Down's综合征关键区一个假基因的克隆与表达分析

利用生物信息分析方法与RACE在21号染色体长臂Down's综合征关键区克隆了一个新基因,命名为NY1,结构分析显示这一基因序列无内含子,无完整的阅读框,在3′端有PolyA尾序列.说明它可能为返座假基因.RT PCR与Northern杂交分析,这一基因在多种组织中有表达,但呈现出表达差异及组织特异性.

建立危重新生儿转运网的初步尝试

目的 探讨建立区域性新生儿转运网 ,降低新生儿死亡率、减少伤残及改善预后情况。方法 与北京市东城区所属医院建立绿色通道 ,1999年 11月～ 2 0 0 3年 5月共转诊新生儿 2 5 1例 ,早产儿 183例 (占72 .9% ) ,其中胎龄 2 6～ 30周 19例 ,出生体重 <15 0 0 g 2 8例 ;病种以呼吸系统疾病为主。 3年来共出诊 16 7例次 ,使用转运暖箱 10 2次 ,出动救护车 5 1次 ,参与复苏抢救 6 5次。结果 转诊人数逐年增多 ,2 5 1例新生儿中治愈 2 30例 (治愈率 91.6 % ) ,家长放弃治疗 17例 ,死亡 4例。结论 建立区域性三级转诊系统是降低新生儿病死率的重要环节 ,具备急救技术和训练有素的主动转运方式可使危重儿在生命的最初阶段得到及时和序贯治疗 ,从而全面提高救治质量 ;早产儿尽早转运、重视转运前急救是转运成功的保证 ;提倡胎儿于宫内时转运 。

lncRNA DGCR5在食管鳞状细胞癌组织中的表达及其临床意义

目的:探讨长链非编码RNA DiGeorge综合征临界区基因5(digeorge syndrome critical region gene 5,DGCR5)在食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell cancinoma,ESCC)组织中的表达及其与患者临床病理特征和预后的相关性。方法:利用生物信息学方法对TCGA数据库中ESCC数据集的DGCR5表达进行分析。收集2016年8月至2017年3月河北医科大学第四医院手术切除60例ESCC患者的癌及癌旁组织标本,用qPCR检测ESCC组织中DGCR5的表达水平,分析DGCR5表达与ESCC患者临床病理特征和预后的相关性。结果:TCGA数据库分析结果显示,DGCR5在ESCC组织中的表达水平显著高于正常食管组织(P<0.01)。ESCC组织中DGCR5表达水平显著高于癌旁组织(P<0.01)。DGCR5表达水平与ESCC患者TNM分期和淋巴结转移呈显著性相关(均P<0.05)。Kaplan-Meier单因素分析显示,高表达DGCR5的ESCC患者2年生存率显著低于低表达DGCR5患者(P<0.05)。结论:DGCR5在ESCC组织中呈高表达状态,共表达与TNM分期、淋巴结转移及预后不良密切相关,可能成为ESCC早期诊断及预后判断的分子标志物。

lncRNA DGCR5通过上调EGFR表达促进食管鳞状细胞癌TE1细胞的恶性生物学行为

目的:探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)DiGeorge综合征临界区基因5(digeorge syndrome critical region gene 5,DGCR5)对食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)TE1细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其机制。方法:采用qPCR检测ESCC细胞系TE1、Yes-2、KYSE150和Eca9706中DGCR5的表达水平。将siRNA-DGCR5(si-DGCR5)和阴性对照组(si-NC)质粒转染进TE1细胞,用CCK-8、划痕愈合、Transwell小室法分别检测TE1细胞增殖、迁移和侵袭能力。依据GEPIA数据库资料分析食管癌组织中DGCR5表达与细胞表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)的相关性,并用qPCR和Western blotting(WB)检测ESCC细胞系中EGFR mRNA和蛋白表达水平,进一步用WB实验检测转染si-DGCR5前后TE1细胞中EGFR蛋白的表达水平。结果:DGCR5在ESCC细胞系中均高表达(均P<0.01),转染siDGCR5组TE1细胞中DGCR5的表达水平明显低于si-NC组(P<0.01)。敲低DGCR5后,TE1细胞的增殖、侵袭和迁移能力显著低于si-NC组细胞(均P<0.01)。GEPIA数据库的分析显示,食管癌组织中DGCR5表达水平与EGFR的表达呈正相关(P<0.01)。敲低DGCR5后TE1细胞中EGFR蛋白表达水平明显下降(P<0.01)。结论:lncRNA DGCR5在ESCC细胞中呈高表达,可能通过上调EGFR表达来促进TE1细胞的增殖、侵袭和迁移等恶性生物学行为。

