地高辛配基人乳头瘤病毒DNA探针的制备和应用

采用非同位素标记物地高辛配基（Ｄｉｇｏｘｉｇｅｎｉｎ），通过随机引物法制成地高辛配基人乳头瘤病毒ＤＮＡ（Ｄｉｇ－ＨＰＶＤＮＡ）探针。用斑点杂交法检测宫颈组织中的ＨＰＶＤＮＡ。经试验证明，该探针检测ＨＰＶＤＮＡ的灵敏度与（３２）Ｐ－ＨＰＶＤＮＡ探针相近。经与（３２）Ｐ－ＨＰＶＤＮＡ探针同时对６５份临床标本进行比较，结果附合率达９５％以上。３５份宫颈癌组织中ＨＰＶ１６／１８型检出率为３４．２９％。Ｄｉｇ标记的探针检测ＨＰＶＤＮＡ特异性高，重复性好，背景显色低。

从西安地区正常儿童尿中检测人巨细胞病毒DNA

为了研究人巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）感染的流行病学及鉴定ＨＣＭＶ核酸在尿中分布，我们用ＨＣＭＶＡＤ１６９株ＨｉｎｄⅢ－ＥＤＮＡ片段制备探针，采用核酸杂交技术对取自西安地区１８０例３岁～５岁正常儿童的尿标本进行了ＨＣＭＶ相关序列的检测。结果显示出西安地区ＨＣＭＶＤＮＡ阳性者３例（５０份尿标本）占６％；咸阳地区ＨＣＭＶＤＮＡ阳性者７例（５０份尿标本）占１４％；兴平地区ＨＣＭＶＤＮＡ阳性者１９例（８０份尿标本）占２５％。在不同的地区之间，阳性检出率有较明显地差异。

重组人组织型纤溶酶原激活剂中细胞残余DNA的检测

采用地高辛标记探针 ,以核酸分子斑点杂交技术检测重组人组织型纤溶酶原激活剂 (rt PA)中细胞残余DNA的方法。从样品中去掉蛋白提取DNA的方法能有效的避免蛋白对检测结果的干扰 ,其灵敏度和结果都能较好地达到WHO的要求。

地高辛素标记人神经生长因子DNA探针的制备及应用

地高辛素标记人神经生长因子ＤＮＡ探针的制备及应用曹铮，陆璐，丁斐，顾静，刘飞，殷冬梅，顾晓松江苏南通医学院分子生物学研究室南通２２６００１余云开，汪家政北京军事医学科学院基础医学研究所北京１００８５０ＰＵＲＩＦＩＣＡＴＩＯＮＡＮＤＩＴＳＡＰＰＬＩＣＡ...

应用地高辛标记HCMV DNA混合探针检测人巨细胞病毒DNA

本文比较了^(32)P和地高辛标记的HCMV EcoRI单一Z片段与EcoR IZ、K、J混合片段探针的敏感性。结果^(32)P和地高辛分别标记的EcoRIZ单一片段检测敏感性分别为50pg和1pg,而两者标记的EcoRI Z、K、J混合片段检测敏感性分别提高到5pg和0.1pg。地高辛标记的混合片段探针比^(32)P标记单一EcoRIZ片段探针敏感性提高500倍,比^(32)P标记混合探针高50倍,比地高辛标记的EcoRI Z片段探针高10倍。应用地高辛标记混合片段探针检测了正常小儿尿标本10份,阳性率为60％(6/10),与免疫组化方法对比,两者符合率为100％。检测肾移植患者尿标本33份,阳性率为46％(15/33);白血病患者尿标本18份,阳性率为72％(13/18),与PCR方法对比两者符合率为93％。地高辛标记混合探针可快速、敏感、特异地检测人巨细胞病毒感染。

神经生长因子 cDNA 探针的制备及应用

人重组βＮＧＦ／ｐＵＣ１９，经ＨｉｎｄⅢ／ＢａｍＨⅠ双酶切后，获βＮＧＦＤＮＡ片段（３６０ｂｐ）。用随机引物标记法进行Ｄｉｇｏｘｉｇｅｎｉｎ标记，在小鼠颌下腺原位杂交检测ＮＧＦｍＲＮＡ显示出很高的特异性，该探针的制备为ＮＧＦ在神经及非神经系统的研究提供新的方法。

