子痫前期患者HMGB1、ADMA水平变化及与螺旋动脉管壁厚度及管腔面积的相关性

目的:探讨子痫前期患者高纤移率族蛋白B1(HMGB1)、不对称性的二甲基精氨酸(ADMA)水平及与螺旋动脉管壁厚度及管腔面积关系。方法:选取本院2019年1月-2021年6月收治子痫前期患者72例临床资料,分为重度子痫前期组(n=37例)、轻度子痫前期组(n=35例),健康孕妇作为对照组(n=35例)。酶联免疫吸附法检测3组血HMGB1、ADMA表达水平,电子显微镜观察并检测孕妇螺旋动脉管厚和管腔面积,分析子痫前期孕妇HMGB1、ADMA水平与壁厚及管腔面积的相关性。结果:血HMGB1、HMGB1表达水平重度子痫前期组(24.58±4.36ng/ml、5.03±3.24umol/ml)、轻度子痫前期组(17.41±7.41ng/ml、2.74±0.40umol/ml),对照组(10.24±2.53ng/ml、1.87±3.02)umol/ml)依次降低;重度子痫前期组胎盘螺旋动脉壁厚以及管腔的面积分别为(118.14±9.03um、138.47±28.41um^(2)),轻度子痫前期组(107.21±8.40um、156.21±26.74um^(2)),对照组(102.08±8.57um、190.53±26.59um^(2))存在差异(均P<0.05)。子痫前期孕妇HMGB1、ADMA与螺旋动脉管壁厚度呈负相关(r=-0.631、-0.655,P<0.001),与螺旋动脉管腔面积呈正相关(r=0.715、0.693,P<0.001)。结论:HMGB1和ADMA表达水平可以作为评价子痫前期患者病情程度的指标,该两项指标可能参与了子痫前期患者胎盘螺旋动脉重铸的障碍过程,为子痫前期的发病机制提供一定理论支持。

急性脑梗死患者ADMA、SESN2、内皮素-1、硫氧还蛋白水平变化

目的探讨急性脑梗死患者非对称性二甲基精氨酸(ADMA)、人Sestrin 2蛋白(SESN2)、内皮素-1、硫氧还蛋白水平变化及意义.方法选取86例急性脑梗死患者为急性脑梗死组,根据治疗手段不同分为静脉溶栓组61例,静脉溶栓联合介入治疗组25例,另收集同期健康志愿者40名为健康对照组.采集参与研究者清晨空腹肘静脉血5 mL,酶联免疫吸附法检测血清ADMA、SESN2、内皮素-1、硫氧还蛋白水平,并行NIHSS评分.使用改良Rankin量表(mRS)评估急性脑梗死患者出院1 a的预后情况,将患者分为预后良好组(mRS≤2分)、预后不良组(mRS>2分).结果急性脑梗死组患者血清ADMA、SESN2、内皮素-1、硫氧还蛋白水平明显高于健康对照组(P<0.05).治疗后14 d,血清ADMA、SESN2、内皮素-1、硫氧还蛋白水平均明显低于治疗前(P<0.05);其中静脉溶栓联合介入治疗组患者血清ADMA、SESN2、内皮素-1、硫氧还蛋白水平明显低于静脉溶栓组(P<0.05).血清ADMA、SESN2、内皮素-1、硫氧还蛋白水平在不同病情严重程度的患者间比较差异具有统计学意义(P<0.05);随着病情严重程度的增加,急性缺血性脑梗死患者血清ADMA、SESN2、内皮素-1、硫氧还蛋白水平明显提升.预后不良组患者中合并冠心病、房颤比例,NIHSS评分及血清ADMA、SESN2、内皮素-1、硫氧还蛋白水平明显高于预后良好组(P<0.05).年龄、男性比例、合并高血压比例、合并糖尿病比例、起病至入院时间在两组间比较差异无统计学意义(P>0.05).多因素Logistic回归分析结果显示,房颤、NIHSS评分、ADMA、SESN2、内皮素-1、硫氧还蛋白是急性脑梗死患者预后的独立影响因素.ROC曲线分析显示,ADMA、SESN2、内皮素-1、硫氧还蛋白对急性脑梗死患者预后均具有较高的预测价值(P<0.05).其中,各项指标联合检测的预测价值最高(AUC=0.962),灵敏度、阳性预测值均明显高于各指标单独检测.结论急性脑梗死患者ADMA、SESN2、内皮素-1、硫氧还蛋白水平高表达,且与病情严重程度密切相关,联合检测可用于急性脑梗死患者的预后评估.

