云南盘鮈属Discogobio鱼类四新种

作者对分布于云南的盘鮈属(Discogobio)鱼类进行了整理,发现其中四个是以往文献中所没有记载过的新种,定名为多鳞盘鮈Discogobis polylepos,sp.nov.长鳔盘鮈D.macrophysallidos,sp.nov.长体盘鮈D.elongatus,sp.nov.短鳔盘鮈D.brachyphysallidos,sp.nov.现记述如下。新种的全模标本均保存于中国科学院昆明动物研究所。

温度对云南盘鮈仔稚鱼生长及存活率的影响

为探究不同温度对云南盘鮈(Discogobio yunnanensis)仔稚鱼生长及存活率的影响,实验设置14、17、20、23和26℃五个温度梯度,以刚出膜且发育正常的云南盘仔鱼为实验对象,定期观察仔稚鱼的生长发育情况并统计死亡数量,测定全长、体长、体重等生长参数。结果显示:温度显著影响云南盘鮈仔稚鱼的生长发育及存活。随着温度的升高,发育进程加快;实验结束时,23℃组云南盘鮈口吸盘最早发育完整,20℃组云南盘鮈存活率最高。在整个实验过程中,20、23和26℃组间全长和体重无显著性差异,说明这几个温度对云南盘的全长、体重生长产生的效应大致相同。综合多种因素考虑,建议在实际生产中,以20~26℃作为云南盘的养殖温度。

多线盘精卵生物学特性及几种因子对精子活力的影响

以繁殖季节多线盘(Discogobio multilineatus Cui)性成熟个体为对象,研究其精子和卵子的生物学特性,并探究了不同因子对其精子活力的影响。结果显示:多线盘精子由头、颈和鞭毛三部分组成,头部呈圆形,颈部不易观察;精子密度为(6.16±0.65)×108 ind/mL;pH为7.3~7.6,偏碱性;成熟卵子为淡黄色,卵径(2.1±0.03)mm,吸水膨胀后卵径(3.6±0.04)mm;绝对繁殖力为197~2089粒,相对繁殖力为21~71粒/g;绝对繁殖力(AF)与体重(BW)和卵巢重(OW)呈显著正相关,与体长(SL)相关性较差。不同水体中精子活力和寿命不同,以红水河水最好,有效运动时间为(16.61±1.90)s,寿命为(28.83±3.94)s;NaCl浓度在0.3%~0.6%范围内精子活力较好,NaCl浓度0.45%时,有效运动时间为(19.51±1.72)s,寿命为(32.83±5.22)s;pH在7.0~9.0时精子活力较好,pH为8.0时,有效运动时间为(17.61±0.69)s,寿命为(27.17±1.51)s;精子原液在4℃下可暂存3 h且不影响其活力。

云南盘鮈消化系统解剖学、组织学及消化酶活性研究

采用形态学、组织学及酶学方法对云南盘鮈(Discogobio yunnanensis)成体消化系统进行研究。结果表明,云南盘鮈消化系统有以下特征:口下位,口腔上皮分布有较多味蕾及杯状细胞,食道粗大,含有大量黏液细胞,无胃,肠道较长,盘旋于体腔中,成鱼盘旋10回,肠道系数为5.06±0.61,肠分为前中后三段,肠腔中密布肠绒毛。消化腺为肝胰脏,肝脏分为左右两叶,胰脏弥散分布在肝脏中。消化系统不同部位消化酶活性大小不同,脂肪酶活性:肝胰脏>前肠>中肠>后肠,胰蛋白酶、淀粉酶、碱性磷酸酶活性:前肠>中肠>肝胰脏>后肠。云南盘鮈口下位,食道粗短,肠道细长,肠绒毛丰富,肠道含较高的胰蛋白酶和淀粉酶活性,消化系统所具有的这些特征与其以固着藻类为食有关。

