Doublecortin样激酶1在结肠肿瘤中的表达及意义

目的研究Doublecortin样激酶1（DCLK1）在结肠肿瘤组织中的表达及与结肠癌发生发展的关系。方法采用免疫组织化学方法检测20例结肠癌旁正常黏膜组织、20例结肠腺瘤、60例结肠癌及20例结肠癌转移灶组织中DCLK1的表达，分析结肠癌组织中DCLK1的表达与临床病理因素的关系。结果DCLK1在结肠癌旁正常黏膜组织、结肠腺瘤组织、结肠癌组织及结肠癌转移灶组织中的阳性表达率分别为20．0％、70．0％、65．0％和60．0％。结肠癌组织中DCLK1蛋白表达与临床分期和淋巴结转移密切相关，而与患者的性别、年龄、肿瘤大小及肿瘤的组织学分级无相关性。结论DCLK1的过表达可能在结肠肿瘤的发展及转移中起重要的作用。

胎盘生长因子、可溶性fms样酪氨酸激酶-1及糖基化纤连蛋白在子痫前期预测中的应用价值

目的:探讨胎盘生长因子(placental growth factor,PLGF)、可溶性fms样酪氨酸激酶-1(soluble fms-like tyrosine kinase-1,SFLT-1)和糖基化纤连蛋白(glycosylated fibronectin,GLYFN)检测对子痫前期的预测价值。方法:选择在无锡市妇幼保健院就诊的188例孕妇,分154例正常孕妇(对照组)和34例子痫前期患者(子痫组),应用免疫荧光法分别检测其在孕16~18周血清中PLGF、SFLT-1和GLYFN的浓度,比较子痫前期组和对照组各标志物的水平,并使用受试者操作特征曲线(receiver operating characteristic,ROC)对3种标志物的预测价值进行效能评估。结果:在妊娠中期,子痫前期组血清PLGF浓度低于对照组,SFLT-1及GLYFN浓度均高于对照组,3种标志物的差异均有统计学意义(3指标P=0.000)。95%置信区间的ROC曲线下面积(areas under the ROC curve,AUC)为,PLGF为0.941(0.907~0.974),SFLT-1为0.881(0.800~0.962),GLYFN为0.951(0.918~0.985),联合指标SFLT-1和GLYFN、3项指标联合检测在ROC曲线下面积(areas under the ROC curve,AUC)分别为0.968、0.986。结论:PLGF、SFLT-1、GLYFN 3种标志物水平在对照组和子痫前期组均存在明显差异,对子痫前期的发病具有一定的预测价值,SFLT-1联合PLGF、SFLT-1联合GLYFN、3项指标联合检测对子痫前期的预测价值高于任一单项指标。

宫颈癌患者血清微小RNA-195、双皮质素样激酶1、鳞状细胞癌抗原表达水平与临床病理特征及预后相关性研究

目的:探讨宫颈癌患者血清微小RNA-195(miR-195)、双皮质素样激酶1(DCLK1)、鳞状细胞癌抗原(SCC-Ag)水平与临床病理特征及预后的相关性。方法:选取宫颈癌患者72例为观察组,同期体检健康女性60例为对照组,比较两组血清miR-195、DCLK1、SCC-Ag表达水平。采用Spearman法分析宫颈癌患者血清miR-195、DCLK1、SCC-Ag与临床病理特征的相关性,随访3年,记录患者生存情况。采用Cox回归模型分析宫颈癌患者预后的影响因素。结果:观察组血清DCLK1、SCC-Ag水平较对照组升高,miR-195水平较对照组下降(均P<0.05)。血清miR-195水平与淋巴结转移、国际妇产科联盟(FIGO)分期、肿瘤分化程度呈负相关,DCLK1水平与FIGO分期、肿瘤分化程度呈正相关,SCC-Ag水平与肿瘤分化程度、肿瘤直径呈正相关(均P<0.05)。miR-195高表达患者3年生存率高于低表达患者,DCLK1、SCC-Ag高表达患者3年生存率低于低表达患者(均P<0.05)。FIGO分期、分化程度、淋巴结转移、肿瘤直径及血清miR-195、DCLK1、SCC-Ag水平是宫颈癌患者预后的独立影响因素(均P<0.05)。结论:宫颈癌患者血清DCLK1、SCC-Ag水平升高,miR-195水平降低,三者与临床病理特征和预后有关,是宫颈癌患者预后的独立影响因素。

