云南栘(Docynia delavayi(Franch.)Schneid.)黄酮成分研究

本文首次对采自云南西双版纳的树皮的主要成分进行了研究 ,从其乙醚提取物中分离出四种黄酮类化合物 ,通过 NMR、MS和 IR等波谱手段 ,鉴定出它们分别为 :白杨素 ( Chrysin, ) ,柚皮素 ( Naringenin, ) ,槲皮素 ( Quercetin, )和广寄生甙( Avicularin, )

澜沧县不同海拔梯度云南栘[木衣]花、果物候观测及表型变异分析

为探讨云南省澜沧县糯扎渡镇海拔高度对云南栘[木衣]物候期的影响及其花、果表型变异水平,以糯扎渡镇10个海拔(1 500~2 000 m)的100个云南栘[木衣]个体为研究对象,观测其开花和结实的物候,对花、果共11个表型性状进行变异分析。结果表明,1)云南栘[木衣]花期长30~34 d;果期长188~198 d。不同海拔梯度之间始花期最大相差为4 d,落花期最大相差为6 d,始果期最大相差11 d,落果期最大相差9 d。随着海拔上升,云南栘[木衣]花、果物候期均逐渐推迟。2)花表型性状存在一定变异,果实表型性状相对稳定。花的各表型性状在不同海拔的变异系数在13.54%~24.15%,平均变异系数为17.79%。果实性状中,果实纵径(FLD)、果实横径(FTD)和单果重(FD)的变异系数分别为7.93%、5.97%和6.15%,平均变异系数为7.21%,变异系数相对较低。在1 801~1 850 m时,云南栘[木衣]种群花、果表型性状平均变异系数均最大。随着海拔上升,OW(子房宽)、CL(子房长)、CW(花萼宽)、PL(花瓣长)和PW(花瓣宽)呈现出逐渐减小的趋势。3)相关性分析表明,除子房宽(OW)与海拔呈显著负相关,其余性状与海拔均无显著相关。除花药长(AL)、子房宽(OW)、花萼长(CL)、花瓣长(PL)及果实纵径(FLD)与其他性状间没有显著相关关外,其他性状间均存在显著或极显著相关。4)聚类分析表明,10个海拔种群可以聚为明显的3支,分别为低海拔区、中海拔区以及高海拔区。研究结果可以为云南栘[木衣]良种选育提供理论依据。

鲜食型云南栘[木衣]优树选择

云南栘[木衣]是云南省的著名野生果树,其果实营养丰富,是理想的绿色水果,由于其果实中富含单宁、粗纤维和黄酮类化合物,导致大多数果实口感酸涩难以直接食用。课题组在前期资源调查过程发现云南栘[木衣]果实自然变异丰富,部分个体的果实汁甜肉脆口感较好,受到大众的喜爱,因此本研究期望筛选出鲜食型优树。本研究以云南省澜沧县糯扎渡镇的100株鲜食型候选单株为研究对象,对其果实表型(单果重、果实横径、果实纵径)进行测定分析,以平均果重(61.28 g)为指标,共筛选出66株初选优株;在此基础上,对初选优株的品质性状(总糖、总酸、维生素C、黄酮、单宁、粗蛋白、粗纤维)进行测定及分析。结果表明,各性状均存在一定变异,其中维生素C含量变异最大,变异系数为0.318,总糖含量最为稳定,总体一致性较高,变异系数为0.064;相关性分析结果表明,除粗蛋白含量与黄酮含量呈显著负相关,其余指标间呈正或负相关,且均未达到显著水平。采用综合评分法对初选优株进行打分并排名,排名越高说明其综合品质越好,最终根据单样本平均数假设检验确定显著低于平均分数的下限值,最终筛选出总得分高于最低下限值(56.13)的13株鲜食型优良个体,其中综合排名第一的为98号,得分66,综合表现最好,其余优株按照综合评分从高到低依次为:1、15、34、12、76、9、77、8、71、7、99、6号。本研究共筛选出了13个优良单株,为鲜食型云南栘[木衣]良种选育提供了宝贵材料。

云南栘依总黄酮提取工艺研究

用正交试验和单因素试验考察了索氏提取不同有机溶剂萃取法;不同条件乙醇回流提取法和超声提取法对云南栘依总黄酮含量的影响,结果表明：正丁醇萃取法总黄酮含量明显高于乙酸乙酯萃取法；回流提取,以12倍量75%乙醇回流提取1.5h,2次为最佳条件;超声提取以60min为宜。