DDAH1通过抑制氧化应激及炎症反应缓解PM2.5诱导的肺损伤机制研究

目的探讨二甲基精氨酸二甲胺水解酶1(DDAH1)通过抑制氧化应激及炎症反应缓解PM2.5诱导的小鼠肺损伤的保护作用。方法32只雌性C57BL/6野生型小鼠,按照随机数字表法将其分为4组,分别为对照组、模型组、DDAH1高剂量组、DDAH1低剂量组,每组各8只。除对照组滴注0.9%氯化钠溶液外,其余各组室温下用无菌0.9%氯化钠溶液将PM2.5稀释至终浓度220μg/100μL,小鼠气管滴注PM2.5溶液60μL,每天1次,连续暴露7 d。其中,DDAH1高剂量组气管滴注PM2.5溶液前30 min,给予300 ng重组人DDAH1蛋白进行滴鼻处理。DDAH1低剂量组气管滴注PM2.5溶液前30 min,给予100 ng重组人DDAH1蛋白进行滴鼻处理。检测小鼠支气管灌洗液中炎症因子[白细胞介素(IL)-6、IL-8、IL-1β、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]及肺组织中丙二醛、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)含量;观察各实验组小鼠肺组织的病理学改变,肺组织中的细胞黏附分子-1(ICAM-1)、血管细胞黏附因子1(VCAM-1)、不对称二甲基精氨酸(ADMA)、转化生长因子-β(TGF-β)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)蛋白表达。结果与对照组相比,模型组肺泡灌洗液中IL-6、IL-8、TNF-α及IL-1β水平均明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05);与模型组相比,DDAH1高剂量组、DDAH1低剂量组肺泡灌洗液中IL-6、IL-8、TNF-α及IL-1β水平均明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比,模型组肺组织中丙二醛水平明显升高,SOD及CAT水平均明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05);与模型组相比,DDAH1高剂量组、DDAH1低剂量组肺组织中丙二醛水平明显降低,SOD及CAT水平均明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比,模型组肺组织中ICAM-1、VCAM-1、TGF-β、iNOS、ADMA蛋白表达水平均明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05);与模型组相比,DDAH1高剂量组、DDAH1低剂量组肺组织中ICAM-1、VCAM-1、TGF-β、iNOS、ADMA蛋白表达水平均明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论PM2.5诱导的肺损伤可增加肺泡灌洗液中炎症因子表达,加重氧化应激反应,并影响血管肌化和血管内皮屏障功能障碍相关蛋白的表达。而外源性DDAH1对PM2.5所致小鼠肺损伤具有一定的保护作用,其机制可能与抑制氧化应激和炎症反应有关。

冠状动脉粥样硬化性心脏病合并肺动脉高压患者血清ADMA、IL-6、TGF-β1水平检测意义

目的探讨冠状动脉粥样硬化性心脏病(CHD)合并肺动脉高压(PAH)患者血清不对称二甲基精氨酸(ADMA)、白细胞介素6(IL-6)、转化生长因子-β1(TGF-β1)水平,并分析其对CHD合并PAH的诊断价值。方法选取2019年6月至2022年6月郑州大学附属郑州中心医院收治的冠状动脉粥样硬化性心脏病(CHD)患者66例为研究对象,依据是否合并肺动脉高压(PAH)分为单纯CHD组22例、CHD合并PAH组44例,同期选取本院体检的健康志愿者132例为对照组。比较各组临床资料及不同组(入组时)、不同疾病严重程度患者血清ADMA、IL-6、TGF-β1水平。分析血清各指标与疾病严重程度、心肺功能相关性。分析血清各指标对CHD合并PAH的诊断价值。结果血清ADMA、IL-6、TGF-β1水平:CHD合并PAH组>单纯CHD组>对照组,重度>中度>轻度(P<0.05);ADMA、IL-6、TGF-β1与氨基末端B型脑钠肽前体(NT-proBNP)、肌钙蛋白I(cTnI)、肺动脉收缩压(sPAP)、肺动脉舒张压(dPAP)、疾病严重程度呈正相关(P<0.05);联合诊断CHD合并PAH的曲线下面积(AUC)大于单项诊断(P<0.05)。结论CHD合并PAH患者血清ADMA、IL-6、TGF-β1水平升高,且与病情严重程度相关,临床监测其水平变化诊断CHD合并PAH具有一定应用价值。

