银杏叶和柿子叶黄酮类化合物提取条件优化研究

以黄酮类化合物提取率为评价指标,考察料液比、超声波功率及水浴时间对银杏叶和柿子叶提取的影响.采用超声波辅助水溶液提取法对银杏叶及柿子叶进行提取,通过单因素试验确定料液比、超声波功率及水浴时间的较佳范围;在此基础上设计3因素3水平正交试验优化试验条件.通过正交试验结果确定,银杏叶的最佳提取工艺为料液比1:20,超声波功率144 W,水浴时间1.0 h,在此条件下,黄酮类化合物的提取率为4.18%;柿子叶的最佳提取工艺为料液比1:35,超声波功率126 W,水浴时间2.0 h,在此条件下,黄酮类化合物的提取率为2.54%.通过该工艺银杏叶和柿子叶黄酮类化合物提取率较高,为银杏叶和柿子叶提取物应用于化妆品行业提供参考.

柿叶黄酮类物质的乙醇提取工艺及其抗氧化性的研究

研究了用乙醇提取柿叶中黄酮类物质的工艺条件,并对其进行了抗氧化性能的初步探讨。通过正交试验得出了柿叶中黄酮类物质的提取工艺在提取时间为3h条件下的最佳参数组合为:乙醇浓度为80%,料液比为1∶25,提取温度为85℃。抗氧化试验表明柿叶中黄酮类物质可有效地延缓油脂脂质过氧化反应,其抗氧化性明显优于VC和茶多酚,表明黄酮类物质是一种很有潜力的天然、安全、高效的油脂抗氧化剂。

柿叶黄酮类化合物提取方法和抗氧化性的研究

采用不同的方法提取柿叶中的黄酮类化合物 ,比较不同提取方法的提取效率及提取物中黄酮类化合物的含量 ,从而探讨最佳的提取方法并对柿叶提取物抗氧化性进行了研究。结果表明 :体积分数 75 %乙醇提取法较佳 。

柿叶的化学成分研究(Ⅰ)

Five triterpenoidal compounds were isolated from the ethanol extracts of Diospyros kaki leaves and identified as uvaol(1),oleanolic acid(2),betulinic acid(3),19α hydroxyursolic acid(4) and 19α,24 dihydroxyursolic acid(5).Compound 5 was isolated from Diospyros genus for the first time.

柿叶黄酮化合物分离制备

应用高速逆流色谱法和制备型高效液相色谱法分离制备柿叶黄酮化合物并进行初步结构鉴定。采用乙酸乙酯-甲醇-水(5:1:5,V/V)做溶剂系统,在主机转速850r/min、流速1.5mL/min、检测波长254nm条件下进行HSCCC分离纯化,所得流分浓缩干燥后再采用制备型HPLC分离制备柿叶黄酮化合物,所得产物采用HPLC检测并进行显色反应、紫外图谱和质谱分析。结果表明,从柿叶粗提物中分离所得4种化合物是以槲皮素和山奈酚为苷元的黄酮苷类化合物。

柿叶提取物对高血糖大鼠血糖及肝糖原含量的影响

目的:通过研究柿叶提取物对高血糖大鼠的血糖及肝糖原含量的影响,初步探讨柿叶的降血糖作用及其机制。方法:采用四氧嘧啶制备高血糖大鼠模型,葡萄糖氧化法测定大鼠的空腹血糖,并通过对肝脏组织匀浆糖原含量生化测定和肝脏组织糖原染色及病理评分来初步评价药物对肝糖原含量的影响。结果:与高糖模型组比较,柿叶提取物组可显著降低空腹血糖(P<0.01),明显增加肝糖原含量(P<0.01),增高糖原染色评分。结论:柿叶提取物具有显著的降血糖作用,并能增加肝糖原的含量。

柿树乙醇脱氢酶活性与可溶性单宁含量的关系

研究了4种不同脱涩类型柿(Diospyros kaki Thunb.)果实和叶片中的可溶性单宁含量、乙醇脱氢酶(alcohol dehydrogenase,ADH)活性和ADH最适反应温度,以了解ADH在脱涩过程中的作用。结果表明:不完全甜柿和完全甜柿果实发育前期,可溶性单宁含量逐渐降低,ADH活性逐渐增高,到果实基本完成脱涩后,ADH活性又开始降低,在不完全甜柿中变化较大;涩柿和不完全涩柿在果实近熟期,可溶性单宁含量有所下降,但不能完成脱涩,且ADH活性较低。叶片发育过程中,可溶性单宁含量的变化与ADH没有相关性。ADH的最适反应温度在25℃左右。ADH与柿果实脱涩有一定关系。

湖北省柿子产业现状及发展对策

湖北省柿子种质资源丰富,拥有我国唯一原产的甜柿种质——罗田甜柿,是我国甜柿生产的最适宜区域之一。经过考察调研,基本摸清了湖北省柿子产业的生产现状及存在的问题,提出了促进湖北省柿子产业可持续发展的对策。

