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果蝇血液发育标记基因Dox-A3多克隆抗体的制备
1
作者
苏勇
蔡哲彦
+2 位作者
江志钢
袁婺洲
吴秀山
《湘南学院学报》
2012年第5期33-36,共4页
从野生型成体果蝇体内提取总RNA,以cDNA作为模板进行PCR扩增,获取Dox-A3部分基因片段,将这片段连接于原核表达载体pET-28a上,成功构建重组质粒pET-28a-Dox-A3.将重组质粒转化大肠杆菌菌株Rosetta,用ITPG诱导表达出融合蛋白,然后将经Ni-...
从野生型成体果蝇体内提取总RNA,以cDNA作为模板进行PCR扩增,获取Dox-A3部分基因片段,将这片段连接于原核表达载体pET-28a上,成功构建重组质粒pET-28a-Dox-A3.将重组质粒转化大肠杆菌菌株Rosetta,用ITPG诱导表达出融合蛋白,然后将经Ni-IDA凝胶柱纯化的融合蛋白免疫新西兰大白兔制备Dox-A3多克隆抗体,通过Western-Blot检测效价和特异性.结果表明,实验获得了高质量的多克隆抗体.
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关键词
dox—a3基因
果蝇
原核表达
多克隆抗体
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职称材料
题名
果蝇血液发育标记基因Dox-A3多克隆抗体的制备
1
作者
苏勇
蔡哲彦
江志钢
袁婺洲
吴秀山
机构
湖南师范大学蛋白质化学及鱼类发育生物学教育部重点实验室心脏发育研究中心
出处
《湘南学院学报》
2012年第5期33-36,共4页
基金
国家自然科学基金项目(30671053
30871340
+2 种基金
30930054
30900851)
国家重点基础研究发展计划项目(2005CB522505)
文摘
从野生型成体果蝇体内提取总RNA,以cDNA作为模板进行PCR扩增,获取Dox-A3部分基因片段,将这片段连接于原核表达载体pET-28a上,成功构建重组质粒pET-28a-Dox-A3.将重组质粒转化大肠杆菌菌株Rosetta,用ITPG诱导表达出融合蛋白,然后将经Ni-IDA凝胶柱纯化的融合蛋白免疫新西兰大白兔制备Dox-A3多克隆抗体,通过Western-Blot检测效价和特异性.结果表明,实验获得了高质量的多克隆抗体.
关键词
dox—a3基因
果蝇
原核表达
多克隆抗体
Keywords
dox
-
a3
gene
drosophila
prokaryotic expression
polyclonal antibody
分类号
Q71 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
果蝇血液发育标记基因Dox-A3多克隆抗体的制备
苏勇
蔡哲彦
江志钢
袁婺洲
吴秀山
《湘南学院学报》
2012
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