云南栘(Docynia delavayi(Franch.)Schneid.)黄酮成分研究

本文首次对采自云南西双版纳的树皮的主要成分进行了研究 ,从其乙醚提取物中分离出四种黄酮类化合物 ,通过 NMR、MS和 IR等波谱手段 ,鉴定出它们分别为 :白杨素 ( Chrysin, ) ,柚皮素 ( Naringenin, ) ,槲皮素 ( Quercetin, )和广寄生甙( Avicularin, )

中国栘(木衣)属(Docynia Dcne.)一新种——长爪栘(木衣)

报道了栘(木衣)属一新种,长爪栘(Docynia longisunguis Q.Luo et J.L.Liu)。该新种与栘(木衣)(Docynia indica(Will.)Dcne.)和云南栘(木衣)(Docynia delavayi(Franch.)Schneid.)相似,但以花较大,直径3.5～4 cm,花瓣长20～25 mm,宽12～16 mm,基部具长爪,长5～9 mm,雄蕊46～53;子房5～6(7),花柱5～6(7);果径3～4.5 cm,而与它们相区别。

Study on Polyphenol Oxidase Activity and Total Phenol Content of Docynia indica

[Objectives] To study the polyphenol oxidase (PPO) activity and total phenol content of Docynia indica .[Methods] The tender branches and petioles of the medicinal and edible plant D. indica were used as experimental materials, and the annual changes of total phenol content and polyphenol oxidase (PPO) activity were analyzed.[Results] pH 7.0 was the optimum value of polyphenol oxidase activity in D. indica plants;the best substrate was catechol with the concentration of 0.15 mol/L;the optimum temperature was 25 ℃.[Conclusions] The total phenol content of D. indica plants was the lowest in April, May and September of each year. The polyphenol oxidase activity of D. indica plants at flowering and fruiting stage was significantly higher than that at pre-flowering stage.

蔷薇科SSR引物在云南栘[木衣]中的通用性分析

【目的】探究蔷薇科植物的SSR引物在云南栘[木衣]中的通用性,以便快速获得在云南栘[木衣]可以通用的SSR标记。【方法】以云南省瑞丽市、梁河县、陇川县和芒市4个天然居群的云南栘[木衣]为试验材料,利用100对李、梨、苹果、枇杷和Malacomeles denticulata等蔷薇科植物的SSR引物对云南栘[木衣]进行PCR扩增,从中筛选出具有多态性的SSR引物,并对云南栘[木衣]进行遗传多样性分析和聚类分析。【结果】在100对蔷薇科植物的SSR引物中有52对SSR引物在云南栘[木衣]中扩增出了目标产物条带,其中有42对SSR引物扩增出多态性条带,多态性引物所占比例为80.77%。4个云南栘[木衣]天然居群的多态位点比例、Shannon’s指数、Nei’s遗传多样性、观测等位基因数和有效等位基因数的均值分别为32.65%,0.191 7,0.131 1,1.326 5和1.232 4,其中瑞丽居群的以上多样性指数依次为40%,0.224 3,0.150 9,1.400 0和1.257 7,明显高于其他居群,表明其具有较高的遗传多样性,可能具有较为丰富的遗传变异。聚类分析结果表明,4个居群的云南栘[木衣]可分为2大类群,其中瑞丽、陇川和芒市居群聚为一类,梁河居群单独聚为一类,分类结果与地理区域分布情况一致。【结论】蔷薇科植物的SSR引物在云南栘[木衣]中具有较好的通用性,这些SSR为后续云南栘[木衣]及其近缘种进行种质资源鉴定和遗传多样性分析等研究提供了可用的标记。