柿EST-SSR引物的开发及筛选

为丰富柿树SSR引物来源,利用从NCBI下载的9 474条柿属EST序列开发柿EST-SSR引物,并用于分析7个柿品种的遗传多样性。EST序列经去除低质量及冗余片段后拼接成1 390条重叠序列和4 097条无重复序列。共搜索到601条EST序列中含有540个SSR。SSR出现频率为10.96%,其中以2核苷酸为主(61.06%)。利用检出的SSR-ESTs序列设计SSR引物100对,对7个柿样品进行了PCR扩增,31对引物有扩增带,占设计引物的31%,其中14对引物有多态性,占可扩增引物的45.2%。同时发现引物68是临潼板柿的特异引物。引物68的P68-115、P68-160和P68-210处为临潼板柿的3个特异性标记位点,而引物28的P28-225是麻城秋艳的特异性标记位点。

基于IRAP技术的磨盘柿变异单株鉴定

以已知亲子关系的柿品种、柿近缘种和磨盘柿标准品种为对照,对采自北京市房山区磨盘柿产区的部分变异单株进行了IRAP分析。结果表明,19条逆转座子引物中的4个(rtdk13-f5,rtdk16-r10,rtdk4-p3和rtdk2-p6)可将供试11份变异单株完全区分;供试变异单株间的相似系数在0.90～0.98(平均0.94),与磨盘柿标准品种的相似系数为0.91,大于种间和品种间相似系数,与芽变类型及其母株间的相似系数接近;聚类分析结果表明,变异单株与磨盘柿标准品种紧密相聚,分支模式与种间及品种间明显有别。因此,供试11份变异单株已发生部分遗传物质改变,且可能为磨盘柿芽变。IRAP可区分遗传背景高度相似的种质间的微小变异,可望在果树芽变鉴定中应用。

柿叶黄酮的大孔吸附树脂分离提纯富集

目的研究8种不同类型吸附树脂对柿叶黄酮的吸附特性。方法测试它们对柿叶黄酮的吸附率、吸附速率、解吸率和产物得率及其黄酮含量。结果发现聚酰胺和AB8树脂对柿叶黄酮吸附量大,吸附快、解吸容易,吸附后产物黄酮含量高。结论聚酰胺和AB8树脂是一种性能良好的柿叶黄酮吸附剂,可用于从柿叶提取物中富集制备含量达70%以上的柿叶黄酮,为柿叶黄酮的开发提供新工艺。

罗田甜柿Ty1-copia类逆转座子RNaseH-LTR序列的分离和特性分析

逆转座子序列信息的获得,对了解其在基因组中的行为及系统学研究有重要价值。本试验从罗田甜柿(Diospyros kaki Thunb.‘Luotian-tianshi’)基因组中分离出31个RNaseH-LTR(long terminal repeat,长末端重复)序列,并利用逆转座子间扩增多态性(inter-retrotransposon amplified polymorphism,IRAP)技术对部分序列相应的逆转座子家族在柿属植物中的转座活性及分布情况进行初步探讨。序列分析结果表明,至少有10个Ty1-copia类逆转座子家族得到扩增;其家族间普遍表现高度异质,碱基替换、插入或缺失突变,以及翻译成氨基酸后发生不同程度的终止密码子突变、氨基酸取代和移框突变等,是产生高异质性的原因;此外,其家族内部某些序列间的相似性极高,可能是寄主基因组与逆转座子间互惠关系的体现。应用部分逆转座子引物的IRAP分析结果表明,相应的逆转座子家族在柿属植物中普遍存在,其分布广泛,拷贝数高,转座活性强,具有进一步开发为多种逆转座子分子标记的潜力。

柿叶提取物对实验性糖尿病大鼠的药理作用研究

目的:观察柿叶提取物对糖尿病大鼠模型降糖、降脂、抗氧化作用,并初步探讨其作用机制。方法:采用链脲佐菌素(STZ)结合高脂高糖饲料喂养诱导建立糖尿病大鼠模型,给予柿叶提取物灌胃14天,测定血糖含量并分别测定血清TC、TG、HDLC、LDLC、SOD、MDA含量,并观察对肝脏组织形态的影响。结果:与模型组比较,柿叶提取物组可显著降低空腹血糖,并降低血清中甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LD-LC),显著提高高密度脂蛋白胆固醇(HDLC),并具有提高血清SOD活力,降低血清MDA含量的作用。结论:柿叶提取物对实验性糖尿病大鼠具有降低血糖,调节血脂和抗氧化作用。