栘衣果汁饮料加工技术的研究

以栘衣果实为原料,通过单因素试验和正交试验方法,研究栘衣果汁饮料的最佳制作工艺及配方。结果表明,0.9 g/L的明胶对果汁脱涩澄清的效果最好;添加0.2%NaHSO3可保持栘衣的原有色泽,且无明显硫味;以0.07%羧甲基纤维素钠(CMC)作稳定剂,可使果汁有良好的悬浮稳定性和流动性。产品的最佳配方为:13%栘衣原果汁,6%白砂糖,0.1%蛋白糖。按此工艺与配方制得的饮料具有栘衣果实的色泽与风味,酸甜适口,清亮透明,均匀稳定。

野香橼小果型毛叶枣云南栘(木衣)的营养价值研究

文研究并分析了野香橼、小果型毛叶枣、云南移(木衣)的营养成分,给出了果实中粗蛋白质、粗脂肪,总糖、维生素C和微量元素(Fe、Cu、Zn等元素)的含量,在与一些常见水果进行了比较的基础上,提出加工利用的建议。

云南栘[木衣]SRAP-PCR反应体系的建立及引物筛选

【目的】建立云南栘[木衣]SRAP-PCR最佳反应体系并筛选SRAP-PCR多态性引物组合。【方法】以木里、澜沧和盈江3个天然群体的云南栘[木衣]嫩叶为试验材料,采用改进后的CTAB法提取云南栘[木衣]基因组DNA。利用L16(45)的正交设计对Taq DNA聚合酶、Mg^(2+)、dNTPs、模板DNA及引物5种因素进行优化,建立云南栘[木衣]SRAP-PCR最佳反应体系,并从100对引物组合中筛选SRAP-PCR多态性较高的引物组合。【结果】云南栘[木衣]SRAP-PCR最佳反应体系(25μL):Taq DNA聚合酶0.5 U,Mg^(2+)2.5 mmol/L,dNTPs 0.25 mmol/L,模板DNA 80 ng,引物0.8μmol/L。各因素对云南栘[木衣]SRAP-PCR反应体系的影响由小到大排列为:dNTPs<模板DNA<Taq DNA聚合酶<Mg^(2+)<引物。利用木里、澜沧和盈江3个天然群体的云南栘[木衣]基因组DNA对建立的体系进行验证,筛选出的20对引物组合共扩增出212个位点,其中多态性位点187个,占比为88.21%。【结论】建立了稳定可靠的云南栘[木衣]SRAP-PCR体系,为后续云南栘[木衣]遗传多样性的研究提供支持。

栘依树抗氧化剂对香烟烟气自由基及人淋巴细胞姐妹染色单体交换率的影响

采用电子顺磁共振法研究了栘依树抗氧化剂对香烟烟气自由基含量的影响,并比较了不同自由基含量的香烟烟气冷凝物(CSC)对人淋巴细胞姐妹染色单体的损伤情况.在香烟滤嘴中注入50μL0.2%的栘依树抗氧化剂溶液后,香烟烟气中气相、粒相自由基含量分别降低40.2%和28.3%,平均降低39.6%;中高剂量的实验烟(添加栘依树),与对照烟(不加栘依树)相比,人淋巴细胞姐妹染色单体交换率显著降低(t＞t0．05),其中中剂量烟降低幅度更大；低剂量实验烟与对照烟相比,姐妹染色单体交换率也有降低趋势,但差异不显著(t<t0.05).以上结果表明,栘依树可明显降低香烟中自由基水平,进而降低香烟对人体的危害性.

多依果红心火龙果复合果酒发酵工艺优化及抗氧化活性分析

目的 通过响应面法优化多依果、红心火龙果复合果酒的发酵工艺,并对其抗氧化活性进行分析。方法 在单因素实验的基础上,以酒精度和感官评分“归一化”后的总评“归一值”为响应值进行响应面优化实验,并对发酵工艺优化所得的复合果酒进行1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)和2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐[2’-azinobis-(3-ethylbenzthiazoline-6-sulphonate),ABTS]自由基清除率实验分析。结果 复合果酒发酵最佳工艺参数为:多依果、红心火龙果的质量比1:1、蔗糖添加量17%、二氧化硫添加量69 mg/kg、酵母接种量1.4%和初始pH 3.3,常温发酵7 d。在此最佳酿造工艺条件下,复合果酒为亮红色,酒精度达到11.3%vol,总黄酮含量为9.0mg/kg,对DPPH和ABTS自由基的清除率最高可达89.75%和81.26%,总体抗氧化能力高于多依果汁而略低于维生素C。结论 多依果红心火龙果复合果酒口感谐调,并且较好地保留了水果的抗氧化活性成分,本研究为多依果的应用开发提供了一定的理论支撑。

