香青兰总黄酮灌胃对博来霉素诱导大鼠肺纤维化的抑制作用及其机制

目的观察香青兰总黄酮灌胃对博来霉素诱导大鼠肺纤维化(PF)的影响,并基于肠道菌群和血清代谢组学方法探讨其可能的机制。方法将32只雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组、香青兰总黄酮高剂量组及香青兰总黄酮低剂量组,每组8只。除对照组外,其余各组均采用气管内滴入博来霉素的方法建立PF模型;香青兰总黄酮高、低剂量组建模后分别给予香青兰总黄酮400、100 mg/kg灌胃,对照组和模型组分别给予等体积生理盐水灌胃,1次/天,连续21 d。各组末次给药后处死,采用HE染色及Masson染色观察肺组织病理情况,实时荧光定量PCR法检测肺组织胶原蛋白Ⅲ(COLⅢ)、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)mRNA相对表达量,16 S rRNA测序技术进行肠道菌群α、β多样性分析并检测其相对丰度,超高效液相色谱串联质谱分析并筛选血清关键差异代谢产物,并导入京都基因与基因组百科全书(KEGG)进行代谢途径的富集分析。结果与对照组比较,模型组大鼠肺泡结构被破坏,肺泡间隔增宽,炎症细胞浸润明显,肺泡壁变厚,肺泡之间的距离增宽,可见蓝色条索状胶原纤维沉积;与模型组比较,香青兰总黄酮高、低剂量组大鼠上述病理改变减轻。与对照组比较,模型组大鼠肺组织COLⅢ、α-SMA mRNA相对表达量均升高(P均<0.05);与模型组比较,香青兰总黄酮高、低剂量组肺组织COLⅢ、α-SMA mRNA相对表达量均降低(P均<0.05)。α多样性分析结果显示,与对照组比较,模型组、香青兰总黄酮高剂量和香青兰总黄酮低剂量组大鼠肠道菌群Chao1、Ace均升高(P均<0.05)。β多样性分析结果显示,对照组、香青兰总黄酮高剂量和香青兰总黄酮低剂量组大鼠肠道菌群组成接近,与模型组大鼠肠道菌群组成比较均差异明显。在门水平上,与对照组比较,模型组大鼠拟杆菌门相对丰度降低而厚壁菌门/拟杆菌门升高(P均<0.05);与模型组比较,香青兰总黄酮高剂量组和香青兰总黄酮低剂量组大鼠拟杆菌门相对丰度升高而厚壁菌门/拟杆菌门降低(P均<0.05)。在属水平上,与对照组比较,其余三组大鼠嗜酸乳杆菌属相对丰度均降低(P均<0.05);与对照组、模型组比较,香青兰总黄酮高剂量组和香青兰总黄酮低剂量组大鼠乳杆菌属相对丰度均升高(P均<0.05)。与对照组比较,模型组大鼠关键差异菌群为大肠杆菌种;与模型组比较,香青兰总黄酮高剂量组大鼠关键差异菌群为假长双歧杆菌种、双歧杆菌属、瘤胃球菌属等;与模型组比较,香青兰总黄酮低剂量组大鼠关键差异菌群为约翰逊乳杆菌种、嗜黏蛋白阿克曼菌种。模型组和香青兰总黄酮高、低剂量组之间分别筛选出30、49个血清差异代谢产物,均主要富集在AMP活化蛋白激酶(AMPK)信号通路等。结论香青兰总黄酮可减轻博来霉素诱导的大鼠PF,其作用机制可能与调控肠道菌群组成和AMPK相关代谢通路等有关。