阿司匹林抗高糖诱导的内皮细胞衰老过程中对DDAH-ADMA系统及Caveolin-1蛋白的影响

目的观察阿司匹对高糖诱导的内皮细胞衰老模型二甲基精氨酸二甲胺水解酶（DDAH）-非对称性二甲基精氨酸（ADMA）系统和Caveolin-1蛋白表达的影响,探讨阿司匹林抗高糖诱导内皮细胞衰老的机制。方法人脐静脉内皮细胞（HUVEC）分别培养于正常糖浓度培养液（5.5 mmol/L）、高糖培养液（33 mmol/L）、高糖＋阿司匹林（0.01~1 mmol/L）培养液以及含L-NAME（300μmol/L）培养液,48 h后采用β-半乳糖苷酶（β-gal）染色鉴定衰老细胞,流式细胞仪检测细胞内活性氧（ROS）水平,Western blot分析Caveolin-1蛋白表达,液质联用仪检测细胞上清液中ADMA的含量并计算DDAH的活性。结果高糖作用内皮细胞48 h后,细胞β-gal染色阳性细胞数明显增多,ROS、ADMA水平以及Caveolin-1蛋白表达升高,DDAH活性降低。0.01~1 mmol/L阿司匹林剂量依赖性地降低β-gal染色阳性细胞数、ROS和ADMA水平以及Caveolin-1蛋白表达,同时升高细胞DDAH活性（P均〈0.05）。L-NAME（NOS的抑制剂）能完全抑制阿司匹林的上述作用（P〈0.05）。结论高糖环境下阿司匹林（0.01~1mmol/L）能抑制Caveolin-1表达,改善DDAH-ADMA系统的活性而进一步发挥抗氧化损伤、抗细胞衰老的作用。

不对称二甲基精氨酸对THP-1源性巨噬细胞表达巨噬细胞移动抑制因子的影响

目的研究不对称二甲基精氨酸对THP-1源性巨噬细胞表达巨噬细胞移动抑制因子的影响。方法 150nmol/L佛波酯诱导THP-1细胞48h使其转化为巨噬细胞,并用抗人CD68进行免疫细胞化学鉴定,以不同浓度的不对称二甲基精氨酸(1、5、10、20和30μmol/L)作用于THP-1源性巨噬细胞24h及20μmol/L不对称二甲基精氨酸作用于THP-1源性巨噬细胞0h、6h、12h、24h及48h,逆转录聚合酶链反应检测各组细胞的巨噬细胞移动抑制因子mRNA表达水平,酶联免疫吸附法检测各组细胞上清液中巨噬细胞移动抑制因子的蛋白含量。结果与对照组相比,5、10、20和30μmol/L的不对称二甲基精氨酸作用于THP-1源性巨噬细胞24h后,巨噬细胞移动抑制因子的mRNA和蛋白表达水平均明显提高(P<0.05)。与0h组相比,20μmol/L不对称二甲基精氨酸作用于THP-1源性巨噬细胞12、24和48h,巨噬细胞移动抑制因子的mRNA和蛋白表达水平均明显提高(P<0.05)。结论不对称二甲基精氨酸可上调THP-1源性巨噬细胞的巨噬细胞移动抑制因子表达,并呈剂量和时间依赖性,不对称二甲基精氨酸可能通过诱导巨噬细胞移动抑制因子的表达而促进动脉粥样硬化的发生和发展。

