caveolin-1、Dnmt1基因与胃癌发生发展的关系及其临床意义

目的:研究正常胃黏膜及胃癌组织中caveolin-1、Dnmt1蛋白的表达,并探讨caveolin-1、Dnmt1基因与胃癌发生发展的关系及其临床意义.方法:采取甲基化特异性聚合酶链反应(methylation-specific PCR,MSP)检测不同分化程度的60例胃癌组织(其中包括新鲜组织50例、石蜡包埋组织10例)和14例正常胃组织中caveolin-1基因启动子区域甲基化状态;同时用SP免疫组织化学法、原位杂交法检测caveolin-1蛋白、Dnmt1蛋白及mRNA的表达.结果:14例正常胃组织中,未检测到caveolin-1基因甲基化;在60例胃癌组织中,检测到44例胃癌组织中存在甲基化,甲基化发生率为73.33%,两组间差异具有统计学意义(P<0.005).caveolin-1基因甲基化的发生与患者年龄有关.60例胃癌标本中,caveolin-1蛋白阳性表达率仅为30%(18/60),Dnmt1蛋白阳性表达率为63.3%(38/60),Dnmt1基因mRNA阳性表达率为53.3%(32/60).结论:在胃癌组织中,caveolin-1基因可能在Dnmt1基因的作用下发生甲基化,丧失其活性,进而导致胃癌的发生、发展.

胃癌组织中PCDH8基因甲基化及Dnmt1表达的关系

目的探讨PCDH8(protocadherin 8)基因在人胃癌组织中的甲基化状态及其与甲基转移酶1(Dnmt1)表达之间的关系,分析其与胃癌发生、发展的关系。方法取60例手术切除的胃癌组织及其相应癌旁正常胃黏膜组织(距癌组织5 cm以上),以甲基化特异性聚合酶链式反应(methylationspecific PCR,MSP)检测60例胃癌组织及其癌旁正常胃黏膜组织中PCDH8基因启动子区甲基化的状态;以免疫组化SP法分别检测PCDH8基因蛋白及Dnmt1蛋白的表达水平。结果胃癌组织中PCDH8甲基化率为55.0%(33/60),癌旁正常胃黏膜组织中PCDH8的甲基化率为3.3%(2/60),两者比较差异有统计学意义(χ2=38.76,P<0.001),PCDH8甲基化的发生率与患者年龄、性别及TNM分期等差异均无统计学意义(P均>0.05),而与有无淋巴结转移的差异有统计学意义(χ2=17.47,P<0.001)。PCDH8蛋白在癌旁正常胃黏膜组织中的表达(90.0%)明显高于胃癌组织(11.7%)(χ2=73.65,P<0.001),Dnmt1蛋白在胃癌组织中的阳性表达率(73.3%)明显高于癌旁正常胃黏膜组织的表达率(5.0%)(χ2=58.79,P<0.001)。胃癌组织中PCDH8蛋白与Dnmt1蛋白的表达呈负相关(r=-0.544,P<0.001)。结论PCDH8基因甲基化及Dnmt1的高表达可能参与了胃癌的发生和发展。

胃癌组织中Dnmt1基因mRNA和蛋白的表达

目的:探讨正常胃黏膜、不典型增生胃黏膜及胃癌组织中Dnmt1基因mRNA及蛋白的表达以及两者之间的关系.方法:应用原位杂交技术及免疫组化SP法检测20例正常胃黏膜、40例不典型增生胃黏膜及60例胃癌组织中Dnmt1基因mRNA及蛋白的表达状况.结果:Dnmt1 mRNA在正常胃黏膜腺上皮中基本呈阴性表达(除部分增生的小凹上皮),其阳性率在正常胃黏膜、不典型增生胃黏膜及胃癌三组间呈递增趋势,组间有统计学差异(P<0.01).Dnmt1蛋白在正常胃黏膜腺上皮中基本呈阴性表达(除部分增生的小凹上皮和淋巴细胞),其阳性率在正常胃黏膜、不典型增生胃黏膜及胃癌三组间呈递增趋势,组间有统计学差异(P<0.01).Dnmt1 mRNA和蛋白的阳性表达与年龄、性别、肿物的大小、浸润深度、有无脉管转移等临床病理特征无关,而与有无淋巴结转移有关(P<0.05).Spearman等级相关分析显示Dnmt1蛋白与mRNA表达呈正相关(rs=1.000,P<0.01).结论:Dnmt1在胃癌组织中的高表达与胃癌的发生、发展及淋巴结转移密切相关.

Dnmt1基因单核苷酸多态性与胃癌的关系

目的探讨Dnmt1基因rs16999593、rs2228611位点单核苷酸多态性与胃癌发病易感性的关系。方法采用病例-对照的研究方法 ,采集青岛地区310例胃癌患者（胃癌组）与420名健康体检者（对照组）外周血液样本,提取基因组DNA,PCR扩增目的基因片段,用DNA直接测序法对Dnmt1基因rs16999593、rs2228611位点进行基因分型,分析其与胃癌发病易感性的关系。结果 Dnmt1基因rs16999593位点TT型、CT型和CC型在胃癌组中的频率分别为58.1%、36.1%和5.8%,在对照组中分别为66.9%、27.9%和5.2%。与野生型TT型相比,携带CT基因型者胃癌发病的风险性增加（OR=1.494,95%CI=1.086~2.057,P〈0.05）,CC基因型虽可增加胃癌发病风险,但差异无统计学意义（OR=1.277,95%CI=0.677~2.448,P〉0.05）。rs2228611位点的各基因型在胃癌组和对照组间分布频率的差异无统计学意义（P〉0.05）。结论 Dnmt1基因rs16999593位点CT基因型可能增加青岛地区汉族人群胃癌发病的易感性。