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Peripheral CD4^(+)CD8^(+) double positive T cells:A potential marker to evaluate renal impairment susceptibility during systemic lupus erythematosus
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作者 Kai Chang Wanlin Na +4 位作者 Chenxia Liu Hongxuan Xu Yuan Liu Yanyan Wang Zhongyong Jiang 《The Journal of Biomedical Research》 CAS CSCD 2023年第1期59-68,共10页
Lupus nephritis(LN) has a high incidence in systemic lupus erythematosus(SLE) patients, but there is a lack of sensitive predictive markers. The purpose of the study was to investigate the association between the CD4^... Lupus nephritis(LN) has a high incidence in systemic lupus erythematosus(SLE) patients, but there is a lack of sensitive predictive markers. The purpose of the study was to investigate the association between the CD4^(+)CD8^(+)double positive T(DPT) lymphocytes and LN. The study included patients with SLE without renal impairment(SLE-NRI), LN, nephritic syndrome(NS), or nephritis. Peripheral blood lymphocyte subsets were analyzed by flow cytometry. Biochemical measurements were performed with peripheral blood in accordance with the recommendations proposed by the National Center for Clinical Laboratories. The proportions of DPT cells in the LN group were significantly higher than that in the SLE-NRI group(t=4.012, P<0.001), NS group(t=3.240,P=0.001), and nephritis group(t=2.57, P=0.011). In the LN group, the risk of renal impairment increased significantly in a DPT cells proportion-dependent manner. The risk of LN was 5.136 times(95% confidence interval, 2.115–12.473) higher in cases with a high proportion of DPT cells than those whose proportion of DPT cells within the normal range. These findings indicated that the proportion of DPT cells could be a potential marker to evaluate LN susceptibility, and the interference of NS and nephritis could be effectively excluded when assessing the risk of renal impairment during SLE with DPT cell proportion. 展开更多
关键词 CD4^(+)CD8^(+)double positive t cells lupus nephritis SUSCEPtIBILItY systemic lupus erythematosus
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Reconstitution of double-negative T cells after cord blood transplantation and its predictive value for acute graft-versus-host disease
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作者 Tianzhong Pan Peng Ding +8 位作者 Aijie Huang Baolin Tang Kaidi Song Guangyu Sun Yue Wu Shiying Yang Xingchi Chen Dongyao Wang Xiaoyu Zhu 《Chinese Medical Journal》 SCIE CAS CSCD 2024年第10期1207-1217,共11页