云南盘鮈肌肉营养成分分析与营养评价

采用常规生化分析方法对云南盘鮈含肉率和肌肉营养成分进行测定分析。结果表明:云南盘鮈含肉率为(66.62±4.46)%,肌肉中水分、粗蛋白质、粗脂肪和粗灰分的含量分别为(76.10±0.91)%、(20.24±0.05)%、(1.32±0.17)%和(1.30±0.02)%(以鲜质量计)。肌肉中含18种氨基酸,总量为(79.78±4.22)%,8种人体必需氨基酸总量为(33.05±1.62)%(以干质量计),占氨基酸总量的41.43%,必需氨基酸的构成比例符合联合国粮农组织/世界卫生组织的标准;云南盘鮈的第一限制性氨基酸为色氨酸,必需氨基酸指数为68.09,4种鲜味氨基酸总量为30.47%(以干质量计),肌肉中单不饱和脂肪酸、多不饱和脂肪酸、二十碳五烯酸+二十二碳六烯酸在总脂肪酸中含量分别为(27.93±2.67)%、(40.28±2.54)%和(29.23±2.77)%;肌肉矿物元素含量丰富,微量元素中锌含量较高。云南盘鮈营养价值较高、味道鲜美,具有较高的开发利用价值。

盘鮈属鱼类的分类研究及两新种记述(鲤形目:鲤科)

盘鮈属是我国鲤科鱼类的一个特有属,过去已记录7种,因早期发表的云南盘鮈原始描述简略,国内又无人察看过模式标本,造成一些种名归属混乱。本工作在核对多数种的模式标木或地模标本的基础上,对盘鮈属鱼类的分类性状重新估价,认为多鳞盘鮈 D.polylepis Huang不能成立,为长鳔盘鮈 D.macrophysallidos Huang的同物异名,予以归并,经整理本属鱼类可分为8个种,其中具2个新种,文中给出了分种检索表,还就过去分类中存在的其他问题进行了讨论。

盘鮈属鱼类口吸盘的形态分化及其意义

本文从研究盘鮈属鱼类口吸盘的形态结构入手,探讨它们口吸盘结构分化的进化意义和生物学意义。具大、小吸盘的两个类群是盘鮈鱼类在演化进程中分化成的两个自然类群,它们为适应不同的栖息环境,吸盘的微观结构和须的长短等进一步分化,分化途径在两个类群各不相同。

云南盘鮈口吸盘发育、表面亚显微结构及功能

云南盘鮈口吸盘发育可划分为5个时期,这一过程在盘鮈属中具有一定代表性。吸盘发育过程或多或少暗示了盘鮈的起源和演化,为进一步探索它们的起源提供了一点线索。吸盘的一些细微结构不失为好的分类性状,有助于系统分类和进化研究。在野外观察和室内饲养观察相结合、宏观和微观形态比较相结合的基础上,阐述口吸盘的功能和适应意义。口吸盘是抵御急流冲击的吸附器官和运动辅助器官,在取食活动中的作用更不可忽视。

云南盘[鱼句]仔稚鱼口吸盘发育

为了解盘[鱼句]属(Discogobio)鱼类口吸盘的发育特点,本研究选取刚出膜的云南盘[鱼句](Discogobio yunnanensis)仔鱼为实验材料,在实验室条件下进行人工养殖,采用体视显微镜、扫描电子显微镜观察云南盘[鱼句]口吸盘的发育过程,利用组织切片的方法观察乳突和味蕾的分布情况,综合分析口吸盘的功能。结果显示,口吸盘的发育可划分为3个时期,即口吸盘形成前期、口吸盘形成期和口吸盘完善期。其中,在口吸盘形成前期,云南盘口吸盘原基尚未形成;在口吸盘形成期,口吸盘各组分原基出现,下唇瓣、肉突、侧突与吸盘主体愈合但仍具缺刻,口吸盘雏形形成;在口吸盘完善期,愈合处缺刻消失,口吸盘发育完整。除马蹄形隆起两侧和中央肉质垫前缘具无乳突分布区外,口吸盘其他区域均布满大小不一的乳突;味蕾主要分布于吻皮、须、唇突、中央肉质垫和口角处。

大宁河云南盘鮈的胚胎发育初步研究

为了系统观察和详述云南盘鮈（Discogobio yunnanensis）胚胎发育过程和各时期特征，实验采用干法受精获得受精卵，然后用显微活体观察的方法。结果表明：云南盘鮈成熟卵为球形，成黄色，沉粘性，卵径为（2．76±0．16）mm，卵膜遇水膨胀后，卵膜径为（4．62±0．36）mm。在水温（18．2±0．5）℃条件下孵化，受精后2h30min，胚盘隆起，3h20min进入卵裂期，9h15min进入囊胚期，22h57min进入原肠期，40h07min进入神经胚期，45h42min进入器官形成期，受精后96h开始出膜，受精后131h30min，当积温达到2535．82℃·h时，50％仔鱼出膜，至受精后164h仔鱼全部出膜，初孵仔鱼全长为（10．06±0．26）mm。本研究旨在为云南盘鮈种质资源保护提供科学依据，并对其苗种生产提供参考依据。

