分泌蛋白DKK1(Dickkopf-1)在胃癌患者血清及组织中的表达及其意义

目的探讨DKK1(Dickkopf-1)在胃癌患者血清及组织中的表达及其意义。方法检测153例胃癌患者与173名健康志愿者血清中DKK1含量。免疫组化检测144例胃癌患者(从153例胃癌患者中选取)和265例回顾性胃癌患者肿瘤组织中DKK1表达情况。结果胃癌组血清DKK1含量明显高于健康人群组(P<0.05)。当把血清DKK1浓度31.9150 pg/mL设为诊断胃癌的阈值时,其诊断特异性和敏感性分别为87.9%和87.6%。血清DKK1浓度大于60.0 pg/mL胃癌患者生存期明显低于血清DKK1浓度较低患者(P=0.033)。胃癌组织中DKK1高表达与血清DKK1含量有密切相关性。结论低浓度阈值的DKK1可以作为胃癌诊断标志物,而高浓度阈值的DKK1可以作为胃癌预后预测标志物。血清和组织中DKK1表达水平可以帮助诊断胃癌,预测胃癌患者预后。

淫羊藿总黄酮对去卵巢大鼠骨髓间充质干细胞成骨和成脂分化中DKK1蛋白动态表达的影响

目的观察DKK1在淫羊藿总黄酮调控去势雌性大鼠骨髓间充质干细胞成骨和成脂分化平衡过程中的动态表达,为进一步阐明淫羊藿总黄酮治疗绝经后骨质疏松症的作用机制提供实验依据。方法体外分离培养去势雌性大鼠来源骨髓间充质干细胞,分别在成骨诱导液和脂肪诱导液条件下连续培养15 d,并在此基础上添加剂量为10μg/mL的淫羊藿总黄酮。采用ALP染色、ALP活性测定、油红O染色以及荧光定量PCR技术,观察淫羊藿总黄酮对骨髓间充质干细胞成骨和成脂分化的影响。用酶联免疫法(ELISA)检测淫羊藿总黄酮处理过程中DKK1蛋白的动态表达,观察DKK1蛋白在淫羊藿总黄酮调控去势雌性大鼠骨髓间充质干细胞成骨和成脂分化平衡过程中的作用。结果淫羊藿总黄酮能显著增加骨髓间充质干细胞ALP的表达以及成骨早期分化因子Runx2 mRNA的表达,显著下调骨髓间充质干细胞中脂肪形成关键基因PPARγ-2mRNA的表达,从而抑制脂滴的形成。在成骨诱导条件下,EFs呈时间依赖性下调DKK1的表达;在脂肪诱导条件下,EFs呈时间依赖性抑制DKK1蛋白的上调。结论通过抑制DKK1蛋白的表达调控去势雌性大鼠BMSCs成骨和成脂分化平衡,可能是淫羊藿总黄酮治疗绝经后骨质疏松症的分子机制之一。