Background:With an increasing number of patients with hematological malignancies being treated with umbilical cord blood transplantation(UCBT),the correlation between immune reconstitution(IR)after UCBT and graft-vers... Background:With an increasing number of patients with hematological malignancies being treated with umbilical cord blood transplantation(UCBT),the correlation between immune reconstitution(IR)after UCBT and graft-versus-host disease(GVHD)has been reported successively,but reports on double-negative T(DNT)cell reconstitution and its association with acute GVHD(aGVHD)after UCBT are lacking.Methods:A population-based observational study was conducted among 131 patients with hematological malignancies who underwent single-unit UCBT as their first transplant at the Department of Hematology,the First Affiliated Hospital of USTC,between August 2018 and June 2021.IR differences were compared between the patients with and without aGVHD.Results:The absolute number of DNT cells in the healthy Chinese population was 109(70-157)/μL,accounting for 5.82(3.98-8.19)%of lymphocytes.DNT cells showed delayed recovery and could not reach their normal levels even one year after transplantation.Importantly,the absolute number and percentage of DNT cells were significantly higher in UCBT patients without aGVHD than in those with aGVHD within one year(F=4.684,P=0.039 and F=5.583,P=0.026,respectively).In addition,the number of DNT cells in the first month after transplantation decreased significantly with the degree of aGVHD increased,and faster DNT cell reconstitution in the first month after UCBT was an independent protective factor for aGVHD(HR=0.46,95%confidence interval[CI]:0.23-0.93;P=0.031).Conclusions:Compared to the number of DNT cells in Chinese healthy people,the reconstitution of DNT cells in adults with hematological malignancies after UCBT was slow.In addition,the faster reconstitution of DNT cells in the early stage after transplantation was associated with a lower incidence of aGVHD. 展开更多
关键词 Umbilical cord blood transplantation Graft-versus-host disease Immune reconstitution double negative t Hematological Malignancies treg cell Breg cell
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Development and optimization of a double antibody sandwich ELISA for the detection of goose T cell surface CD8α molecule
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作者 ZHANG Wei CHENG Bei-bei +10 位作者 CHEN Shun WANG Ming-shu JIA Ren-yong ZHU De-kang LIU Ma-feng LIU Fei SUN Kun-feng YANG Qiao WU Ying CHEN Xiao-yue CHENG An-chun 《Journal of Integrative Agriculture》 SCIE CAS CSCD 2016年第10期2363-2368,共6页
CD8, a glycoprotein on the surface of T cells, is involved in the defense against viral infection and plays significant roles in antigen presentation and in the antiviral immune response. CD8 is composed of two chains... CD8, a glycoprotein on the surface of T cells, is involved in the defense against viral infection and plays significant roles in antigen presentation and in the antiviral immune response. CD8 is composed