基于GC-MS和生物信息学研究丁香挥发油“启郁开闭”防治银屑病的成分及机制

[目的]通过气相色谱-质谱联用仪(GC-MS)鉴定丁香挥发油的成分,生物信息学预测其可能作用机制。[方法]GC-MS分析成分后,使用SwissADME平台对活性成分进行筛选,通过Swiss和GeneCards数据库获取这些活性成分与疾病相关的靶点,再通过Cytoscape软件构建化合物-靶点网络,采用String平台、Cytoscape软件构建靶点蛋白互作(PPI)网络,筛选关键靶点,将核心靶点导入DAVID数据库完成功能富集(GO)和京都基因和基因组百科全书(KEGG)分析,采用GEO芯片进行核心靶点的外部验证和ROC分析,最后利用AutoDock软件进行分子对接验证。[结果]从丁香挥发油中共鉴定出10个主要成分,且均满足“类药五原则”。预测到丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶1(AKT1)、肿瘤坏死因子(TNF)、丝裂原活化蛋白激酶3(MAPK3)、血管内皮生长因子A(VEGFA)、酪氨酸蛋白激酶(SRC)、胱天蛋白酶3(CASP3)等关键靶点,外部验证结果显示6个关键靶点表达均具有差异,TNF具有诊断价值。富集分析得到了117个生物过程和114条信号通路。分子对接实验显示,大多数活性成分与其关键靶点具有良好的结合能力。[结论]丁香挥发油可能通过其中的活性成分如丁香酚等以及关键靶点如AKT1等来调控信号传导、蛋白质磷酸化与细胞分化等多个生物学过程,从而协同发挥防治银屑病的作用。

藏药智托日嘎丸质量标准研究

目的:首次对智托日嘎丸的质量标准开展研究,达到质控目的。方法:对来源不同厂家的5批智托洁白丸样品进行显微鉴别、理化鉴别、薄层色谱鉴别、水分和重量差异进行考察。结果:建立了以寒水石结晶、矮紫堇淀粉粒、矮紫堇花瓣薄壁细胞、诃子石细胞、兔耳草根皮层薄壁组织、川木香纤维为鉴别特征的显微鉴定方法和以正己烷-醋酸乙酯(6∶1);甲苯-乙酸乙酯-甲酸(6∶3∶1)为展开剂,硅胶G薄层板为载体的薄层层析方法。测得智托日嘎丸的水分含量为4.9%~8.6%,平均水分含量为7.4%,重量差异为5.6%~6.9%,符合药典规定的要求。结论:本研究实验中所选用的试剂无毒/低毒,方法操作性强,结果直观,重现性好,能够有效地控制藏药智托日嘎丸质量,可为智托日嘎丸的规范化生产和临床应用提供简便可依的质量控制依据。

丁香温中止痛作用研究

观察了丁香水提物及醚提物对四种胃溃疡,胆汁分泌,小鼠二种腹泻,二种痛刺激,CCl_4诱发大鼠急性肝损伤sGPT和sGOT的影响,说明丁香的温中散寒、治疗脘腹冷痛之功效与其抗胃溃疡、利胆、止泻和镇痛作用有关。

对《中国药典》2010年版丁香药材中丁香酚含量测定方法的探讨

目的改进丁香药材中丁香酚的含量测定方法。方法HPLC法测定丁香酚的含量，流动相为甲醇-1％醋酸水（55：45），检测波长为280nm，并与《中国药典》2010年版一部的测定方法进行比较。结果新建方法测定丁香中丁香酚的含量高于《中国药典》方法，新方法灵敏、准确、重现性好。丁香酚在0．1605—9．6504ug范围内线性关系良好，r=0．9999，平均加样回收率为100．27％，RSD=0．82％。结论HPLC测定法可用于丁香药材的质量控制，为改进丁香的含量测定方法提供依据。

丁香的超微粉碎工艺研究

目的:探讨富含油脂类中药材丁香的超微粉碎工艺。方法:采用单因素试验法选择丁香的超微粉碎方法;采用正交试验法对丁香的气流超微粉碎工艺进行优选,以初粉细度、加入不同种类和不同配比的辅料为影响因素,以粉末收得率、粉末平均粒径、粉末流动性(休止角)及粉末性状为考察指标,确定其最佳超微粉碎工艺。结果:选用气流粉碎得到的超微粉性状最佳,但仍不稳定;正交试验中因素A(初粉细度)和B(辅料品种)对各指标的影响均无显著性意义,因素C(辅料用量)对粉末流动性的影响具有显著性意义,最佳工艺为A1B3C3。结论:本实验得到的超微粉体流动性好,粒度均一,且性状稳定,可以作为丁香的超微粉碎工艺技术进行推广应用。