DKK1蛋白表达与肝内胆管细胞癌患者淋巴结侵犯及其预后的相关性研究

目的探讨DKK1蛋白表达与肝内胆管细胞癌患者淋巴结侵犯及其预后的相关性。方法选择2005年1月—2012年12月来我院行切除治疗肝内胆管癌患者78例,制作肝内胆管细胞癌组织及癌旁组织的组织芯片,并于术前进行生化指标测定。患者术后每隔3个月复查1次,并结合患者的临床资料和病历资料,采用Kaplan-Meier法进行无复发生存曲线及总生存曲线的绘制,采用Cox比例风险回归模型进行多因素分析,确定影响预后无复发生存时间(Relapse-free survival,RFS)和总生存时间(Overall survival,OS)的因素。结果 DKK1蛋白表达阴性与表达阳性的患者间GGT、肝门淋巴结侵犯、Child-Pugh分级、MMP9差异存在统计学意义(P<0.05)。78例肝内胆管细胞癌患者组织芯片结果发现DKK1蛋白在肝内胆管细胞癌的阳性表达率为35.90%(28/78),在癌旁组织中的阳性表达率为14.10%(11/78)。78例肝内胆管细胞癌患者的1、3、5年的总生存率和无复发生存率分别为51.28%(40/78)与50.00%(38/78)、41.03%(32/78)与38.46%(30/78)、25.64%(20/78)与23.08%(18/78)。相关危险性因素经单因素、多因素分析后,研究结果显示GGT、CA19-9、CEA、肿瘤大小、DKK1、肝门淋巴结侵犯是影响肝内胆管细胞癌患者RFS的预后因素;CEA、肿瘤大小、DKK1、肝门淋巴结侵犯是影响肝内胆管细胞癌患者DFS的预后因素。DKK1蛋白表达阳性与阴性的OS与RFS曲线显示,5年后肝内胆管细胞癌患者DKK1蛋白表达阳性与阴性的总生存率分别为28.20%与20.51%;无复发生存率分别为24.36%与21.79%。结论肝内胆管细胞癌患者淋巴结侵犯与否与DKK1蛋白表达密切相关,DKK1蛋白表达可能是影响肝内胆管细胞癌患者OS和RFS的预后因素。

壮骨止痛方提取物对去势雌鼠Dkk1蛋白的影响

目的:观察壮骨止痛方提取物对去势大鼠Dkk1蛋白的影响,并探究其治疗骨质疏松症的具体机制。方法:60只3月龄的健康雌性SD大鼠,随机分为壮骨止痛方组、模型组、假手术组、空白组,每组15只。壮骨止痛方组、模型组去势(去卵巢)后建立绝经后骨质疏松大鼠模型,假手术组去除卵巢周围相应体积脂肪。术后5d开始给药,13周后取血和骨组织,测定血清中雌激素(E2)、降钙素(CT)、骨钙素(BGP)含量变化、骨组织病理变化、骨小梁密度,以及骨组织中Dkk1、β-catenin蛋白的表达情况。结果:与模型组相比,壮骨止痛方能降低去势雌鼠血清BGP、CT含量,差异具有统计学意义(P<0.05);壮骨止痛方组E2与模型组相比,差异具有统计学意义(P<0.05)。壮骨止痛方组相比模型组,骨髓腔扩大不明显,且骨小梁形态较为正常;与模型组相比,壮骨止痛方组骨小梁密度有明显升高,具有显著性(P<0.05);与模型组比较,壮骨止痛方组骨组织中骨组织Dkk1蛋白的表达降低、而β-catenin蛋白的表达增多,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论:壮骨止痛方可能是通过下调去势雌鼠体内Dkk1蛋白表达,进一步直接影响β-catenin的表达,间接影响雌激素、降钙素等激素的变化,从而达到改善骨代谢紊乱来治疗骨质疏松症。

DKK3蛋白与乳腺癌的临床病理及预后

目的:探讨DKK3(Dickkopf-3)蛋白在乳腺癌中的表达及其临床意义。方法:采用免疫组织化学方法检测DKK3蛋白在18例乳腺导管内乳头状瘤、14例乳腺非典型增生和103例乳腺癌中的表达,分析其与临床病理特征的关系。结果:在18例乳腺导管内乳头状瘤中,DKK3蛋白的高表达为14例,DKK3蛋白的高表达率为77.8%(14/18),在14例乳腺非典型增生中,DKK3蛋白的高表达为5例,DKK3蛋白的高表达率为35.7%(5/14);在103例乳腺癌中,DKK3蛋白的高表达为32例,DKK3蛋白的高表达率为31%(32/103),导管内乳头状瘤中的DKK3表达高于非典型增生中的DKK3表达(P<0.05),同时高于乳腺癌中的DKK3表达(P<0.01)。在乳腺癌中,DKK3的表达与患者的组织学分级、月经状态有关,而与患者的年龄、肿瘤大小、腋窝淋巴结转移、TNM分期、雌激素受体状态、孕激素受体状态、人表皮生长因子受体2状态无关。Kaplan-Meier生存曲线显示,DKK3高表达的乳腺癌患者总生存率明显高于低表达者(P<0.05)。结论:DKK3的表达降低可能在乳腺癌的形成中起到重要作用,DKK3可以作为一个判断乳腺癌预后的指标。