Doublecortin样激酶-1在胃癌组织中的表达及其与预后关系

目的研究doublecortin样激酶-1(DCLK1)在胃癌组织的表达情况及其与患者临床病理特征及预后的关系。方法收集北京协和医院2002年7月至2006年12月收治的122例胃癌根治患者的临床病理资料及标本,采用免疫组织化学法检测DCLK1在胃癌及癌旁组织中的表达水平,Kaplan-Meier法绘制生存曲线,Cox比例风险模型进行单因素及多因素生存分析。结果 122例胃癌患者中,51例存在DCLK1高表达。DCLK1与患者淋巴结转移(P=0.029)、脉管癌栓(P=0.029)密切相关。Kaplan-Meier分析结果显示,DCLK1高表达者的5年总生存率和5年无病生存率分别为39.0%和37.0%,明显低于DCLK1低表达者的65.8%和64.5%(P均=0.001)。Cox模型分析结果显示,DCLK1是胃癌患者总生存时间和无病生存时间的独立预后因素(P均=0.036)。结论 DCKL1高表达与胃癌淋巴结转移和脉管癌栓相关,是胃癌患者预后不良的一个潜在分子指标。

子宫内膜样腺癌组织中ROR1、ROR2表达变化与上皮间质转化及患者预后的关系

目的探讨子宫内膜样腺癌(EA)组织中酪氨酸激酶样孤儿受体(ROR)1、ROR2表达变化与上皮间质转化及患者预后的关系。方法选取162例接受子宫内膜癌根治术治疗的EA患者,收集手术切除的癌组织和癌旁组织,采用免疫组织化学法检测ROR1、ROR2及EMT相关蛋白E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)。比较不同临床病理特征EA患者癌组织ROR1、ROR2阳性率,Spearman相关性分析癌组织中ROR1、ROR2表达与E-cadherin、Vimentin表达的相关性,Kaplan-Meier生存曲线分析ROR1、ROR2表达与EA患者5年总体生存率(OS)的关系,COX比例风险回归模型分析EA患者预后的影响因素。结果与癌旁组织相比,癌组织中ROR1、Vimentin阳性率较高,ROR2、E-cadherin阳性率较低(P均<0.05)。与FIGO分期Ⅰ~Ⅱ期、高中分化、无淋巴结转移患者比较,FIGO分期Ⅲ期、低分化、淋巴结转移患者癌组织ROR1阳性率升高,ROR2阳性率降低(P均<0.05)。ROR1阳性与阴性患者5年OS分别为72.13%(88/122)、90.00%(36/40)。癌组织ROR1与E-cadherin呈负相关,与Vimentin呈正相关(P均<0.05),ROR2与E-cadherin呈正相关,与Vimentin呈负相关(P均<0.05)。ROR1阳性患者5年OS低于阴性患者,ROR2阳性患者5年OS高于ROR2阴性患者(P均<0.05)。FIGO分期Ⅲ期、淋巴结转移、ROR1阳性是影响EA预后的独立危险因素,ROR2阳性则是保护因素(P均<0.05)。结论EA组织中ROR1表达升高、ROR2表达降低,二者可能通过促进EMT导致患者不良预后。

可溶性FMS样酪氨酸激酶1和胎盘生长因子在子痫前期中的临床应用

子痫前期(pre-eclampsia,PE)是一种进行性的多系统的妊娠期高血压疾病,其特点是在妊娠20周后出现新发高血压,累及母亲和/或胎儿的一个或多个器官/系统,并在分娩后的3个月内恢复正常^([1])。PE会导致多种严重并发症,属于妊娠高血压的严重阶段,可威胁母儿的健康和安全。