长链非编码RNA-CECR7在胃癌中的表达水平及与临床病理特征和预后的关系

目的观察胃癌组织中长链非编码RNA猫眼综合征临界区基因7(LncRNA CECR7)的表达变化,并探讨其临床意义及与患者预后的关系。方法收集2014年7月至2015年12月经病理确诊的89例胃癌患者胃癌组织为研究对象,对应癌旁组织为对照组。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测患者组织中LncRNA CECR7的表达水平,分析其与胃癌临床病理特征的关系;并对全部患者进行随访,分析患者胃癌组织中LncRNA CECR7表达对预后的影响,LncRNA CECR7表达水平高低与患者生存率的关系,及胃癌患者不良预后危险因素分析。结果胃癌组织中LncRNA CECR7表达水平显著高于癌旁组织(P<0.05)。胃癌组织中LncRNA CECR7表达水平与肿瘤原发灶淋巴结转移(TNM)分期、肿瘤直径、脉管浸润密切相关(P<0.05)。LncRNA CECR7低表达水平患者术后良好比例高于高表达患者(P<0.05),术后肿瘤复发率、死亡率均低于高表达患者(P<0.05)。胃癌组织中LncRNA CECR7低表达患者3年生存率明显高于高表达患者(P<0.05)。LncRNA CECR7表达、TNM分期、肿瘤分化程度是影响胃癌患者预后的独立危险因素(P均<0.05)。结论胃癌组织中LncRNA CECR7高表达水平与TNM分期、预后症状密切相关,是影响胃癌患者预后的独立危险因素,可作为患者不良预后的预测指标。

长链非编码RNA DSCR8在胃癌中的表达及其与预后的关系

目的通过检测长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)唐氏综合征关键区域8(Down syndrome critical region 8,DSCR8)在胃癌患者胃癌组织中的表达情况,对其表达水平与患者预后的关系以及与信号传导和转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)、微小RNA-98-5p(miR-98-5p)的相关性进行探讨。方法选取2013年8月至2015年6月185例我院已确诊收治的胃癌患者手术切除的胃癌组织、癌旁组织标本,采用实时荧光定量PCR方法检测组织样本中DSCR8、Stat3、miR-98-5p的表达情况,对DSCR8与胃癌临床病理参数的关系进行分析;DSCR8与STAT3、miR-98-5p以及STAT3和miR-98-5p间相关性用Pearson相关系数进行分析;采用Kaplan-Meier进行生存曲线分析;胃癌患者预后的影响因素使用Cox生存回归分析方法。结果与癌旁组织相比,胃癌组织中DSCR8的表达水平显著增加(P<0.05);DSCR8表达在患者淋巴结转移、肿瘤大小和TNM分期中差异有统计学意义(P<0.05)。胃癌组织中STAT3的表达水平显著增加,而miR-98-5p的表达水平则显著降低(P<0.05),二者呈显著负相关;DSCR8与STAT3呈显著正相关,而与miR-98-5p呈显著负相关;与DSCR8高表达组相比,DSCR8低表达组预后生存率较高(P<0.05)。多因素分析发现,淋巴结转移、TNM分期、肿瘤大小、DSCR8高表达均是影响预后生存的独立危险因素(P<0.05)。结论胃癌患者胃癌组织中DSCR8呈高表达,且与患者临床病理参数及预后生存情况密切相关,检测其表达水平对判断患者预后生存情况具有重要价值。

肺腺癌组织的DGCR5水平及临床意义

目的探讨肺腺癌组织的DiGeorge综合征临界区基因5(DGCR5)水平及临床意义。方法采用实时定量PCR(qPCR)检测本院2017年1月至2019年12月手术切除的106对肺腺癌组织和癌旁组织的DGCR5水平,受试者工作特征(ROC)曲线评价以病理结果为标准利用组织DGCR5鉴别肺腺癌的价值,分层分析组织DGCR5水平与肺腺癌临床病理特征的关系,Kaplan-Meier Plotter数据库在线分析DGCR5水平与肺腺癌预后的关系。结果肺腺癌组织的DGCR5水平为3.845±1.580,高于癌旁组织的1.009±0.478(P<0.05);ROC曲线结果显示组织DGCR5水平诊断肺腺癌的曲线下面积为0.937(95%CI:0.903~0.970),且DGCR5水平取2.005时约登指数最佳,敏感度和特异度分别为83.96%和99.06%。组织DGCR5水平与肿瘤大小、分化程度和TNM分期有关(P<0.05),而与性别、年龄、吸烟史和淋巴结转移无关(P>0.05)。组织DGCR5水平与肺腺癌的首次进展后生存期和总生存期无关(P>0.05),而与疾病进展后生存期有关(P<0.05)。结论DGCR5在肺腺癌组织中异常高表达,该基因可能是治疗肺腺癌的新靶点。