云南栘[木衣]R2R3-MYB转录因子鉴定与表达分析

【目的】R2R3-MYB转录因子是植物中重要的一类转录因子,在调节色素积累方面发挥着重要作用。云南栘[木衣]存在显著的果皮颜色变异,通过分析R2R3-MYB转录因子在3种变异类型果皮的表达模式,旨在筛选可能参与果皮着色的候选基因。【方法】以3种变异类型果皮为材料,基于其转录组数据对R2R3-MYB转录因子进行鉴定,并对其理化性质、系统发育、保守结构域、保守基序和表达模式进行分析。【结果】共鉴定出99个R2R3-MYB转录因子,以不稳定亲水蛋白为主,其氨基酸长度在86~881 aa之间,相对分子质量在10.21~99.63 kDa之间,等电点在5.01~11.44之间;系统发育分析显示,4个云南栘[木衣]R2R3-MYBs和苹果MdMYB10共同聚在S6亚组,说明可能参与调控植物花青素的生物合成;每位成员均含有2个R结构域,每个R结构域在进化过程中都呈现出高度的保守性;保守基序分析结果显示,motif 1~motif 4在大多数成员的N端分布,与R2、R3结构域分布特点相似;表达模式分析表明,48个差异表达的DdR2R3-MYB基因存在5种表达模式,表明DdR2R3-MYB转录因子功能具有一定的多样性。RT-qPCR分析表明,DdR2R3-MYB2/16/18在红色果皮中上调表达显著,DdR2R3-MYB47/48在黄色果皮中上调表达显著。【结论】基于系统发育及表达模式分析结果,共筛选出3个可能调控花青素生物合成和2个可能调控类胡萝卜素生物合成的候选基因,为云南栘[木衣]果皮着色相关基因的挖掘奠定理论基础。

胶体处理对多依复原果汁品质及澄清机制的影响

研究旨在建立多依复原果汁澄清与色泽优化的胶体处理条件,借助分光光度、HPLC及UPL C-M S-MS等分析方法,解析胶体处理对复原果汁基本性状(色度、浊度、褐色值、pH值、可溶性固形物含量、维生素C含量)、总酚含量、绿原酸含量、多酚物质组成、体外抗氧化活性及非酶褐变动力学参数的影响。结果表明,添加质量分数为0.4%苹果高甲氧基果胶(AHP)、0.1%罗望子多糖(TSP)或0.2%壳聚糖(CTS)可使多依复原果汁澄清化为清亮的金黄色,澄清效果由优到劣依次是CTS、TSP、AHP;冷沉淀(4℃、24 h)结合胶体处理的澄清效果更佳,可将复原果汁在55℃下起始非酶褐变速率常数(k 0)从0.150 d-1降低至0.071~0.078 d-1。复原果汁的色度、浊度、褐色值及k 0的变化皆与总酚质量浓度呈密切的直线关系。综合考虑澄清性、非酶褐变抑制性(降低k 0)、DPPH自由基清除力、膳食纤维等因素,质量分数为0.1%的TSP为胶体处理得到的多依复原果汁相对最佳。多依复原果汁中的多酚类化合物主要为绿原酸类、黄酮类(包括槲皮素-O-葡萄糖苷、山柰酚-O-葡萄糖苷与二木糖苷、根皮苷以及白杨素)、异黄酮类(包括大豆苷、豌豆香堇苷)等。TSP处理会轻微减少绿原酸及其衍生物、黄酮类及异黄酮类含量。热处理会促使多酚类化合物明显减少或消失,产生大量的羟基化绿原酸衍生物,研究结果表明,绿原酸和羟基化绿原酸衍生物为非酶褐变的关键组成物质。希望研究成果可为多依复原果汁的澄清处理提供一定的理论与技术支持。

云南栘依黄酮提取及其抗氧化、降血糖活性研究

以云南栘依果为研究对象,采用响应面分析法对超声波辅助酶法提取黄酮进行优化,并对其体外抗氧化和降血糖活性进行测定。结果表明,云南栘依黄酮提取最佳工艺参数为提取温度50℃、复合酶比例(纤维素酶和果胶酶)3:2、提取时间50 min、液料比30 mL/g、乙醇浓度55%、pH4.5,在此条件下云南栘依黄酮得率高达13.10%,与预测值(13.01%)接近。体外抗氧化实验发现云南栘依黄酮清除DPPH自由基、ABTS^(+)自由基和羟基自由基的IC_(50)分别为0.04、0.29、0.70 mg/mL,当黄酮浓度分别为0.24、1.40、4.00 mg/mL时,对DPPH自由基、ABTS^(+)自由基、羟基自由基清除率分别为93.98%、97.60%、84.26%,同时云南栘依黄酮还具有一定的铁离子还原能力,表明其具有较强的抗氧化能力;体外降血糖实验发现云南栘依黄酮抑制α-葡萄糖苷酶、α-淀粉酶的IC_(50)分别为0.86、0.37 mg/mL,当黄酮浓度为12.0、5.0 mg/mL时对α-葡萄糖苷酶、α-淀粉酶的抑制率分别为81.83%、82.72%,表明其对α-葡萄糖苷酶、α-淀粉酶有很好的抑制能力。本文为云南栘依的综合开发利用提供了实验依据。

