四种抗原用于Dot-IGSS和Dot-ELISA诊断日本血吸虫病的比较

以日本血吸虫可溶性成虫抗原(AWA)、尿素溶解性成虫抗原(JWU)、硫酸铵沉淀成虫抗原(AW)和可溶性虫卵抗原(SEA),用斑点免疫金银染色试验(Dot-IGSS)和Dot-ELISA诊断日本血吸虫病.结果显示:Dot-IGSS法,4种抗原分别检测50例日本血吸虫病人血清,抗体检出率均达100.0%,50例正常人阴性符合率98.0%—100.0%,与肝吸虫病人的交叉反应率0%—2.0%(P>0.05),Dot-ELISA法、AWA、AW和SEA阳性符合率均为100.0%,JWU为90.0%,低于其它抗原(P<0.05),与正常人阴性符合率及肝吸虫病人交叉反应率分别为94.0%—100.0%及0%—6.0%.各抗原检出抗体滴度,Dot-IGSS均高于Dot-ELISA(P<0.05—0.01).抗原浓度在500.0μg/ml,两法抗体检出结果无差异(100.0%),至6.25μg/ml,酶标法检出率为0,而金标法仍为70.0%—80.0%(P<0.01).

三种抗原用于斑点免疫金银染色试验(Dot-IGSS)诊断华支睾吸虫病的研究

应用斑点免疫金银染色技术(Dot-IGSS),以华支睾吸虫成虫抗原(AWA)、尿素溶解性成虫抗原(CWU)和硫酸铵沉淀成虫抗原(AW)诊断华支睾吸虫病,60例血清抗体检出率均达100.0％,与正常人血清反应(60例)阴性符合率为93.3～96.6％,与日本血吸虫病人(60例)的交叉反应为0～5.0％,与囊虫病人(30例)和肝炎病人(15例)的交叉反应分别为3.3～6.7％和0。各抗原间未见显著性差异(P>0.05)。但与混合阳性血清反应,AW活性似较AWA和CWU强。

快速微量Dot—IGSS检测日本血吸虫病人血清中抗体的研究

本文用日本血吸虫可溶性虫卵抗原点于微孔滤膜上,以快速微量斑点免疫金银染色法(Rapid microvolume Dot-IGSS,Rm Dot-IGSS)检测血吸虫病患者血清中相应抗体,并与Dot-IGSS相比较,检测血吸虫病人血清69份,两法阳性率均为100％。检测正常人血清50份,两法阴性率均为100％。检测华支睾吸虫病人血清10份,两法均未出现交叉反应。检测肺吸虫病人血清10份,Rm Dot-IGSS未出现交叉反应,Dot-IGSS有1例出现交叉反应。

快速斑点免疫金银染色方法诊断华支睾吸虫病的观察

本文报告应用快速斑点免疫金银染色法(FAST-Dot-IGSS)、免疫金银染色法、斑点免疫金银染色法各检测华支睾吸虫病人血清100份,阳性率分别为94％、98％和98％。正常人血清50份,阴性率分别为100％、98％和98％。日本血吸虫病人血清10份,未出现交叉反应。

斑点免疫金染色法与免疫金银染色法诊断日本血吸虫病的比较(英文)

目的 建立快速、敏感、特异性强 ,操作简便和经济实用的诊断日本血吸虫病的免疫学检测方法一快速斑点免疫金染色法 (R -Dot-IGS)。 方法 将日本血吸虫虫卵可溶性抗原点加于微孔滤膜 ,经预作用和封闭后 ,依次加入待检血清和金标记二抗 ,然后观察结果 ,并与快速微量斑点免疫金银染色法 (RM -Dot -TGSS)和斑点免疫金银染色法(Dot-IGSS)进行比较。 结果 用R -Dot -IGS、RM -Dot -IGSS和Dot -IGSS同步检测 5 5份日本血吸虫病患者血清 ,三种方法的阳性率分别为 98.18% (5 4/5 5 )、98.18% (5 4/5 5 )和 10 0 % ;检测 5 0例健康人血清均为阴性 ;检测 10例肝吸虫病人和 10例肺吸虫病人血清 ,仅有 1份肝吸虫病人血清在RM -Dot -IGSS反应为阳性。 结论 R -Dot -IGS检测过程仅为 15min不需银显影 ,具有敏感特异、快速简便实用的特点 ,适用于日本血吸虫病的现场流行病学调查和临床快速诊断。

斑点免疫金银染色检测RNA抗体及其临床意义

采用斑点免疫金银染色法检测了280份临床血清标本的抗RNA 抗体.其中144份血清同时以ELISA 法作平行对照。两法检测结果差异无显著性(P>0.05),符合率91%,两法定量结果间存在高度的直线正相关性。该抗体在自身免疫病中的检出率为46.6%,其中在SLE 达62%,但在非自身免疫病仅为5.1%,可作为自身免疫病筛查指标,对ANA 阴性者尤有意义。

免疫金银染色法检测SLE患者血清抗核抗体和抗双链DNA抗体的临床研究

目的 探讨检测系统性红斑狼疮 (SLE)患者血清抗核抗体 (ANA)和抗双链DNA抗体 (A -dsDNA)的临床意义。方法 用免疫金银染色法 (immunogold -silverstaining ,IGSS)和斑点免疫金银染色法 (dot -immunogold -silverstaining ,Dot-IGSS)同步检测SLE患者血清ANA和A -dsDNA。结果 16 9例活动期SLE患者血清ANA和A -dsDNA的阳性率分别为 98.2 %和 77.2 % ;4 4例非活动期患者ANA和A -dsDNA的阳性率分别为 72 .2 %和15 .9% ,两组比较 ,阳性率有显著性差异 (P <0 .0 1)。活动期病人的血清滴度也较非活动期患者高 (P <0 .0 1) ;A -dsDNA阳性患者的肾损害率明显高于A -dsDNA阴性者 (P <0 .0 1)。结论 ANA、A -dsDNA阳性且滴度高提示SLE处于活动期 ,A -dsDNA阳性提示有肾损害的可能 ;但A -dsDNA阴性亦不能排除SLE。