of two chains. Of these, the CD8α chain was chosen for the detection because it involved in both the CD8αα homodimer and the CD8αβ heterodimer. Here, we established a double antibody sandwich enzyme-linked immunosorbent assay(DAS-ELISA) for specific detection of goose CD8α(go CD8α). The results showed that the optimal coated antibody and antigen dilutions were 1:50(the antibody titer was 1:12 800) and 1:32(0.3 ng m L^–1), respectively, while the optimal capture antibody and horseradish peroxidase(HRP)-labelled goat anti-rabbit Ig G dilutions were 1:50(the antibody titer was 1:51 200) and 1:4 000(the antibody titer was 1:5 000), respectively. The optimal blocking buffer was 5% bovine serum albumin(BSA). The best incubating condition was overnight at 4℃, the best blocking time was 120 min and the best anti-capture antibody working time was 150 min. In addition, the minimum dose detectable by DAS-ELISA was 5×10^–3 ng m L^–1. Most importantly, go CD8α expression levels in goose spleen mononuclear cells(MNCs) post-Goose parvoviruse(GPV) infection were found to be significantly up-regulated using the DAS-ELISA method, which was consistent with previous results obtained using real-time quantitative PCR. In conclusion, the DAS-ELISA method reported here is a novel, specific technique for the clinical detection of go CD8α. 展开更多
关键词 t cells goose CD8α polyclonal antibody double antibody sandwich ELISA
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新辅助治疗后外周血双阴性T细胞比例与进展期直肠癌预后的关系研究
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作者 赵欣烜 郭宇廷 +2 位作者 张毅勋 卫强 刘海义 《中国临床新医学》 2024年第5期501-505,共5页
目的探究新辅助治疗后外周血双阴性T细胞(DNT)比例与进展期直肠癌预后的关系。方法回顾性收集2017年1月至2021年12月山西省肿瘤医院结直肠外科收治的219例直肠癌患者的临床资料,采集其新辅助治疗后的DNT比例指标,取中位数为截断值,将其... 目的探究新辅助治疗后外周血双阴性T细胞(DNT)比例与进展期直肠癌预后的关系。方法回顾性收集2017年1月至2021年12月山西省肿瘤医院结直肠外科收治的219例直肠癌患者的临床资料,采集其新辅助治疗后的DNT比例指标,取中位数为截断值,将其分为DNT高水平组(DNT≥3%)125例和DNT低水平组(DNT<3%)94例,比较两组TNM分期、病理肿瘤退缩分级(TRG)、神经脉管侵犯、生存预后等指标。结果两组性别、年龄、体质量指数、肿瘤下界距肛门距离、术前肿瘤分期(cT分期、cN分期)、直肠周围筋膜侵犯情况比较差异无统计学意义(P>0.05)。相较于DNT高水平组,DNT低水平组患者的神经脉管侵犯率较低(P=0.014),且有更好的生存预后(P=0.014)。结论新辅助治疗后外周血DNT比例与直肠癌患者的神经脉管侵犯及生存预后显著相关。DNT低水平组患者的神经脉管侵犯率更低,总体生存期更长。 展开更多
关键词 直肠癌 新辅助治疗 双阴性t细胞 预后
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靶向抗TIGIT和PVRIG双特异抗体的制备及体外生物性活性的研究
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作者 叶银松 米梓毓 +4 位作者 雷毅 康金森 郝锋 宁金鹰 杨建 《新疆医科大学学报》 CAS 2024年第8期1153-1160,共8页
目的制备靶向抗T细胞免疫球蛋白-ITIM结构域蛋白(T cell immune receptor with Ig and ITIM domains,TIGIT)和脊髓灰质炎病毒受体相关免疫球蛋白结构域蛋白(Poliovirus receptor-related immunoglobin domain-containing protein,PVRIG... 目的制备靶向抗T细胞免疫球蛋白-ITIM结构域蛋白(T cell immune receptor with Ig and ITIM domains,TIGIT)和脊髓灰质炎病毒受体相关免疫球蛋白结构域蛋白(Poliovirus receptor-related immunoglobin domain-containing protein,PVRIG)双特异抗体,探究其体外生物学活性。