云南栘依热风干燥动力学模型及品质变化

为明确云南栘依热风干燥特性及适宜的干燥温度,实现其在热风干燥过程中的质量控制。以云南栘依为研究对象,探究不同温度(40、60、80、100℃)下云南栘依的干燥特性并建立动力学模型,同时以色泽、复水比、活性成分(多酚、黄酮、多糖)含量和抗氧化能力为指标,综合评价不同干燥温度对云南栘依品质的影响。结果表明:云南栘依干燥过程中水分比曲线呈指数衰减,干燥速率曲线分为加速、恒速及降速3个阶段,随着干燥温度升高,云南栘依水分扩散加剧,干燥速率明显增大,有效水分扩散系数(Deff)为0.61×10^(-6)~1.78×10^(-6)m^(2)/s,活化能(Ea)为17.64 kJ/mol;通过数据分析发现Page模型拟合度较好,决定系数(R^(2))均在0.98以上,卡方(X^(2))、误差平方和(SSE)分别在0.149×10^(-3)~0.548×10^(-3)、0.184×10^(-2)~0.493×10^(-2)范围内,能够较好地反映热风干燥过程中云南栘依水分比随干燥温度的变化规律。不同干燥温度下云南栘依的品质表现出一定的差异,60℃能够最大程度地保持栘依的色泽,40℃有较好的复水性,60℃时总酚、总黄酮、总多糖含量最高且抗氧化能力较好。干燥后的品质分析结果表明,温度对云南栘依的品质有较显著影响,60℃对其色泽的保持及活性物质的保留较好。品质相关性分析表明,云南栘依的色泽、复水比、活性物质含量及抗氧化能力之间存在一定的相关性,其中活性物质含量与总色差值(ΔE)呈负相关,与复水比及抗氧化能力呈正相关,同时也证实了云南栘依的抗氧化能力是多种活性物质共同作用的结果。综上所述,云南栘依的最佳热风干燥温度为60℃,在此温度下干燥的云南栘依品质较为突出,研究结果为云南栘依的进一步开发利用奠定基础。

鲜食型云南栘[木衣]优树选择

云南栘[木衣]是云南省的著名野生果树,其果实营养丰富,是理想的绿色水果,由于其果实中富含单宁、粗纤维和黄酮类化合物,导致大多数果实口感酸涩难以直接食用。课题组在前期资源调查过程发现云南栘[木衣]果实自然变异丰富,部分个体的果实汁甜肉脆口感较好,受到大众的喜爱,因此本研究期望筛选出鲜食型优树。本研究以云南省澜沧县糯扎渡镇的100株鲜食型候选单株为研究对象,对其果实表型(单果重、果实横径、果实纵径)进行测定分析,以平均果重(61.28 g)为指标,共筛选出66株初选优株;在此基础上,对初选优株的品质性状(总糖、总酸、维生素C、黄酮、单宁、粗蛋白、粗纤维)进行测定及分析。结果表明,各性状均存在一定变异,其中维生素C含量变异最大,变异系数为0.318,总糖含量最为稳定,总体一致性较高,变异系数为0.064;相关性分析结果表明,除粗蛋白含量与黄酮含量呈显著负相关,其余指标间呈正或负相关,且均未达到显著水平。采用综合评分法对初选优株进行打分并排名,排名越高说明其综合品质越好,最终根据单样本平均数假设检验确定显著低于平均分数的下限值,最终筛选出总得分高于最低下限值(56.13)的13株鲜食型优良个体,其中综合排名第一的为98号,得分66,综合表现最好,其余优株按照综合评分从高到低依次为:1、15、34、12、76、9、77、8、71、7、99、6号。本研究共筛选出了13个优良单株,为鲜食型云南栘[木衣]良种选育提供了宝贵材料。

