中药地黄的现代研究进展及其质量标志物(Q-marker)预测分析

地黄为我国传统大宗药材,首载于《神农本草经》,列为上品,是滋补类代表中药,其化学成分主要包括环烯醚萜、苯乙醇、糖、核苷、紫罗兰酮等类化合物。现代药理学研究表明地黄对神经、心脑血管、血液、内分泌等系统具有显著的疗效。在对地黄化学成分及其炮制变化、药理作用及质量控制研究近况进行总结的基础上,从质量传递与溯源性、成分与药效关联性、复方配伍环境、化学成分有效性及可测性等方面对地黄质量标志物进行预测分析,为地黄质量标准研究提供科学依据。

Xijiao Dihuang Decoction(犀角地黄汤)and Rehmannia glutinosa Libosch.Protect Mice against Lipopolysaccharide and Tumor Necrosis Factor Alpha-Induced Acute Liver Failure

Objective: To investigate the hepatoprotective effect of Xijiao Dihuang Decoction(犀角地黄汤,XJDHD) on lipopolysaccharide(LPS)-and tumor necrosis factor alpha(TNF-α)-induced acute liver failure(ALF)as well as the underlying mechanism of action, and to clarify the key herbs and components of XJDHD. Methods:LPS/D-galactosamine(D-GalN) or TNF-α/D-GalN were intraperitoneally injected into C57BL/6J mice to induce ALF. Simultaneously, XJDHD or its individual herbs and components were orally administered. Survival rates, transaminase levels in serum, and hepatic histology were examined to evaluate the effects of XJDHD.The terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP nick end labeling(TUNEL) assay and real-time polymerase chain reaction were additionally performed to expound the mechanism underlying the anti-apoptotic activity of XJDHD. Results: Oral administration of XJDHD protected mice from lethal liver failure induced by LPS and TNF-α, with notable amelioration of liver injury in histology and a significant decrease in transaminase levels in serum. XJDHD signi?cantly inhibited apoptosis of hepatocytes and enhanced expression of the antiapoptosis genes, c-Flip, Iap1, Gadd45 b and A20(all P<0.05). In addition, Rehmannia glutinosa Libosch. was identi?ed as the key herb of XJDHD and galactose as the effective component of Rehmannia glutinosa Libosch.that protects against ALF. Conclusions: XJDHD inhibits TNF-α-induced apoptosis of hepatocytes by promoting the expression of nuclear factor κB-regulated anti-apoptotic genes. Rehmannia glutinosa Libosch. may be the most effective herb of XJDHD and galactose is an active component in this protection.

地黄叶多糖的超高压提取工艺优化及抗氧化活性研究

为充分利用地黄叶资源,采用超高压提取方法提取地黄叶中多糖,并且将其与热水提取、微波提取和超声波提取的地黄叶多糖进行抗氧化活性的比较。结果表明:超高压压力400MPa、加压时间8.5min、液固比20∶1mL/g为最佳提取条件,在该条件下,地黄叶中多糖得率达到4.52%,其对DPPH自由基和ABTS+自由基清除能力的IC50分别为1.26mg/mL和1.78mg/mL,清除能力强于热水提取、微波提取和超声波提取的地黄叶多糖。超高压提取方法提取地黄叶多糖得率高、时间短、活性高。在提取地黄叶多糖方面具有较好的应用前景。

高效液相色谱法测定地黄叶中梓醇的含量

目的对地黄叶中有效成分梓醇进行含量测定。方法采用高效液相色谱法测定,流动相为乙腈-0.1%磷酸(1:99),检测波长为210nm,流速为1.0mL/min,柱温为40℃。结果地黄叶中梓醇含量为2.1%。结论地黄叶中有效成分梓醇含量较高,有很高的开发利用价值。

