SD雄性大鼠作为正常组,分别给予相应处理。8周末,利用全自动生化仪检测空腹血糖(FBG),HE染色观察心肌病理形态学变化,Western blot法检测TGF-β1,TGF-βRⅡ及Smad7蛋白的表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠心肌组织细胞肥大,炎症细胞浸润较明显,心肌TGF-β1及TGF-βRⅡ蛋白表达明显升高,Smad7蛋白表达明显降低(P<0.01);与模型组比较,抵当汤可以明显减轻糖尿病大鼠心肌组织的病理改变,抵当汤明显下调大鼠心肌TGF-β1蛋白及TGF-βRⅡ蛋白表达,明显上调Smad7蛋白表达(P<0.05,P<0.01)。拆方组大鼠与糖尿病模型大鼠组比较,TGF-β1蛋白下调,心肌组织损伤也有好转,但均不如全方明显。结论:抵当汤可减缓糖尿病大鼠心肌纤维化病变,其机制可能与下调糖尿病大鼠心肌中TGF-β1和TGF-βRⅡ蛋白表达,上调Smad7蛋白的表达有关,同时表明,抵当汤全方对DCM病变的防治作用优于拆方,"泻热化瘀通络"治法与抑制TGF-β1/Smad7信号转导通路有关。

抵挡汤早期干预对2型糖尿病大鼠大血管巨噬细胞调控作用的影响

目的:观察抵挡汤早期干预对实验性2型糖尿病大鼠大血管中巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)、巨噬细胞炎性蛋白(Mip-1a)和基质金属蛋白酶(MMP-9)表达的影响。方法:采用高脂饲料喂养及链脲佐菌素诱导法制成实验性大鼠糖尿病模型,分别以抵挡汤(含生药3.24 g.kg-1,ig)早期、中期及晚期干预,实时荧光定量PCR法检测主动脉M-CSF,Mip-1amRNA表达,Western-blot法检测主动脉MMP-9蛋白表达。结果:与模型对照组比较,抵挡汤早期干预组和罗格列酮组大鼠主动脉M-CSF mRNA表达明显降低(P<0.05);抵挡汤早期干预组、罗格列酮组和辛伐他汀组大鼠主动脉Mip-1a mRNA表达明显降低(P<0.05);抵挡汤早期、中期干预组和罗格列酮组MMP-9蛋白表达明显降低(P<0.05)。结论:抵挡汤早期干预可以有效降低实验性2型糖尿病大鼠主动脉M-CSF,Mip-1a mRNA表达以及MMP-9蛋白表达,调节巨噬细胞在动脉粥样硬化斑块形成及其稳定性中的作用,从而延缓糖尿病大血管病变的发展。

抵挡汤早期干预对糖尿病大鼠视网膜VEGF和PKC基因表达的影响

目的通过链脲佐菌素(STZ)诱导建立糖尿病大鼠模型,探讨不同时间段给予抵挡汤干预对糖尿病大鼠视网膜病变基因表达的影响及其作用机制。方法高脂饲料喂养大鼠12周时尾静脉注射STZ制备2型糖尿病大鼠模型,抵挡汤早期组、抵挡汤中期组和抵挡汤晚期组分别于8周、13周和16周给予抵挡汤灌胃,辛伐他汀组和罗格列酮组大鼠于13周分别给予辛伐他汀和罗格列酮灌胃,上述各组给药均至实验24周时结束。观察抵挡汤对糖尿病大鼠体重、血糖、血胰岛素的影响,采用逆转录聚合酶链反应法(RT-PCR)检测糖尿病大鼠视网膜组织中血管内皮生长因子(VEGF)-mRNA和蛋白激酶C(PKCβ2)-mRNA表达水平的变化。结果实验第13周时,与正常对照组比较,模型组大鼠空腹血糖明显升高(P<0.01),大鼠视网膜VEGF-mRNA与PKCβ2-mRNA表达量也显著升高(P<0.01)。与模型对照组比较,抵挡汤给药干预的3组大鼠视网膜VEGF-mRNA与PKCβ2-mRNA表达有显著降低(P<0.05);与抵挡汤晚期组和抵挡汤中期组比较,抵挡汤早期组VEGF-mRNA与PKCβ2-mRNA的表达明显降低(P<0.05)。与模型对照组相比,辛伐他汀组和罗格列酮组大鼠视网膜VEGF-mRNA与PKCβ2-mRNA表达降低(P<0.05)。结论抵挡汤早期干预可延缓糖尿病大鼠视网膜病变的发展,这与抵挡汤降低大鼠视网膜VEGF和PKCβ2基因表达从而抑制炎症反应有关。

通腑活血法及其类方研究初探

通腑活血法临床应用广泛,其类方亦疗效显著,值得深入系统规范化研究。通腑活血法奠基于汉代张仲景,发展于金元时期张从正,完善于明清时期吴有性及吴鞠通,发扬于近现代诸多医家。收集整理历代通腑活血方剂46首,根据通腑、活血逐瘀、攻补之力、轻重缓急不同,可分为逐瘀泄热桃核承气汤类21首,泻热破瘀大黄牡丹汤类11首,破血逐瘀抵当汤(丸)、下瘀血汤类7首。祛瘀扶正大黄虫丸类7首;统计通腑活血方药物使用频次,提示大黄与桃仁分别为泻下通腑药与活血化瘀药中的高频药物,是通腑活血方常用药对。

抵当汤加减治疗糖尿病肾病微量蛋白尿的回顾性分析

目的观察抵当汤加减治疗糖尿病肾病微量蛋白尿的临床疗效。方法采用回顾性分析研究方法,采集我院内分泌科仝小林教授门诊病例中符合入选标准的糖尿病肾病患者,经中医辨治服用汤药,观察服用汤药前后尿微量白蛋白排泄率(UAER)、糖化血红蛋白(HbA1c)、血压、血脂的变化,运用统计学方法进行数据处理分析。结果治疗3,6个月后,UAER较治疗前显著降低(P<0.01),总有效率分别为92.1%和90.5%;治疗3个月后HbA1c、收缩压(SBP)、总胆固醇(TC)降低有统计学意义(P<0.05,P<0.01),其他指标改善无统计学差异。结论抵当汤加减可改善糖尿病肾病患者微量蛋白尿,并对降低HbA1c、SBP、TC具有一定的疗效。

《伤寒论》抵当汤方名考证

通过对《伤寒论》抵当汤方名的考证,提示现今通行本《素问》《伤寒论》《千金要方》等经宋人整理改动,其文本材料在不同程度上偏离了原著原貌,具有明显的宋代医学特点;这些医书的相关内容存在诸多差异。这些文本材料的复杂性与不确定性,推测或源于宋人校理各书的体例、原则及校订过程、着力程度有所不同,或由于年代久远各书流传过程复杂、辗转翻刻而致。对关乎中医理、法、方、药的核心要素,特别是对长久以来歧义纷出、莫衷一是问题的研究考证,当建立在对文本材料充分了解的基础之上,切忌局限于某一文本而以偏概全。