宫颈癌患者血清双皮质素样激酶1、黏蛋白-1、血管生成素-2的表达及临床意义

目的探讨宫颈癌患者血清双皮质素样激酶1(DCLK1)、黏蛋白-1(MUC-1)、血管生成素-2(Ang-2)的表达及临床意义。方法选择该院2018年2月至2019年2月收治的102例宫颈癌患者为研究对象。分析血清DCLK1、MUC-1及Ang-2表达水平与患者临床病理参数的关系。以血清DCLK1、MUC-1及Ang-2表达水平中位数为界(高于中位数为高表达,低于中位数为低表达),分析上述3项指标高表达和低表达患者的3年总生存率。分析宫颈癌患者预后的影响因素。分析血清DCLK1、MUC-1及Ang-2单独及联合检测预测宫颈癌患者预后的效能。结果国际妇产科联盟(FIGO)分期Ⅲ~Ⅳ期及有淋巴结转移的宫颈癌患者血清DCLK1、MUC-1表达水平分别高于FIGO分期Ⅰ~Ⅱ期及无淋巴结转移的患者,FIGO分期Ⅲ~Ⅳ期的宫颈癌患者血清Ang-2表达水平高于FIGO分期Ⅰ~Ⅱ期的患者,差异均有统计学意义(P<0.05)。血清DCLK1、MUC-1及Ang-2高表达患者3年总生存率均明显低于对应的低表达患者,差异有统计学意义(P<0.05)。Cox回归分析结果显示,血清DCLK1、MUC-1、Ang-2表达水平及FIGO分期、淋巴结转移情况均是宫颈癌患者预后的影响因素(P<0.05)。受试者工作特征曲线分析结果显示,血清DCLK1、MUC-1、Ang-2单独及联合检测预测宫颈癌患者预后的曲线下面积(AUC)分别为0.687、0.728、0.694、0.836,联合检测的预测效能最高,其AUC高于各指标单独检测(P<0.05)。结论血清DCLK1、MUC-1、Ang-2表达水平与宫颈癌进展及预后有关,检测上述3项指标可为患者的病情评估及预后预测提供指导依据。

哺乳动物Ste20样激酶1在糖尿病心肌病发病中的作用机制研究进展

糖尿病心肌病(diabetic cardiomyopathy,DCM)是一种严重不可逆的心血管并发症,其临床表现主要为左心室肥厚、心肌纤维化和舒张功能受损。研究显示,线粒体过度分裂、自噬紊乱、细胞凋亡、氧化应激、炎症反应和心肌纤维化等均参与糖尿病心肌病的发病。近年来,有研究表明,哺乳动物Ste20样激酶1(Mst1)可能与糖尿病心肌病的发生和发展密切相关。本文主要围绕Mst1在糖尿病心肌病发展中的作用进行论述。

哺乳动物不育系20样激酶1在代谢性疾病中的研究进展

哺乳动物不育系20样激酶1(MST1)是Hippo信号通路的核心组件,在进化中高度保守,最初研究证实MST1在肿瘤的发展进程中起重要作用,随着对其深入研究,发现MST1在肝脏细胞、胰岛β细胞、肿瘤细胞、骨细胞等人体多种细胞系广泛表达,并在代谢调节、维持代谢稳态中发挥关键作用,参与多种代谢性疾病的发生。本文就MST1在代谢性疾病中的最新研究进展进行综述,以期为代谢相关性疾病的研究和治疗提供理论基础及可能的思路和策略。

局部晚期宫颈癌患者血清双肾上腺素样激酶1、黏蛋白1的表达及与放疗预后的关系

目的探讨局部晚期宫颈癌患者血清双肾上腺素样激酶1(DCLK1)、黏蛋白1(MUC1)的表达及与放疗预后的关系。方法收集102例局部晚期宫颈癌患者的临床资料,分析不同临床特征、临床疗效和预后患者血清DCLK1、MUC1表达水平,比较放疗前后患者血清DCLK1、MUC1表达水平。结果不同肿瘤直径、淋巴结转移情况、临床分期和分化程度局部晚期宫颈癌患者血清DCLK1、MUC1表达水平比较,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。放疗后,局部晚期宫颈癌患者血清DCLK1、MUC1表达水平均明显低于放疗前,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。不同临床疗效局部晚期宫颈癌患者血清DCLK1、MUC1表达水平比较,差异均有统计学意义(P﹤0.01),且放疗前局部晚期宫颈癌患者血清DCLK1、MUC1水平均随着疾病发展逐渐升高。3年生存局部晚期宫颈癌患者血清DCLK1、MUC1水平均明显低于1年生存患者,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。结论局部晚期宫颈癌患者血清DCLK1、MUC1表达水平与肿瘤直径、淋巴结转移情况、临床分期和分化程度有关,放疗前血清DCLK1、MUC1水平与患者临床疗效和预后密切相关,可作为判断肿瘤转归和评估放疗预后的重要指标。

