目的:应用网络药理学联合分子对接技术探讨定志小丸干预阿尔兹海默病(Alzheimer’s disease,AD)的作用机制。方法:通过TCMSP数据库及文献检索收集与查询定志小丸的组分化学成分信息;应用PubChem和SwissTargetPrediction数据库收集药物...目的:应用网络药理学联合分子对接技术探讨定志小丸干预阿尔兹海默病(Alzheimer’s disease,AD)的作用机制。方法:通过TCMSP数据库及文献检索收集与查询定志小丸的组分化学成分信息;应用PubChem和SwissTargetPrediction数据库收集药物化学成分靶点、GeneCards数据库收集AD靶点;利用DAVID数据库对共有靶点进行基因本体(GO)功能及京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析;使用Cytoscape软件构建成分与靶点等相关网络图,以筛选主要成分与靶点进行分子对接研究。采用水迷宫实验、ELISA和Western blot法检测定志小丸干预APP/PS1小鼠的作用情况。结果:共整理得到定志小丸的52个成分及其对应的881个靶点,AD靶点9599个,二者共同靶点101个,富集分析发现共同靶点主要参与细胞活力、缺氧应答等生物过程,及PI3K/AKT信号通路、缺氧诱导因子-1(HIF-1)信号通路、肿瘤坏死因子(TNF)信号通路等。分子对接结果显示,人参的二十碳-11,14,17-三烯酸甲酯、石菖蒲的环阿屯醇、茯苓的麦角甾烷-7,22-二烯-3β-醇及远志的3,6’-二芥子酰基蔗糖等成分能与热激蛋白90家族α类别A成员1(Heat Shock Protein 90 Alpha Family Class A Member 1,HSP90AA1)、表皮生长因子受体(Epidermal Growth Factor Receptor,EGFR)、Janus激酶3(Janus kinase 3,JAK3)、丝裂原活化蛋白激酶8(Mitogen-Activated Protein Kinase 8,MAPK8)等靶点良好对接。试验结果发现定志小丸明显改善APP/PS1小鼠的学习记忆能力,降低4-羟基壬烯酸(4-HNE)、白介素-6(IL-6)、TNF-α含量,下调磷酸化Janus激酶3(p-JAK3)和HSP90的表达,明显增加超氧化物歧化酶(SOD)活力和上调磷脂酰肌醇-4,5-二磷酸3-激酶催化亚单位α(PIK3CA)蛋白表达(P<0.05)。结论:定志小丸可能是通过二十碳-11,14,17-三烯酸甲酯、环阿屯醇、麦角甾烷-7,22-二烯-3β-醇和3,6’-二芥子酰基蔗糖等关键成分作用于HSP90、JAK3、PI3KCA等靶点改善神经元活力、氧化应激和减轻炎性反应,从而干预AD。展开更多
文摘目的:应用网络药理学联合分子对接技术探讨定志小丸干预阿尔兹海默病(Alzheimer’s disease,AD)的作用机制。方法:通过TCMSP数据库及文献检索收集与查询定志小丸的组分化学成分信息;应用PubChem和SwissTargetPrediction数据库收集药物化学成分靶点、GeneCards数据库收集AD靶点;利用DAVID数据库对共有靶点进行基因本体(GO)功能及京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析;使用Cytoscape软件构建成分与靶点等相关网络图,以筛选主要成分与靶点进行分子对接研究。采用水迷宫实验、ELISA和Western blot法检测定志小丸干预APP/PS1小鼠的作用情况。结果:共整理得到定志小丸的52个成分及其对应的881个靶点,AD靶点9599个,二者共同靶点101个,富集分析发现共同靶点主要参与细胞活力、缺氧应答等生物过程,及PI3K/AKT信号通路、缺氧诱导因子-1(HIF-1)信号通路、肿瘤坏死因子(TNF)信号通路等。分子对接结果显示,人参的二十碳-11,14,17-三烯酸甲酯、石菖蒲的环阿屯醇、茯苓的麦角甾烷-7,22-二烯-3β-醇及远志的3,6’-二芥子酰基蔗糖等成分能与热激蛋白90家族α类别A成员1(Heat Shock Protein 90 Alpha Family Class A Member 1,HSP90AA1)、表皮生长因子受体(Epidermal Growth Factor Receptor,EGFR)、Janus激酶3(Janus kinase 3,JAK3)、丝裂原活化蛋白激酶8(Mitogen-Activated Protein Kinase 8,MAPK8)等靶点良好对接。试验结果发现定志小丸明显改善APP/PS1小鼠的学习记忆能力,降低4-羟基壬烯酸(4-HNE)、白介素-6(IL-6)、TNF-α含量,下调磷酸化Janus激酶3(p-JAK3)和HSP90的表达,明显增加超氧化物歧化酶(SOD)活力和上调磷脂酰肌醇-4,5-二磷酸3-激酶催化亚单位α(PIK3CA)蛋白表达(P<0.05)。结论:定志小丸可能是通过二十碳-11,14,17-三烯酸甲酯、环阿屯醇、麦角甾烷-7,22-二烯-3β-醇和3,6’-二芥子酰基蔗糖等关键成分作用于HSP90、JAK3、PI3KCA等靶点改善神经元活力、氧化应激和减轻炎性反应,从而干预AD。