激光显微切割结合蛋白质组学技术分析DDAH-1在肝细胞癌表达的变化

目的:应用激光显微切割(laser capture microdissection,LCM)结合蛋白组学技术筛查肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)组织及其癌旁组织的差异表达蛋白,分析二甲基精氨酸二甲胺水解酶1(dimethylarginine dimethylaminohydrolase1,DDAH-1)在肝细胞癌表达的变化。方法:选取2003-2006年间东方肝胆外科医院原发性肝细胞癌患者的手术切除标本40例。利用LCM技术分离捕获肝癌组织及癌旁组织的肝实质细胞,应用二维凝胶电泳技术(two dimensional gel electrophoresis,2-DE)筛选全部标本共同差异表达频率>80%、差异强度>3倍的蛋白质点;应用电喷雾串联质谱(electrospray ionisation tandem mass spectrometry,ESI-MS/MS)及基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption/ionization time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)对差异蛋白点进行质谱鉴定分析;采用Western blotting及免疫组化对差异蛋白DDAH-1进行检测。结果:2-DE筛查获得在肝癌及癌旁组织差异表达的蛋白质点共20个,通过质谱鉴定获得12个蛋白质,其中5个在肝癌组织表达上调,7个下调;这12个蛋白质与细胞代谢、增殖、分化及信号调控相关,其中的DDAH-1是参与调控一氧化氮相关通路的重要酶。Western blotting检测显示,20例标本中16例DDAH-1表达明显升高;免疫组化检测证实,10例标本DDAH-1全部呈强阳性表达。结论:肝细胞癌组织细胞中筛查到12个差异表达蛋白质,其中的DDAH-1在肝癌组织中表达上调,其有可能在肝癌发生、发展过程中起重要作用。

不对称二甲基精氨酸上调THP-1来源的巨噬细胞和泡沫细胞内胆固醇酰基转移酶-1的表达(英文)

目的观察不对称二甲基精氨酸(ADMA)对单核细胞THP-1来源的巨噬细胞和泡沫细胞中胆固醇酰基转移酶-1(ACAT-1)的表达及胆固醇含量的影响。方法分别采用RT-PCR和Western blot技术检测ACAT-1mRNA和蛋白表达水平。采用酶偶联比色法检测细胞内胆固醇含量。结果不同浓度的ADMA(0,3.75,7.5,15,or30μmol/L)对THP-1来源的巨噬细胞和泡沫细胞作用不同时间(6、12、24h)后,巨噬细胞和泡沫细胞内ACAT-1mRNA和蛋白的表达明显上调,细胞内总胆固醇的含量明显升高。结论 ADMA在巨噬细胞形成泡沫细胞过程中可能发挥了重要作用。抑制巨噬细胞和泡沫细胞内ACAT-1可能成为治疗动脉粥样硬化的潜在靶点。

血清不对称二甲基精氨酸、妊娠相关蛋白-A、胰岛素样生长因子-1水平与妊娠糖尿病患者妊娠结局的相关性

目的探讨血清不对称二甲基精氨酸(ADMA)、妊娠相关蛋白-A(PAPP-A)、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)水平与妊娠糖尿病(GDM)患者妊娠结局的相关性。方法选取该院2019年1月至2021年1月收治的100例GDM患者作为GDM组,选取同期60例糖耐量异常(AGT)孕妇作为ATG组,另选取同期60例产检正常的健康孕妇作为对照组。比较3组血清ADMA、PAPP-A、IGF-1水平和不良妊娠结局发生率。采用Pearson相关分析GDM患者血清ADMA、PAPP-A、IGF-1水平间的相关性。采用多因素Logistics回归分析GDM患者不良妊娠结局的影响因素。ROC曲线分析血清ADMA、PAPP-A、IGF-1水平对GDM患者不良妊娠结局的预测价值。结果GDM组血清ADMA、IGF-1水平高于ATG组、对照组(P<0.05),PAPP-A水平低于ATG组、对照组(P<0.05);ATG组血清ADMA、IGF-1水平高于对照组(P<0.05),PAPP-A水平低于对照组(P<0.05)。GDM患者血清PAPP-A水平与ADMA、IGF-1水平呈负相关(r=-0.536、-0.601,P<0.001),ADMA水平与IGF-1水平呈正相关(r=0.587,P<0.001)。GDM组不良妊娠结局发生率高于ATG组、对照组(P<0.05),ATG组不良妊娠结局发生率高于对照组(P<0.05)。糖化血红蛋白(OR=1.703,95%CI:1.247~2.235)、胰岛素抵抗指数(OR=1.384,95%CI:1.158~1.894)、ADMA(OR=1.583,95%CI:1.224~2.163)、IGF-1(OR=1.051,95%CI:1.018~1.085)为GDM患者不良妊娠结局独立危险因素(P<0.05),PAPP-A(OR=0.692,95%CI:0.422~1.137)为保护因素(P<0.05)。ADMA、PAPP-A、IGF-1和3项联合预测GDM患者不良妊娠结局的曲线下面积(AUC)分别为0.743、0.732、0.731、0.852,3项联合预测GDM患者不良妊娠结局的AUC大于ADMA、PAPP-A、IGF-1单独预测(P<0.05)。结论GDM患者血清ADMA、IGF-1水平升高,PAPP-A水平降低。ADMA、IGF-1为不良妊娠结局的独立危险因素,PAPP-A为保护因素。联合检测这3项指标有助于准确预测不良妊娠结局,指导临床干预,改善妊娠结局。