方法用PVRIG人源化抗体hP1和TIGIT人源化抗体hT1构建KY-TIGIT-hlgG4M-PVRIG-SCFV双特异性抗体,将纯化得到KY-TIGIT-hlgG4M-PVRIG-SCFV抗体进行SDS-PAGE凝胶电泳、热稳定性检测和稳定性分析;采用流式细胞术(Fluorescence activated cell sorting,FACS)检测双特异性抗体的结合活性;采用生物干涉膜技术(Bio-layer interferometry,BLI)检测双特异性抗体亲和力;用Jurkat-NFAT-Luc2-PD1-TIGIT-PVRIG细胞和293T-OS8-PVRL2-PDL1细胞中检测双特异性抗体KY-TIGIT-hlgG4M-PVRIG-SCFV对于TIGIT/PVRIG靶点的阻断作用;采用CMV recall assay法检测IFN-r在上清液中的浓度。结果SDS-PAGE凝胶电泳结果显示KY-TIGIT-hlgG4M-PVRIG-SCFV双特异性抗体纯度>95%;Tm结果为Tm1:66.34,Tm2:80.95。采用SEC-HPLC对双特异性抗体KY-TIGIT-hlgG4M-PVRIG-SCFV进行稳定性分析,其纯度均>90%。KY-TIGIT-hlgG4M-PVRIG-SCFV抗体和PVRIG的人源化抗体hP1与293T-PVRIG cell line的EC 50分别为0.16870μg/mL和0.03865μg/mL,与293T-cyno-PVRIG cell line的EC 50分别为0.03714μg/mL和0.03198μg/mL,与Human PVRIG Protein,His Tag的亲和力为1.74E-10M和1.69E-10M。KY-TIGIT-hlgG4M-PVRIG-SCFV抗体和TIGIT的人源化抗体hT1与293T-PVRIG cell line的EC 50分别为0.07027μg/mL和0.03121μg/mL;与293T-cyno-TIGIT cell line的EC 50分别为0.02028μg/mL和0.02822μg/mL;与Human TIGIT Protein,His Tag的亲和力为8.50E-10M和8.47E-10M。KY-TIGIT-hlgG4M-PVRIG-SCFV抗体具有阻断PD1/PDL1/TIGIT/PVRIG相互作用活性,且KY-TIGIT-hlgG4M-PVRIG-SCFV的EC 50为0.007μg/mL,优于单独人源化抗体hT1(EC 50为0.013μg/mL)和hP1(EC 50为0.048μg/mL)的作用。在含pp65 peptide条件下KY-TIGIT-hlgG4M-PVRIG-SCFV抗体分泌IFN-r为349.72 pg/mL,明显高于其他抗体。结论KY-TIGIT-hlgG4M-PVRIG-SCFV抗体具有高亲和力和良好的生物学活性,有望开发成为肿瘤免疫治疗的抗体药物。 展开更多
关键词 t细胞免疫球蛋白和ItIM结构域蛋白 脊髓灰质炎病毒受体相关免疫球蛋白结构域蛋白 人源化抗体 双特异性抗体 生物学活性
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血清DCLK1、sTim-3对前列腺癌根治术患者预后的评估价值 被引量:1
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作者 黄敏玉 吴军 +4 位作者 覃天资 周威 苏立泽 邱荣 黄璐 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2023年第18期2368-2372,2378,共6页
目的 探讨血清双皮质素样激酶1(DCLK1)、可溶性T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子3(sTim-3)对前列腺癌根治术患者预后的评估。方法 选取2016年6月至2019年6月在右江民族医学附属医院行前列腺癌根治术的80例患者作为研究组,另选取同期80例健康... 目的 探讨血清双皮质素样激酶1(DCLK1)、可溶性T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子3(sTim-3)对前列腺癌根治术患者预后的评估。方法 选取2016年6月至2019年6月在右江民族医学附属医院行前列腺癌根治术的80例患者作为研究组,另选取同期80例健康体检者作为对照组;采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测血清DCLK1、sTim-3水平;分析血清DCLK1、sTim-3与前列腺癌根治术患者病理临床特征及预后的关系。结果 研究组血清DCLK1、sTim-3水平显著高于对照组(P <0.05)。血清DCLK1、sTim-3水平呈正相关(P <0.05)。二者与PSA水平、Gleason评分均呈正相关(P <0.05)。血清DCLK1、sTim-3表达水平与PSA水平、Gleason评分以及TNM分期有关(P <0.05)。预后死亡组血清DCLK1、sTim-3水平显著高于预后生存组(P <0.05)。DCLK1和sTim-3高表达患者生存率低于低表达患者。根据Cox回归分析表明,DCLK1、sTim-3高表达是影响前列腺癌根治术患者预后的危险因素(P <0.05)。根据ROC曲线得知,二者联合预测前列腺癌根治术患者预后的AUC优于DCLK1、sTim-3各自单独预测。结论 DCLK1、sTim-3在前列腺癌患者血清中显著升高,二者联合可以更好对前列腺癌根治术患者预后进行评估。 展开更多
关键词 双皮质素样激酶1 可溶性t细胞免疫球蛋白黏蛋白分子3 前列腺癌根治术 预后
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早期ART对HIV急性期感染者双阴性T细胞频率和表型的影响
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作者 李珍 王蕊 +5 位作者 陆小凡 粟斌 张欣 张彤 吴昊 黄晓婕(指导) 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第11期2368-2371,2376,共5页
