Djhsp70-4基因在日本三角涡虫中的功能分析

热休克蛋白70(HSP70)在细胞保护等方面起着关键作用,但至目前为止,在日本三角涡虫(Dugesia japonica)中,HSP70的具体功能尚不明确.以再生能力极强的日本三角涡虫为实验材料,从转录组数据库中筛选了在再生过程中显著调高的Djhsp 70-4基因进行研究.实时荧光定量PCR结果显示:在受到外界刺激后,Djhsp 70-4基因的表达量显著上调.通过整体原位杂交技术,观察到Djhsp 70-4基因在整体涡虫身体两侧及再生芽基处有较强的杂交信号.利用RNA干扰技术敲低Djhsp 70-4基因的表达量后,整体及再生组涡虫出现头部溶解现象.综上所述,Djhsp 70-4基因可能在日本三角涡虫的稳态维持以及再生方面发挥重要作用.

镉胁迫对涡虫DjHsp70,DjP53基因表达量的影响

本文旨在运用半定量RT-PCR技术,研究不同浓度及不同时间镉胁迫下,涡虫(Dugesia japonica)体内Dj Hsp70及Dj P53基因的表达规律。提取相同暴露时间(48 h)不同浓度(0,20滋g/L,40滋g/L,80滋g/L,160滋g/L,320滋g/L)及相同暴露浓度(25滋g/L)不同暴露时间(0,1 d,3 d,6 d,9 d,15 d)镉胁迫下涡虫组织总RNA,反转录得到cD NA,以茁-actin作为内参,应用半定量RT-PCR方法,检测Dj Hsp70及Dj P53基因的表达量。结果表明:与对照相比,重金属镉胁迫导致涡虫体内Dj Hsp70、Dj P53基因表达量均上调,存在明显的"毒理兴奋"作用。在25滋g/L镉离子处理15 d后Dj Hsp70基因表达呈现下降趋势。因此,半定量RT-PCR方法应用于淡水生态环境镉污染评价具有较大的潜力。