高通量透析与间断性血液透析滤过对尿毒症毒素清除及DKK1蛋白、sKlotho蛋白表达的影响

目的:比较高通量透析(High Flux Hemodialysis,HFHD)与间断性血液透析滤过(Hemodiafiltration,HDF)两种治疗模式对尿毒症毒素清除及Dickkopf相关蛋白1(Dickkopf Related Protein 1,DKK1)、可溶性Klotho蛋白(sKlotho)表达的影响,探寻更高效的血液净化模式。方法:将92例尿毒症患者随机分为A组和B组,每组各46例。A组接受间断性血液透析滤过治疗;B组接受高通量透析治疗。比较两组治疗前后尿毒症毒素、炎性因子指标、DKK1蛋白和sKlotho蛋白的水平,治疗后的血管钙化分级,以及治疗期间不良反应发生率等的异同。结果:透析治疗前,两组患者毒素和炎性因子指标无显著差异(P>0.05)。经6m治疗后,两组患者尿毒症毒素和炎性因子指标较治疗前均显著下降(P<0.01);且B组的血磷、半胱氨酸蛋白酶抑制剂C、血β2微球蛋白、全段甲状旁腺激素、白介素-6及C-反应蛋白水平均显著低于A组(P<0.05)。透析前,两组患者DKK1蛋白、sKlotho蛋白水平无显著(P>0.05);透析后两组DKK1蛋白水平均较治疗前显著下降,sKlotho蛋白均较治疗前显著上升(P<0.05),并且B组的DKK1蛋白水平显著低于A组,sKlotho蛋白水平则显著高于组A(P<0.05)。B组的血管钙化严重程度和不良反应总发生率均显著低于A组(P<0.05)。结论:高通量透析在清除中大分子尿毒症毒素、降低炎性因子指标和改善微炎症状态(MIS)、降低血管钙化程度方面均优于间断性血液透析滤过,且不良反应发生率更低,是一种更高效的透析模式。

Dkk1在胃癌诊断、治疗及预后中的应用

胃癌(gastric cancer,GC)是一种高侵袭性和高致死性的恶性肿瘤,是第五大常见癌症和第四大癌症死亡的主要原因^([1])。根治性手术是可手术GC患者的主要治疗方法,早期GC患者若及时治疗5年生存率可达90%以上[2-3]。但由于许多GC患者早期症状不典型,在诊治过程中常与胃炎或胃溃疡相混淆,导致大多数患者在首次诊断时通常已处于中晚期阶段,失去了最佳治疗时机,直接影响GC患者的预后。因此,早发现、早诊断、早治疗是降低GC高发病率和高死亡率的重要手段。

HBx蛋白抑制DKK4表达的机制及对肝癌细胞系增殖和迁移的影响

目的探讨乙型肝炎病毒X蛋白下调DKK4的机制及对肝癌细胞系增殖和迁移能力的影响。方法将编码乙型肝炎病毒X蛋白的腺病毒(Ad-HBx)分别感染肝癌细胞系HepG2和SMMC7721细胞,同时设感染GFP腺病毒(Ad-GFP)为对照组,用去乙酰化酶抑制剂(TSA)处理肝癌细胞系,并用小干扰RNA-组蛋白去乙酰化酶1(si-HDAC1)及过表达DKK4的慢病毒转染肝癌细胞系。Western blot检测DKK4、HDAC1及SIRT1的表达情况。MTT实验、结晶紫实验和Transwell实验分别检测肝癌细胞系的增殖和迁移能力。结果Ad-HBx感染肝癌细胞系后DKK4蛋白表达水平下降(P<0.05),TSA处理后DKK4蛋白表达水平回复(P<0.05)。Ad-HBx感染肝癌细胞系后,HDAC1及SIRT1蛋白水平显著升高(P<0.05)。小干扰RNA沉默HDAC1后能够恢复DKK4的表达(P<0.05),沉默HDAC1和(或)过表达DKK均能抑制肝癌细胞系的增殖和迁移能力(P<0.05)。结论乙型肝炎病毒X蛋白通过上调HDAC1、SIRT1来抑制DKK4的表达,沉默HDAC1及过表达DKK4蛋白表达能够抑制感染Ad-HBx肝癌细胞系的增殖和迁移能力。