PET/CT影像组学结合LncRNA-DGCR5在NSCLC精准医疗中的应用研究

目的研究PET/CT影像组学结合长链非编码RNA DiGeorge综合征临界区基因5(LncRNA-DGCR5)在非小细胞肺癌(NSCLC)精准医疗中的应用价值。方法106例NSCLC患者均接受PET/CT检查及放化疗治疗,根据治疗后实体肿瘤疗效评价标准(RECIST)对其进行疗效评价,将完全缓解和部分缓解患者纳入治疗有反应组(58例),疾病稳定和疾病进展患者纳入治疗无反应组(48例)。比较2组患者的PET/CT图像纹理参数[最大标准摄取值(SUV_(max))、平均值、方差、峰度、偏度、对比度、熵、能量];实时荧光定量PCR检测外周血LncRNA-DGCR5表达;构建受试者工作特性(ROC)曲线分析各指标对NSCLC患者疗效的预测价值。结果有反应组SUV_(max)、熵及LncRNADGCR5表达低于无反应组(P<0.05),能量高于无反应组(P<0.05),其余参数比较差异无统计学意义;以LncRNADGCR5表达均值2.01为临界值,将患者分为LncRNA-DGCR5低表达组(51例)和高表达组(55例),与LncRNADGCR5低表达组比较,LncRNA-DGCR5高表达组PET/CT纹理参数中SUV_(max)、熵升高,能量降低(P<0.05);ROC曲线结果显示,SUV_(max)、熵、能量及LncRNA-DGCR5预测NSCLC患者疗效的AUC分别为0.897、0.851、0.795和0.949,且联合预测的AUC最高,为0.998。结论PET/CT影像组学结合LncRNA-DGCR5有助于预测NSCLC患者的疗效,从而在NSCLC精准医疗中提供指导。

瑞芬太尼通过上调lncRNA DGCR5表达影响卵巢癌细胞增殖和转移的机制研究

目的探讨瑞芬太尼对长链非编码RNA(lncRNA)DiGeorge综合征关键区域基因5(DGCR5)表达的调控及卵巢癌细胞生长和转移的影响。方法采用细胞计数试剂盒8(CCK-8)法检测0、0.5、5.0、50.0、500.0 ng/mL瑞芬太尼组、si-NC组、si-lncRNA DGCR5组、si-NC+500 ng/mL瑞芬太尼组、si-lncRNA DGCR5+500 ng/mL瑞芬太尼组卵巢癌细胞SKOV3、OVCAR3的增殖;采用流式细胞仪、Transwell法、免疫印迹试验(Western blot)和定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)依次检测SKOV3、OVCAR3细胞的凋亡、迁移、侵袭以及细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、活化的天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3(Cleaved-caspase-3)、基质金属蛋白酶2(MMP2)、基质金属蛋白酶9(MMP9)的表达和lncRNA DGCR5表达。结果与0 ng/mL瑞芬太尼比较,0.5、5.0、50.0、500.0 ng/mL瑞芬太尼可降低SKOV3、OVCAR3细胞的增殖活性、迁移及侵袭细胞数量以及CyclinD1、MMP2、MMP9蛋白表达水平,增加凋亡率、Cleaved-caspase-3蛋白和lncRNA DGCR5表达水平,差异有统计学意义(P<0.01)。与si-NC组比较,lncRNA DGCR5低表达可使卵巢癌细胞SKOV3和OVCAR3的lncRNA DGCR5表达水平、凋亡率、Cleaved-caspase-3蛋白表达水平降低,细胞增殖活性、迁移及侵袭数量、CyclinD1、MMP2、MMP9蛋白表达水平升高,差异有统计学意义(P<0.01)。lncRNA DGCR5低表达可以逆转瑞芬太尼对卵巢癌细胞SKOV3和OVCAR3增殖、迁移、侵袭、凋亡的影响。结论瑞芬太尼通过上调lncRNA DGCR5,抑制卵巢癌细胞SKOV3、OVCAR3的增殖和转移,促进其凋亡。

猫叫综合征关键区域定位于5p15.2的D5S713-D5S18区域

猫叫综合征是由５号染色体短臂缺失引起的染色体缺失综合征。根据染色体综合征“关键区域”的概念，以及近１０年来对１０６例５ｐ缺失病例的临床诊断、细胞遗传学及分子遗传学分析，将猫叫综合征的关键区域定位于５ｐ１５．２，位于Ｄ５Ｓ７１３和Ｄ５Ｓ１８两个遗传标记之间的区域。为研究该病提供了遗传学资料。