栘[木衣]属植物多酚的含量测定与比较

以根皮苷为标样,研究Folin-Ciocalteu(FC)比色法测定栘[木衣]属3个种的多酚含量适宜条件,进一步用此改良法测定和比较多酚含量在栘[木衣]属的3个种的叶以及在长爪栘[木衣]的不同器官中的差异性。结果表明,FC比色法最佳测定条件为:加质量分数10%的Na2CO3溶液2.5 m L和FC显色剂0.5 m L,在55℃条件下反应7 min。在1.252~15.024 μg/m L范围内,根皮苷的吸光度与其质量浓度呈良好的线性关系(R2=0.999 1),平均加样回收率为(100.08±2.43)%;测定结果还表明,3个物种的叶片多酚含量的差异显著,云南栘[木衣]最低12.55 g/100 g,长爪栘[木衣]最高25.35 g/100 g;长爪栘[木衣]的不同器官均含有多酚类化合物,含量差异显著(3.75~25.35 g/100 g)(P<0.05),由低到高为:果核<根<果肉<根皮<果皮<茎<叶。结论:改良后的FC比色法,用于测定栘[木衣]的多酚含量,具有快速、准确、重复性好的特点。栘[木衣]属植物的多酚含量较高,且多酚含量有明显的种间差异性及部位的差异性,栘[木衣]属的植物具有较大的开发和应用价值。

云南栘依总黄酮提取工艺研究

用正交试验和单因素试验考察了索氏提取不同有机溶剂萃取法;不同条件乙醇回流提取法和超声提取法对云南栘依总黄酮含量的影响,结果表明：正丁醇萃取法总黄酮含量明显高于乙酸乙酯萃取法；回流提取,以12倍量75%乙醇回流提取1.5h,2次为最佳条件;超声提取以60min为宜。

栘衣果汁饮料加工技术的研究

以栘衣果实为原料,通过单因素试验和正交试验方法,研究栘衣果汁饮料的最佳制作工艺及配方。结果表明,0.9 g/L的明胶对果汁脱涩澄清的效果最好;添加0.2%NaHSO3可保持栘衣的原有色泽,且无明显硫味;以0.07%羧甲基纤维素钠(CMC)作稳定剂,可使果汁有良好的悬浮稳定性和流动性。产品的最佳配方为:13%栘衣原果汁,6%白砂糖,0.1%蛋白糖。按此工艺与配方制得的饮料具有栘衣果实的色泽与风味,酸甜适口,清亮透明,均匀稳定。

冠突散囊菌固态发酵对栘(木衣)茶品质和成分影响的研究

通过人工接种冠突散囊菌固态发酵栘(木衣)茶,探究栘(木衣)茶发酵前后感官品质和化学成分的变化。栘(木衣)茶经冠突散囊菌发酵7 d,通过感官评价可知发酵后茶汤滋味醇厚回甘,颜色橙黄明亮,具有独特的"菌花香",并通过电子舌进一步证明栘(木衣)茶发酵前后感官品质存在差异。采用全自动氨基酸分析仪对主要氨基酸进行分析,结果发酵后氨基酸总量下降,但是呈味氨基酸和人体必需氨基酸质量分数升高。采用高效液相色谱仪对发酵前后化学成分的组成与主要指标成分进行含量分析,结果 HPLC指纹图谱比较显示其化学成分组成与含量均发生了明显的变化,其中主要化学成分根皮苷质量分数由251.87 mg/g下降为198.25 mg/g,根皮素作为根皮苷的降解产物,其质量分数由2.4943 mg/g升高到19.619 mg/g。因此,通过发酵栘茶,可以改善其感官品质和化学成分,具有较大的开发与应用价值。

云南丽江栘果成分分析

本文对云南丽江木多木衣果内宏量营养成份、常量及微量营养元素和氨基酸组成进行了较为全面的分析 ,木多木衣果中粗蛋白含量及钙、磷、钾、脯氨酸、天冬氨酸的含量比一般水果中的含量要高。

不同育苗基质对多依果苗木生长的影响研究

开展6种不同基质配方对多依果苗期生长量(苗高、地径)的影响研究,通过方差分析和多重比较,分析不同基质对多依果小苗的苗高和地径生长量的影响。结果表明:采用不同的基质对多依果(容器育苗阶段)小苗的苗高和地径生长量具有极显著差异(P<0.01),且苗高和地径对不同育苗基质的响应不一致。基质配方为草炭∶腐殖土∶珍珠岩=3∶3∶1最适合苗木的苗高生长;基质配方为草炭∶蛭石=3∶1最适合苗木地径的生长,基质配方为红土对苗木的苗高和地径生长均不适合,不建议使用,混合基质比单一基质更适宜多依果的根系发育和苗木生长。

野香橼小果型毛叶枣云南栘(木衣)的营养价值研究

文研究并分析了野香橼、小果型毛叶枣、云南移(木衣)的营养成分,给出了果实中粗蛋白质、粗脂肪,总糖、维生素C和微量元素(Fe、Cu、Zn等元素)的含量,在与一些常见水果进行了比较的基础上,提出加工利用的建议。