环杷明与香青兰总黄酮联合用药对肺纤维化小鼠的影响

研究环杷明(Cyc)和香青兰总黄酮(TFDM)联合用药对肺纤维化(PF)小鼠的影响及作用机制。将C57BL/6小鼠随机分成5组,每组10只,即正常对照组、模型组、TFDM组(360 mg/kg)、Cyc组(5 mg/kg)和TFDM组(360 mg/kg)+Cyc组(5 mg/kg)。采用气管内滴注博来霉素(4 mg/kg)构建小鼠PF模型,正常对照组给予等量蒸馏水,建模第二天,给予相应药物干预,连续给药28 d。肺功能检测采用AniRes2005动物肺功能分析系统进行。肺组织进行冰冻切片的制作,使用HE染色和Masson染色观察肺组织病理情况;水解法测定肺组织羟脯氨酸(HYP)含量;采用Western blot检测各组小鼠1型胶原蛋白(Col-1)、纤维连接蛋白(FN1)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、SHH、Ptch1、SMO、Gli1和SUFU蛋白表达。结果显示与正常对照组比较,HE染色中模型组肺组织结构异常,出现炎性细胞浸润;Masson染色中出现较多被染成蓝色的胶原纤维化组织,肺组织被严重损伤;HYP含量显著升高(P<0.01);肺功能检测显示吸气相气道阻力(RL)、呼气相气道阻力(RE)和FEV0.1/FVC显著升高,肺动态顺应性(Cdyn)、用力肺活量(FVC)和呼气峰流速(PEF)显著降低(P<0.01);Western blot的结果可得知模型组肺组织中Col-1、FN1、α-SMA、SHH、Ptch1、SMO和Gli1蛋白表达水平显著升高,SUFU蛋白表达水平显著减低(P<0.01)。与模型组相比,Cyc组和TFDM组肺组织结构正常,几乎无炎性细胞浸润;Masson染色可以看出,蓝色纤维组织较少,肺组织纤维化程度得到缓解;HYP含量上调(P<0.01);肺功能检测显示RL、RE和FEV0.1/FVC显著下降,Cdyn和FVC和PEF显著升高(P<0.01);Western blot显示PF小鼠肺组织中Col-1、FN1、α-SMA、SHH、Ptch1、SMO和Gli1蛋白表达水平显著下调,SUFU蛋白表达水平显著升高(P<0.01)。TFDM可以在一定程度上改善小鼠PF,进一步得出结论Cyc和TFDM联合用药能更好地发挥作用。

RP-HPLC法测定香青兰有效部位中7种成分的含量

目的:建立RP-HPLC法测定香青兰有效部位中田蓟苷、金合欢素、木犀草素-7-O-β-葡萄糖醛酸苷等7种成分含量的方法。方法:Sunfire-C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱;以乙腈(A)-0.2%磷酸水溶液(B)为流动相,梯度洗脱(0~5min,16%A;5~45min,16%→28%A;45~65min,28%→80%A);流速1.0m L·min^(-1);柱温35℃;检测波长330 nm。结果:木犀草素-7-O-β-葡萄糖醛酸苷、芹菜素-7-O-β-葡萄糖醛酸苷、迷迭香酸、香叶木素-7-O-β-葡萄糖醛酸苷、田蓟苷、金合欢素-7-O-β-葡萄糖醛酸苷和金合欢素分离均良好,分别在1.20~60.00μg·m L^(-1)(r=0.9999)、0.48~24.00μg·m L^(-1)(r=0.9997)、0.88~44.00μg·m L^(-1)(r=0.9999)、0.88~44.00μg·m L^(-1)(r=0.9999)、3.84~192.00μg·m L^(-1)(r=0.9999)、0.72~36.00μg·m L^(-1)(r=0.9999)和0.72~36.00μg·m L^(-1)(r=0.9997)范围内呈良好线性关系;平均回收率分别为99.29%,97.04%,99.56%,98.29%,101.18%,99.34%和95.50%,RSD值分别为0.52%,1.13%,0.55%,0.42%,0.58%,0.97%和0.60%。结论:该色谱方法灵敏、稳定、简单、准确,可用于香青兰有效部位及制剂的质量控制。