Wnt信号途径及其调节因子Dkk与子宫内膜容受性

Wnt信号通路是存在于生物体内的一条极其保守的信号转导通路,其相关基因在胚胎种植前后的子宫表达,且受标准的种植相关基因调控,如LIF和HOXA-10。Dkk(Dickkopf)是一种分泌蛋白,通过调节Wnt信号转导途径发挥作用,其在子宫内膜表面表达有时空特异性,种植期表达增高,引起子宫内膜分泌期容受性发生改变。Wnt信号和Dkk参与调节子宫内膜容受性,是其关键因素之一。

骨关节炎患者血清中DKK-1和MMP-13水平的相关研究

目的:通过研究骨关节炎(OA)患者和健康对照组的抑癌蛋白DKK1抗原(DKK-1)和基质金属蛋白酶13(MMP-13)的血清水平,探讨DKK-1与OA的发病机制。方法:采用酶联免疫吸附试验检测OA患者68例以及72例年龄匹配的健康者DKK-1和MMP-13水平,探索DKK-1与MMP-13之间的相关性。结果:与对照组相比,OA组血清DKK-1水平降低,MMP-13水平明显升高,差异均有统计学意义(P<0.01)。Spearman相关分析中,DKK-1和MMP-13的血清水平呈负相关(r=-0.588,P<0.01)。结论:血清DKK-1水平是降低的,从而对MMP-13水平的抑制作用降低。MMP-13水平升高,导致OA的发生。

DKK4通过负调控Wnt/β-catenin信号通路抑制乳腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭

Wnt信号通路在机体多种生理过程中均具有重要作用,已证明有多种蛋白质参与其调节,包括DKK(Dickkopf)家族成员。然而,DKK4在乳腺癌中的生物学功能和分子机制尚不清楚。本研究通过在线数据库TCGA(the cancer genome atlas)和UALCAN(ualcan.path.uab.edu/)分析发现,DKK4在乳腺癌中的表达与其甲基化程度负相关,并影响其肿瘤分期和患者生存率。MethHC数据库分析显示,DKK4在多数乳腺癌组织中的表达低于癌旁组织。RT-PCR检测发现,DKK4在8种人乳腺癌细胞株中不表达或低表达,在2种人正常乳腺细胞中表达;qPCR分析发现,13对组织标本中有11对癌组织的表达低于癌旁组织(P<0.0001)。构建过表达DKK4的人乳腺癌细胞株MCF7和YCCB1,克隆形成的结果显示,MCF7和YCCB1稳定细胞株形成的细胞集落数量分别为对照组的28.66%和37.26%,增殖能力明显低于对照组细胞(P<0.001);Transwell实验结果显示,细胞迁移能力减弱(590 vs. 2 052;1 310 vs. 5 137,P<0.001);侵袭能力也明显减弱(220 vs. 872;2 532 vs. 5 089;P<0.001)。流式细胞仪分析发现,DKK4可将乳腺癌细胞周期阻滞于G0/G1期((57.06±0.64)%vs.(50.13±1.08)%;(51.94±0.93)%vs.(31.00±1.03)%,P<0.001),细胞凋亡率明显增高((31.55±0.77)%vs.(9.85±0.58)%;(28.19±0.99)%vs.(17.92±0.58)%,P<0.001)。进一步采用Western印迹检测结果显示,DKK4能够使细胞周期调控蛋白P53、P27、P21和细胞凋亡因子胱天蛋白酶-3、胱天蛋白酶-7、胱天蛋白酶-9表达上调。Western印迹检测过表达DKK4对Wnt/β-catenin信号通路的影响。结果表明,细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、C-Myc蛋白、环氧合酶2 (cyclooxygenase 2,Cox 2)、C-Jun蛋白、磷酸化应激活化蛋白激酶(p-JNK)和活化的β-联蛋白(activeβ-catenin)等的表达下调,而上皮型钙黏着蛋白(E-Cadherin)表达上调。综上所述,DKK4通过负调控Wnt/β-catenin信号通路抑制乳腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭,阻滞细胞周期,并促进其凋亡。