丁香普通粉与超微粉中丁香酚体外溶出度的比较

目的研究超微粉碎对丁香中丁香酚体外溶出度的影响。方法采用不同pH值的释放介质,模拟胃肠道各段的pH条件;按溶出度转篮法,采用高效液相色谱法测定丁香普通粉与超微粉中丁香酚的体外溶出度。结果丁香超微粉最大累积溶出度为72.17%,粗粉最大累积溶出度为52.42%。结论超微粉碎能促进丁香药材中丁香酚的体外溶出,超微粉碎技术应用于丁香具有可行性和必要性。

丁香有效期的研究

目的:进行中药(中药材及中药饮片)有效期的研究。方法:选用易走油、气味易散失的丁香,通过经典恒温和留样观察试验,采用HPLC测定丁香酚的含量,推导出该药有效成分含量变化规律。结果:经典恒温试验测得的丁香酚含量变化符合一级反应规律。在20℃贮存,丁香酚含量变化的速度常数K20℃=1.557×10-5,该批丁香的有效期为900d。经典恒温与留样观察结果基本一致。结论:用经典恒温试验预测中药有效期的方法可行,得出的有效期结论可靠。

高速逆流色谱法分离制备母丁香和公丁香中的5种非挥发性化合物

应用高速逆流色谱法从母丁香和公丁香中快速分离了3种已知非挥发性化合物,并利用相同方法从公丁香中分离出2种色原酮类化合物。两相溶剂系统A为正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水(5∶8∶6∶13,v/v/v/v),系统B为正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水(5∶8∶9∶10,v/v/v/v),以系统A的上相为固定相,系统A和B的下相为流动相,利用梯度洗脱方式,在主机转速为880 r/min、流速1.2 mL/min条件下,成功地从70 mg母丁香粗提物中分离得到12.3 mg鞣花酸、9.6 mg鼠李素、17.2 mg槲皮素,从50 mg公丁香粗提物中分离得到5,7-二甲氧基-2-甲基色原酮10.2mg、5,7-二甲氧基-2,6-二甲基色原酮8.6 mg,纯度均在96%以上。各化合物的结构均由质谱和核磁共振氢谱、碳谱鉴定。利用该方法可以对丁香不同药用部位中的非挥发性化合物进行有效的分离和纯化。

不同提取方法对丁香精油体外杀螨效果的影响

目的探讨不同提取方法获取的丁香精油对蠕形螨的体外抑杀效果。方法采用水蒸气蒸馏法、乙醇回流法和超临界二氧化碳萃取法获取丁香精油；采用挤黏结合法获取蠕形螨；镜下观察丁香精油对人体蠕形螨的抑杀效果。结果3种提取方法获取的丁香精油对蠕形螨均有较好的抑杀效果，差异无统计学意义，但是超临界二氧化碳萃取法与水蒸气蒸馏法对两种人体蠕形螨抑杀效果比较，差异有统计学意义（P〈0．005），3种提取方法获取的丁香精油对两种人体蠕形螨的抑杀效果与对照组比较，差异均有统计学意义（P〈0．005）。超临界二氧化碳萃取法获取的丁香精油含量最高，3～5min内抑杀效果优于其他方法。结论超临界二氧化碳萃取法因提取率高，提取时间短，无溶剂残留，抑杀蠕形螨效果好，是选择和应用含挥发油类中药材进行抑杀蠕形螨实验的一种首选提取方法。

丁香·厚朴不同溶剂萃取物的抑菌性和抗氧化性研究

[目的]研究丁香、厚朴不同溶剂萃取物的抑菌性和抗氧化性。[方法]利用石油醚、乙酸乙酯对丁香和厚朴的醇提物进行萃取,以食品中常见的8种腐败菌为试验菌种,采用纸片法研究各萃取相的抑菌性;用清除二苯代苦味肼基自由基(DPPH)法和Rancimat法研究各萃取相的抗氧化性。[结果]丁香的石油醚萃取液、厚朴的石油醚萃取液、乙酸乙酯萃取液对食品腐败常见的8种菌有较强的抑菌效果。各萃取液对DPPH自由基基均有较强的清除作用,但丁香的各萃取相提取物清除自由基能力均强于厚朴萃取相。各萃取液对猪油体系抗氧化能力的强弱依次为:厚朴乙酸乙酯萃取液>厚朴石油醚萃取液>丁香乙酸乙酯萃取液>丁香石油醚萃取液>丁香水萃取液>厚朴水萃取液。[结论]该研究为开发天然食品防腐剂和抗氧化剂提供了科学依据。