大果栘依总黄酮的提取与抗氧化性研究

为了探讨大果栘依中总黄酮的提取工艺及体外抗氧化性,采用超声提取法。在乙醇浓度、液料比、提取时间、提取温度四个单因素实验的基础上,通过L9(34)正交实验,比较各因素对提取率的影响,优化大果栘依总黄酮的提取工艺。同时,对大果栘依总黄酮进行显色定性,并测定大果栘依总黄酮对DPPH、羟基自由基、超氧阴离子的清除作用。最佳提取工艺为:乙醇浓度60%、液料比25∶1 mL/g、超声时间20 min、提取温度50℃,此条件下的提取率达到4.12%;随着大果栘依总黄酮浓度的升高,对DPPH、羟基自由基、超氧阴离子的清除率逐渐升高。

云南多依的生物学特性和物候特征研究

通过对云南多依生物学特性进行观察,对其形态特征、物候特征进行较详细描述。结果表明:其果期是6～11月,12月中、下旬才进入落果期;部分老叶在冬、春季节呈紫红色,春季新发嫩叶也呈紫红色。对云南多依生物学特性和物候特征的观察,为云南多依的开发利用提供依据。

云南多依繁殖方法的研究

通过田间观察和室内试验,研究云南多依在不同处理方式下的发芽率和移栽成活率。结果表明:播种繁殖中随采随制备随播种的发茅率和移栽成活率是最高的,基质为砂土的要此园土的发芽率和移栽成活率高;扦插繁殖的最佳方式是使用一年生枝条并使用生根粉。

云南栘[木衣]MADS-box基因家族鉴定与表达分析

MADS-box基因家族是一类重要的转录因子家族,在调控植物的生长发育、信号传导等过程中发挥着重要作用。为研究云南栘[木衣][Docynia delavayi(Franch.)Schneid.]MADS-box基因家族的特征及其在种子不同萌发时期的表达情况,本研究以云南栘[木衣]不同萌发时期的种苗为材料,在转录组测序的基础上利用生物信息学方法从云南栘[木衣]转录组数据库中筛选MADS-box转录因子,分析其理化性质、蛋白保守基序、系统进化及表达模式,并采用实时荧光定量PCR(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)实验验证云南栘[木衣]MADS-box基因家族成员在种子不同萌发时期的表达情况。在云南栘[木衣]转录组数据中共鉴定出81个MADS-box转录因子,其编码的氨基酸序列分子量分布范围在6211.34–173512.77 Da之间,等电点介于5.21−10.97之间。系统进化分析显示,81个云南栘[木衣]MADS-box基因可分为15个亚组,其中DdMADS27、DdMADS42、DdMADS45、DdMADS46、DdMADS53、DdMADS61、DdMADS76、DdMADS77和DdMADS79可能参与对云南栘[木衣]胚珠的发育调控。结合云南栘[木衣]种子转录组数据与qRT-PCR实验分析发现,DdMADS25和DdMADS42可能参与调控种子发育,DdMADS37和DdMADS38可能对种子休眠有负调控作用。前人报道中MIKC*亚组多参与调控花器官发育,本研究首次发现MIKC*亚组的转录因子在种子萌发前期具有较高表达量,由此推测MIKC*亚组在种子萌发过程中起到调控作用。为验证该推测准确性,挑选了MIKC*亚组的DdMADS60和DdMADS75进行qRT-PCR实验,实验结果与转录组测序的表达趋势一致。本研究可为进一步从分子进化角度研究云南栘[木衣]MADS-box基因家族的生物学功能提供参考。

云南栘[木衣]ISSR-PCR反应体系的建立及引物筛选

为建立适合云南栘[木衣]的ISSR-PCR反应体系,本研究通过L_(16)(4~5)正交设计对影响PCR扩增反应的5个因素(模板DNA,引物,Mg~(2+),d NTPs,Taq DNA聚合酶)进行优化;在建立反应体系的基础上,筛选出多态性高的引物并确定其退火温度。结果表明,在25μL反应体系中,最佳反应体系用量为模板DNA 20 ng、引物0.3μmol/L、Mg~(2+)1.5 mmol/L、d NTPs 0.15 mmol/L、Taq DNA聚合酶1.5 U。建立的反应体系扩增稳定,筛选出的11条引物多态性较好、条带清晰。本研究反应体系的建立可为云南栘[木衣]遗传多样性研究提供技术支持。