原发性高血压高迁移率族蛋白1与血管内皮功能的关系

目的探讨原发性高血压(EH)患者血清高迁移率族蛋白1(HMGB1)与血管内皮功能的关系。方法连续收集高血压患者30例,正常对照组30例。分别采用酶联免疫吸附法、高效液相色谱法、硝酸还原酶法测定血清HMGB1、血浆非对称性二甲基精氨酸(ADMA)、血清一氧化氮(NO)水平,同时采用高分辨超声检测肱动脉血流介导的内皮依赖性血管舒张功能(FMD)。结果高血压组血清HMGB1、血浆ADMA显著高于对照组(P<0.01),血清NO、FMD显著低于对照组(P<0.01)。Spearman秩相关分析显示,在所有研究对象中,HMGB1与ADMA呈正相关(r=0.757,P<0.01),与NO、FMD呈负相关(r=-0.743,P<0.01;r=-0.707,P<0.01)。以FMD为应变量进行多元线性逐步回归分析,HMGB1是FMD的独立影响因子之一。结论血清炎症因子HMGB1可能参与了高血压血管内皮功能损伤过程。

冠心病患者外周血RANTES、PAI-1和ADMA水平的变化及与GRACE评分的相关性分析

目的观察不同类型冠心病患者外周血活化T细胞趋化因子(RANTES)、血浆纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)、非对称性二甲基精氨酸(ADMA)水平的变化,探讨其与冠心病GRACE评分的关系。方法选择行冠状动脉造影术的住院患者150例,其中无症状心肌缺血(SMI)组28例,稳定型心绞痛(SAP)组59例,急性冠脉综合征(ACS)组63例。用ELISA法测定血清RANTES、PAI-1和ADMA水平,并计算患者GRACE评分,分析RANTES、PAI-1和ADMA水平与GRACE危险分层的关系。结果 ACS组外周血RANTES、PAI-1、ADMA水平均高于SMI组和SAP组,差异有统计学意义(P<0.05);SAP组和SMI组RANTES、PAI-1、ADMA水平间比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。外周血RANTES与PAI-1、ADMA水平均呈正相关(r=0.334,P=0.000;r=0.173,P=0.021),而血清PAI-1与ADMA水平无明显相关性,血清RANTES、PAI-1、ADMA水平与患者GRACE评分均未显示出明显相关性。结论 GRACE评分联合检测外周血RANTES、PAI-1和ADMA水平,可能有助于冠心病患者危险分层,能更有效地预测急性冠脉事件的发生。

非对称性二甲基精氨酸对人脐静脉内皮细胞黏附分子-1表达的影响及L-精氨酸的拮抗作用

目的 :探讨非对称性二甲基精氨酸 (ADMA)对人脐静脉内皮细胞 (HUVECs)表达可溶性细胞间黏附分子- 1(sICAM 1)的影响 ,并观察不同浓度L- 精氨酸 (L- arg)对ADMA效应的拮抗作用。方法 :以不同浓度的ADMA与HUVECs共育或固定浓度的ADMA加不同浓度的L -arg与HUVECs共育 2 4h ,用ELISA法检测培养液中sICAM 1的浓度。结果 :ADMA呈剂量依赖性增加HUVECs表达sICAM 1(P <0 .0 5 ) ,接近生理范围的ADMA对内皮功能没有明显的影响 ;外源性补充L arg可逆转ADMA的效应 ,且呈剂量依赖性 (P <0 .0 5 ) ,但当外源性L arg的剂量大到一定程度时 ,内皮功能并不能得到进一步改善。直线相关分析显示培养液中sICAM 1的浓度和ADMA的浓度明显正相关 (r=0 .943 ,P <0 .0 1)。结论 :ADMA可通过增加内皮细胞表达sICAM -1来导致内皮功能紊乱 ,且内皮功能紊乱的程度与ADMA的浓度有关 ;外源性补充L-arg可逆转ADMA的效应 ;药物调节ADMA的浓度可能是防治心血管疾病的一个新目标。