突发性耳聋患者血清脂联素和可溶性Fms样酪氨酸激酶1表达水平对预后的评估价值

目的 探讨突发性耳聋患者血清脂联素、可溶性Fms样酪氨酸激酶1(sFIt-1)表达水平对预后的评估价值。方法 选取2019年2月-2022年2月南通市第一人民医院耳鼻喉头颈外科收治的突发性耳聋患者93例为研究对象(突发性耳聋组),根据纯音测听检查结果将突发性耳聋患者分为低频下降型40例、高频下降型25例、平坦下降型16例和全耳聋型12例。将治疗1个月后耳闷、耳堵、耳鸣症状减轻且听力基本恢复的患者设置为预后良好组;其他为预后不良组。另取同期在本院进行体检的健康志愿者60例作为健康组。ELISA法检测血清脂联素、sFlt-1水平;Logistic回归分析突发性耳聋发生的影响因素;Pearson法分析突发性耳聋患者血清脂联素与sFlt-1水平的相关性;ROC曲线分析血清脂联素、sFlt-1水平对突发性耳聋患者预后的诊断价值。结果 突发性耳聋组血清脂联素水平显著低于健康组,sFlt-1水平显著高于健康组(P<0.05);有睡眠障碍、心脑血管疾病史、sFlt-1为影响突发性耳聋发生的危险因素,脂联素为保护因素(P<0.05);突发性耳聋患者血清脂联素与sFlt-1水平呈负相关(r=-0.518,P<0.05)。不同听力下降类型的突发性耳聋患者血清脂联素水平比较,低频下降型>高频下降型>平坦下降型>全耳聋型;血清sFlt-1水平比较,低频下降型<高频下降型<平坦下降型<全耳聋型(P<0.05)。预后不良组血清脂联素水平显著低于预后良好组,血清sFlt-1水平显著高于预后良好组(P<0.05)。血清脂联素、sFlt-1两者联合诊断突发性耳聋患者预后不良的AUC为0.818,优于血清脂联素、sFlt-1各自单独诊断(Z两者联合-脂联素=2.555、Z两者联合sFlt-1=2.279,P=0.011、P=0.023)。结论 突发性耳聋患者血清脂联素水平明显降低,sFlt-1水平明显升高,可作为评估该疾病预后情况的生物学指标,两者联合诊断突发性耳聋患者的预后具有较高价值。

Polo样激酶1在肝细胞肝癌中的作用及临床意义

目的探讨PLK1在肝细胞肝癌中的表达、对肝癌细胞生物学行为的影响及临床转化意义。方法使用TCGA数据库分析PLK1 mRNA在369例肝细胞癌肿瘤患者组织及160例患者癌旁组织中的表达及对无病生存期的影响。提取川北医学院附属医院肝胆外一科2019年1~6月收治的30例肝细胞癌患者的肿瘤组织及癌旁组织,应用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测PLK1的mRNA表达水平进行验证。选取HepG2细胞系进行功能实验,分别使用小干扰及GSK461364处理,Western blot实验检测PLK1小干扰RNA敲低效率,检测不同处理肝癌细胞生物学行为变化;流式细胞术检测不同处理细胞周期改变。使用HepG2细胞构建裸鼠皮下成瘤模型,分别给予50 mg/kg GSK461364腹膜注射和等体积生理盐水腹膜注射,20 d后收获皮下肿瘤,进行后续的拍照及免疫组化染色,比较移植瘤体积及Ki-67染色阳性率。提取数据库中患者两年随访资料,同时以PLK1表达中位值为界,将患者分为PLK1高表达组及低表达组,并采用log-rank检验进行生存分析。结果TCGA数据库分析结果显示,PLK1在肝癌组织中的表达明显高于癌旁组织log2(TPM+1)值分别为(2.3±7.5)、(0.8±2.7),差异有统计学意义(P<0.05)。生存分析显示,PLK1高表达组无病生存期低于PLK1低表达者,差异有统计学意义(P<0.05)。肝癌肿瘤组织标本分析PLK1 mRNA表达结果显示,PLK1在肿瘤组织中的表达为(2.4±1.0)高于癌旁组织(1.3±0.8),差异有统计学意义(P<0.001)。使用两条siRNA敲低HepG2细胞中PLK1的表达,敲低效率分别为(71.3±4.8)%、(65.3±5.3)%,细胞增殖、平板克隆形成及细胞周期实验结果显示,与siCtrl组相比,siPLK1-1、siPLK1-2组肝癌细胞HpG2的细胞相对活力明显降低,细胞克隆数减少,HepG2细胞周期阻滞在G2期,差异均有统计学意义(P<0.001)。使用PLK1特异性小分子抑制剂GSK461364处理HepG2细胞,IC50=25.0 nM,CCK8、平板克隆形成及细胞周期实验结果显示,与DMSO组相比,GSK461364组HpG2的细胞相对活力明显降低,细胞克隆数明显减少,HepG2细胞周期阻滞在G2期,与小干扰结果一致,差异均有统计学意义(P<0.05)。裸鼠体内成瘤实验结果显示,相对于生理盐水注射组,GSK461364注射组小鼠的移植瘤体积明显减小[(328.3±28.4)mm3比(527.7±26.5)mm3];Ki-67阳性率明显减少,[(52.5±1.9)%比(15.2±1.9)%],差异均有统计学意义(P<0.05)。而体质量无明显变化,差异无统计学意义(P>0.05)。结论PLK1在肝细胞肝癌中高表达,与患者的总体生存率呈负相关,抑制其表达可显著降低肝癌细胞的增殖能力,减慢肝细胞肝癌进展,可作为肝细胞肝癌的潜在治疗靶点。