Dickkopf家族蛋白在非小细胞肺癌中的作用机制和治疗应用的研究进展

非小细胞肺癌(Non-small cell lung cancer,NSCLC)占所有肺癌的80%~85%,是全世界发病率和致死率极高的恶性肿瘤。最初NSCLC对现有治疗的反应良好,但最终还是产生了耐药性。因此,有必要探索有效且新颖的治疗方法。随着对NSCLC研究的深入,发现Dickkopf家族蛋白(DKKs)的信号传导在NSCLC发展中扮演重要角色,DKKs是Wnt/β-catenin信号通路的重要调节因子,并与NSCLC细胞增殖、转移和侵袭密切相关。本文主要介绍了DKKs家族成员在NSCLC中的作用机制,讨论了DKKs在NSCLC治疗中的潜力,为进一步防治NSCLC提供了新思路。

多层螺旋CT参数联合ProGRP、DKK1在肺癌诊断中的价值分析

目的:探讨多层螺旋CT参数联合胃泌素释放肽前体(Progastrin releasing peptide,ProGRP)、分泌蛋白DKK1(Dickkopf-1,DKK1)在肺癌中的诊断价值。方法:随机收集2020年7月至2021年7月我院接受的87例肺癌患者为研究组,另选取在本院体检健康人员100例为对照组。分别采用电化学发光法、酶联免疫吸附法测定受检者ProGRP、DKK1水平,记录多层螺旋CT影像参数,包括表面通透性(Permeability surface,PS)、血容量(Blood volume,BV)、平均通过时间(Mean transit time,MTT)值,分析多层螺旋CT联合ProGRP、DKK1在肺癌诊断中的应用价值。结果:相比对照组,研究组多层螺旋CT参数PS、BV、MTT值较高(P<0.05),相比Ⅰ~Ⅱ期,Ⅲ~Ⅳ期患者多层螺旋CT参数PS、BV、MTT及血清ProGRP、DKK1水平升高(P<0.05),肺癌患者多层螺旋CT参数PS、BV、MTT及血清ProGRP、DKK1与临床病理分期均呈正相关,且多层螺旋CT参数PS、BV、MTT与ProGRP、DKK1水平呈正相关(P<0.05)。与多层螺旋CT参数、ProGRP、DKK1单项检查相比,三项联合对肺癌的临床诊断价值较高(P<0.05)。结论:多层螺旋CT参数与ProGRP、DKK1水平及肺癌TNM分期间存在线性关联,为肺癌发展诊断提供重要量化参考。