缬沙坦抑制非对称二甲基精氨酸诱导的内皮细胞LOX-1的表达

目的研究缬沙坦对非对称二甲基精氨酸(ADMA)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体1(LOX-1)mRNA和蛋白表达的影响,并探讨其机制。方法体外培养HUVEC,以不同浓度的缬沙坦和15μmol/L ADMA共同孵育24 h,DCFH-DA检测细胞内活性氧(ROS)生成量;RT-PCR测定NADPH氧化酶p22phox及LOX-1 mRNA的转录水平;酶联免疫吸附法检测细胞LOX-1蛋白的表达水平。结果与ADMA组相比,缬沙坦干预后细胞ROS水平显著下降(P<0.05),p22phox和LOX-1 mRNA转录水平及LOX-1蛋白的表达水平明显下调(P<0.05),并呈剂量依赖性。结论缬沙坦通过抑制p22phox的表达减少细胞内ROS水平,进而抑制ADMA诱导的内皮细胞LOX-1 mRNA转录和蛋白表达,这可能是其独立于降压作用的抗动脉粥样硬化作用的部分机制。

乙酰化对二甲基精氨酸二甲胺水解酶1表达水平的影响

目的以去乙酰化酶抑制剂丁酸钠(Na Bu)和乙酰转移酶p300作为乙酰化作用因素,探讨人胚肾HEK293细胞中乙酰化对二甲基精氨酸二甲胺水解酶1(DDAH1)表达水平的调节。方法应用real-time PCR方法检测Na Bu刺激或转染野生型及突变型p300表达载体后DDAH1 m RNA表达水平的变化;应用Western blot方法检测Na Bu和p300对DDAH1蛋白表达水平的影响。结果 Real-time PCR结果显示Na Bu以时间依赖方式上调DDAH1 m RNA表达水平,同时转染野生型p300表达载体显著上调DDAH1 m RNA水平,而突变型p300作用不明显;Western blot结果显示Na Bu及野生型p300可提高DDAH1蛋白表达,但突变型p300无此作用,与对DDAH1 m RNA表达的作用一致。结论乙酰化可上调HEK293细胞中DDAH1 m RNA和蛋白表达水平。

ADMA对单核/巨噬细胞分化为泡沫细胞过程中ACAT-1表达的影响

目的观察不对称二甲基精氨酸(ADMA)对单核/巨噬细胞分化为泡沫细胞过程中酰基辅酶A胆固醇酰基转移酶-1(ACAT-1)表达的影响。方法 1)THP-1单核细胞与160 nmol/L佛波酯(PMA)孵育48 h后,再与80 mg/L氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)孵育24 h,用油红O染色在光镜下鉴定细胞形态及变化。2)将THP-1单核细胞、巨噬细胞、泡沫细胞分别用20μmol/L ADMA干预24 h,酶法测泡沫细胞内胆固醇酯的含量,RT-PCR方法检测ACAT-1mRNA表达,Western blot方法检测其蛋白表达。结果 1)ADMA可显著增加泡沫细胞内胆固醇酯的含量。2)与THP-1单核细胞相比,巨噬细胞(P<0.05)、泡沫细胞(P<0.01)中ACAT-1 mRNA及蛋白表达增加;而与巨噬细胞相比,泡沫细胞中ACAT-1 mRNA及蛋白表达增加但无显著性差异。3)与各自的对照组相比,经ADMA作用后3种细胞中ACAT-1 mRNA及蛋白表达水平均增加(P<0.01)。结论 ADMA增加泡沫细胞内胆固醇酯的含量可能是通过上调ACAT-1的mRNA及蛋白表达来实现的。