激酶ULK1对急性T淋巴细胞白血病细胞凋亡作用的研究

目的 探讨ULK1对急性T淋巴细胞白血病细胞株CEM-C7凋亡的影响及与AMPKα/ULK1轴之间的关系。方法 通过予不同浓度ULK1激活剂LYN-1604(0、1.2、2μmol/L)、ULK1抑制剂MRT68921(0、1.2、2μmol/L)干预CEM-C7细胞24 h,流式细胞术检测各药物浓度对CEM-C7细胞株凋亡率的影响,筛选凋亡最明显的药物浓度进行后续实验,Edu及Soft agar实验检测其对CEM-C7细胞株增殖的影响,流式细胞术检测其对CEM-C7细胞株线粒体膜电位的影响,透射电镜观察其对CEM-C7细胞细胞核及线粒体超微结构变化的影响,Western blot检测激活和抑制ULK1后ULK1、p-ULK1(Ser317)、Caspase3、Cleaved-caspase3、Bcl-2、Bax、PCNA、AMPKα、p-AMPKα(Ser172)的表达情况。结果 ULK1抑制剂及激活剂分别干预CEM-C7细胞24 h以后,与对照组相比,ULK1抑制剂可明显促进CEM-C7细胞发生凋亡,抑制CEM-C7细胞增殖,使细胞线粒体的膜电位明显下降,差异均具有统计学意义(P<0.05);透射电镜可观察到明显的细胞凋亡现象;p-ULK1(Ser317)、p-AMPKα(Ser172)的蛋白水平表达下降,而ULK1激活剂对CEM-C7细胞株无明显影响。结论 ULK1可能通过AMPKα/ULK1轴影响其对CEM-C7细胞的凋亡功能。

外泌体源性环状RNA Tousled样激酶1与老年急性脑梗死病情严重程度及预后的关系

目的探讨血清外泌体源性环状RNA Tousled样激酶1(circTLK1)与老年急性脑梗死病情严重程度及预后的关系。方法选取2021年10月至2022年11月恩施土家族苗族自治州中心医院脑病科收治的老年急性脑梗死患者128例(急性脑梗死组),采用美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分评估病情严重程度。急性脑梗死组90 d时又根据改良的Rankin量表(mRS)评分分为预后不良组46例和预后良好组82例。另选取健康体检者80例(对照组)。RT-PCR检测血清外泌体源性circTLK1表达。出院后对老年急性脑梗死患者进行随访,90 d时用mRS评分对预后进行评价。结果急性脑梗死组血清外泌体源性circTLK1表达明显高于对照组(1.86±0.46 vs 0.87±0.12,P<0.05)。轻度、中度和重度急性脑梗死患者血清外泌体源性circTLK1表达逐渐升高(1.34±0.28 vs 1.78±0.19 vs 2.35±0.33,P<0.05)。预后不良组入院时NIHSS评分和circTLK1表达明显高于预后良好组[(13.21±3.24)分vs(9.55±2.16)分,P=0.001;2.15±0.77 vs 1.47±0.58,P=0.001]。多因素logistic回归分析显示,入院时NIHSS评分和circTLK1表达是老年急性脑梗死患者不良预后的独立影响因素(OR=4.123,95%CI:1.109~12.520,P=0.001;OR=2.734,95%CI:1.067~6.135,P=0.001)。ROC曲线分析显示,血清外泌体源性circTLK1表达预测急性脑梗死患者预后的曲线下面积为0.831,敏感性和特异性分别为96.19%、85.20%。结论老年急性脑梗死患者血清外泌体源性circTLK1表达升高,其表达越高,病情可能越重,且预后不良。

