氯离子对东方拟无枝酸菌发酵产物的影响

本文研究了氯离子对东方拟无枝酸菌发酵产物的影响。在常规培养条件下,改变发酵培养基中氯离子存在形式或是添加抑氯剂和溴化钠,都发现了新组分无氯万古霉素(didechlorovancomycin,DDCV)的产生。通过对培养基中添加抑氯剂的量的改变,发现加入0.005%2-巯基苯骈噻唑和0.1%溴化钠时万古霉素产量降至对照的6%,而DDCV的相对含量达到62%。

东方拟无枝酸菌HCCB10007中vcm8基因的敲除及无氯万古霉素产生菌的构建

目的:利用基因敲除的方法构建无氯万古霉素产生菌。方法:利用PCR-Targeting的方法获得破坏粘粒cLYLH15(Δvcm8::apr),通过接合转移敲除东方拟无枝酸菌HCCB10007中万古霉素生物合成基因簇中的卤化酶基因vcm8。结果:筛选得到1株突变子A.orientalisdvcm8(Δvcm8::apr)。结论:该菌不再代谢产生万古霉素,转而合成无氯万古霉素。经传代试验证明该菌株遗传稳定,可作为无氯万古霉素产生菌。