核因子-κB介导非对称性二甲基精氨酸上调大鼠主动脉氧化低密度脂蛋白受体1的表达

目的探讨非对称性二甲基精氨酸(ADMA)上调大鼠主动脉氧化低密度脂蛋白受体-1(LOX-1)的表达是否是由NF-κB调控。方法 Wistar大鼠50只随机分为4组:①正常对照组(n=10):标准饲料喂养。②H组(n=12):高脂饲料喂养。③A+H组(n=14):高脂饲料喂养,ADMA[0.2mg/(kg.d)]灌胃,每日1次。④P+A+H组(n=14):高脂饲料喂养,吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC)[40 mg/(kg.d)]腹腔注射、ADMA[0.2mg/(kg.d)]灌胃,均为每日1次。18周后麻醉大鼠、取主动脉。以实时荧光定量PCR和Western blot法分别检测LOX-1 mRNA和蛋白表达,以电泳迁移率变动分析(EMSA)和增强化学发光法(ECL)检测NF-κB活性。结果①A+H组LOX-1 mRNA和蛋白表达量较正常对照组和H组升高(P<0.05),P+A+H组较A+H组LOX-1 mRNA和蛋白表达量降低(P<0.05)。②A+H组NF-κB活性较正常对照组和H组均显著升高(P<0.05),P+A+H组NF-κB活性较A+H组明显降低(P<0.05)。③相关分析:NF-κB活性与LOX-1 mRNA和蛋白表达量均呈正相关(相关系数r分别为0.79,0.81;P<0.05)。结论 ADMA可能通过NF-κB途径上调LOX-1表达而促进动脉粥样硬化的发生发展。

二甲基精氨酸二甲胺水解酶1 rs3087894C/G单核苷酸多态性与我国肝细胞癌遗传易感性的相关性

目的探讨二甲基精氨酸二甲胺水解酶1(DDAH1)rs3087894C/G单核苷酸多态性与我国汉族人群中肝细胞癌(HCC)遗传易感性的关系。方法用聚合酶链反应-限制性片断长度多态性(PCR-RFLP)法对120例HCC患者(病例组)和70例健康对照者(对照组)进行基因型分析。结果病例组DDAH1 rs3087894C/G位点CC+CG、GG基因型频率分别为33.3%和66.7%,对照组基因型频率分别为7.1%和92.9%,2组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。与GG基因型相比,CC+CG基因型个体患HCC的风险度高(OR=3.793,95%CI=1.589～8.307)。DDAH1 rs3087894C/G单核苷酸多态性与乙型肝炎病毒感染、甲胎蛋白水平有相关性(P<0.05),与患者性别、年龄、肿瘤大小、分化程度、淋巴结转移无相关性(P>0.05)。结论 DDAH1 rs3087894C/G单核苷酸多态性与我国HCC发生有相关性。

不同海拔地区急性暴露的健康人急性高原病发生情况及血清ET-1、ADMA、VEGF水平变化

目的观察急进不同海拔地区的健康人群急性高原病(AMS)发生情况及血清内皮素1(ET-1)、非对称性二甲基精氨酸(ADMA)、血管内皮生长因子(VEGF)水平变化,探讨在不同海拔地区急性暴露对健康人血管内皮功能的影响。方法在平原地区招募健康志愿者45人,从平原(海拔400 m)出发,途经西宁市(海拔2 260 m)、刚察县(海拔3 260 m)及玛多县(海拔4 270 m)。400 m到2 260 m通过乘坐火车到达,时间28 h,停留72 h后进行路易斯湖评分体系(LLSS)判定受试者AMS发生情况;2 260 m以后乘坐大巴车迁移,途中时间分别为10、18 h,在3 260 m、4 270 m海拔各停留72 h进行LLSS评分。分别于从平原进入高海拔地区前24 h和进入不同海拔地区后72 h采集静脉血标本,采用ELISA法检测血清ET-1、ADMA、VEGF。结果所有受试者在不同海拔地区均未发生AMS。随着海拔升高,受试者血清ET-1、VEGF、ADMA水平逐渐下降,其中进入海拔3 260、4 270 m地区时受试者血清ET-1、VEGF、ADMA水平低于进入海拔400 m、2 260 m地区时,在海拔4 270 m地区时血清ET-1、VEGF、ADMA水平低于进入海拔3 260 m地区时(P均<0.05)。吸烟者与不吸烟者进入不同海拔地区时血清ET-1、VEGF、ADMA水平差异均无统计学意义。吸烟者或不吸烟者进入海拔4 270 m地区时血清ET-1、VEGF、ADMA水平低于同组进入海拔3 260 m地区时(P均<0.05)。是否吸烟与不同海拔因素之间无交互作用,不同海拔对ET-1、VEGF、ADMA水平的影响与吸烟因素无关。结论健康人由平原地区通过梯度海拔进入高海拔地区可能有助于降低AMS的发生率,在此过程中血清ET-1、VEGF、ADMA水平呈降低趋势。进入高海拔地区导致的血清ET-1、VEGF、ADMA水平变化与吸烟因素无关。