丁香超微粉对离体大鼠肠活动影响的量效关系研究

目的观察丁香超微粉对离体大鼠肠活动影响的量效关系,探索超微粉碎技术在中药丁香中的应用。方法采用大鼠离体回肠平滑肌肌张力测试法,比较丁香超微粉不同剂量组对离体大鼠肠最大收缩张力的影响,来观察其抑制肠蠕动的作用。结果丁香超微粉对离体大鼠肠收缩有抑制作用,且随着给药浓度的增加,抑制作用增强。结论丁香超微粉对离体大鼠肠收缩具有明显的量效关系,实验将为丁香超微粉在临床中的应用提供一定指导意义。

不同方法提取丁香中挥发油的比较

目的:筛选丁香中挥发油的最佳提取方法。方法:采用6种不同方法提取丁香挥发油,以提取的挥发油体积及挥发油中丁香酚的含量为指标,筛选从丁香中提取挥发油的最佳方法。结果:比较挥发油量及油中丁香酚总量,超临界二氧化碳萃取法明显优于其他5种方法。结论:超临界二氧化碳萃取法因为提取率高,提取时间较短,提取温度较低,而且无溶剂残留,是提取丁香中挥发油值得推广和有前景的一种方法。

丁香的化学成分研究

目的:研究丁香的化学成分。方法:采用各种色谱方法进行分离纯化,根据理化性质和波谱数据鉴定化合物结构。结果:从丁香中分离得到25个化合物,分别鉴定为:阿魏醛(1)、高根二醇(2)、白桦酸(3)、山柰素(4)、山楂酸(5)、香草酸(6)、3,5,3′,4′-四羟基-7-甲氧基黄酮(7)、5-羟甲基糠醛(8)、3,3′,4′-三甲基鞣花酸(9)、2α,3β,19α,23-四羟基乌苏-12-烯-28-酸(10)、eugenol 4-O-β-D-(6′-O-galloyl)glucopyranoside(11)、对-羟基-反式肉桂酸(12)、山柰酚-3-O-β-葡萄糖醛酸苷(13)、木犀草素(14)、杨梅素(15)、鼠李秦素-3-O-β-D-(6″-乙酰)葡萄糖苷(16)、鼠李秦素-3-O-β-D-葡萄糖苷(17)、3,4,3′-三甲基鞣花酸-4′-O-β-D-葡萄糖苷(18)、大豆脑苷Ⅰ(19)、iotroridoside-B(20)、异鼠李素-3-O-β-D-葡萄糖苷(21)、丁香苷Ⅱ(22)、丁香苷Ⅰ(23)、异槲皮苷(24)、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖醛酸甲酯(25)。结论:其中,化合物6、8、10、12、18～20为首次从该植物中分离得到,化合物6、10、12、19和20为首次从该属植物中分离得到。

五种植物挥发油霜抗人体蠕形螨作用的研究

目的:观察五种不同的植物挥发油霜对人体蠕形螨杀灭作用的情况,筛选出新的天然杀螨药物。方法:在室温18℃～26℃,相对湿度为60%～70%的条件下,从我科门诊患者和健康人群的额部、双颊、鼻部、鼻唇沟取蠕形螨,立即加入不同植物挥发油霜,显微镜下观察蠕形螨的存活情况,筛选出此五种植物挥发油中杀螨效果最佳者,又对其进行不同浓度抗蠕形螨作用的显微镜观察。结果:姜黄、丁香、桉叶、珊瑚姜、木姜子这五种植物的挥发油霜均有不同程度的杀灭人体蠕形螨作用,随着药物作用时间的延长,螨虫死亡率明显增高,而其中姜黄油霜的杀螨效果最强,加药后2h螨虫死亡率有显著性差异(P<0.05,与基础霜比;P<0.05,与木姜子油霜比;P>0.05,丁香、桉叶、珊瑚姜、木姜子这四种植物挥发油霜的螨虫死亡率差别无显著性)。桉叶油霜及新肤螨灵霜的杀螨作用次强(P<0.05,与基础霜比)。而且,随着加药时间的延长,姜黄油霜组螨虫形态结构发生变化与基础霜比差异有显著性(P<0.05),而其他的各组与基础霜比差异无显著性(P>0.05)。结论:姜黄、丁香、桉叶、珊瑚姜、木姜子这五种植物挥发油霜有抗人体蠕形螨的作用,其中以姜黄挥发油霜的作用最强。我们的研究为临床治疗蠕形螨的天然药物开发打下了一个基础。

丁香普通粉及超微粉中挥发油的化学成分研究

目的对丁香普通粉及超微粉中挥发油的化学成分进行分析和比较。方法采用水蒸气蒸馏法提取丁香普通粉及超微粉中挥发油,运用气相色谱-质谱联用法对其化学成分进行分析、鉴定和比较,用气相色谱面积归一化法测定各组分的相对百分含量。结果经气相色谱-质谱联用技术,从丁香普通粉中分离出23个峰,从丁香超微粉中分离出27个峰。结论报道了丁香普通粉及超微粉中挥发油的化学成分,为超微粉碎在含挥发油类中药中的应用提供了一定的依据。

