p53同系物Djp53在涡虫胚基早期发育阶段的组织特异性表达及其在再生中的作用

为了探索东亚三角涡虫Djp53基因在涡虫组织中的表达和功能,利用整体原位杂交、RT-PCR技术,检测了涡虫Djp53基因在组织中的表达分布特点,结果表明,Djp53基因在再生1、3、5天的胚基中具有较强的阳性信号,且3天的表达量最高;而在再生7、10天和成虫的实质组织中表达较弱.RNA干扰后的RT-PCR检测显示,Djp53表达量显著下降,涡虫不能正常再生或出现眼点缺陷.由此推断,东亚三角涡虫Djp53基因在早期胚基发育阶段,通过调节多功能干细胞的迁移和增殖分化影响早期胚基的形成,是涡虫早期胚基发育必不可少的一个基因,并且在涡虫成体和再生后期对多功能干细胞的维持具有重要的作用.

镉胁迫对涡虫DjHsp70,DjP53基因表达量的影响

本文旨在运用半定量RT-PCR技术,研究不同浓度及不同时间镉胁迫下,涡虫(Dugesia japonica)体内Dj Hsp70及Dj P53基因的表达规律。提取相同暴露时间(48 h)不同浓度(0,20滋g/L,40滋g/L,80滋g/L,160滋g/L,320滋g/L)及相同暴露浓度(25滋g/L)不同暴露时间(0,1 d,3 d,6 d,9 d,15 d)镉胁迫下涡虫组织总RNA,反转录得到cD NA,以茁-actin作为内参,应用半定量RT-PCR方法,检测Dj Hsp70及Dj P53基因的表达量。结果表明:与对照相比,重金属镉胁迫导致涡虫体内Dj Hsp70、Dj P53基因表达量均上调,存在明显的"毒理兴奋"作用。在25滋g/L镉离子处理15 d后Dj Hsp70基因表达呈现下降趋势。因此,半定量RT-PCR方法应用于淡水生态环境镉污染评价具有较大的潜力。