血清ADMA水平、sFlt-1/PlGF比值与子痫前期患者胎盘血流动力学参数的相关性分析

目的 探讨血清不对称二甲基精氨酸(ADMA)水平、可溶性血管内皮生长因子受体-1/胎盘生长因子(sFlt-1/PlGF)比值对发生子痫前期的预测价值及与胎盘血流动力学参数的相关性。方法 选择2019年1月至2021年3月期间在广元市第一人民医院确诊为子痫前期的104例患者作为观察组,另外选取正常孕妇90例作为对照组。观察两组孕妇的血清ADMA、sFlt-1、PlGF水平变化,使用受试者工作特征曲线(ROC)分析观察指标对发生子痫前期的预测价值。采用彩色多普勒超声技术检查胎盘血流动力学变化,并分析其与血清ADMA水平、sFlt-1/PlGF比值的相关性。结果 子痫前期组孕妇血清ADMA、sFlt-1水平均显著高于对照组孕妇(t值分别为7.119、4.206,P<0.01),而血清PlGF水平显著低于对照组孕妇(t=8.866,P<0.01)。子痫前期组孕妇胎盘动脉的搏动指数(PI)、阻力指数(RI)、末期血流速度比值(S/D)均显著高于对照组孕妇(t值分别为4.760、5.810、8.495,P<0.01),而时间平均流速(TAV)显著低于对照组孕妇(t=5.937,P<0.01)。ROC曲线分析显示ADMA诊断子痫前期的曲线下面积(AUC)为0.937(P<0.001),截断值为0.78μmol/L(灵敏度为90.4%,特异度为87.8%);sFlt-1/PlGF比值诊断子痫前期的AUC为0.926(P<0.001),截断值为4.00 (灵敏度为84.6%,特异度为86.7%);联合检测(ADMA+sFlt-1/PlGF)的AUC为0.957(P<0.001),灵敏度为94.2%,特异度为87.9%。Spearman相关性分析结果显示子痫前期患者血清ADMA水平与TAV呈显著负相关(r=-0.613,P<0.001),与PI、RI、S/D比值均呈显著正相关(r分别为0.614、0.465、0.517,P<0.001);子痫前期患者的sFlt-1/PlGF比值与TAV呈显著负相关(r=-0.611,P<0.001),与PI、RI、S/D比值均呈显著正相关(r分别为0.590、0.440、0.520,P<0.001)。结论 子痫前期的患者血清ADMA水平与sFlt-1/PlGF比值明显升高,联合检测两者对子痫前期的发病具有较高的预测价值,并与胎盘血流灌注降低显著相关。

DDAH1对心肌梗死大鼠心室的重构作用及机制

目的观察DDAH1在心肌梗死模型大鼠中的表达,探索DDAH1对心室的重构作用及机制。方法选取120只DDAH1^(KO)大鼠,建立心梗模型后随机分为对照组、假手术组和手术组,每组40只。分别于造模前及造模后第7、14、28天观察左室射血分数、左室舒张末期内径、左室收缩末期内径,采用聚合酶链式反应检测eNOS mRNA、PKG mRNA的表达,蛋白印迹法检测eNOS、sGC蛋白的表达。结果假手术组左室射血分数显著下降,左室舒张末期内径和左室收缩末期内径增大。手术组左室射血分数提高,左室舒张末期内径和左室收缩末期内径减小。与对照组同期比较,假手术组第14、28天eNOS、sGC表达差异均有统计学意义(均P<0.05);手术组第14天eNOS、sGC表达均升高(P<0.05),第28天eNOS、sGC表达均较第14天回落。与假手术组同期比较,手术组第28天eNOS、sGC表达差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论 DDAH1在心肌梗死中能提高左心室功能,与eNOS、sGC表达有关。