目的:评价早期抗病毒治疗(ART)对HIV感染者双阴性(DN)T细胞频率和表型的影响。方法:入组接受早期ART的HIV急性期感染者,流式细胞术检测DN T细胞的频率和表型。结果:HIV急性期感染者DN T细胞的比例较健康对照组显著降低,但早期ART不能使... 目的:评价早期抗病毒治疗(ART)对HIV感染者双阴性(DN)T细胞频率和表型的影响。方法:入组接受早期ART的HIV急性期感染者,流式细胞术检测DN T细胞的频率和表型。结果:HIV急性期感染者DN T细胞的比例较健康对照组显著降低,但早期ART不能使其完全恢复。HIV急性期感染者DN T细胞亚群Vδ1和Vδ2 T细胞的活化水平升高,与基线CD4^(+)T细胞数量呈负相关。尽管早期ART能使Vδ1和Vδ2 T细胞的活化正常化,但Vδ1/2^(neg)T细胞活化水平仍显著高于健康对照组,并与ART后CD4^(+)T细胞的数量呈负相关。结论:DN T细胞亚群频率和表型的变化与HIV感染者疾病进展和ART后CD4^(+)T细胞数量恢复有关。 展开更多
关键词 双阴性t细胞 HIV急性期感染 抗病毒治疗 免疫活化
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多发性骨髓瘤的CAR-T治疗研究进展
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作者 何爱丽 付冰洁 《西部医学》 2023年第10期1405-1411,1417,共8页
多发性骨髓瘤(MM)是发生于浆细胞的恶性肿瘤,单克隆浆细胞在骨髓中异常增殖并产生M蛋白。尽管蛋白酶体抑制剂、单克隆抗体、免疫调节剂等药物的应用显著延长了MM患者的生存期,但MM仍无法治愈。嵌合抗原受体T(CAR-T)细胞可以特异性靶向... 多发性骨髓瘤(MM)是发生于浆细胞的恶性肿瘤,单克隆浆细胞在骨髓中异常增殖并产生M蛋白。尽管蛋白酶体抑制剂、单克隆抗体、免疫调节剂等药物的应用显著延长了MM患者的生存期,但MM仍无法治愈。嵌合抗原受体T(CAR-T)细胞可以特异性靶向并杀死带有特定抗原的MM细胞,但脱靶效应和耐药性的产生使MM存在复发难治的风险。双靶点CAR-T可以增大抗原的覆盖率,提高抗肿瘤能力,减少抗原逃逸,为MM的治疗提供了新思路。本文对现阶段CAR-T治疗多发性骨髓瘤的研究进展做一述评,旨在为临床提供一定的参考。 展开更多
关键词 多发性骨髓瘤 嵌合抗原受体t细胞 双靶点
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基于SMART-seq2测序分析结直肠癌外周血DNT细胞转录组的表达差异及功能初探
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作者 代玉玲 魏云波 +2 位作者 武静 朱惠茹 刘晓斐 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第10期900-909,共10页
目的探讨结直肠癌患者外周血中双阴性T细胞差异基因及功能。方法选取2例结直肠癌患者和2例健康体检者,首先采用流式细胞术分选外周血双阴性T细胞,然后利用单细胞全长转录组(SMART-seq2)测序技术获得测序数据,筛选差异表达基因,并对筛选... 目的探讨结直肠癌患者外周血中双阴性T细胞差异基因及功能。方法选取2例结直肠癌患者和2例健康体检者,首先采用流式细胞术分选外周血双阴性T细胞,然后利用单细胞全长转录组(SMART-seq2)测序技术获得测序数据,筛选差异表达基因,并对筛选出的差异表达基因进行基因本体富集分析(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)途径富集分析。利用STRING数据库构建蛋白质互作网络,并通过Cytoscape软件鉴定关键基因。采用RT-qPCR验证差异表达基因。结果与健康体检者相比,结直肠癌患者外周血双阴性T细胞差异基因共有1276个,其中141个上调基因,1135个下调基因。GO分析显示差异基因主要参与甲基化、代谢过程以及转移酶活性等生物学功能。KEGG通路分析显示差异基因主要涉及自噬、P53信号通路和磷酸肌醇代谢等信号通路。蛋白质互作网络包含1154个节点和1022条边,并鉴定出10个Hub基因:PIK3C3、WIPI1、ATG101、PIK3R4、DDX10、RBM28、SDAD1、ATG16L1、UVRAG、ATG7。RT-qPCR验证10个差异表达基因,其中7个差异基因表达变化趋势与测序结果一致,3个基因表达与测序结果不符。结论DNT细胞可能通过甲基化、P53信号通路和自噬等作用参与了结直肠癌的发生发展,同时,DNT细胞可能通过对基因的调控抑制结直肠癌的发生发展。本研究为进一步探讨DNT细胞在恶性肿瘤中的功能提供理论依据。 展开更多
关键词 结直肠癌 双阴性t细胞 差异基因 SMARt-seq2
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慢性重型乙型肝炎患者外周血DNT细胞及T细胞亚群的表达及意义 被引量:13
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作者 刘坤 杨亚萍 +2 位作者 刁青 陈璀 孙谢文 《河北医药》 CAS 2014年第15期2248-2250,共3页
目的研究外周血CD+3CD-4CD-8(DNT)细胞及T细胞亚群在慢性重型乙型肝炎患者的表达及意义。方法正常对照者32例、慢性乙型肝炎(CHB)40例、慢性重型乙型肝炎(CSHB)35例患者为研究对象,采用流式细胞仪检测各组外周血DNT细胞及T细胞亚群。结... 目的研究外周血CD+3CD-4CD-8(DNT)细胞及T细胞亚群在慢性重型乙型肝炎患者的表达及意义。方法正常对照者32例、慢性乙型肝炎(CHB)40例、慢性重型乙型肝炎(CSHB)35例患者为研究对象,采用流式细胞仪检测各组外周血DNT细胞及T细胞亚群。结果 CHB组和CSHB组DNT细胞占T淋巴细胞的百分比与对照组比较明显增高(P<0.05);而CSHB组增高程度更为显著,与CHB组比较差异亦有统计学意义(P<0.05)。HBV DNA载量与DNT细胞占T淋巴细胞的百分比呈正相关(r=0.742,P<0.05)。CHB组与对照组比较,仅CD+4亚群明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);CSHB组和CHB组比较,CD+4亚群及CD+4/CD+8明显降低,CD+8亚群明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论慢性重型乙型肝炎患者DNT细胞显著增高及T细胞亚群比例异常可能是慢性乙型肝炎发生发展的重要因素。 展开更多
关键词 慢性重型乙型肝炎 DNt细胞 t细胞亚群