受体酪氨酸激酶样孤儿受体1与肿瘤细胞信号通路关系的研究进展

受体酪氨酸激酶样孤儿受体1(ROR1)属于受体酪氨酸激酶(RTKs)大家族的一种表面跨膜蛋白,在调控骨骼与神经的发育,细胞迁移与细胞极性中有重要作用。ROR1在正常组织中表达低或不表达,在肿瘤组织中高表达。研究发现ROR1能与配体螯合来调节Wnt等多种细胞信号通路,从而在多种疾病尤其是恶性肿瘤中发挥重要的作用,逐渐成为恶性肿瘤的治疗靶标。本文就ROR1在恶性肿瘤中与细胞信号通路相互作用及靶向ROR1肿瘤免疫治疗的研究进展进行综述,为肿瘤临床治疗策略的制订提供参考。

Doublecortin样激酶-1在消化道肿瘤中的研究进展

Doublecortin样激酶-1(doublecortin-like kinase 1,DCLK1)最初是在神经系统中发现的一种跨膜微管相关蛋白激酶,具有调节微管聚合以及促进神经元迁移的功能。近年来,随着DCLK1在消化道恶性肿瘤中的研究,其被认为是一种在恶性肿瘤形成和发展中发挥重要作用的蛋白质。此外,DCLK1可以通过调控多种mi RNAs促进上皮间质转化,进而促进肿瘤的侵袭和转移。研究DCLK1在恶性肿瘤中发挥的作用及机制并特异性阻断其分子机制,或许可以成为一种治疗肿瘤的新方法。

微核糖核酸101和可溶性fms样酪氨酸激酶1在子痫前期患者中的表达及其临床意义

目的 探讨微核糖核酸(microRNA)101(简称miR-101)与可溶性fms样酪氨酸激酶1(soluble fms-like tyrosine kinase receptor 1,sFlt-1)在子痫前期(preeclampsia,PE)患者中的表达及其临床意义。方法 选取2018年1月—2020年12月在上海市宝山区吴淞医院妇产科收治的因无宫缩行剖宫产分娩的60例孕产妇,其中PE组20例,重度子痫前期(sPE)组20例,健康孕产妇(对照)组20例。收集3组孕产妇外周血和胎盘组织样本,采用ELISA法检测3组孕产妇外周血中sFlt-1的表达水平,实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测3组孕产妇胎盘组织中miR-101的表达变化,结合双荧光素酶报告实验分析miR-101与sFlt-1表达的相关性,通过细胞学功能实验验证miR-101对胎盘滋养层细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。结果 sPE、PE组孕产妇收缩压、舒张压值和尿蛋白量均显著高于对照组,分娩孕周均显著早于对照组(P值均<0.017)。sPE组孕产妇收缩压、舒张压值和尿蛋白量均显著高于PE组(P值均<0.017),两组分娩孕周的差异无统计学意义(P>0.05)。sPE组孕产妇血小板计数减少、肝功能损伤、肾功能损伤、产后出血和新生儿窒息比例均显著高于对照组和PE组(P值均<0.05)。ELISA检测结果显示,PE和sPE组外周血中sFlt-1表达水平分别为(3 131.80±448.25)和(3 555.00±428.89) ng/L,均显著高于对照组的(500.70±72.71) ng/L(P值均<0.001)。RT-qPCR检测结果显示,PE和sPE组胎盘组织中sFlt-1 mRNA相对表达量分别为5.33±0.58、6.50±0.50,均显著高于对照组的1.00±0.11(P值均<0.001)。PE和sPE组胎盘组织中miR-101相对表达量分别为0.50±0.14、0.40±0.12,均显著低于对照组的1.00±0.26(P=0.038、0.021)。荧光素酶报告实验结果显示,sFlt-1-Luc+miR-101-5p组293T细胞的相对荧光强度为2 366.67±321.46,显著低于sFlt-1-Luc组的4 533.33±665.83(P=0.016)。对3组孕产妇胎盘组织中miR-101与sFlt-1 mRNA表达进行Spearman秩相关检验,r_(s)=-0.871,P=0.001。提示3组孕产妇胎盘组织中miR-101与sFlt-1 mRNA表达呈负相关。3组孕妇一般临床资料与sFlt-1 mRNA、miR-101表达的相关性分析结果显示,sFlt-1 mRNA表达上调与孕妇收缩压、舒张压值和尿蛋白量呈正相关,与孕妇分娩孕周呈负相关(P值均<0.001),与孕妇年龄和孕前BMI无相关性(P值均>0.05);miR-101 mRNA表达下调与孕妇收缩压、舒张压值和尿蛋白量呈负相关,与孕妇分娩孕周呈正相关(P值均<0.001),与孕妇年龄和孕前BMI无相关性(P值均>0.05)。结论 miR-101在PE患者胎盘组织中低表达,可能导致sFlt-1的表达增加,进而抑制滋养层细胞的增殖、侵袭和迁移,参与PE的发生、发展。

