Three New Diarylpropanes from Dioscorea composita

Three new diarylpropanes were isolated from the dried rhizomes of Dioscorea composita Hemsl., and their structures were determined as 1, 3-bis-(2-hydroxy-4-methoxyphenyl) propane (1), 1, 3-bis-(2, 4-dihydroxyphenyl)propane (2), 1-(2′-hydroxy-4′-O-β-D- glucopyranosy- phenyl)-3-(2′′, 4′′-dihydroxyphenyl)propane (3), by spectroscopic analysis, respectively.

墨西哥菊叶薯蓣茎段再生繁殖技术

【目的】建立高效稳定的菊叶薯蓣组织培养快繁体系,以保持品种的遗传稳定性。【方法】分别以室内和田间培育的墨西哥菊叶薯蓣藤茎茎段为外植体起始材料,比较依次用0.55%次氯酸钠、体积分数70%酒精和1.0g/L HgCl2消毒不同时间对外植体的消毒效果,并通过不同植物生长调节剂及其浓度组合筛选适合菊叶薯蓣组培快繁的茎段不顶芽诱导培养基、继代培养基和生根培养基。【结果】以室内培养的墨西哥菊叶薯蓣藤茎为起始材料,依次用0.55%次氯酸钠消毒5 min,体积分数70%酒精消毒1 min,1.0 g/L HgCl2消毒8 min,最后用无菌水清洗3次,获得材料的污染率可控制在5%;筛选出茎段不定芽诱导培养基为MS+3.0 mg/L BA+0.2 mg/L NAA,不定芽诱导数可达4.3个,诱导率达95%,且不定芽质量较好;将分化的不定芽转至MS+1.0 mg/L BA+0.2 mg/L IBA继代培养基,单茎芽增殖率可达到3.5;茎芽在1/2 MS+1.0 mg/L IBA生根培养基上可以诱导出良好的根系。【结论】按上述方法培育的菊叶薯蓣生根试管苗炼苗后,移栽至珍珠岩+粗沙+田园土按体积比2∶1∶1配置的介质中,移栽成活率可以达到85%以上,表明所建立的墨西哥菊叶薯蓣组培快繁体系是可行的。

分光光度法测定菊叶薯蓣中薯蓣总皂甙含量的研究

采用紫外分光光度计测定菊叶薯蓣中薯蓣总皂甙含量,确定薯蓣总皂甙的最大吸收波长为480nm,最佳实验条件为:5%香草醛-冰醋酸溶液的加量0.2mL,高氯酸溶液的加量0.8mL,水浴温度70℃,水浴时间15min。精密度实验的相对标准偏差(RSD)为1.25%,加标回收率实验的平均回收率为98.87%。该方法具有操作快捷、精密度高、重现性好等优点。

菊叶薯蓣引种栽培试验

通过试验,菊叶薯蓣引到陕西汉江流域安康栽植,采用5-10℃温棚和覆土80 cm可以安全越冬,第3年单株产量达1.48 kg、皂素含量3.01%,产量和皂素含量均高于当地的盾叶薯蓣。

水杨酸对菊叶薯蓣中薯蓣皂素生物合成的影响

薯蓣皂素为甾体激素药物合成起始原料,主要来源于菊叶薯蓣等薯蓣属植物的块茎或根状茎,因而关于提高菊叶薯蓣中薯蓣皂素含量的研究有重要意义。利用水杨酸处理菊叶薯蓣的离体植株,研究其对薯蓣皂素生物合成的影响及作用机制。100μmol·L-1的水杨酸处理使薯蓣皂素积累量最大,且提高了叶绿素含量和可溶性糖含量,降低可溶性蛋白含量。半定量RT-PCR检测基因表达发现,除了法尼基二磷酸(FPP)基因,水杨酸增强菊叶薯蓣角鲨烯合酶(SQS)基因、甲基戊二酰辅酶A还原酶(HMGR)基因、环阿屯醇合成酶(CAS)基因的表达。研究结果为提高菊叶薯蓣中薯蓣皂苷的含量、揭示水杨酸促进薯蓣皂素生物合成的机制等研究提供了基础。

基于4种皂苷的定量分析评价干燥方式对菊叶薯蓣有效成分的影响

目的建立HPLC-ELSD法同时测定菊叶薯蓣中4种皂苷的含量,评价干燥方式对菊叶薯蓣有效成分的影响。方法采用HPLC-ELSD的方法同时测定菊叶薯蓣鲜品及不同干燥方式所获得的干品中原薯蓣皂苷、伪原薯蓣皂苷、重楼皂苷Ⅱ、薯蓣皂苷的含量。结果结果表明菊叶薯蓣中4种皂苷的含量在不同干燥方式所获得的干品及鲜品之间存在差异:与鲜品相比,60℃热风干制后4种皂苷的含量变化最小;阴干法干制后4种皂苷的含量差异较大,其中原薯蓣皂苷含量下降显著,薯蓣皂苷含量上升明显,伪原薯蓣皂苷、重楼皂苷Ⅱ含量均有所升高;晒干法干制后4种皂苷的含量与阴干法的含量变化趋势相似。结论HPLC-ELSD同时定量测定多种皂苷的方法,可用于菊叶薯蓣及其他含皂苷类药材的质量控制,60℃热风干制是保障菊叶薯蓣有效成分的最优产地干燥技术,可为菊叶薯蓣的产地加工及质量控制提供参考。

生物发酵菊叶薯蓣富集薯蓣皂苷的研究

目的通过响应面分析法优化菊叶薯蓣的发酵条件,富集菊叶薯蓣中的薯蓣皂苷。方法采用响应面分析法,设计三因素三水平实验,考察发酵时间、发酵温度、接种量对菊叶薯蓣中薯蓣皂苷含量的影响。采用HPLC-ELSD测定薯蓣皂苷的含量。结果回归模型分析表明二次回归方程能够用于菊叶薯蓣生物发酵条件的优化(R^(2)=0.9685),最佳发酵条件为发酵时间47 h、发酵温度33.4℃、接种量16.3%。结论响应面分析法能够优化菊叶薯蓣的发酵条件并实现薯蓣皂苷的富集,为菊叶薯蓣的进一步研究与利用提供参考。

菊叶薯蓣不同发育时期块茎内参基因的筛选

薯蓣皂苷元为重要的药物原料。为初步分析菊叶薯蓣(Dioscorea composita)块茎中薯蓣皂苷元合成关键基因的表达,筛选稳定表达的内参基因至关重要。根据已建立的菊叶薯蓣转录组数据库和已报道的传统内参基因,筛选出ubiquitin-conjugating enzyme E2(UBC7)、MMS ZWEI homologue 3(MMZ3)、tubulin beta-7(TUB7)、actin 1(ACT1)、glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase C subunit 1(GAPC1)、elongation factor 1-alpha(EF-1α2)、cyclophilin 5(CYP5)、histone H2A2(H2A2)共8个候选内参基因,利用实时荧光定量PCR(qPCR)技术,结合Ge Norm、Norm Finder和Best Keeper三个统计学软件进行分析。结果表明,在菊叶薯蓣块茎不同发育过程中,TUB7和H2A2表达最稳定,为最佳内参基因。本研究为探究薯蓣皂苷元合成途径分子机理提供参考。