罗田甜柿种质资源ISSR分子标记初步鉴定

分别采集湖北省罗田县、麻城市自然分布的28、8株罗田甜柿(Diospyros kaki Thunb cv.Oriental persimmon)古树优系及小涩柿、无核、宝盖、秋焰甜柿优系为研究材料,利用简单重复序列间扩增分子标记(Inter simple sequence repeat,ISSR)技术对40个甜柿优系进行初步认证及亲缘关系分析。结果表明:1从21条ISSR引物中筛选出了9条能够扩增出清晰、稳定条带的引物,9条引物共扩增出185条谱带,其中多态性条带有185条,多态性条带比率为100%;2应用NTSYS2.10e软件对扩增结果进行非加权组平均法(Unweighted pair-group method with arithmetic means,UPGMA)聚类分析,40个甜柿优系大致被分为两大类,遗传相似系数从0.39到0.92;3罗田甜柿古树基因资源丰富,每个基因型都有其独特的指纹图谱,遗传多样性高。罗田甜柿优系间的亲缘关系与地理来源有一定的相关性,麻城市与罗田县地理位置交界区域的罗田甜柿资源相对集中在A区,其他地理位置采集优系集中在B区。分析结果可为罗田甜柿种质资源开发、基因资源保存、后期品种审定及鉴别提供理论依据。

杀青工艺对柿叶绿茶活性成分的影响

研究了杀青工艺条件对安溪油柿叶绿茶类黄酮、维生素C、多酚和游离氨基酸等活性成分的影响。结果表明:柿叶鲜叶不切,直接以炒青机炒青有利于保留柿叶绿茶类黄酮、多酚和游离氨基酸等活性成分;低温短时杀青有利于柿叶绿茶活性成分的保留,杀青条件以120℃,1min最佳。

超临界CO_2萃取柿叶精油的工艺研究

通过单因素试验和正交试验研究了超临界流体萃取柿叶精油的影响因素,并对生产工艺进行了优化设计。试验结果表明,萃取压力、萃取温度、CO2流量、萃取时间对萃取得率的影响程度依次递减。最佳工艺条件为,100g柿叶在萃取压力18MPa、萃取温度50℃、CO2流量20kg/h、萃取时间2.5h,得率为3.1%。用超临界CO2萃取柿叶精油比水蒸气法蒸馏的柿叶精油得率提高了55%,萃取物纯度高,有浓郁的柿果香味,色淡黄。

第五届国际柿学术研讨会总结报告

介绍了第五届国际柿学术研讨会(2012年10月20-26日,武汉-恭城)概况;主要基于该会议提供的资料和信息,总结了世界范围内柿学和柿业现状和发展趋势,分析了我国柿生产和科学研究取得的成就及其与先进国家间的差距,并对未来我国柿产业的发展提出了若干建议。

柿树寄主的桑寄生科7种不同属种桑寄生药用植物中槲皮苷含量分析

目的：测定柿树寄主的桑寄生科7种不同属种的桑寄生药用植物中槲皮苷含量。方法：采用HPLC法对柿树寄主的桑寄生科7种不同属种桑寄生药用植物槲皮苷含量进行测定，样品采用甲醇超声提取方法制备，用Inertsil ODS-SP 色谱柱（150 mm×4.6 mm，5μm），甲醇-0.1%磷酸溶液（52：48）为流动相，流速1.0 mL·min-1，检测波长254 nm。结果：槲皮苷的线性范围0.21-350.00 mg·L-1（ r =0.9999），平均回收率为98.86%，RSD=2.31%。桑寄生科7种不同属种药用植物茎枝中槲皮苷含量为0.3589-3.6770 mg·g-1，叶中槲皮苷含量为5.0091-76.3813 mg·g-1。结论：桑寄生科不同属种桑寄生药用植物槲皮苷的含量各不相同，主要存在于叶中，而茎枝中的含量较低。

柿树乙醇脱氢酶在果实发育期及不同器官间的分布特点

为研究不同类型柿果实的脱涩与乙醇脱氢酶(ADH)之间的关系,采用聚丙烯酰胺凝胶电泳法,对4种类型的5个柿品种不同部位和果实不同发育时期的ADH进行了同工酶分析。结果表明:成熟期的果实中,不同脱涩类型柿果实的ADH均表现2条谱带,完全甜柿和不完全甜柿果实的ADH酶带谱型一致,不完全涩柿果实的ADH酶带中独有一条更靠近负极的谱带,而完全涩柿中则没有检测到ADH同工酶带;果实发育过程中,2个完全甜柿出现酶带的时期较早,分别在7月中旬和8月中旬,不完全甜柿和不完全涩柿则在果实发育后期(8月底和9月中旬)出现酶带,而完全涩柿果实从始至终都没有出现ADH同工酶带。不同器官的ADH同工酶电泳结果表明,果实成熟时在不同器官中共检测到5条ADH同工酶谱带,其中酶带b、酶带d、酶带b和c分别是柿果实、叶片、枝皮的特征性酶带,说明ADH同工酶具有器官特异性。本试验初步研究了柿果实发育过程中ADH在不同器官的分布特点,为进一步研究ADH在柿不同脱涩类型果实脱涩机制中的作用及其相关基因表达提供参考。