漆酶基因LACC1经腺苷酸活化蛋白激酶/NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3加重脑梗死缺血再灌注损伤的机制研究

目的探讨漆酶基因LACC1对脑梗死后缺血再灌注损伤的影响及其机制。方法①采购C57BL/6J LACC1基因敲除(LACC1-/-)小鼠20只,野生型小鼠20只,建立大脑中动脉闭塞/再灌注(middle cerebral artery occlusion/reperfusion,MCAO/R)模型各15只,比较两组小鼠的脑梗死体积。采用蛋白质免疫印迹实验检测脑组织中磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(phosphorylate AMP-activated protein kinase,p-AMPK)及NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor protein 3,NLRP3)水平,采用微阵列分析外周血中长链非编码RNA(long noncoding RNA,lncRNA)表达谱及探讨可能涉及的信号转导通路。②制备小鼠小胶质细胞氧糖剥夺/再灌注(oxygen glucose deprivation/reoxygenation,OGD/R)模型,并通过小干扰RNA(siRNA)转染技术上调及抑制LACC1的表达,明确LACC1对脑梗死体外模型炎症和氧化应激的调节作用。采用蛋白质免疫印迹实验检测p-AMPK、NLRP3水平,采用酶联免疫吸附测定法检测血清过氧化氢酶(catalase,CAT)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、活性氧(reactive oxygen species,ROS)、IL-1β、IL-6、干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)、TNF-α水平。结果MCAO/R模型野生型小鼠组脑梗死体积比例为(21.38%±4.06%),LACC1-/-小鼠组脑梗死体积比例为(19.07%±2.86%),差异有统计学意义(P=0.041),同时LACC1-/-小鼠脑组织中p-AMPK的蛋白表达水平增加,NLRP3蛋白表达水平受到抑制。OGD/R细胞模型中,LACC1的下调抑制了NLRP3蛋白的表达、增加了p-AMPK蛋白的表达。OGD/R细胞模型中,LACC1的过度表达增加了IL-1β、IL-6、INF-γ、TNF-α、MDA和ROS生成,降低了CAT和SOD的水平(P<0.05)。结论LACC1可能通过AMPK/NLRP3途径加重小鼠缺血再灌注后的炎症反应,这可能为脑梗死或其他神经系统疾病及其相关并发症提供一种新的治疗方案。