DKK4增强结肠癌细胞5-FU耐药的作用和意义

目的:观察DKK4在结肠癌肝转移组织中的表达差异和DKK4基因对结肠癌细胞耐受5-FU的作用。方法:收集17例同时性结肠癌肝转移肿瘤组织,通过免疫组化分析原发灶和转移灶DKK4蛋白的表达差异。利用CRISPR-Cas9技术敲除人结肠癌SW480细胞DKK4基因,使用蛋白电泳和RT-PCR评估基因编辑效果,并分析DKK4表达对结肠癌细胞耐受5-FU杀伤的影响。结果:在17例结肠癌肝转移组织中,原发灶DKK4染色阳性率为20% (2/10),肝转移灶染色阳性率70% (7/10),提示肝转移灶DKK4蛋白表达明显高于结肠原发灶。利用CRISPR/Cas9技术成功敲除人结肠癌SW480细胞DKK4基因,在含有5%、10% 5-FU的培养基中,WT-DKK4 SW480细胞可继续增殖,但DKK4-KO SW480细胞则随5-FU浓度增加而加速死亡。结论:结肠癌肝转移灶组织中DKK4表达更高,且DKK4表达水平对结肠癌细胞耐受5-FU杀伤有极为重要的影响,提示DKK4可能是影响肿瘤耐受5-FU化疗的重要因素和潜在治疗靶点。

非小细胞肺癌患者血清DKK1蛋白表达及其与骨转移的关系

目的 探讨非小细胞肺癌（NSCLC）患者血清中Wnt通路抑制因子DKK1蛋白的表达水平及其与骨转移的关系.方法 应用酶联免疫吸附法（ELISA）检测33例有骨转移、41例无骨转移NSCLC患者及32名健康体检者血清中DKK1蛋白的表达水平采用方差分析和独立样本t检验比较其差异.DKK1表达和骨转移之间相关性的分析采用Pearson相关分析法.结果 NSCLC患者血清中DKK1蛋白表达水平为（79.6±8.3）ng/ml,高于健康体检者的（21.5±6.4）ng/ml,两者差异有统计学意义（t=13.17,P=0.001）.NSCLC患者中有骨转移组DKK1蛋白表达水平为（110.3±11.4）ng/ml,高于无骨转移组的（60.7±10.5）ng/ml,两组差异有统计学意义（t=14.128,P=0.003）.血清DKK1水平与NSCLC骨转移之间呈正相关（r=0.855,P〈0.001）.结论 NSCLC患者血清中DKK1蛋白的表达水平与骨转移关系密切.DKK1有望成为预测NSCLC有无骨转移的生物学指标.

DKK1蛋白在兔下颌骨牵引成骨过程的表达及其意义

目的探讨下颌骨牵引成骨(MDO)过程Wnt/β-catenin信号通路拮抗剂DKK1蛋白的表达及意义。方法将健康成年新西兰大白兔24只分为牵引组和对照组,每组12只。牵引组行双侧下颌骨截骨后放置牵引器。对照组行双侧下颌骨截骨后直接牵开5mm,钛板钛钉固定。细胞图像分析仪测量骨痂DKK1的表达。结果免疫组织化学染色显示,DKK1主要定位于骨痂组织的成纤维细胞、软骨细胞、成骨细胞胞质中。牵引组随着牵引启动DKK1表达逐渐增加,在术后第10天时达高峰,随着牵引张力消失,术后17~24d表达减弱,术后31~38d,骨细胞内DKK1表达逐渐降低,胞核、胞质染色均为阳性。在各时间点,牵引组DKK1表达均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论牵引成骨过程中,随着牵引应力激活Wnt/β-catenin信号通路,通路相关蛋白表达增强,其负性调控因子DKK1表达也随之增强,有利于牵引区新骨生成和改建重塑。

Wnt/β-catenin信号通路在双酚A暴露对子鼠雄性生殖细胞表达

目的探讨Wnt/β-catenin信号通路蛋白在出生前后双酚A(BPA)暴露对子鼠雄性生殖表达。方法 ICR孕鼠饮水染毒,自受孕0天随机分为:溶剂对照组、100 nmol/LBPA组、300 nmol/LBPA组;雄性仔鼠出生后6周处死,取睾丸组织,免疫组化检测β-catenin、DKK1蛋白的表达。结果免疫组化结果显示,与溶剂对照组比较,BPA暴露组β-catenin、DKK1蛋白表达明显增加,多分布在精原细胞和睾丸间质细胞中,且间质细胞强阳性。结论 Wnt/β-catenin信号通路蛋白可能参与了BPA暴露对子鼠雄性生殖细胞表达影响。