2种大宁河土著鱼肌肉常规营养成分的比较分析

[目的]比较大宁河野生齐口裂腹鱼和云南盘鮈的肌肉常规营养成分。[方法]对齐口裂腹鱼和云南盘鮈的肌肉常规营养成分进行了测定,并初步探讨了2种鱼的肌肉品质。[结果]齐口裂腹鱼肌肉中粗蛋白、粗脂肪、水分和粗灰分含量分别为18.40%、0.60%、78.76%和1.24%,云南盘鮈肌肉中粗蛋白、粗脂肪、水分和粗灰分含量分别为20.23%、1.32%、76.49%和1.29%;2种土著鱼肌肉粗蛋白含量均高于部分常规鱼类,在所属同亚科鱼类中也处于较高水平。[结论]2种土著鱼均为高蛋白、低脂肪的优质鱼类,但云南盘鮈的营养价值稍优于齐口裂腹鱼。

多线盘驯养及人工繁育

开展了多线盘(Discogobio multilineatus Cui)的亲鱼驯养、人工繁殖和苗种培育等试验。结果显示,采用室内循环水养殖,亲鱼驯化成功率为98%;人工催产104尾多线盘鮈,获得鱼苗1.24万尾;经过30 d培育后鱼苗长势良好,平均体长15~25 mm,存活率为94.43%,共计获得1.08万多线盘鱼苗。

巴马繐唇鲃和四须盘鮈的同工酶比较研究

采用水平凝胶电泳技术对野鲮亚科繐唇鲃属巴马繐唇鲃和盘属四须盘鮈进行了同工酶比较研究,本实验采用肌肉组织,共分析了天冬氨酸转氨酶(Aspartate aminotransferase,AAT)、酯酶(Esterase,EST)、甘油醛-3-磷酸脱氢酶(Glycerol-3-phosphalate dehydrogenase,G3PDH)、异柠檬酸脱氢酶(Isocitrate dehydrogenase,IDHP)、亮氨酸氨基肽酶(Leucyl naphtylaminopeptidase,LAP)、乳酸脱氢酶(Lactate dehydro-genase,LDH)、苹果酸脱氢酶(Malate dehydrogenase,MDH)、甘露糖-6-磷酸异构酶(Mannose-6-phosphate isomerase,MPI)、磷酸葡萄糖变位酶(Phosphoglucomutase,PGM)和超氧物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)10种酶。研究结果表明,在检测到的巴马繐唇鲃的13个位点中,在0.99水平上,只有MPI*位点呈多态,该位点的遗传偏离指数d为-1,说明无杂合子;多态位点比例为0.0769,平均预期杂合度为0.0059,实际观测杂合度为0;平均有效等位基因数目为1.1361。而在四须盘鮈的13个位点中,在0.99水平上,MPI*和MDH-2*位点为多态位点,MPI*位点的遗传偏离指数d为-0.2535,显示该处杂合子缺失,而MDH-2*位点上的遗传偏离指数d为0.024,杂合子过剩,AAT*、PGM*、LDH*、IDHP*、SOD-1*、SOD-2*、SOD-3*、G3PDH*、MDH-1*、LAP*和EST*位点均为单态,多态位点比例为0.1538,平均预期杂合度为0.0391,实际观测杂合度为0.0301;平均有效等位基因数目为0.9609。四须盘鮈和巴马繐唇鲃间遗传距离为0.7353,在AAT*、PGM*、LDH*、MPI*、LAP*和EST*位点发生完全的基因置换,可作为两种生化分类依据。

