‘四季蜜’龙眼花芽总蛋白质提取方法及双向电泳体系的优化

利用TCA丙酮法、丙酮法、TCA酚抽提法和改良酚抽法等4种方法，提取‘四季蜜’龙眼花芽的总蛋白质，在蛋白产量、单mSDS—PAGE和2-DE图谱等方面进行比较，并对IPG胶条种类、蛋白质上样量及等电聚焦条件等进行优化。结果表明：采用改良酚抽法，选用24om、pH3～10的胶条，按120μg上样，在适宜的等电聚焦条件下．可获得背景清晰、重复性好、分辨率高的2-DE图谱．本研究为‘四季蜜’龙眼花芽蛋白质组学后续研究奠定了基础。

四季蜜龙眼花芽形成相关基因SAM的克隆

以四季蜜龙眼花芽为材料,进行了总RNA的提取与纯化,应用RT-PCR技术扩增其3′端序列,经测序和拼接,获得SAM3′末端,共1 253 bp;序列分析表明,与杨树SAM基因同源性达到96%,为龙眼成花机理的深入研究奠定了基础。