香青兰总黄酮通过调控lncRNA FOXD3-AS1对ox-LDL诱导的血管内皮细胞损伤的影响

目的探讨香青兰总黄酮对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)损伤的影响及可能机制。方法不同浓度(25、50、100μg/mL)的香青兰总黄酮作用于ox-LDL诱导的HUVEC、ox-LDL诱导转染FOXD3-AS1小干扰RNA的HUVEC或香青兰总黄酮作用于ox-LDL诱导的转染FOXD3-AS1过表达载体的HUVEC后,检测细胞中MDA、SOD和GSH-Px水平,流式细胞仪检测细胞凋亡,Western Blot检测细胞中Bax和Bcl-2蛋白表达水平,RT-qPCR检测FOXD3-AS1表达水平。结果ox-LDL诱导HUVEC细胞后,细胞中MDA水平、细胞凋亡率、Bax蛋白和FOXD3-AS1表达升高(P<0.05),SOD和GSH-Px活性、Bcl-2蛋白表达降低(P<0.05);而香青兰总黄酮干预后,ox-LDL诱导的HUVEC细胞中MDA水平、细胞凋亡率、Bax蛋白和FOXD3-AS1表达降低(P<0.05),SOD和GSH-Px活性、Bcl-2蛋白表达升高(P<0.05),且呈剂量依赖性(P<0.05)。干扰FOXD3-AS1表达后,ox-LDL诱导的HUVEC细胞中MDA水平、细胞凋亡率和Bax蛋白表达降低(P<0.05),SOD和GSH-Px活性、Bcl-2蛋白表达升高(P<0.05)。过表达FOXD3-AS1后,香青兰总黄酮处理的ox-LDL诱导的HUVEC细胞中MDA水平、细胞凋亡率和Bax蛋白表达升高(P<0.05),SOD和GSH-Px活性、Bcl-2蛋白表达降低(P<0.05)。结论香青兰总黄酮可能通过下调FOXD3-AS1表达减轻ox-LDL诱导的HUVEC氧化应激和凋亡,保护细胞免受ox-LDL损伤。

火焰原子吸收光谱法分析香青兰中微量元素的溶出特性及化学形态

结合香青兰的药用功效,对其铜、锌、锰、铁、镁、镍6种微量元素的含量和形态进行了分析.分别用0.45 μm滤膜、D101型大孔吸附树脂,将香青兰水煎液中铜、锌、锰、铁、镁、镍分为悬浮态和可溶态、有机态和无机态;并采取正辛醇-水分配体系模拟水煎液中铜、锌、锰、铁、镁、镍在人体胃肠中的分配情况,建立了上述6种元素的4种形态分离分析方法,用火焰原子吸收光谱法测定6种微量元素的含量、分布及其在不同溶剂中的溶出特性和化学形态.结果表明,方法的回收率在92%～106%范围内,相对标准偏差均在3.8%以下,铜、锌、锰、铁、镁、镍是各以某种形态为主的多种形态共存的混杂体系.

香青兰总黄酮促进脑缺血再灌注大鼠室管膜下区巢蛋白表达

目的:观察香青兰总黄酮(TFDM)对大鼠脑缺血再灌注(I/R)损伤后室管膜下区(SVZ)巢蛋白(nestin)表达的影响,并研究其与Notch信号通路的相关性。方法:8周龄雄性SD大鼠随机分成为假手术组(sham)、缺血再灌注组(I/R)及I/R大鼠TFDM治疗组(I/R+TFDM)。采用大脑中动脉栓塞(MCAO)法制备大鼠I/R模型,免疫组织化学法检测各组大鼠梗死侧SVZ部位巢蛋白(nestin)阳性标记的神经干细胞(NSGs)的分布,Western Blot检测各组大鼠梗死侧SVZ部位nestin和Notch信号通路的中间产物Notch1细胞内域(NICD)的表达。结果:再灌注后3 d和7 d时,I/R+TFDM组大鼠梗死侧SVZ部位nestin的表达较I/R组显著增加(P <0.05),NICD的产生亦较I/R组显著增加(P <0.05)。结论:TFDM可促进脑缺血再灌注大鼠SVZ部位nestin的表达,其机制可能是通过激活Notch信号通路实现的。

香青兰中总黄酮含量的测定

利用聚酰胺薄层及分光光度法对唇形科植物香青兰中黄酮类成份进行了定性定量的分析,经薄层实验得知含5种黄酮类成份,测得总黄酮类含量26.06mg/g(生药)回收率101.0％,RSD=4.42％

益心巴迪然吉布亚(香青兰)颗粒中总黄酮含量测定

目的:建立维吾尔制剂巴迪然吉布亚(香青兰)颗粒中总黄酮的含量测定方法。方法:用60%乙醇水浴回流提取2h,以芦丁为对照品,采用紫外分光光度法在波长500nm处测定总黄酮含量。结果:本法在60min内吸收稳定,平均回收率为99.93%,线性范围为2～23μg/ml(r=0.9996),含量为15.92mg/g。结论:该方法简便、准确、稳定性好、灵敏度高,可作为巴迪然吉布亚颗粒中总黄酮含量测定的质量控制方法之一。

