广州地区汉族人群Diego血型系统多态性调查

目的了解广州地区汉族人群中Diego血型系统DI1(Dia)和DI2(Dib)、DI3(Wra)和DI4(Wrb)两对抗原的基因频率分布,为指导临床输血提供依据。方法随机收集广州地区献血者200名,从静脉血提取基因组DNA。采用红细胞血型系统多重连接依赖的探针扩增(MLPA)技术对DI1和DI2、DI3和DI4两对抗原进行基因分型。采用测序法对MLPA基因分型结果做进一步确认。结果广州地区汉族人群中DI1、DI2、DI3和DI4抗原的基因频率分别为0.040 0、0.960 0、0.000 0和1.000 0。MLPA基因分型结果与测序法分型结果完全一致。DI1和DI2、DI3和DI4抗原在广州地区汉族人群随机输血中抗原不配合率分别为3.84%和0.00%。结论 DI1和DI2抗原在广州地区汉族人群随机输血中不配合率较高,具有一定临床意义。通过MLPA方法可以对DI1和DI2抗原进行基因分型从而推测其表型,解决了因抗体来源困难导致抗原鉴定难以开展的难题。

Diego血型基因分型方法的建立及西安地区多态性分布研究

目的建立降落PCR技术检测Diego血型基因的方法,并对西安地区献血者Diego血型基因多态性分布进行分析研究,同时建立Diego稀有血型库。方法建立了降落PCR检测Diego血型基因的方法,并采用抗-Dia和商品化基因分型试剂盒进行验证,以及基因测序做进一步确认。对西安地区1068名献血者提取基因组DNA,进行Diego血型基因分型。结果建立了检测Diego血型基因的降落PCR方法,用此方法共检测到Di(a+b-)1例,Di(a+b+)52例,Di(a-b+)1 015例,未检测到Di(a-b-)样本。献血者中Dia抗原的表达频率为0.049 63,Dib抗原的表达频率为0.999 06。结论本研究成功建立了降落PCR技术检测Diego血型基因的方法,并对西安地区献血者的Diego血型进行筛查和分析,获得其多态性分布数据。

人类红细胞血型Diego (DI,010)研究进展

目前Diego血型系统共发现22个抗原,均位于红细胞膜外带3蛋白上,是单基因SLC4A1单核苷酸多态性的产物。此血型系统中除了Dib、Wrb、DISK抗原外,其他抗原的表达频率极低,至今报道了抗-Dia、-Dib、-Wra、-ELO、-DISK具有临床意义,可引起轻重程度不等的新生儿溶血病和输血反应性疾病。值得注意的是Dia抗原在蒙古人种中具有多态性特点,在人种遗传学研究中具有生物学意义。

输血患者Diego血型不规则抗体的检测及临床分析

目的探讨临床输血患者中Diego血型不规则抗体产生的阳性率及分布特征。方法采用柱凝集法对本省68 918例临床申请输血的患者筛查不规则抗体;对409例初筛阳性患者采用试管低离子盐溶液-抗球蛋白试验(LISS-IAT)法进行不规则抗体种类及特异性的鉴定;对19例Diego血型不规则抗体阳性的患者采用试管法进行ABO、Rh以及Diego血型鉴定。结果 19例Diego血型不规则抗体中,女性患者13例(68.42%),男性患者6例(31.58%);所检出的抗体均为IgG-Di^a抗体,占所有不规则抗体阳性患者的4.65%,阳性率为0.03%。疾病分类:肝胆系统疾病6例(31.58%),妇产科疾病6例(31.58%),血液系统疾病5例(26.32%),肾脏系统疾病1例(5.26%),心血管系统疾病1例(5.26%);ABO血型中,A型8例(42.11%)、B型5例(26.32%)、O型4例(21.05%)、AB型2例(10.52%);Rh血型系统中,DCCee 7例(36.84%)、DCcEe 5例(26.32%)、DCcee 4例(21.05%)、DccEE 3例(15.79%)。结论对临床申请输血的患者(尤其是妇产科患者)进行不规则抗体的筛查以及抗体特异性的鉴定,可有效预防新生儿溶血病的发生以及减少输血不良反应。