云南盘鮈人工繁殖及胚胎发育初步观察

采用催产素绒毛膜促性腺激素(human chorionic gonadotrophin,HCG)、促黄体素释放激素A2(luteinizing hormone releasing hormone A2,LHRH-A2)和地欧酮(domperidone,DOM)对性腺发育良好的野生云南盘鮈(Discogobio yunnanensis)进行人工催产,干法授精。利用体视镜观察早期胚胎发育过程,并详细记录了各发育阶段的形态特征及发育时序。结果显示,云南盘鮈成熟卵圆形、黄绿色、弱粘性,卵径平均2.1 mm。受精后卵迅速吸水膨胀,卵膜外径平均3.29 mm。在水温17~19℃条件下,胚胎发育历时168 h 30 min,胚胎发育过程可划分为受精卵、卵裂、囊胚、原肠胚、神经胚和器官发生6个阶段,共27个分期。初孵仔鱼平均体全长为7.16 mm,平均体质量为0.012 g,初孵仔鱼口凹形成,鳃循环明显,泄殖孔处可见输尿管,残余卵黄囊较大。

云南盘鳇仔稚鱼发育的初步观察

为探究云南盘鮈(Discogobio yunnanensis)仔稚鱼发育过程,积累云南盘鮈基础生物学资料,为其规模化养殖提供科学指导,以人工孵化刚出膜的云南盘鮈仔鱼为对象,开展了其仔稚鱼发育研究。使用显微数码拍摄系统,定期观察云南盘鮈仔稚鱼各阶段的发育情况,并定性或定量描述其外部形态及内部结构特征。研究显示,在水温(20±0.5)℃的培养条件下,云南盘鮈初孵仔鱼体质量(0.012±0.001)g,全长(7.16±0.03)mm。卵黄囊呈长梨形,长(4.04±0.02)mm,高(1.35±0.02)mm。仔鱼出膜后第9天开始摄食,出膜后第28天卵黄囊消失,混合营养期长达19 d,推测该时期的存在有利于仔鱼与外界建立营养关系,降低早期发育阶段的死亡率。出膜后第45天鳞片出现,第80天鳞被完整,晚期仔鱼共历时17 d;另外,根据云南盘鮈自身特点将稚鱼期稍作调整,以出膜后第165天口吸盘发育完整作为稚鱼期结束的标志,稚鱼期共历时120 d。

人工养殖云南盘鮈成鱼性腺发育及周年变化

采用常规解剖学和组织学方法,研究人工养殖条件下云南盘鮈(Discogobio yunnanensis)成鱼性腺发育及周年变化情况,为其全人工化繁殖提供基础资料。实验时间为2016年6月至2017年6月,每月中旬解剖成鱼取性腺,雌雄各5～8尾,活体状态下测量常规生物学数据,解剖后肉眼观察性别及性腺发育情况,并记录色泽等其他外形特征。取性腺称重并测量其长度和宽度,计算其性腺成熟系数(GSI),观察其性腺发育状况。结果表明,云南盘鮈在人工养殖条件下可以性成熟,并能繁殖后代。卵巢发育可分为Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ期,Ⅱ期卵巢持续时间最长(6-11月),11月开始出现Ⅲ期卵巢,12月主要为Ⅱ、Ⅲ期卵巢,次年1-3月主要为Ⅲ期卵巢,4-5月主要为Ⅳ期卵巢,5月底达到Ⅴ期即成熟期,排卵后进入短暂的Ⅵ期,后迅速退化至Ⅱ期。本实验没有观察到Ⅰ期性腺。云南盘鮈精巢发育也可分为5期。6-12月主要为Ⅱ期精巢,12月开始出现Ⅲ期精巢,以Ⅱ、Ⅲ期精巢过冬;次年1-3月主要为Ⅲ期精巢,含少量Ⅱ、Ⅳ期精巢,4月主要为Ⅳ、Ⅴ期精巢,5月全为Ⅴ期精巢,6月则以Ⅱ期精巢为主,含少量Ⅴ、Ⅵ期精巢。云南盘鮈卵巢成熟系数为1%～18%,精巢成熟系数为0.2%～8.0%;性腺成熟系数在4-6月出现一次高峰,成熟系数变化趋势与周年变化一致,说明云南盘鮈为一次产卵类型鱼类,且繁殖期集中在5月底至6月初。