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SLE患者外周血CD3^+ CD16^+ CD56^+ NK T细胞和CD3^+ CD4^- CD8^- DN T细胞的流式细胞分析及意义 被引量:2
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作者 尤海燕 郑东海 +2 位作者 裘影影 吴玲 巴荣 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期11-13,共3页
目的探讨CD3+CD16+CD56+天然杀伤T(NK T)细胞和CD3+CD4-CD8-双阴性T(DN T)细胞在SLE患者外周血中的变化及意义。方法选取32例SLE活动期患者作为SLE活动组、30例SLE稳定期患者作为SLE稳定组、25例健康人作为健康人对照组,用流式细胞术检... 目的探讨CD3+CD16+CD56+天然杀伤T(NK T)细胞和CD3+CD4-CD8-双阴性T(DN T)细胞在SLE患者外周血中的变化及意义。方法选取32例SLE活动期患者作为SLE活动组、30例SLE稳定期患者作为SLE稳定组、25例健康人作为健康人对照组,用流式细胞术检测各组对象外周血中NK T细胞和DN T细胞的比率,并比较其与SLE疾病活动性指数(SLEDAI)之间的相关性。结果 SLE活动组外周血NK T细胞比率(3.47±1.49)%显著低于SLE稳定组(5.30±1.83)%及健康人对照组(6.24±2.11)%,P均<0.01,但SLE稳定组与健康人对照组差异无统计学意义(P>0.05);SLE活动组外周血DN T细胞比率(5.16±1.97)%显著高于SLE稳定组(4.00±1.37)%及健康人对照组(3.15±1.06)%,P均<0.01,SLE稳定组亦高于健康人对照组(P<0.05)。SLE患者外周血NK T细胞比率与SLE DAI呈显著负相关(r=-0.439,P<0.01);SLE患者外周血DN T细胞比率与SLE DAI呈显著正相关(r=0.446,P<0.01);SLE患者外周血NK T细胞比率与DN T细胞比率之间无明显相关性(r=-0.215,P>0.05)。结论外周血中NK T细胞及DN T细胞比率改变可能参与了SLE的发病过程,且可能与SLE的病情活动性相关。 展开更多
关键词 天然杀伤t细胞 双阴性t细胞 系统性红斑狼疮
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DNT细胞的扩增及其对胰腺癌Panc-1细胞的影响 被引量:2
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作者 杨仁保 陈炯 +4 位作者 卢寅 武文 周杭城 陈龙江 胡立威 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2013年第3期228-232,共5页
目的探讨TCR+CD3+CD4-CD8-(DNT)双阴T细胞对人胰腺癌细胞系Panc-1的影响。方法应用抗体吸附法扩增人外周血DNT细胞,采用流式细胞仪检测所得细胞表型,选择多组对照观察DNT细胞对裸鼠荷瘤的生长曲线和抑瘤率的影响,应用RT-PCR检测不同浓度... 目的探讨TCR+CD3+CD4-CD8-(DNT)双阴T细胞对人胰腺癌细胞系Panc-1的影响。方法应用抗体吸附法扩增人外周血DNT细胞,采用流式细胞仪检测所得细胞表型,选择多组对照观察DNT细胞对裸鼠荷瘤的生长曲线和抑瘤率的影响,应用RT-PCR检测不同浓度DNT细胞与Panc-1细胞体外培养后Fas/FasL的表达情况。结果经过12 d左右的培养,每孔细胞数量可达1.0×106个以上。流式细胞仪鉴定细胞表型为CD3+CD4-CD8-。与阴性对照组比较,实验组和阳性对照组对裸鼠荷瘤的肿瘤生长曲线及抑瘤率的差异有统计学意义,实验组的抑瘤率达44.75%。DNT细胞与胰腺癌细胞共培养后,胰腺癌细胞在mRNA水平的Fas表达量明显上升,差异有统计学意义;FasL表达略有下调,差异无统计学意义。结论 DNT细胞能抑制胰腺癌Panc-1细胞株增殖,Fas/FasL途径为其作用机制之一。 展开更多
关键词 胰腺癌 DNt细胞 免疫治疗
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携带双串联卵清蛋白T细胞表位的嵌合兔出血症病毒衣壳蛋白自聚能力的研究 被引量:2
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作者 张燕 胡波 +4 位作者 宋艳华 范志宇 魏后军 姜平 王芳 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2014年第1期55-61,共7页
以兔出血症病毒( RHDV)衣壳蛋白VP60为载体,构建VP60携带双串联OVA T细胞表位( Ovalbumin,卵清蛋白第257-264位氨基酸)的嵌合蛋白,研究外源基因对VP60蛋白表达及病毒样颗粒( VLPs )装配的影响,分析VP60作为载体对外源基因长度的... 以兔出血症病毒( RHDV)衣壳蛋白VP60为载体,构建VP60携带双串联OVA T细胞表位( Ovalbumin,卵清蛋白第257-264位氨基酸)的嵌合蛋白,研究外源基因对VP60蛋白表达及病毒样颗粒( VLPs )装配的影响,分析VP60作为载体对外源基因长度的耐受性。运用基因克隆和重组技术,通过2次SOE法( Splicing by overlap extension,重叠延伸剪接术),将双串联OVA T细胞表位(257-264位氨基酸)的基因序列取代VP60第302-309位氨基酸的基因序列,得到嵌合VP60基因。利用杆状病毒表达系统表达嵌合蛋白,命名为DC。经 IFA、SDS-PAGE、Western Blot、RT-PCR方法鉴定嵌合蛋白的表达,并通过电镜观察嵌合蛋白自聚为病毒样颗粒的能力。嵌合VP60蛋白在杆状病毒表达系统中得到高效表达,且可自聚形成病毒样颗粒。携带双串联外源表位的嵌合VP60蛋白得到有效表达,并可形成VLPs。该研究为嵌合VP60 VLPs的形成、结构功能的研究奠定基础,同时扩展了VP60作为载体可携带的外源基因耐受性的研究资料。 展开更多
关键词 兔出血症病毒 VP60 双串联OVAt细胞表位 病毒样颗粒