云南栘[木衣]叶片总RNA提取方法的比较与改进

高质量RNA的提取是开展云南栘[木衣]分子生物学研究的前提。采用OMEGA(Plant RNA Kit 50)试剂盒、TIANGEN(TRNzol-A+Reagent)试剂盒、CTAB法、Trizol法、SDS法及其改良法6种方法提取云南栘[木衣]叶片的RNA,并用琼脂糖凝胶电泳、核酸蛋白检测仪及RT-PCR技术比较了6种不同方法提取的总RNA样品的质量。结果表明,2种试剂盒法和trizol法不适合云南栘[木衣]RNA提取,无法得到28S、18SrRNA条带,CTAB法和SDS法虽能得到RNA的3条带,但拖带现象严重,A260/A230的比值较低,对SDS法进行改进,提高β-巯基乙醇的量,在缓冲液中增加PVP,使用HiBind RNA Mini柱,有效地抑制多酚多糖的污染,得到了较高质量、可用于RT-PCR扩增的云南栘[木衣]的RNA。对其开展分子生物学研究提供技术支撑。

云南栘[木衣]SRAP-PCR反应体系的建立及引物筛选

【目的】建立云南栘[木衣]SRAP-PCR最佳反应体系并筛选SRAP-PCR多态性引物组合。【方法】以木里、澜沧和盈江3个天然群体的云南栘[木衣]嫩叶为试验材料,采用改进后的CTAB法提取云南栘[木衣]基因组DNA。利用L16(45)的正交设计对Taq DNA聚合酶、Mg^(2+)、dNTPs、模板DNA及引物5种因素进行优化,建立云南栘[木衣]SRAP-PCR最佳反应体系,并从100对引物组合中筛选SRAP-PCR多态性较高的引物组合。【结果】云南栘[木衣]SRAP-PCR最佳反应体系(25μL):Taq DNA聚合酶0.5 U,Mg^(2+)2.5 mmol/L,dNTPs 0.25 mmol/L,模板DNA 80 ng,引物0.8μmol/L。各因素对云南栘[木衣]SRAP-PCR反应体系的影响由小到大排列为:dNTPs<模板DNA<Taq DNA聚合酶<Mg^(2+)<引物。利用木里、澜沧和盈江3个天然群体的云南栘[木衣]基因组DNA对建立的体系进行验证,筛选出的20对引物组合共扩增出212个位点,其中多态性位点187个,占比为88.21%。【结论】建立了稳定可靠的云南栘[木衣]SRAP-PCR体系,为后续云南栘[木衣]遗传多样性的研究提供支持。

栘依树抗氧化剂对香烟烟气自由基及人淋巴细胞姐妹染色单体交换率的影响

采用电子顺磁共振法研究了栘依树抗氧化剂对香烟烟气自由基含量的影响,并比较了不同自由基含量的香烟烟气冷凝物(CSC)对人淋巴细胞姐妹染色单体的损伤情况.在香烟滤嘴中注入50μL0.2%的栘依树抗氧化剂溶液后,香烟烟气中气相、粒相自由基含量分别降低40.2%和28.3%,平均降低39.6%;中高剂量的实验烟(添加栘依树),与对照烟(不加栘依树)相比,人淋巴细胞姐妹染色单体交换率显著降低(t＞t0．05),其中中剂量烟降低幅度更大；低剂量实验烟与对照烟相比,姐妹染色单体交换率也有降低趋势,但差异不显著(t<t0.05).以上结果表明,栘依树可明显降低香烟中自由基水平,进而降低香烟对人体的危害性.

响应面法优化多依果酒的酿造工艺

以多依果为原料,酒精度、感官评分、可溶性固形物含量为评价指标,在单因素试验的基础上,通过响应面法优化多依果酒的酿造工艺。结果表明,多依果酒的最佳酿造工艺参数为:室温(18~26℃)发酵6 d,白砂糖添加量23.7%,二氧化硫添加量4.5%,酵母菌接种量4.0%。在此最优条件下,多依果酒呈黄橙色,具有多依果清香,口感醇和,感官评分为98分,酒精度为9.82%vol,可溶性固形物含量为13.00%,总酸含量为7.20 g/L,菌落总数为18 CFU/m L,大肠菌群<3 MPN/100 m L,各项指标均符合相关果酒行业标准。