免疫金银染色法用于检测系统红斑狼疮患者血清抗核抗体和抗双链DNA抗体

目的 探讨检测抗核抗体 (ANA)、抗双链DNA抗体 (A -dsDNA)对系统性红斑狼疮 (SLE)的诊断意义。方法 采用免疫金银染色法 (IGSS)和用斑点免疫金银染色法 (Dot-IGSS) ,检测SLE病人血清中ANA和A -dsD NA。结果 113例活动期SLE患者血清ANA阳性率 97.3% ,A -dsDNA阳性率 71.7% ;35例非活动期SLE患者血清ANA阳性率 74 .3% ,A -dsDNA阳性率 14 .3%。活动期ANA、A -dsDNA阳性率与非活动期比较均有显著性差异 (P <0 .0 1)。活动期ANA平均滴度明显高于非活动期 ,A -dsDNA阳性组肾损害明显高于A -dsDNA阴性者(P <0 .0 1)。结论 IGSS和Dot-IGSS检测ANA、A -dsDNA有高度特异性、敏感性和稳定性 ,较高滴度A -dsD

快速斑点免疫金染色法与二种免疫金银染色法诊断日本血吸虫病的比较

将日本血吸虫虫卵可溶性抗原点加于微孔滤膜 ,经预作用和封闭后 ,依次加入待检血清和金标记二抗 ,建立快速、敏感、特异性强 ,操作简便和经济实用的诊断日本血吸虫病的免疫学检测方法———快速斑点免疫金染色法 (R Dot IGS) ,该法无需银显影 ,检测过程仅为 15min。用 (R Dot IGS)、快速微量斑点免疫金银染色法 (RM Dot IGSS)和斑点免疫金银染色法 (Dot IGSS)同步检测 5 5份日本血吸虫病患者血清 ,三种方法的阳性率分别为 98. 18% ( 5 4/ 5 5 ) ,98. 18% ( 5 4/ 5 5 )和 10 0 % ;检测 5 0例健康人血清均为阴性 ;检测 10例肝吸虫病人和 10例肺吸虫病人血清 ,仅有 1份肝吸虫病人血清在RM Dot IGSS反应为阳性。检测结果证明R Dot IGS具有敏感特异、快速简便实用的特点 ,适用于日本血吸虫病的现场流行病学调查和临床快速诊断。

斑点免疫金银染色检测日本血吸虫抗体影响因素的探讨

本文对不同封闭液及其稀释液、不同显影时间、不同方法保存的金标记抗体对斑点免疫金银染色检测日本血吸虫抗体实验结果的影响进行了探讨。认为以适当浓度的羊血清/BSA作封闭液,小牛血清作稀释液较好;20℃显影20min为宜;金标抗体以不加NaN_3—20℃保存较佳,有效期可达2年以上。

4种抗原用于斑点免疫金银染色试验诊断日本血吸虫病的比较

采用斑点免疫金银染色(Dot-IGSS)试验对4种日本血吸虫抗原的敏感性及特异性进行比较。结果显示粗提成虫抗原(AWA)、尿素溶解性成虫抗原(JWU)、硫酸铵沉淀成虫抗原(AW)和可溶性虫卵抗原(SEA)检测40例日本血吸虫病人血清抗体的敏感性均达100.0％,40例正常人血清的可疑阳性反应分别为2.5％、0、2.5％和0,40例肝吸虫病人血清的可疑交叉率分别为2.5％、0、2.5％和0,表明在高敏感的IGSS检测系统中,粗提成虫抗原的敏感性和特异性与部分纯化者和虫卵抗原无显著性差异(P>0.05)。

银加强技术在滴金免疫测定法中的应用

为了提高斑点金免疫渗滤试验（滴金法）的敏感度，进行了银加强滴金法的研究。通过最适条件的选择，建立了如下的方法。银染液的组成为乙酸银，阿拉伯树胶，对苯二酚，溶于ｐＨ３．８柠檬酸盐缓冲液中。洗涤液为含Ｔｗｅｅｎ－２０的ｐＨ８．２Ｔｒｉｓ缓冲盐水。在滴金法试验完成后，在渗滤装置的小孔中按滴金法操作依次加入洗涤液、双蒸水、ｐＨ３．８柠檬酸缓冲液，最后加入银染液。７分钟后观察结果，膜上出现棕黑色斑点者为阳性。银染过程在室温中进行，无需避光。以测定肌红蛋白的滴金法为模式进行如上的银加强实验，敏感度提高８倍。本法试剂稳定，操作简便，适用于各种斑点金免疫结合试验。

斑点免疫金银染色技术检测鸡传染性法氏囊病毒的研究

本研究成功建立了检测鸡传染性法氏囊病毒（ＩＢＤＶ）抗原的斑点—免疫金银染色技术（Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ），并确定了操作流程的最佳试验条件。应用该法对纯化ＩＢＤＶ抗原的最低检出量为０．１９５３ｎｇ／点，其敏感性为Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ的８倍。特异性阻断试验和交叉反应试验证明Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ具有较高的特异性。Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ和Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ对５４份自然感染法氏囊样品检测的阳性率为９６．３％和９２．５％（χ２＝３．１１７９，Ｐ＞０．０５），统计学分析两者无显著差异。研究表明本法具有敏感、特异性强、经济、安全等优点，可用于ＩＢＤＶ感染的特异诊断。