益骨汤含药血清通过经典Wnt信号通路促进成骨细胞增殖分化的研究

目的:在经典wnt信号通路抑制剂大鼠Dickkopf相关蛋白1(DKK1)的干预下,观察益骨汤含药血清对成骨细胞的经典Wnt信号通路的影响,探究益骨汤治疗骨质疏松的作用机制,为临床使用补肾活血中药防治骨质疏松症提供实验依据。方法:将40只雌性SD大鼠随机分成2组,益骨汤水提液组和空白对照组,连续灌胃10天,获取含药血清。从乳鼠颅盖骨中分离培养成骨细胞,实验分为4组,即A组(益骨汤含药血清组)、B组(DKK1组)、C组(DKK1+益骨汤含药血清组)、D组(空白血清对照组)。进行细胞增殖MTT检测、碱性磷酸酶活性检测,RT-PCR检测经典Wnt/β-catenin通路中β-链蛋白(β-catenin)、低密度脂蛋白受体相关蛋白5(LRP-5)、DKK1基因的表达情况。结果:根据MTT法动态观察各组成骨细胞增殖,发现成骨细胞增殖呈规律性:48 h至72 h成骨细胞呈对数增长期,96 h后细胞增殖逐渐受到抑制。同一时间点与B组比较,A、C、D各组成骨细胞的增殖和ALP活性显著较高,差异均有统计学意义(P<0.05)。同一时间点与D组比较,A组成骨细胞的增殖和ALP活性显著较高,差异均有统计学意义(P<0.05)。与B组比较,A、C、D组β-catenin mRNA、LRP-5 mRNA、TCF mRNA的表达均明显升高,DKK1 mRNA的表达明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。与D组比较,A组β-catenin mRNA、LRP-5 mRNA、TCF mRNA的表达均明显升高,DKK1 mRNA的表达明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:益骨汤含药血清可能是通过抑制DKK1的高表达,从而上调经典Wnt/β-catenin信号中β-catenin、LRP-5、TCF基因的表达,达到促进成骨细胞增殖,起到抗骨质疏松作用。

Kremen2生物学功能研究进展

Kremen2 (kringle-containing transmembrane protein 2)是经典Wnt 信号通路中的重要调控因子。起初Kremen2 蛋白仅被认为是Wnt 信号通路的抑制因子,但后期研究发现Kremen2 蛋白在某些特定的生物环境中却发挥促进Wnt 信号通路活化的作用。在对Wnt 信号通路的调控过程中,Kremen2 蛋白需要与多种蛋白质调控因子相互作用,以参与胚胎发育、骨形成、肿瘤发生等多种生理病理过程。通过对Kremen2 相关研究文献的整理,本文综述了Kremen2 蛋白的发现与分子结构,以及其主要的相互作用因子和蛋白质功能,并提出了相关研究展望。

人源Dickkopf1原核表达产物对体外培养的黑素细胞的抑制作用

目的:观察人源Dickkopf1原核表达产物(DKK1蛋白)对体外培养的黑素细胞的抑制作用。方法:采用MTT法测定细胞增殖情况;光学显微镜观察细胞形态学变化;氢氧化钠裂解法测定黑素合成;多巴氧化法测定酪氨酸酶活性。结果:DKK1蛋白对黑素细胞的增殖有抑制作用,能使细胞数明显减少(P<0.05);光学显微镜观察到DKK1蛋白作用的黑素细胞胞体较大,形态略呈多角形,树突较粗短;并能使黑素合成显著下降(P<0.05);使酪氨酸酶活性显著减弱(P<0.05)。结论:DKK1蛋白能抑制黑素细胞增殖、黑素合成、酪氨酸酶活性,为DKK1蛋白应用于治疗色素增多性疾病奠定实验基础。