HPV6，11型在女性生殖器尖锐湿疣和乳头瘤样增生中的分布

从３４２名上海地区患者的外阴、阴道和宫颈的病变部，采集４８７份活检标本。５种病理诊断类型，经斑点杂交法检测，ＨＰＶ６、１１ＤＮＡ总阳性率：尖锐湿疣８５％、乳头瘤样增生１０．１０％、慢性宫颈炎７．１４％、鳞状上皮增生５％、生殖器正常粘膜２．６５％。５１例尖锐湿疣和１０例乳头瘤样增生，ＨＰＶ６、１１和６＋１１感染阳性率分别为：１５．６９％、２５．４９％、５８．８２％和２０％、３０％、５０％。Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹转移杂交与斑点杂交的符合率，在尖锐湿疣中，ＨＰＶ６、１１和６＋１１分别为７５％、９２．３％、８６．７％；在乳头瘤样增生中，分别为１００％、３３．３％、６０％。ＡＢＣ法检测阳性率仅为６１．６７％和０％。本调查结果证实，上海地区女性尖锐湿疣和乳头瘤样增生与ＨＰＶ６、１１型感染密切相关，且以ＨＰＶ两种型别（ＨＰＶ６＋１１）混合感染为主。

《中国神经科学学会第一届代表大会暨学术会议》纪要

《中国神经科学学会第一届代表大会暨学术会议》纪要《中国神经科学学会第一届代表大学暨学术会议》于１９９５年１０月１６～１９日在上海市第二军医大学召开。１０月１５日晚举行了盛大的招待会，欢迎与会代表。１６日上午举行开幕式。出席大会的有：有关的领导，来自全...

同位素与生物素标记的HCMV DNA探针检测婴儿肝炎综合症血和尿标本的比较

用^(32)P和生物素标记的克隆化的人巨细胞病毒(HCMV)AD169株DNA片段作探针,采用DNA-DNA斑点杂交法,对照检测了27例婴儿肝炎综合症患者(血清学检测为非甲非乙型肝炎者)临床血、尿标本的HCMV-DNA。其中16份血标本呈阳性,占59％;9份尿标本呈阳性,占33％。初步结果表明,血标本中HCMV DNA检出率比尿标本检出率高26％。标记的^(32)P探针可检测10pg同源DNA,生物素探针可检测50Pg同源DNA,均不与其它疱疹病毒及未感染的人胚肺细胞DNA杂交。将其中26份血标本的HCMV DNA杂交结果与抗HCMV IgM ELISA检测结果相比较,符合率为65％。

采用DNA-DNA杂交试验检测人巨细胞病毒感染的初步研究

建立了快速的DNA-DNA杂交试验检测感染人巨细胞病毒(HCMV)的细胞.采用32P或生物素标记的克隆的DNAJ片段作为探针.实验结果表明该探针是敏感的、特异的,能检测出0.9pg(32P-探针)或90pg(生物素-探针)的同源DNA.该探针不能和其它疱疹病毒、未感染人胚肺细胞和人胚DNA相杂交.本试验检测了先天性CMV感染的新生儿、孕妇和助血员的尿标本144份和血标本154份,获得了满意的结果.

神经生长因子mRNA水平与睾丸生精细胞成熟和功能的关系

以地高辛素标记人β－神经生长因子ＤＮＡ为探针，采用原位杂交的方法观察了小鼠睾丸曲精小管中ＮＧＦｍＲＮＡ的分布情况，发现阳性细胞分布于大部分曲精小管基底至管腔的各级生精细胞中，随着生精细胞成熟度的增加，ＮＧＦｍＲＮＡ表达水平逐步增加，细胞核与间质呈阴性。结果提示：ＮＧＦ在睾丸中具有自分泌与旁分泌作用的可能，不断促进精子自身的成熟与活力。