地黄活血生新功效考辨

地黄根据炮制方式有鲜地黄、生/干地黄与熟地黄之别,应用方法不同其功效迥异。自《神农本草经》以降,历代医家对地黄的功效认识与临床应用各有重点,其"活血生新"功效经历了重视、忽视、再发掘的过程,地黄梓醇促血管新生效应是其"活血生新"功效的微观体现。

正交实验优选地黄叶中梓醇的提取工艺

目的对干地黄叶中梓醇的提取方法进行优选,确定最佳提取工艺。方法采用正交实验表L8(2)7安排实验。结果提取方法对梓醇提取率影响最大。结论确定地黄叶中梓醇的最佳提取工艺,即加水煎煮提取,提取次数为2次,1h/次。

地黄叶水提物和乙醇提取物滋阴作用探析

目的探讨地黄叶水提物和地黄叶80%乙醇提取物(醇提物)的滋阴作用。方法小鼠按体质量被随机分为对照组、模型组、以及地黄叶水提物低剂量组(3 g/kg)、地黄叶水提物高剂量组(6 g/kg)、地黄叶醇提物低剂量组(3 g/kg)、地黄叶醇提物高剂量组(6 g/kg)、六味地黄丸组(0.6 g/kg)各给药组;每天灌服左旋甲状腺素钠持续14 d造小鼠阴虚模型,除对照组外,其余各组均采用同样的造模处理,各给药组在造模的当天灌服相应的受试药物,模型组和对照组灌服同等容积的溶媒蒸馏水;通过对小鼠大体观察、体质量、饮水量、肛温、肾脏指数等指标的检测分析评价地黄叶的水提物和醇提物的滋阴作用。结果造模7~14 d,小鼠出现毛发稀疏、枯槁、大便干燥等不同程度的阴虚症状,小鼠体质量分别显著降低13.7%和17.7%,饮水量分别升高48.1%和79.3%,在造模14 d,小鼠肛温和肾脏指数分别显著升高3.8%和10.9%;在给药7d和14 d,各受试药物(地黄叶水提物低剂量、地黄叶水提物高剂量、地黄叶醇提物低剂量、地黄叶醇提物高剂量、六味地黄丸)均不同程度缓解了造模诱导的阴虚症状,使小鼠体质量分别显著升高5.5%和5.4%、11.8%和13.8%、10.7%和12.1%、12.2%和13.8%、14.0%和19.5%,饮水量分别下降17.5%和32.7%、22.5%和36.5%、20.0%和30.8%、20.0%和34.6%、27.5%和40.4%,在给药14 d,小鼠肛温分别显著下降2.1%、2.9%、1.8%、2.9%和3.2%,而各受试药物对模型引起的肾脏指数升高均无显著影响。此外,地黄叶水提物高剂量组和地黄叶醇提物高剂量组各项指标比较总体无明显差异,与六味地黄丸组比较也总体相当。结论地黄叶水提物和醇提物均有滋阴作用,均以高剂量为佳,且在高剂量下,二者的作用相当,均与六味地黄丸的作用总体相当。

地黄饮片中外源性有害物质残留情况分析

目的了解地黄饮片中外源性有害物质的残留状况。方法依据《中华人民共和国药典》和探索性研究方法对不同产地的地黄饮片中的二氧化硫残留量、脱硫剂、重金属及有害元素、200余种农药残留进行分析和评价。结果 187批样品中检出1批二氧化硫残留量超标,检出1批使用了脱硫剂;35批样品中重金属均有检出,但均不超标;55批样品中检出14种农药,其中检出3种植物生长调节剂(丁酰肼、吲哚丁酸、胺鲜酯),检出率100%,地黄农药残留存在一定风险。结论地黄饮片中外源性有害物质以农药残留为主,需要进一步加强生产监管,建议完善现行质量标准对农药残留进行限量控制。