香青兰总黄酮对H_2O_2诱导的U87细胞损伤的保护机制研究

目的探讨香青兰总黄酮对过氧化氢(H_2O_2)诱导的U87细胞损伤的保护作用,以及ERK/MAPK信号通路在该过程中的作用机制。方法以正常培养的U87细胞为正常对照组,U87细胞加入0.31 mmol/L的H_2O_2损伤20min为模型组,采用不同浓度香青兰总黄酮(200.00、100.00、50.00、25.00、12.50、6.25、3.13、1.56μg/mL)预给药U87细胞2h,分别加入0.31mmol/L的H_2O_2刺激U87细胞20min作为实验组,采用CCK-8法检测U87的增殖活力,用ROS检测试剂盒法对活性氧(ROS)含量进行测定,Western blot法检测P-ERK1/2、ERK1/2蛋白的表达水平。结果与模型组比较,实验组细胞增殖活力提高,差异有统计学意义(P<0.05),与模型组相比,实验组细胞ROS含量降低,差异有统计学意义(P<0.05)。Western blot实验表明,与模型组比较,香青兰总黄酮不同浓度(100、50、25、5μg/mL)实验组P-ERK1/2蛋白含量均高于模型组,且呈现剂量依赖,差异有统计学意义(P<0.05)。结论香青兰总黄酮通过激活P-ERK1/2通路,抑制ROS过量产生,起到拮抗H_2O_2对U87细胞增殖的抑制作用。

基于VEGF-B/AMPKα通路研究香青兰总黄酮对阿霉素诱导内皮细胞损伤的保护作用

目的探究香青兰总黄酮(total flavonoids of Dracocephalum moldavica L.,TFDM)对阿霉素诱导的内皮细胞损伤的保护作用及机制。方法CCK-8法检测细胞活力;显微镜法观察细胞形态;试剂盒法检测LDH、SOD和线粒体膜电位变化;Transwell法检测细胞迁移情况;Western blot法检测内皮功能障碍和VEGF-B/AMPKα通路相关蛋白表达情况。结果与模型组相比,TFDM可明显提高细胞活力,改善阿霉素诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)细胞形态学变化,降低LDH漏出量,升高SOD活力,升高线粒体膜电位,促进内皮细胞迁移,抑制内皮细胞损伤。Western blot结果显示,与模型组比较,TFDM升高非受体酪氨酸激酶(Src)和黏着斑激酶(FAK)表达水平,升高舒血管因子eNOS磷酸化水平,降低内皮素-1(ET-1)蛋白表达水平,从而抑制内皮功能障碍。TFDM明显上调VEGF-B、NRP1、VEGFR1蛋白表达水平明显升高、明显升高p-AMPKα/AMPKα比例。结论TFDM抑制阿霉素诱导的内皮细胞损伤的机制可能与激活VEGF-B/AMPKα通路有关。

HPLC法测定不同采收期香青兰中黄酮和酚酸类的含量

目的:测定不同时期采收的香青兰药材中黄酮类成分(木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷、香叶木素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷和田蓟苷)和酚酸类成分(迷迭香酸)的含量,确定最佳采收期。方法:采用PurospherSTAR LP RP-18 endcapped(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以乙腈(A)-0.5%甲酸水溶液(B)为流动相,梯度洗脱(0~30 min,17% A;30~60 min,17% A→28% A;60~75 min,28% A),流速1.0 mL·min^(-1),检测波长330 nm,柱温35℃。结果:木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷、迷迭香酸、香叶木素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷、田蓟苷5种化学成分的分离效果良好,质量浓度在相应的范围内与峰面积有良好的线性关系,相关系数均大于0.999 5;平均加样回收率(n=6)为98.4%~99.5%(RSD<1.9%,n=6)。该方法应用于研究新疆吉木萨尔县产区不同采收期对香青兰药材中5种化学成分含量的影响,本试验在6月13日(种植后213 d)至8月6日(种植后270 d)内设置了8个采收期,发现木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷等上述5种化学成分的含量与采收期(种植后天数)均呈二次或三次函数关系,随着采收期的推迟,含量先增后减。结论:该含量测定方法操作简单,重复性好,为确定香青兰药材适宜采收期提供依据。香青兰药材中木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷等5种化学成分含量随采收期不同而异,其总量最大值出现在7月中上旬。