丁香郁金配伍的药理研究

丁香郁金配伍属中药配伍禁忌“十九畏”之一，本文就二者单独使用和配伍后的抗炎、镇痛、止泻、抗溃疡等指标进行了动物药效学试验。二药配伍后镇痛、抗炎及止泻作用有下降趋势；抗溃疡作用不受影响；对试验动物胸腺指数和脾脏指数无明显影响。实验结果，二者配伍似属“相恶”。

清咽利喉胶囊的质量标准研究

目的建立清咽利喉胶囊(丁香、甘草、诃子等)的质量标准。方法采用薄层色谱法对处方中丁香、冰片、甘草、诃子予以鉴别;丁香酚、甘草酸的定量测定采用高效液相色谱法。应用Diamonsil C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,丁香酚以甲醇-0.14%磷酸溶液(65∶35)为流动相,体积流量为1 mL/min,检测波长为280 nm,柱温为30℃;甘草酸以甲醇-0.2 mol/L醋酸铵溶液-冰醋酸(67∶33∶1)为流动相,体积流量为1 mL/min,检测波长为250 nm,柱温为30℃。结果薄层色谱检出了丁香、冰片、甘草、诃子,特征斑点分离清晰,阴性对照无干扰。丁香酚在0.248～1.490μg范围内,与峰面积具有良好的线性关系,相关系数为0.999 9;平均回收率为98.27%,RSD为1.06%(n=9)。甘草酸在0.098 5～0.344 6μg范围内,与峰面积具有良好的线性关系,相关系数为0.999 8;平均回收率为98.53%,RSD为1.09%(n=9)。结论该方法灵敏准确、专属性强、重复性好,可用于清咽利喉胶囊的质量控制。

基于有效基准特征图谱质量表征的丁香质量评价研究

目的建立基于丁香有效基准特征图谱的质量表征模式、方法与质量评价应用,以精准、有效地评价丁香饮片质量。方法以确定有促胃动力作用的丁香饮片作为饮片基准,以具有促胃动力功效的代表性成分及其含量作为质量表征基准点,采用HPLC-PDA建立丁香有效基准特征图谱,基于对照品模拟基准点的有效基准特征图谱质量表征信息作为评价丁香饮片质量标尺,并对其准确性进行佐证及质量评价应用与验证。结果以丁香饮片S10(饮片基准)中的丁香酚作为质量表征基准点(保留时间:65.198分钟、检测溶液中含量:1.574 mg/mL),并以丁香酚对照品准确模拟其基准点,分别对丁香有效饮片(基准)进行质量表征,结果佐证了检测方法的可行性及检测结果的准确性。以模拟基准点为基准得到的丁香有效基准特征图谱质量表征信息(质量标尺)为:特征峰数目、相对保留时间、相对峰面积,5个代表性成分(异槲皮苷、没食子酸、丁香酚、山楂酸、齐墩果酸)的相对含量;涵盖了丁香药学架构中黄酮类、酚酸类、苯丙素类、三萜类四种主要的化学类型。采用所构建的丁香质量评价模式及其质量基准标尺对14批丁香饮片的质量进行评价得出:饮片S13,S2,S9,S14,S15,S3和S7质量较优;且基于换算系数得到的5个代表性成分的含量皆与实测值基本一致。结论建立的基于丁香有效基准特征图谱的质量表征模式、方法能够整体、准确地对丁香饮片进行质量表征,且可以有效、精准、简易地评价丁香饮片质量。

醒脑酊质量控制方法的研究

目的 :建立醒脑酊的质量控制方法。方法 :采用薄层色谱法对醒脑酊中的薄荷脑、丁香、冰片进行定性鉴别 ;并采用气相色谱法对该药中的薄荷脑进行含量测定。气相色谱条件 :以萘为内标物 ,填充玻璃柱 (2 .1mm× 3 .2m ,Shimadzu 7G ,) ,载气N2 ,流速 50mL·min- 1 ,柱温 1 4 5℃ ;进样口及检测器温度 1 80℃ ,不分流方式进样 ,进样量3μL。 结果 :薄层色谱图斑点清晰 ,阴性对照无干扰 ;气相色谱法精密度、重现性良好 ,平均加样回收率为 98.4% ,RSD=0 .9%。结论 :本方法快速简便 ,结果准确 。

蒙成药中丁香薄层色谱鉴别研究

目的 :对高勒图 -宝日 -6等不同剂型的 15种蒙成药中丁香的鉴别进行研究。方法 :采用薄层色谱对丁香进行鉴别。结果 :找到一种比较简单的供试液的制备方法和薄层色谱条件。结论 :该法同样适用于啊嘎日 -35等大复方散、丸剂 ,而且斑点清晰 ,重现性好。