地黄叶浸膏微波真空低温干燥工艺优化

为充分利用地黄叶资源,提高其经济附加值并为植物提取物干燥提供方法。采用单因素试验考察微波功率、干燥时间等因素对干燥产物含水率的影响,在单因素试验的基础上,选用L9(34)正交试验法和多指标综合评分法对工艺参数进行优化,确定地黄叶浸膏微波真空低温干燥的最佳工艺条件,并与真空烘箱干燥、真空带式干燥和冷冻干燥等方法进行比较研究。结果表明:地黄叶浸膏微波真空低温干燥的最佳工艺条件为浸膏初始含水率45%、微波功率2kW、干燥时间18min、装料盘转速90r/min、间歇比3:1、装载量110g;在此工艺条件下干燥产物含水率2.89%、毛蕊花糖苷保留率95.98%、地黄叶总苷保留率89.41%。与其他干燥方法相比,微波真空干燥具有干燥产品含水率低、有效成分损失少、干燥时间短且操作简便等优点,工艺稳定可靠,有较大的工业化应用价值。

基于中红外光谱技术对不同产地地黄的定性及定量分析

目的基于中红外光谱技术建立不同产地地黄的定性和定量模型。方法采集不同产地地黄样品的中红外光谱,高效液相色谱法(HPLC)测定梓醇、毛蕊花糖苷和地黄苷D含量,结合判别分析及逐步多元线性回归法分别建立不同产地地黄样品的定性和定量分析模型。结果定性分析中,所建立的定性模型能有效区分不同产地地黄样品;定量分析中,建立了地黄梓醇、毛蕊花糖苷及地黄苷D含量的定量模型,经验证,所建模型预测效果良好。结论所建立的定性和定量模型稳定、客观,可为不同产地地黄品质的快速评价提供依据。

基于体质与证候辨析的阴虚体质主药主方筛选

阴虚体质与阴虚证冠名相似,在临床中因对两者界定不清而导致遣方用药不分的现象。因此,从辨识内容、调治目的、主药及配伍方面对阴虚体质与阴虚证进行辨析,并对阴虚体质调体主药龟板、熟地黄以及阴虚体质调体主方大补阴丸合六味地黄丸进行探究,以期为阴虚体质的调理及其相关疾病的预防提供临床指导。

高天舒治疗糖尿病周围神经病变临床表现及用药规律系统综述

[主要目的]分析高天舒治疗糖尿病周围神经病变临床表现及用药规律。[资料来源]在辽宁中医药大学附属医院病案室选择慢病内分泌科住院病历。[选择文献量及依据](1)研究类型:临床观察。(2)符合糖尿病周围神经病变诊断标准;知情同意,签署知情同意书。排除信息不全、方药组成不完整,临床疗效不显著,未按要求坚持服汤药。[数据提炼规则及应用方法]根据《中药学》《中医内科学》规范统一药名及术语。SPSS22.0统计软件、Excel2003软件,计量资料采用均值±标准差(±s)表示,计数资料采用χ~2检验;统计药味频次,主要症状、舌象、脉象排序,聚类分析高频药物、药对。[数据综合得出结果与结论]口渴多饮100例,尿频量多99例,疲乏无力96例,大便正常69例,寐佳65例,双下肢麻木疼痛63例,纳可61例,双目视物不清53例,多食易饥42例,寐差28例,胸闷26例,头晕23例,气短22例,自汗18例,大便干14例,胸痛12例,头痛12例,双上肢麻木疼痛12例,心悸11例;舌质暗58例,舌质暗红37例,舌质红3例,舌质紫黯1例,舌质淡1例,舌下络脉紫黯1例,苔少44例,苔薄白30例,苔黄16例,苔白7例,苔白腻1例,苔黄少1例,苔白腻厚1例;脉细27例,脉沉细27例,脉沉25例,脉沉涩5例,脉细数3例,脉细无力3例,脉沉细无力3例,脉沉无力2例,脉滑2例,脉细涩1例,脉弦细1例,脉滑数1例;聚类方(使用频率>20%药物)(1)桑叶、桑白皮、乌梅、五味子、桑椹、知母、枸杞子、玉竹、山茱萸、女贞子;(2)半夏、炙甘草、黄连、生地黄。常用药对:女贞子-玉竹、生地黄-知母、桑椹-桑白皮、山茱萸-桑叶、枸杞子-乌梅。[未来展望]扩大样本、多中心协调配合,得出更确切的结果。