江西地区汉族人群Diego和Dombrock血型基因频率调查

目的调查200名江西地区汉族随机献血者的Diego(Di)和Dombrock(Do)2个稀有血型系统,取得相应基因频率资料,为临床输血提供相应资料。方法采集200名江西地区汉族随机献血者,应用聚合酶链反应-序列特异性引物(PCR-SSP)法检测Di和Do 2个血型系统。结果 200名随机献血者中Di血型查出2种基因表现型,分别为Dia-b+196例、Dia+b+4例,Dia+b-及Dia-b-未检出;Dia基因频率为0.01,Dib基因频率为0.99。Do血型查出3种基因表现型,分别为Doa+b-2例,Doa+b+16例,Doa-b+182例;Doa基因频率为0.05,Dob基因频率为0.95。结论本地区Di血型系统的表现型多数为Dia-b+、少数为Dia+b+,Dia+b-及Dia-b-未见;Do血型系统的表现型多数为Doa-b+、少数为Doa+b+和Doa+b-。

Diego血型分子诊断方法的建立与应用

目的建立一个可行、准确的PCR-SSP实验系统用于Diego血型的检测。方法初步建立检测Diego血型的PCR-SSP实验系统,对合肥地区258份随机无偿献血者的血样进行检测,初步确定其Diego血型类型,用血清学方法对样品进行平行检测,以验证所设计的PCR-SSP实验系统的准确性。结果建立了Diego血型的PCR-SSP检测方法。258份随机标本中,检测到Dia-b+254份、Dia+b+4份,无Dia+b-和Dia-b-,与血清学检测结果基本一致。结论所设计的PCR-SSP实验系统可以较准确地检测出标本的Diego血型类型。

罕见抗-Di^b母婴血型不合配合型血液筛选及家系调查——附一例报告

目的诊断抗-Dib导致的母婴血型不合,筛选稀有Di(b-)血液并做家系调查。方法对患儿进行直抗试验,放散试验及游离试验,对产妇进行不规则抗体筛选及鉴定并检测其红细胞主要血型抗原;使用稀释的抗-Dib利用48孔微孔板以试管法间接抗球法从献血者和产妇亲属中筛选Di(b-)血液。结果产妇为Di(b-)稀有血型,产生了抗-Dib导致新生儿溶血病;从345名献血者和产妇亲属中各筛选到1例Di(b-)稀有血型,产妇亲属为患儿献血,患儿康复。结论建立了1种相对简便的间接抗球试验大规模筛选稀有血液的方法,诊断了抗-Dib母婴血型不合新生儿溶血病,为临床提供了稀有的Di(b-)血液。

中国汉族人群中Dia抗原和Dib抗原的分子遗传分析

目的研究中国汉族人群Diego血型系统中Dia和Dib抗原表达的分子遗传背景。方法采用血型血清学方法对2990例非血缘关系的捐血者进行Diego血型鉴定,从中随机选择20例表现型为Di(a-b+)的样本,以及筛选到的所有Di(a+b-)稀有血型样本,采用PCR-SSP、DNA直接测序方法分析Diego血型基因的分子遗传背景。结果2990例捐血者中,发现Di(a+b-)表现型2例,Di(a+b+)167例,Di(a-b+)2821例。随机选择的20例表现型为Di(a-b+)的DNA样本,经PCR-SSP法检测的基因型为DI2DI2,对DI基因第19外显子直接测序,2561位上碱基为C。2例稀有血型Di(a+b-)的DNA序列在19外显子2561位上碱基为T,基因型为DI1DI1。结论中国汉族人群Dia和Dib抗原表达的分子遗传基础是DI基因第19外显子2561位上碱基T-C的置换,引起第854位氨基酸的改变。

中国南京地区汉族人群Colton血型等4个血型系统稀有血型的初步调查

目的:调查和分析中国南京地区部分汉族人群Colton、Diego、Kell、Yt等4个稀有血型抗原的分布情况,以解决稀有血型病人的临床用血问题,并进一步充实国家稀有血型献血者资料库。方法:随机选择南京地区符合《献血者健康检查要求》的2 015名无偿献血者全血标本,提取DNA,采用PCR及多重PCR的方法检测Kell系统的K+和Kpc+、Yt系统的Ytb+、Colton系统的Cob+以及Diego系统的Dia+b+、Dia+b-血型抗原基因。结果:在2005例献血者中筛选出K+基因1例;在2 015例献血者中筛选出Ytb+8例和Dia+b+100例、Dia+b-2例,未筛查出Kpc+与Cob+。结论:中国南京地区汉族人群中K+、Ytb+和Dia+、Dib+基因频率分别为0.0003、0.0013和0.0258、0.9742,在现有筛查人群中未发现Kpc+与Cob+抗原存在。

