蒙古沙冬青AmDREB2.2基因的克隆与植物表达载体构建

从前期建立的蒙古沙冬青[Ammopiptanthus mongolicus(Masxim)Cheng f.]根转录本数据库中克隆得到1个编码DREB类转录因子基因。结果表明,Am DREB2.2基因序列全长1 045 bp,开放阅读框(ORF)为597 bp,编码198个氨基酸,具有典型的DREB转录因子保守的AP2结构域。实时荧光定量PCR分析表明,该基因能在根、叶中表达,但对干旱、低温响应不同,Am DREB2.2主要参与根的干旱胁迫应答。在Am DREB2.2基因的编码区两端分别加入Bam HⅠ和SacⅠ酶切位点,双酶切植物表达载体p PZP212和带有酶切位点的Am DREB2.2基因PCR产物,成功获得了Am DREB2.2的植物过表达载体p PZP212-Am DREB2.2。

第四轮实验室成果：将Discuz!2．2F漏洞进行到底

自从2004年黑防第10期孟兄一篇《再爆Discuz!漏洞》使Discuz论坛再受重创，佩服孟兄的话就不多说了！珍对这个Discuz2.2F偶也想再唠叨几句！

多房棘球绦虫重组Bb—EmⅡ／3-Em14—3—3疫苗诱导BALB／c小鼠T淋巴细胞亚群变化的研究

目的探讨多房棘球绦虫（Em）重组Bb-EmⅡ／3-Eml4．3．3疫苗免疫和Em原头节攻击后小鼠脾CD4＋和CD8＋T淋巴细胞亚群的变化。方法用重组Bb-EmⅡ／3-Em14．3．3疫苗分别通过皮下注射、肌肉注射、鼻腔黏膜接种以及口服接种免疫BALB／c小鼠，双歧杆菌（Bb）液和磷酸盐缓冲液（PBS）为对照，12周后，用50个Em原头蚴腹腔注射进行攻击，攻击感染18周剖杀小鼠，检获泡球蚴组织，称取重量，计算减蚴率；分离脾细胞，流式细胞仪检测脾CD4＋和CD8＋T淋巴细胞亚群的百分比。结果疫苗免疫组（皮下注射、肌肉注射、鼻腔黏膜接种、口服接种）小鼠检获泡球蚴重量[（0．77±0．52）、（0．87±0．60）、（2．17±0．50）、（3．06±0．15）g]均明显低于PBS对照组[（3．54±0．32）g．P〈0．05或〈0．01]。疫苗免疫组（皮下注射、肌肉注射、鼻腔黏膜接种、口服接种）小鼠脾CD4＋T细胞亚群[（28．2±2．5）％、（25．0±2．7）％、（24．0±1.3）％、（23．0±1．8）％]显著高于PBS对照组[（16．1±2．2）％，P均〈0．01]；各疫苗免疫组小鼠CD8＋T细胞亚群水平均轻微升高，但组间比较差异无统计学意义（F=1．36，P〉0．05）。皮下注射组小鼠CD4＋T细胞亚群高于肌肉注射组、鼻腔黏膜接种组和口服接种组（P均〈0．05）。结论CD4＋T细胞亚群在Em重组Bb-EmⅡ／3-Em14-3-3疫苗诱导的小鼠抗Em原头节攻击感染的保护性免疫机制中起关键作用，疫苗皮下注射是一种较好的免疫途径。