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慢性丙型肝炎患者DNT细胞及T细胞亚群的研究 被引量:5
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作者 梁骑 焦艳梅 +4 位作者 计云霞 李田 吴昊 张国元 唐中 《首都医科大学学报》 CAS 2012年第2期214-217,共4页
目的探讨外周血中CD3+CD4-CD8-(double negative T,DNT)细胞及T淋巴细胞亚群在慢性丙型肝炎(chronichepatitis C,CHC)患者中的表达及意义。方法利用流式细胞仪对92例CHC患者、93例正常健康人外周血中的DNT细胞及T细胞亚群进行检测,并对... 目的探讨外周血中CD3+CD4-CD8-(double negative T,DNT)细胞及T淋巴细胞亚群在慢性丙型肝炎(chronichepatitis C,CHC)患者中的表达及意义。方法利用流式细胞仪对92例CHC患者、93例正常健康人外周血中的DNT细胞及T细胞亚群进行检测,并对比分析两者的差异。结果 CHC患者DNT细胞百分比(8.57%±6.16%)高于正常对照组(6.78%±4.50%)(P<0.05),其绝对数在两者间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。CHC患者CD4+%,CD4+/CD8+比值低于正常对照组(P值均<0.001),CD8+%高于正常对照组(P<0.001)。结论 CHC患者DNT细胞百分比显著升高及T淋巴细胞亚群比例改变,可能是丙型肝炎病毒感染慢性化的重要原因之一。 展开更多
关键词 慢性丙型肝炎 DNt细胞 t淋巴细胞亚群
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CD4^-CD8^-T细胞对小鼠病毒性肝炎慢性化的免疫调节作用 被引量:7
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作者 孙颖 王晓晶 +2 位作者 谭振敏 习东 宁琴 《中西医结合肝病杂志》 CAS 2014年第2期101-103,I0001,I0002,共5页
目的:探讨CD4-CD8-T细胞(DNT细胞)在小鼠病毒性肝炎慢性化中的作用和机制。方法:C3H/Hej小鼠感染3型鼠肝炎病毒(MHV-3)建立了小鼠慢性肝炎模型。分离感染病毒5天后的小鼠脾脏细胞,利用磁珠法分选得到DNT细胞,通过小鼠尾静脉注射过继到... 目的:探讨CD4-CD8-T细胞(DNT细胞)在小鼠病毒性肝炎慢性化中的作用和机制。方法:C3H/Hej小鼠感染3型鼠肝炎病毒(MHV-3)建立了小鼠慢性肝炎模型。分离感染病毒5天后的小鼠脾脏细胞,利用磁珠法分选得到DNT细胞,通过小鼠尾静脉注射过继到同样感染MHV-3的小鼠,观察其生存率、组织炎症和病毒载量的变化,检测FasL表达情况。体外将DNT细胞与同来源的CD8+T淋巴细胞共培养观察其抑制效应。结果:实验发现,肝炎小鼠的生存率由23.3%提高到46.67%,肝脏组织炎症减轻,病毒载量无变化。体外实验DNT细胞高表达FasL,对CD8+细胞有特异性杀伤效应。结论:CD4-CD8-双阴性T细胞可以通过Fas/FasL途径对CD8+T细胞进行特异性杀伤,从而导致肝炎的慢性迁延。 展开更多
关键词 双阴性t细胞 3型鼠肝炎病毒 肝炎 慢性 FASL
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CD25^+ Foxp3^+调节性T细胞和Th17细胞在口腔白斑组织中的表达 被引量:2
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作者 白杨 王文梅 +3 位作者 王翔 黄晓峰 蒋文晖 刘雅菁 《口腔医学研究》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期221-224,228,共5页
目的:通过观察CD25+Foxp3+和IL-17阳性细胞在口腔黏膜白斑(oral leukoplakia,OLK)和口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)组织中的表达情况,探讨Treg细胞和Th17细胞在口腔癌发生发展过程中的变化。方法:采用免疫组织化学... 目的:通过观察CD25+Foxp3+和IL-17阳性细胞在口腔黏膜白斑(oral leukoplakia,OLK)和口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)组织中的表达情况,探讨Treg细胞和Th17细胞在口腔癌发生发展过程中的变化。方法:采用免疫组织化学方法检测CD25+Foxp3+、IL-17阳性细胞在10例单纯增生性白斑、32例异常增生性白斑、13例OSCC和10例正常口腔黏膜中的变化情况。结果:正常口腔黏膜组、单纯增生性白斑组、异常增生性白斑组和OSCC组CD25+Foxp3+Treg细胞数量逐渐增高(P<0.05),依次为(2.5±0.65)、(5.22±1.19)、(31.4±16.8)和(42.8±12.67)个/每高倍镜视野。重度异常增生白斑组织中,CD25+Foxp3+Treg细胞的数量高于轻、中度异常增生白斑组织(P<0.05)。此外,正常口腔黏膜组、单纯增生性白斑组、异常增生性白斑组和OSCC组中表达IL-17的阳性细胞虽有递增趋势,但差异无统计学意义。CD25+Foxp3+Treg细胞和Th17细胞数量改变在口腔白斑和OSCC组织中呈正相关(r=0.318,P<0.05)。结论:Treg细胞的数量在白斑和OSCC组织中增多,Th17细胞协同Treg细胞,在口腔癌发生发展过程中发挥了一定的作用。 展开更多
关键词 CD25+Foxp3+调节性t细胞 tH17细胞 口腔黏膜白斑 免疫组织化学 双标记染色
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DNT细胞在胸腔积液鉴别诊断中的意义 被引量:3
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作者 张平骥 戴丽 +1 位作者 李天水 夏国光 《中国医刊》 CAS 2018年第9期972-974,共3页