高通量红细胞血型基因分型的多重连接依赖的探针扩增技术在一例抗Di^a新生儿溶血病诊断中的应用

目的运用高通量红细胞血型基因的多重连接依赖的探针扩增技术(multiplex ligation-dependent probe amplification,MLPA)辅助诊断一例罕见的由抗Di^a导致的严重核黄疸新生儿溶血病。方法运用传统的血型血清学方法对导致新生儿溶血病相关红细胞血型抗体进行鉴定,运用MLPA对患儿及其父母的超过40种红细胞血型抗原进行基因分型,对鉴定的抗体进行效价分析。结果血型血清学检测表明患儿体内含有针对某种低频抗原的抗体,MLPA基因分析结果提示母婴红细胞MNS血型系统及Diego血型系统抗原不匹配,可能存在抗N或抗Di^a,经进一步的血型血清学检测,证实母亲及患儿血清中存在抗Di^a,并且其母亲血清抗Di^a效价为1:32。结论抗Di^a可引起包括核黄疸在内的严重新生儿溶血病;高通量红细胞血型基因分型的MLPA技术能够协助并有效解决临床疑难样本稀有血型鉴定;针对国人的Di^a阳性的试剂红细胞应该常规应用于日常的抗体筛查工作中。

罕见抗-Di;联合多种抗体的鉴定与临床输血实践

目的对送检的1例抗体筛查阳性血样进行抗体鉴定,探讨复合抗体的鉴定思路并提供输血方案。方法采用血清学试验方法进行血型鉴定、抗体筛查;使用基因检测方法进行Diego血型基因分型;设计吸收放散试验进行复合抗体的鉴定。结果血清学试验结果显示患者血型结果为B,ccDEE,Jk(a-b+),Le(a-b+),Fy(a+b-),Di(a+b-);基因分型结果显示患者Diego基因型为Di(a+b-);结合上述结果设计吸收放散试验,检出患者血清中存在IgG抗-Di^(b)、IgG抗-Ce、IgG抗-Jk^(a);通过配合使用免疫球蛋白,并采取针对性的输血措施,为患者的成功救治提供了血液保障。结论对于抗高频抗原抗体联合多种抗体的鉴定,应将多种试验技术和方法组合应用,灵活设计试验方案。保障输血安全的措施不应仅局限于提供相合性的血液,更需联合多种措施保障输血安全。

抗-E合并抗-Wra抗体鉴定

目的:探讨抗-Wra抗体的鉴定过程及该抗体潜在的临床意义。方法:对1例不规则抗体检测阳性男性骨髓增生异常综合征患者进行抗体特异性鉴定。盐水法、凝聚胺法以及抗人球法进行交叉配血试验。结果:患者血清中检出抗-E及抗-Wra抗体,E抗原阴性的血液与患者进行交叉配血,3种交叉配血法均相合。结论:输血后患者无任何不良输血反应。对anti-Wra抗体及其他低频抗体进行检测有利于了解其临床意义。

含有抗Di^a及抗E混合抗体1例

Rh血型系统是临床血型问题中出现频率非常高的血型系统,国内外报道中又以抗E最为多见。Diego血型系统主要有Di^a及Di^b等位抗原,由于频率分布的缘故,Di（a-b＋）表型抗原在中国汉族人群中约90%。近期笔者在对1例阵发性睡眠性血红蛋白尿症（paroxysmal nocturnal hemoglobinuria,PNH）患者的输血前备血检测中发现有意外抗体,并经过一系列试验确定该患者血液中含有混合的抗Di^a及抗E抗体，最后提供了相合的血液，现报告如下。

抗-Di^(b)血型不合致新生儿溶血病一例

分析1例怀疑由抗-Di^(b)抗体引起的新生儿溶血病(HDFN)。患儿出生两天,诊断为贫血,高胆红素血症。患儿父母均为O型,RhD阳性,排除ABO、RhD溶血。患儿母亲抗体鉴定实验结果怀疑为抗-Di^(b)抗体引起的HDFN,由于市面上缺乏检测Dib抗原的试剂,导致抗-Di^(b)抗体引起的HDFN不易被发现,使用序列特异引物引导的PCR反应及聚合酶链反应-直接测序法检测患儿及父母Di^(a)、Di^(b)抗原。结果显示该患儿血型为Di(a+b+),患儿母亲血型为Di(a+b-),患儿父亲血型为Di(a-b+),该患儿所患HDFN为罕见抗体抗-Di^(b)抗体所致。