MOFs对毛蕊花糖苷的吸附解吸性能研究

为了探究MOFs材料对地黄叶提取物中毛蕊花糖苷的吸附解吸性能,首先制备MOFs材料,随后以吸附量、解吸量、解吸率为指标筛选最适宜分离毛蕊花糖苷的MOFs和大孔树脂,以单因素试验对ZIF-8吸附、解吸毛蕊花糖苷的能力进行优化,并在优化所得条件下比较ZIF-8和D-101对毛蕊花糖苷的吸附、解吸能力。结果表明:ZIF-8对毛蕊花糖苷的吸附量和解吸量分别为40.78和25.42 mg·g^(-1),其分别是D-101大孔树脂对毛蕊花糖苷吸附量和解吸量的1.85倍和1.83倍。因此,ZIF-8对毛蕊花糖苷的吸附、解吸性能优于D-101大孔树脂。

地黄叶总苷胶囊对核苷类药物肾损伤的疗效及线粒体自噬的作用

目的研究地黄叶总苷胶囊对核苷类药物所致肾损伤的疗效及线粒体自噬的作用。方法使用阿德福韦酯(ADV)建立乙型肝炎病毒(HBV)转基因乙型肝炎小鼠肾损伤模型,造模1周及2周检测各组肾功能,造模2周时检测肾脏组织线粒体自噬指标,透射电镜检测肾脏组织线粒体自噬现象。后分别予地黄叶总苷胶囊或等渗盐水对肾损伤小鼠灌胃治疗8周,检测肾功能,观察肾脏组织形态并检测肾脏组织线粒体自噬指标。观察不同浓度毛蕊花糖苷(地黄叶总苷胶囊主要有效成分)对ADV引起HK-2细胞损伤后的保护作用。将HK-2细胞分为对照组、ADV以及ADV加毛蕊花糖苷组。观察不同时间及不同浓度毛蕊花糖苷对HK-2细胞线粒体自噬指标的影响。收集50例使用核苷(酸)类似物治疗后出现肾损伤的慢性乙型肝炎患者。随机数法分为对照组29例按常规治疗,治疗组21例在对照组的基础上给予地黄叶总苷胶囊治疗,8周检测血清肌酐(Scr)、尿蛋白。统计学方法用χ2或t检验。结果ADV组造模2周引起HBV小鼠肾功能损伤,ADV组肾组织自噬指标表达高于对照组;透射电镜观察到ADV组肾脏组织线粒体自噬现象。与对照组相比,地黄叶总苷胶囊治疗2个月HBV小鼠肾功能好转,自噬指标表达下调。毛蕊花糖苷促进ADV损害的HK-2细胞的增殖,且较单独ADV组自噬指标表达下调。50例有肾功能损伤的患者中,治疗组的尿蛋白改善显著优于对照组,治疗组有效18例、无效3例,对照组有效12例、无效17例,差异有统计学意义(χ^(2)=9.9750,P=0.0016)。治疗组血肌酐减低,治疗组有效11例、无效10例,对照组有效12例、无效17例,2组差异无统计学意义(χ^(2)=0.5935,P=0.4411)。结论地黄叶总苷胶囊可改善核苷(酸)类似物所致慢性乙型肝炎的肾功能损伤,可能通过抑制PINK1/PARKIN介导的线粒体自噬发挥作用。