长链非编码RNA DSCR8在胃癌中的表达及其与临床病理特征和预后的关系

目的探讨胃癌组织中长链非编码RNA唐氏综合征关键区域8(LncRNA DSCR8)mRNA的表达水平及其临床意义。方法选取2014年8月至2015年8月期间在笔者所在医院住院治疗的86例胃癌患者作为研究对象,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测胃癌组织及其癌旁组织中LncRNA DSCR8 mRNA的表达水平,并分析胃癌组织中LncRNA DSCR8 mRNA表达水平与患者临床病理特征的关系;采用Kaplan-Meier法分析胃癌组织中LncRNA DSCR8 mRNA表达与患者生存率的关系;多因素Cox比例风险回归分析影响胃癌患者预后的因素。结果胃癌组织中LncRNA DSCR8 mRNA相对表达量高于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.001);组织低分化、TNM分期为Ⅲ~Ⅳ期和有淋巴结转移胃癌患者的LncRNA DSCR8 mRNA表达水平高于组织高/中分化、TNM分期为Ⅰ~Ⅱ期和无淋巴结转移患者,差异有统计学意义(P<0.05);LncRNA DSCR8 mRNA低表达胃癌患者的1、3、5年生存率(分别为97.62%、92.86%、83.33%)高于LncRNA DSCR8 mRNA高表达患者(分别为63.64%、38.64%、31.82%),P<0.05;LncRNA DSCR8 mRNA表达和TNM分期是影响胃癌患者死亡的独立影响因素(P<0.05)。结论LncRNA DSCR8与胃癌的发生发展及预后均有一定的关系,有望成为胃癌患者肿瘤分期、淋巴结转移等疾病进展的重要分子标志物。

LncRNA DGCR5在宫颈癌中的表达及其与临床特征及预后的关系

目的 研究长链非编码RNA (LncRNA)DGCR5在宫颈癌中的表达,分析DGCR5与宫颈癌临床病理特征及预后间的关系。方法 纳入124例宫颈癌患者作为研究对象,qRT-PCR方法检测宫颈癌组织及癌旁正常组织DGCR5表达,GEPIA数据库及TCGA数据库分析DGCR5在宫颈癌中的表达情况及患者预后总生存期(OS)的关系。以宫颈癌患者癌组织中DGCR5相对表达量中位数作为分组截断值,将患者分为高表达组和低表达组,分析DGCR5与宫颈癌患者临床病理特征之间的关系;Cox风险比例模型分析影响宫颈癌预后的独立危险因素;生存曲线分析DGCR5与宫颈癌患者术后3年生存率的关系;受试者工作曲线(ROC)分析DGCR5对宫颈癌病理特征及预后的诊断价值。结果 DGCR5在癌组织中相对表达量明显低于癌旁正常组织(P<0.05);DGCR5表达与患者的FIGO分期、组织分化程度淋巴结转移及微血管侵犯有关(P<0.05);DGCR5低表达患者OS明显低于高表达的患者(P<0.05);DGCR5低表达为影响宫颈癌预后的独立危险因素;DGCR5在诊断宫颈癌组织、FIGO分期、分化程度、淋巴结转移及微血管侵犯中曲线下面积(AUC)分别为0.863、0.788、0.730、0.637、0.814、0.727,均具有较高的诊断价值。结论 DGCR5在宫颈癌组织中表达下调,DGCR5的低表达是宫颈癌患者总体生存的独立不良预后因素。

产前超声联合孕妇血锌、ALP、DGCR8检测对胎儿先天性心脏病的诊断效能

目的探讨产前超声联合孕妇血锌、碱性磷酸酶(ALP)、乔治综合征危象基因8(DGCR8)检测对胎儿先天性心脏病的诊断价值。方法抽取2021年4月至2023年1月于河南大学第一附属医院产检的92例孕妇(单胎妊娠),其中40例诊断为胎儿先天性心脏病的孕妇设为研究组,52例胎儿无先天性心脏病的孕妇设为对照组。两组均给予产前超声检查以及血清标志物(血锌、DGCR8、ALP)检测,采用受试者工作特征曲线下面积(AUC)分析产前超声、血清标志物单项及联合检测的诊断效能。结果研究组胎儿心轴角度大于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。研究组血锌、ALP及DGCR8水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。产前超声、血锌、ALP、DGCR8四者联合,诊断胎儿先天性心脏病的灵敏度(98.6%)、AUC(0.951)和准确率(89.0%)高于四者单项诊断。结论产前超声联合血锌、ALP及DGCR8检测对胎儿先天性心脏病的鉴别诊断效能较高,具有较好的应用价值。