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题名尖吻蝮蛇蛇毒出血毒素DaHT-3的纯化与性质
被引量:4
- 1
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作者
叶文娟
冉永禄
赖仞
龚光林
俞帆
曾昭权
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机构
中国科学院昆明动物研究所
云南大学实验中心
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出处
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
1999年第5期762-767,共6页
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基金
云南省应用基础研究基金资助项目!( 95 B0 93 M)
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文摘
被尖吻蝮蛇咬伤会引起严重的出血,对蛇毒出血毒素的研究有利于治疗蛇伤出血药物的筛选.通过SephadexG-75,DEAE-SephadexA-50,SephadexG-200和两次PBE聚焦层析,从尖吻蝮蛇(Dienagkistrodonacutus)蛇毒中纯化到一个分子量为56000的出血毒素(DaHT-3),经氨基酸组成测定计算,由487个氨基酸残基组成.此成分在SDS-PAGE上显示出一条均一的蛋白染色带,用等电聚焦电泳测定,其pI为5.50.该出血成分的最小出血剂量是2.6μg,具有蛋白水解酶活力,其活力为3.68,但没有精氨酸酯酶和磷脂酶A2活力.用红外光谱仪研究DaHT-3在溶液中酰胺I带的吸收谱,该毒素含有31.8%的α螺旋、56.1%的β折叠和12.1%的转角;当加入EDTA螯合剂去除金属离子后,它们的α螺旋、β折叠、转角和无规卷曲分别变为11%、26.4%、46.2%和16.5%,而出血活力和蛋白水解酶活力均丧失。
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关键词
尖吻蝮蛇毒
出血毒素
理化性质
纯化
金属蛋白酶
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Keywords
dienagkistrodon acutus venom,hemorrhagic toxin, physical and chemical properties, Fourier transform infrared spectrum
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分类号
Q556.3
[生物学—生物化学]
R996.3
[医药卫生—毒理学]
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题名湖南尖吻蝮蛇毒两个出血毒素的纯化和理化性质
被引量:6
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作者
陶勇
冉永禄
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机构
中国科学院昆明动物研究所
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出处
《生物化学杂志》
CSCD
1995年第2期189-194,共6页
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文摘
经SephadexG-75凝胶过滤,QAE-SephadexA-50和CM-SephadexC-25离子交换层析的步骤,从湖南产尖吻蝮(Dienagkistrodonacutus)蛇毒中纯化出两个出血毒素(DaHT-1和DaHT-2).SDS-PAGE测得分子量均为23.5kD,IEF-PAGE测得等电点分别为5.6和5.2,两者具有相似的氨基酸组成,其中酸性氨基酸(Asx,Glx)分别占23%和24%,DaHT-1和DaHT-2的最小出血剂量(MHD)分别为0.5μg和0.8μg。都具蛋白水解酶活性,无对TAME,BAEE的水解活性和PLA2酶活性.两者的蛋白水解酶活力与出血活性并非正相关.DaHT-1和DaHT-2的最适温度分别为35℃和40℃,最适pH为6-9,对热均不稳定,温度高于60℃活性完全丧失。金属离子的分析显示每摩尔毒素蛋白约含0.5mol的Zn,1mol的Ca,较多的Na、K、Mg,不含Co。
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关键词
尖吻蝮
蛇毒
出血毒素
理化性质
提纯
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Keywords
venom of dienagkistrodon acutus
hemorrhagic toxin
purification
physical and chemical properties
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分类号
Q959.620.6
[生物学—动物学]
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题名尖吻蝮蛇蛇毒出血毒素的纯化与部分性质
被引量:1
- 3
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作者
叶文娟
冉永禄
赖仞
龚光
林俞帆
曾昭权
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机构
中国科学院昆明动物研究所
云南大学实验中心
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出处
《蛇志》
1999年第3期21-24,共4页
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基金
云南省应用基础研究基金
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文摘
目的 被尖吻蝮蛇 ( Dienagkistrodon acutus) 咬伤会引起严重的出血, 对蛇毒出血毒素的研究有利于治疗蛇伤出血药物筛选。 方法 采用 Sephadex G75, D E A E Sephadex A50, Sephadex G200 和两次 P B E 聚焦层析纯化。 S D S P A G E 电泳和等电聚焦电泳测定纯化样品的纯度和等电点。氨基酸组成用自动氨基酸分析仪测定。以小鼠背部皮下注射部位出血斑的面积来确定最小出血剂量和常规的方法测定酶活性。结果 从尖吻蝮蛇毒中纯化到一个相对分子量为56 000 的出血毒素 ( Da H T3), 经氨基酸组成测定计算,它由 487 个氨基酸残基组成。此成分在 S D S P A G E上显示出一条均一的蛋白染色带, 其p I为550。该出血成分的最小出血剂量是 26μg, 具有蛋白水解酶活力, 其活力为 368, 但没有精氨酯酶和磷脂酶 A2 活力。当加入 E D T A 螯合剂去除金属离子后, 它们的出血活力和蛋白水解酶活力均丧失。 结论 这是从大陆尖吻蝮蛇毒中获得的一个新的出血金属蛋白酶 ( Da H T3)。
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关键词
蛇毒
尖吻蝮蛇
出血毒素
纯化
物理化学性质
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Keywords
dienagkistrodon acutus venom, hemorrhagic toxin, purification, physical and chemical properties
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分类号
Q959.620.6
[生物学—动物学]
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