地黄质量控制研究进展

地黄常用于热病伤阴、大热烦渴、喉咙肿痛等,为常用大宗药材,其质量控制是临床安全合理用药的基础。查阅近年来关于地黄质量控制的研究成果,通过归纳地黄性质、显微、薄层和分子标记的分析方法和总结HPLC、UPLC、质谱联用、光谱分析、指纹图谱等多种技术手段在地黄质量控制领域的应用,为全面推进地黄质量控制体系的建立提供参考。有助于地黄种植加工炮制过程的质量提升,有利于地黄相关产业高质量发展。

怀地黄不同主栽品种叶形态特征比较

目的:通过观察怀地黄不同主栽品种叶的形状,非腺毛和气孔器大小、密度等特征,为怀地黄主栽品种的鉴定及优良品种的选育提供依据。方法:用直尺测量叶片的长度和宽度,在扫描电镜下计数不同主栽品种怀地黄叶表面非腺毛和气孔的密度,测量其长度。结果:叶片长度、宽度及长宽比,非腺毛和气孔的长度、密度等,在怀地黄不同主栽品种间具有差异。结论:叶的形状,非腺毛和气孔的密度、长度等叶的形态特征可以作为怀地黄不同品种间鉴别的依据。

地黄叶与桑叶降血糖作用研究

目的:比较地黄叶、桑叶单用与合用对四氧嘧啶诱导的糖尿病模型小鼠降低血糖的作用。方法:KM雄性小鼠,禁食不禁水16 h后,以0.01 m L·g-1体质量的剂量腹腔注射新鲜配制的四氧嘧啶生理盐水溶液(23 g·L-1),建立小鼠糖尿病模型,造模成功后将造模组动物随机分为模型组、地黄叶组、桑叶组、地黄叶桑叶合用(1∶1)组、阳性对照(二甲双胍)组,各组灌胃给予相应药物10 d,模型组给予等体积的蒸馏水,余下各组剂量分别为:6 g·kg-1,6 g·kg-1,6 g·kg-1,6 g·kg-1,6 g·kg-1,0.2 g·kg-1。给药后观察各组小鼠的行为表现,以及摄食量、饮水量、体质量的变化。通过测定空腹血糖,观察地黄叶、桑叶单用与二者合用对糖尿病动物模型血糖的影响。结果:造模后小鼠平均体质量显著降低(P<0.01);饮水量和摄食量均显著增加(P<0.01);垫料潮湿,符合糖尿病小鼠"三多一少"的典型症状,且空腹血糖浓度超过11.1 mmol·L-1(P<0.01)。实验期间模型对照组小鼠血糖一直保持较高水平,未出现自行降低。灌胃给药后,各组小鼠的体质量有不同程度的增加,饮水量、摄食量、血糖值有不同程度的降低。结论:地黄叶桑叶合用的效果不如单用的效果好,地黄叶的降低血糖作用显著优于桑叶,与盐酸二甲双胍类似。

地黄叶对糖尿病肾病大鼠肠道菌群的调节作用

研究地黄叶总苷提取物及地黄叶总苷胶囊对糖尿病肾病大鼠肠道菌群的调节作用。将48只大鼠随机分为正常组(C)、模型组(M)、黄葵胶囊组(0.75 g·kg^(-1)·d^(-1),HK)、厄贝沙坦组(27 mg·kg^(-1)·d^(-1),YX)、地黄叶总苷提取物低剂量组(4.3 g·kg^(-1)·d^(-1),DHYL)、地黄叶总苷提取物高剂量组(7.2 g·kg^(-1)·d^(-1),DHYH)、地黄叶总苷胶囊低剂量组(216 mg·kg^(-1)·d^(-1),JNL)和地黄叶总苷胶囊高剂量组(360 mg·kg^(-1)·d^(-1),JNH),每组6只。除正常组外,其余各组采用高糖高脂饲料+5%葡萄糖饮水+注射链脲佐菌素(45 mg·kg^(-1),STZ)的方法复制糖尿病肾病模型。造模成功后,各组药物给药2周,通过16S rDNA测序的方法研究地黄叶总苷提取物和地黄叶总苷胶囊对糖尿病肾病大鼠肠道菌群的调节作用。结果表明,与正常组相比,糖尿病肾病模型组大鼠肠道内菌群从门水平到属水平均发生了显著变化;且模型组大鼠肠道菌中乳酸杆菌属比例显著降低;给药后乳酸杆菌属比例有所回升,尤其是厄贝沙坦组、地黄叶总苷提取物低剂量组和地黄叶总苷胶囊低剂量组调节作用较为显著。可见,地黄叶总苷具有改善STZ诱导的糖尿病肾病大鼠肠道菌群失调的作用。