云南盘鮈人工驯养繁殖及仔稚鱼发育

【目的】开展云南盘鮈人工繁育技术研究,为有效保护和开发利用云南盘鮈资源提供依据。【方法】对野生云南盘鮈采用混养驯化和单养培育方法,对比筛选4种催产剂组合,统计分析批量繁殖效果,并观察产卵行为和仔稚鱼发育情况。【结果】云南盘鮈卵大、数量少、繁殖力低,绝对怀卵量(F)与体质量(W)呈线性关系,拟合关系式为F=15.336W+103.01(R^(2)=0.6267)。亲鱼培育的适宜温度为年水温7~25℃,注射催产剂(LHRH-A_(2)+HCG+DOM)可使亲鱼自然产卵受精,11批次催产云南盘鮈929组,产卵201866粒,孵化出鱼苗96049尾,人工繁殖的催产率、受精率和孵化率分别为68.47%、76.86%和53.1%;效应时间8~14 h;最适催产水温15~19℃。【结论】人工驯养条件下,云南盘鮈性腺可自然发育至成熟,人工繁殖增殖是云南盘鮈资源保护的重要措施。

云南盘鮈不同地理居群的形态变异及分化

将采自中国元江、南盘江和金沙江水系的233尾云南盘鮈和短鳔盘鮈鱼类标本,按采集点地理位置就近的原则归类分为11个组,共测量了21个框架结构性状和22个常规性状。应用多变量形态度量学方法比较云南盘鮈各地理居群间的形态差异;并期望补充云南盘鮈与短鳔盘鮈的形态学鉴别特征。主成分分析结果表明,全部标本聚集在一起没有分离。差异系数分析结果表明,金沙江组内、元江组内及短鳔盘鮈与各水系间标本的差异系数均达不到亚种水平。南盘江组内,仅组7(罗平八大河)和组8(广南大里塘)标本的"腹鳍起点-背鳍起点距/体长"的差异系数大于1.28,但仅凭一个性状不足以用来区分云南盘鮈的不同地理居群;组7(罗平八大河)和组6(罗平多依河)标本的"腹鳍起点-背鳍起点距/体长"这一比例性状的差异系数大于1.28,但这一比例性状亦没有与其他性状构成一定的性状组合,不足以用来从形态上区分云南盘鮈与短鳔盘鮈。这就说明并不是所有的类群,或在不同水系分布的同一物种均会发生分化;另外,利用形态度量学未能找到进一步区分云南盘鮈与短鳔盘鮈的形态学证据,今后需要从分子生物学等方面寻找二者间新的分类学证据。

鲤科盘鮈属鱼类系统发育及其历史地理分布格局解析

以盘鮈属鱼类作为内群,以巴马拟缨鱼作为外群。通过形态比较共筛选出85个稳定的特征,形成形态特征状态矩阵表。以PAUP4.0b软件,采用均权方式,在无序和有序状态下分别按Heuristic、Branch-and-Bound以及Bootstrap等3种方式计算和构树。每种方法计算均得到唯一的1棵树,最大简约树与严格一致树、Bootstrap值检测树呈现微小差异。但仅最大简约树体现了各种之间先后分化的次序以及各姐妹群之间的关系,所以选择最大简约树作为盘鮈鱼类的系统发育树。其结果显示,盘鮈具小吸盘的种类与具大吸盘的种类分别构成了A、B两支。B支又可分为C、D两支。其中,C支的种类以吻端形成1对明显珠星,甚至形成吻突而区别于同属中具大吸盘的其他种类。运用Component(2.0)软件计算,得到盘鮈属种类分布河流的唯一分支树,其结构基本与水系的地理分布成对应关系。盘鮈属鱼类祖先的形成时期应为第4纪中期之初或更早。古云贵高原是盘鮈属鱼类的起源、分布和分化中心。云贵高原面的抬升与河流的袭夺促成了盘鮈属鱼类的多次分化和扩散,由此形成了该属鱼类的现今分布格局。

云南盘鮈酶水解条件研究

采用动物蛋白水解酶对云南盘鮈进行酶水解,通过正交实验法确定了酶水解条件。结果表明,酶水解的最适条件为:温度50℃,pH7.0,时间3h,加酶量0.5%,固液比1∶2.5。在该条件下盘鮈肉蛋白的水解度为32.85%。氨基酸分析表明,游离氨基酸含量36.47mg/mL,必需氨基酸14.42mg/mL,占39.54%。尤其是亮氨酸、缬氨酸、苏氨酸、赖氨酸含量丰富,为低值鱼深加工研究提供理论依据。