双皮质素过表达载体的构建及其对大鼠脑胶质瘤细胞迁移能力的影响

目的观察过表达双皮质素(DCX)基因对大鼠脑胶质瘤细胞迁移能力的影响。方法采用PCR扩增DCX基因片段,构建DCX慢病毒表达载体,感染293T细胞,荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白的表达。筛选稳定表达DCX的大鼠脑胶质瘤C6细胞,将C6细胞分为空载体病毒感染组(GV468组)和过表达DCX病毒感染组(GV468-DCX组),qRT-PCR和Western blot法检测DCX表达。Transwell实验检测过表达DCX对大鼠胶质瘤C6细胞迁移能力的影响。结果成功构建过表达DCX的慢病毒载体,感染C6细胞的效率达到90%。感染C6细胞后,GV468-DCX组DCX mRNA和蛋白表达较GV468组高(P<0.01或P<0.05),GV468-DCX组迁移能力高于GV468组(P<0.05)。结论成功构建DCX慢病毒表达载体,获得稳定表达DCX的大鼠胶质瘤细胞系,过表达DCX基因能促进胶质瘤细胞的迁移能力,为脑胶质瘤的基因治疗提供参考。