内蒙古香青兰总黄酮提取工艺优化及其抗氧化活性成分分析

目的 优化内蒙古香青兰总黄酮提取工艺,并对抗氧化活性成分进行分析。方法 采用单因素试验法结合响应面法优化提取工艺,并通过清除DPPH自由基试验、ABTS自由基清除试验、抑制羟基自由基试验和抑制超氧阴离子自由基试验筛选提取物的抗氧化活性成分,用高效液相色谱-电喷雾离子源-离子阱-飞行时间质谱联用技术(LC-MS-IT-TOF)对抗氧化活性成分进行分析。结果 内蒙古香青兰总黄酮最佳制备条件为提取温度67℃、乙醇体积百分数63%、料液比1∶58,提取物中总黄酮含量4.77%。香青兰总黄酮抗氧化活性成分为乙酸乙酯活性成分,主要包含迷迭香酸、迷迭香酸甲酯、木犀草素、芹菜素、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷等化学成分。结论 首次建立内蒙古香青兰总黄酮制备方法,该方法简单易操作,提取物总黄酮含量丰富,乙酸乙酯活性成分是香青兰总黄酮抗氧化活性成分,含有多种黄酮类化合物。

香青兰总黄酮通过VEGF-B/AMPK通路缓解氧化应激抗H9c2细胞缺血再灌注损伤

香青兰总黄酮(total flavonoids of Dracocephalum moldavica L.,TFDM)是从维吾尔医药传统药材香青兰中提取分离出来的有效部位,香青兰具有补益心脑、活血化瘀等功效,长期广泛用于治疗心脑血管疾病。本研究旨在确定香青兰总黄酮对H9c2(大鼠心肌细胞)细胞缺氧复氧(hypoxia/re-oxygenation,H/R)损伤的影响及其作用机制。采用缺氧缺糖9 h合并复氧复糖2 h建立H9c2细胞缺氧/复氧损伤模型,模拟心肌缺血再灌注心肌损伤,考察香青兰总黄酮对细胞活力、心肌细胞损伤标志物、氧化应激水平、活性氧自由基(reactive oxygen radical,ROS)含量的影响,并应用Western blot法检测血管内皮生长因子B(vascular endothelial growth factor B,VEGF-B)和磷酸腺苷激活蛋白激酶[adenosine 5'-monophosphate(AMP)-activated protein kinase,AMPK]通路相关蛋白表达。结果显示,香青兰总黄酮显著提高H/R损伤后心肌细胞活力,减少细胞上清中乳酸脱氢酶和肌酸激酶同工酶含量。显著降低丙二醛,增高超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶活性、降低细胞内ROS和一氧化氮含量。Western blot分析显示,香青兰总黄酮降低H/R损伤H9c2细胞的BCL-2关联X蛋白水平,上调B淋巴细胞瘤-2基因表达。香青兰总黄酮上调VEGF-B/AMPK通路相关蛋白VEGF-B、血管内皮生长因子受体1、神经纤毛蛋白1、过氧化物酶体增殖物活化受体γ共激活因子1α、磷酸化AMPK、磷酸化的哺乳动物雷帕霉素靶蛋白水平。上述研究结果表明,香青兰总黄酮能够明显减轻心肌细胞H/R损伤,其机制可能与上调VEGF-B/AMPK通路抑制氧化应激反应有关。

香青兰总黄酮对大鼠离体胸主动脉的舒张作用

香青兰(Dracocephalum MoldavicaL.)为传统维吾尔族药材,具有补益心脑之功效,现代研究表明其对冠心病、心绞痛等病具有治疗作用。该文作者采用大鼠离体胸主动脉灌流技术,观察了香青兰总黄酮的血管舒张作用,旨在为阐明其活性物质基础和作用机制提供依据。结果表明:1)10.0～40.0mg/L香青兰总黄酮对内皮完整和去内皮大鼠主动脉环的基础张力没有明显影响。2)10.0～40.0mg/L香青兰总黄酮对去甲肾上腺素(NE,10μmol/L)所致的内皮完整和去内皮血管均有浓度依赖性的舒张作用,对内皮完整血管的舒张作用更强;一氧化氮合酶抑制剂左旋硝基精氨酸甲酯L-NAME(0.1mmol/L)、鸟苷酸环化酶抑制剂亚甲蓝(10μmol/L)和环氧合酶抑制剂吲哚美辛(10μmol/L)预处理均可一定程度上抑制香青兰总黄酮的血管舒张作用,表明血管内皮合成的一氧化氮(NO)信号通路和前列环素(PGI2)信号通路参与了香青兰总黄酮的血管舒张作用。3)香青兰总黄酮预处理去内皮血管环可以抑制细胞外钙内流所致的血管收缩,但对细胞内钙释放所致的血管收缩没有影响,香青兰总黄酮对高钾(60mmol/L KCl)所致血管收缩没有明显影响,表明香青兰总黄酮可抑制血管平滑肌细胞的受体依赖性钙通道,阻止细胞外钙内流,从而可舒张血管。上述结果表明,香青兰总黄酮一方面可通过活化内皮依赖性的NO和PGI2通路舒张血管,另一方面通过抑制血管平滑肌细胞膜上受体依赖性钙通道产生血管舒张作用。香青兰总黄酮多靶点的扩血管作用可能是香青兰治疗心脏病的机制之一。