基于UPLC-TQ-MS的地黄中核苷类和氨基酸类成分动态积累研究

目的分析评价地黄Rehmannia glutinosa根与叶中5种核苷与14种氨基酸类成分,揭示其动态积累规律,为其合理利用提供科学依据。方法选取不同生长期的地黄根和叶以及不同产地(河南大封、河南温县、河南南召)的地黄叶为研究对象,采用超高效液相色谱-三重四极质谱联用技术(ultra-high performance liquid chromatography-triple quadrupole mass spectrometry,UPLC-TQ-MS)分析不同生长期地黄根和叶以及不同产地地黄叶中核苷类与氨基酸类成分的动态变化。结果研究发现地黄根及地黄叶中均含有5种核苷类成分和14种氨基酸类成分,2部位中不同生长期2类成分的总含量分别为3.88~16.97 mg/g和4.27~25.32 mg/g;地黄根和叶中测得的2类成分总量分别在10月中下旬和11月上中旬显著升高,达到各自峰值,其中L-谷氨酰胺与L-赖氨酸含量最高,占总含量的60%以上;大部分生长期地黄叶中核苷类和氨基酸类成分较地黄根高,尤其在10月下旬;不同产地地黄叶中以河南南召产者核苷和氨基酸含量较高,总含量最高可达30.756 mg/g。结论阐明了地黄中核苷类和氨基酸类成分的分布和动态积累过程,为地黄药食两用特性及合理采收期提供了科学依据,提出了地黄叶可作为新的食用新资源为机体补充核苷类和氨基酸类成分的建议,为地黄叶资源价值的发现、开发和利用提供了支撑。

基于指纹图谱及抗氧化活性考察不同杀青方法地黄叶的质量特征

目的:分析不同杀青方式对地黄叶化学质量特征及抗氧化活性的影响,为地黄叶的加工工艺选择及质量评价奠定基础。方法:分别采用55℃杀青、沸水杀青与105℃杀青3种方法对地黄叶进行处理,杀青处理后样品55℃烘干。采集各处理样品的高效液相色谱法(HPLC)指纹图谱、近红外光谱(NIRS)指纹图谱,并利用2,2-联苯基-1-苦基肼基(DPPH)法分析其抗氧化活性。利用相似度分析、主成分分析(PCA)、正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)及Pearson相关性分析等方法对不同杀青处理地黄叶的质量进行综合评价。结果:HPLC、NIRS指纹图谱分析结果均显示,不同杀青处理的地黄叶质量特征存在差异,其中55℃杀青样品的化学质量综合得分最高,平均综合得分2.096分,105℃杀青次之,最低为沸水杀青。55℃杀青地黄叶的抗氧化活性最强,沸水杀青次之。OPLS-DA结果表明,引起3种杀青处理地黄叶化学质量产生差异的主要成分为毛蕊花糖苷、异类叶升麻苷和梓醇,这3种成分与地黄叶的抗氧化活性均呈正相关,其中毛蕊花糖苷、异类叶升麻苷与抗氧化活性的相关性达显著水平。结论:不同杀青方法对地黄叶的化学质量及抗氧化活性均有一定影响,其中低温杀青为地黄叶最佳的初加工方式。