目的探讨外周血双阴性T淋巴细胞(double-negative T-cell,DNT)表达水平在胸腔积液鉴别诊断中的临床意义。方法收集2015年4月至2017年11月本院收治的174例渗出性胸腔积液患者的临床资料,其中恶性胸腔积液患者68例(恶性胸腔积液组),良性... 目的探讨外周血双阴性T淋巴细胞(double-negative T-cell,DNT)表达水平在胸腔积液鉴别诊断中的临床意义。方法收集2015年4月至2017年11月本院收治的174例渗出性胸腔积液患者的临床资料,其中恶性胸腔积液患者68例(恶性胸腔积液组),良性胸腔积液患者106例(良性胸腔积液组),良性胸腔积液组分为结核性良性胸腔积液组60例与非结核性良性胸腔积液组46例。选择同期健康体检者45例作为对照组。采用FC500流式细胞仪检测全部受检者的外周血DNT细胞表达水平,并进行统计分析。结果恶性胸腔积液组的外周血DNT细胞表达显著高于对照组,差异有显著性(P<0.01),良性胸腔积液组和结核性良性胸腔积液组外周血DNT细胞表达显著低于对照组,差异有显著性(P<0.01),恶性胸腔积液组外周血DNT细胞表达显著高于良性胸腔积液组,差异有显著性(P<0.01)。结核性良性胸腔积液组与非结核性良性胸腔积液组外周血DNT细胞表达差异无显著性(P>0.01)。结论恶性胸腔积液组外周血DNT细胞高表达,而良性胸腔积液组及结核性良性胸腔积液组外周血DNT细胞低表达,提示测定外周血DNT细胞表达水平对于鉴别良恶性胸腔积液具有一定作用,为临床鉴别良恶性胸腔积液及结核性胸腔积液提供了新的思路。 展开更多
关键词 胸腔积液 双阴性t淋巴细胞 鉴别诊断
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胃癌患者DNT细胞和T细胞亚群变化及临床意义 被引量:7
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作者 董进浪 谭炜炜 《中国现代医生》 2012年第21期88-89,91,共3页
目的探讨胃癌患者外周血中CD3+CD4-CD8-(DNT)细胞及T淋巴细胞亚群的表达及临床意义。方法利用流式细胞仪对43例胃癌、36例健康人外周血中的DNT细胞及T细胞亚群进行检测,并对比分析两者的差异。结果胃癌患者DNT细胞百分比(9.11±5.5... 目的探讨胃癌患者外周血中CD3+CD4-CD8-(DNT)细胞及T淋巴细胞亚群的表达及临床意义。方法利用流式细胞仪对43例胃癌、36例健康人外周血中的DNT细胞及T细胞亚群进行检测,并对比分析两者的差异。结果胃癌患者DNT细胞百分比(9.11±5.56)%明显高于正常对照组(4.84±1.43)%(P<0.01),胃癌患者CD4+%、CD4+/CD8+比值低于正常对照组(P均<0.01),CD8+%高于正常对照组(P<0.01)。结论胃癌患者DNT细胞百分比显著升高及T淋巴细胞亚群比例改变,提示胃癌患者免疫功能异常,为胃癌发病机制研究及免疫治疗提供理论依据。 展开更多
关键词 胃癌 DNt细胞 t淋巴细胞亚群
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TCRγδ^+CD^(3+)CD^(4-)CD^(8-)双阴性T细胞在3型鼠肝炎病毒诱导的小鼠慢性病毒性肝炎发病中的作用 被引量:5
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作者 陆玉蕾 王晓晶 +2 位作者 严伟明 王洪武 宁琴 《实用肝脏病杂志》 CAS 2012年第4期339-342,共4页
目的本研究拟探讨在MHV-3诱导的慢性病毒性肝炎模型小鼠外周血和脾脏TCRγδ+DNT细胞在T淋巴细胞中比例变化以及其主要表面分子标记的变化。方法取60只C3H/Hej小鼠,腹腔注射10pfu MHV-3;应用流式细胞仪三色或四色荧光分析法分别检测小... 目的本研究拟探讨在MHV-3诱导的慢性病毒性肝炎模型小鼠外周血和脾脏TCRγδ+DNT细胞在T淋巴细胞中比例变化以及其主要表面分子标记的变化。方法取60只C3H/Hej小鼠,腹腔注射10pfu MHV-3;应用流式细胞仪三色或四色荧光分析法分别检测小鼠外周血和脾脏TCRγδ+DNT细胞在T淋巴细胞中的比例及其CD25、CD28、CD30和CD44表达的变化。结果 MHV-3诱导的慢性病毒性肝炎小鼠各时间点外周血和脾脏TCRγδ+DNT在T淋巴细胞中的比例较对照组显著升高(P<0.05);在感染后10天达到最高峰:外周血和脾脏TCRγδ+DNT细胞占T淋巴细胞的比例分别为4.8±1.5%和4.5±1.3%;模型小鼠外周血和脾脏TCRγδ+DNT细胞的表型均为TCRγδ+CD3+CD4-CD8-CD25-CD28-CD30-CD44+。结论感染MHV-3后C3H/Hej小鼠体内TCRγδ+DNT细胞的数量增加,提示TCRγδ+DNT细胞参与了MHV-3诱导的小鼠慢性病毒性肝炎的发生和发展过程。 展开更多
关键词 病毒性肝炎 3型鼠肝炎病毒 tCRγδ +DNt细胞 小鼠
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人胎脾交错突细胞对T,B淋巴细胞发育影响的免疫组织化学研究 被引量:2
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作者 黄守雄 周凡 +1 位作者 王若愚 葛振华 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 1997年第3期41-48,共8页
用免疫酶单重和双重染色研究人胎儿脾连续切片中交错突细胞(IDC)与T,B淋巴细胞的定位关系及HLA-DR表达。结果表明,S-100阳性树突状细胞为IDC,多数表达HLA-DR。9-12周的胎脾中就可见到散在分布的ID... 用免疫酶单重和双重染色研究人胎儿脾连续切片中交错突细胞(IDC)与T,B淋巴细胞的定位关系及HLA-DR表达。结果表明,S-100阳性树突状细胞为IDC,多数表达HLA-DR。9-12周的胎脾中就可见到散在分布的IDC。13-16周胎脾中IDC开始定位于白髓的T细胞集落内和周缘,及B细胞集落的周边。在上述区域IDC常与T细胞形成IDC-T细胞聚合体。在脾的发育过程中,IDC不仅与T,B淋巴细胞在分布上关系密切,而且可与这两类细胞形成突起-胞体、胞体-胞体的连接。提示,胎儿脾中IDC与T,B细胞的迁移,定位及功能成熟过程有密切联系。 展开更多
关键词 交错突细胞 人胎 t B淋巴细胞 双重染色
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