大孔吸附树脂分离纯化香青兰提取液工艺研究

目的考察大孔吸附树脂分离纯化香青兰提取液的最佳工艺条件。方法以总黄酮、田蓟苷、木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷、迷迭香酸为检测指标,利用静态吸附实验对7种大孔吸附树脂进行筛选,并通过与动态吸附实验相结合的方法,优选大孔吸附树脂分离纯化香青兰提取液的最佳工艺条件。结果 HPD600型大孔树脂宜于香青兰提取液的纯化,最佳纯化工艺参数为香青兰提取液质量浓度为80 mg/m L,柱径高比为1∶9,上样量为生药0.32 g/m L树脂,上样体积流量为1.5BV/h(BV为柱体积),吸附时间为12 h,水除杂用量4 BV,洗脱溶剂为70%乙醇,洗脱体积为6 BV,洗脱体积流量为1.5BV/h,纯化后总黄酮、田蓟苷、木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷和迷迭香酸的质量分数分别达到53%、5.5%、4.7%和2.5%以上。结论 HPD600型大孔树脂分离纯化香青兰提取液的方法可行。

基于斑马鱼的香青兰总黄酮整体发育急性毒性评价研究

目的利用模式生物斑马鱼研究香青兰总黄酮(TFDM)整体发育急性毒性。方法采用发育至48 h的斑马鱼暴露于5、10、20、40、42、44、46、48、50、100μg·mL^(−1)的TFDM,分别于暴露后24、48 h(24、48 hpe),计算死亡率、半数死亡浓度(LC_(50))值;测量每组斑马鱼幼鱼的体长,进行形态学观察并评分;显微镜下观察斑马鱼心脏形态并拍照,记录心率,使用Image-Pro Plus 5.1测量斑马鱼静脉窦-动脉球(SV-BA)距离;显微镜下观察各组斑马鱼是否有体侧水肿来判断TFDM对肾脏的影响并拍照;应用肝脏标记绿色荧光的转基因斑马鱼Tg(L-FABP∶EGFP),通过检测肝脏荧光强度和面积,观察TFDM对肝脏毒性的影响。结果TFDM的24 hpe LC_(50)为50μg·mL^(−1),48 hpe LC_(50)为48μg·mL^(−1),100μg·mL^(−1)TFDM组斑马鱼幼鱼全部死亡。与空白对照组比较,20μg·mL^(−1)以下的TFDM对斑马鱼的形态和心、肝、肾各脏器无影响;20μg·mL^(−1)浓度的TFDM处理斑马鱼48 h导致个别斑马鱼鱼鳔体积减小或缺失,对其他脏器无显著影响;40μg·mL^(−1)的TFDM导致斑马鱼出现轻微的心包水肿,处理48 h以后斑马鱼体长显著减小(P<0.01),形态评分显著下降(P<0.01),斑马鱼的肝脏形态出现轻微变化,但肝脏荧光强度和肝脏荧光面积无显著性变化,对肾脏无影响;暴露在50μg·mL^(−1)的TFDM中24 h,斑马鱼出现心包水肿,心率显著下降(P<0.05),肝脏荧光强度和面积显著减小(P<0.05),肾脏无明显变化。结论TFDM对斑马鱼的毒性较小,低浓度(≤10μg·mL^(−1))的TFDM对斑马鱼无毒性;中浓度(20μg·mL^(−1))下TFDM对斑马鱼的毒性微弱,仅导致部分斑马鱼鱼鳔体积减小或缺失,对其他各脏器无毒性;高浓度(≥40μg·mL^(−1)及以上)下有轻微的心脏毒性和肝脏毒性,在临床应用中有必要合理控制用量。