环状RNA丝氨酸/苏氨酸蛋白扰动样激酶1和微小RNA-214在缺血性脑卒中病人中的表达及意义

目的 探究环状RNA丝氨酸/苏氨酸蛋白扰动样激酶1(Circ TLK1)和微小RNA(miR)-214在缺血性脑卒中(IS)病人中的表达及意义。方法 选取2019年4月至2021年4月在广元市中心医院治疗的97例IS病人为观察组,根据美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分将IS病人分为轻度组33例、中度组45例、重度组19例,另选取85例健康体检者为健康组。采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测所有病人血清Circ TLK1和miR-214水平。对IS病人进行90 d的预后随访,按照改良Rankin量表(mRS)分为预后良好组和预后不良组,分析并比较不同预后病人的临床指标。多因素logistic回归分析IS病人预后不良的影响因素。受试者操作特征曲线(ROC曲线)分析Circ TLK1和miR-214对IS病人预后的预测价值。结果与健康组相比,观察组血清Circ TLK1[(1.83±0.22)比(1.03±0.12)]和miR-214[(2.64±0.49)比(1.07±0.13)]均显著性上调(P<0.05)。与轻度组相比,中度组和重度组病人血清Circ TLK1和miR-214均显著性上调,与中度组相比,重度组病人血清Circ TLK1和miR-214水平显著上升(P<0.05)。观察组病人90 d预后随访结果显示,预后良好组病人63例,预后不良组病人34例。两组病人同型半胱氨酸(Hcy)、三酰甘油、梗死体积、发病到住院的时间、入院时NIHSS评分、Circ TLK1、miR-214水平之间差异有统计学意义(P<0.05)。多因素logistic回归分析显示,入院时NIHSS评分高、发病到住院的时间长、Circ TLK1、miR-214高水平是IS病人预后不良的独立危险因素(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,Circ TLK1和miR-214对IS病人预后评估价值的曲线下面积(AUC)分别为0.86、0.83,灵敏度分别为91.20%、67.60%,特异度分别为74.60%、90.50%。结论 Circ TLK1和miR-214在IS病人血清中呈高表达,二者是IS病人预后不良的独立危险因素,对病人的预后具有一定的评估价值。

颅脑损伤患者胰岛素样生长因子-1、可溶性尿激酶型纤溶酶原激活物受体、同型半胱氨酸水平与认知功能的关系及对患者预测价值研究

目的 探讨颅脑损伤患者胰岛素样生长因子-1(insulin like growth factor-1,IGF-1)、可溶性尿激酶型纤溶酶原激活物受体(soluble urokinase type plasminogen activator receptor,suPAR)、同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)水平与认知功能的关系及对患者预后的预测价值。方法 回顾性选取133例2020年4月至2023年4月云南省滇南中心医院收治的颅脑损伤患者的临床资料作为病例组,根据其病情严重程度分为轻度组(51例)、中度组(48例)和重度组(34例),并根据其预后情况分为预后良好组(89例)和预后不良组(44例);另选144例同期云南省滇南中心医院进行健康体检的健康体检者的临床资料作为对照组。比较病例组和对照组蒙特利尔认知评估量表(Montreal cognitive assessment,MoCA)评分及血清IGF-1、血浆suPAR、Hcy水平,对比不同病情严重程度、不同预后患者血清IGF-1及血浆suPAR、Hcy水平,用Pearson相关性分析颅脑损伤患者血清IGF-1及血浆suPAR、Hcy水平与MoCA评分的关系,绘制受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC)分析血清IGF-1及血浆suPAR、Hcy对颅脑损伤患者预后的预测价值。结果 病例组MoCA评分及血清IGF-1水平低于对照组(P<0.05),血浆suPAR、Hcy水平高于对照组(P<0.05)。重度组血清IGF-1水平低于中度组和轻度组(P<0.05),中度组低于轻度组(P<0.05);重度组血浆suPAR、Hcy水平高于中度组和轻度组(P<0.05),中度组高于轻度组(P<0.05)。预后不良组血清IGF-1水平低于预后良好组(P<0.05),血浆suPAR、Hcy水平高于预后良好组。Pearson相关性分析结果显示,血清IGF-1水平与MoCA评分呈正相关(r=0.659,P<0.05),血浆suPAR、Hcy水平与MoCA评分呈负相关(r=-0.492、-0.513,P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,血清IGF-1及血浆suPAR、Hcy联合预测颅脑损伤患者预后的曲线下面积值为0.916,高于血清IGF-1及血浆suPAR、Hcy单独预测(0.796、0.774、0.781,P<0.05)。结论 颅脑损伤患者血清IGF-1呈低表达,而血浆suPAR、Hcy呈高表达,三者水平变化可参与患者病情进展过程,且与患者认知功能密切相关,另外三者联合预测颅脑损伤患者预后的预测价值更高。