苦绳中木脂素类化学成分的分离与结构鉴定

为明确苦绳Dregea sinensis Hemsl中的主要化学成分,采用AB-8大孔吸附树脂、硅胶、Sephadex LH-20葡聚糖凝胶和反相制备液相等色谱方法从苦绳中首次分离得到5个木脂素类化合物.通过一维和二维核磁共振波谱、有机质谱等方法确定它们分别为4′,4″-二羟基-3,3′,3″,5,5′,5″-六甲氧基-7,9′:7′,9-二环氧-4,8″-氧-8,8′-倍半新木脂素-7″,9″-二醇(1),4′,4″-二羟基-3,3′,3″,5,5′-五甲氧基-7,9′:7′,9-二环氧-4,8″-氧-8,8′-倍半新木脂素-7″,9″-二醇(2),(+)-异落叶松树脂醇(3),赤式-愈创木酚基甘油基-β-O-4′-松柏醇(4),diasyringaresinol(5).

贯筋藤鲜茎中凝乳酶的提取工艺研究

以云南西北部地区的野生植物贯筋藤的鲜茎为原料,在单因素的试验基础上,采用L9(33)正交试验方法,以贯筋藤鲜茎中凝乳酶活力为评价指标,研究了不同的预处理方式、料液比、浸泡时间、浸泡温度对其提取工艺的影响,确定了贯筋藤鲜茎中凝乳酶的最佳提取条件和提取率。结果表明,贯筋藤鲜茎中凝乳酶的提取最佳条件为料液比1∶20(g∶m L),提取时间40 min,提取温度65℃,在此条件下得到的凝乳酶活力为260.984 SU/m L,提取率为31.35%。

苦绳的甾体成分

从苦绳（ＤｒｅｇｅａｓｉｎｅｎｓｉｓＨｅｍｓｌ．）中分离到两个新化合物∶苦绳甙元乙（ｄｒｅｓｉｇｅｎｉｎＢ，１）和苦绳甙Ｉ（ｄｒｅｓｉｏｓｉｄｅＩ，２）。经光谱和化学反应确定其结构为∶２０Ｏ（２甲基丁酰基）托曼托甙元［２０Ｏ（２ｍｅｔｈｙｌｂｕｔｙｒｙｌ）ｔｏｍｅｎｔｏｇｅｎｉｎ］和二氢肉珊瑚甙元３ＯβＤ吡喃黄夹糖基（１－４）βＤ吡喃夹竹桃糖基（１－４）βＤ吡喃磁麻糖甙［ｄｉｈｙｄｒｏｓａｒｃｏｓｔｉｎ３ＯβＤｔｈｅｖｅｔｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ（１－４）βＤｏｌｅａｎｄｒｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ（１－４）βＤｃｙｍａｒｏｐｙｒａｎｏｓｉｄｅ］。

野生贯筋藤花的营养特性分析

以野生贯筋藤花为材料,采用相关国家标准规定方法,研究其常规、微量营养成分以及重金属。结果表明,野生贯筋藤花中水分含量为90.67%,蛋白质含量为2.55%,脂肪含量为3.33%,灰分含量为2.07%;野生贯筋藤花富含维生素和矿物质,每100 g中有硫胺素0.134 mg、核黄素0.050 5 mg、VC 63.3 mg;钙、磷、钾、铁、锌、铜含量分别为768、594、5 240、13.7、2.98、1.64 mg/kg。此外,野生贯筋藤花还含有丰富的赖氨酸等必需氨基酸和黄酮类成分,且重金属污染小,绿色无污染。野生贯筋藤花营养丰富、食用价值高、开发潜力较大。

云南苦绳化学成分的研究

采用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱、半制备型HPLC等方法从云南苦绳中分离纯化了6种化学成分。通过红外光谱、一维核磁共振波谱、二维核磁共振波谱、质谱等方法确定其化学结构为二十烷酸(1)、α,γ-二棕榈酸甘油脂(2)、β-谷甾醇(3)、4ɑ-甲基-胆甾-7-烯-3-β-醇(4)、3,4'-二甲氧基-4,9,9'-三羟基-苯并呋喃木脂素-7'-烯(5)、松脂素(6)。化合物1～6均为首次从云南苦绳根茎中分离得到。

贯筋藤酶解山羊乳酪蛋白糖巨肽的工艺研究

以山羊乳和自主研发的贯筋藤蛋白酶为材料,在单因素实验的基础上,利用响应面优化贯筋藤蛋白酶酶解山羊乳制备CGMP的工艺条件。结果表明:山羊乳酪蛋白糖巨肽的最佳酶解时间32 min,酶解温度85℃,酶的添加量为底物体积7%;在此条件下山羊乳酶解液水解度为19.21%,CGMP质量浓度为2.991 mg/mL;研制的山羊乳CGMP的纯度为79.2%、蛋白质质量分数为73.327%,糖基化度为321.520μg/mg。

功能型水牛奶乳饼制作工艺的研究

本试验以水牛奶为原料,利用贯筋藤蛋白酶制作乳饼,以Tricine-SDS-PAGE对乳饼蛋白肽进行检测并研究乳饼蛋白肽的抗氧化性。结果表明,酶解辅助酸凝乳乳饼最佳工艺为:加酶量0.03g/kg、酶解时间60min、加酸量20mL/kg,成品率达(23.3±2.54)%。电泳检测酶解辅助酸凝乳(MS-RB)乳饼中有肽水解出来,且该蛋白肽的清除ABTS自由基、DPPH自由基活力和还原能力均高于酸凝乳饼(S-RB)。研制具有功能活性肽的乳饼对云南特色乳制品的开发利用具有一定意义。

贯筋藤水提物对小鼠的镇静催眠作用

【目的】探究贯筋藤水提物对小鼠镇静、催眠及抗惊厥作用的影响.【方法】首先利用冷凝回流小提法制备贯筋藤水提物;将ICR小鼠按体质量随机分为贯筋藤水提物(高、中、低)剂量组、艾司唑仑片组及空白组,采用光电计数法检测贯筋藤水提物对小鼠自发活动的影响,利用戊巴比妥钠阈下催眠剂量和延长戊巴比妥钠睡眠时间试验,观察并记录贯筋藤水提物对小鼠催眠的作用,同时利用一些致惊厥药物如戊四唑、印防己毒素及士的宁考察了贯筋藤水提物的抗惊厥作用.【结果】与空白组比较,贯筋藤水提物各剂量组、艾司唑仑片组能显著减少小鼠的自主活动次数(P<0.05);明显增加戊巴比妥钠阈下剂量小鼠睡眠个数(P<0.05);显著缩短阈剂量戊巴比妥钠诱导小鼠睡眠潜伏期,延长睡眠持续时间(P<0.05);表现出一定的抗惊厥作用,明显降低小鼠死亡率(P<0.05).【结论】贯筋藤水提物具有很好的镇静催眠及抗惊厥作用.

贯筋藤凝乳剂对小鼠急性毒性与遗传毒性研究

目的探究贯筋藤作为凝乳剂的安全性。方法以贯筋藤凝乳剂为受试物,采用限量法评价贯筋藤凝乳剂对小鼠的急性毒性,观察小鼠体重及解剖后心脏、脾脏、肝脏、肾脏是否发生病变;采用Ames实验评价其遗传毒性,设20、100、500、2500、12500μg/皿剂量组进行遗传毒性实验。结果急性毒性实验未出现小鼠死亡情况。研究发现小鼠的精神亢奋,有较强攻击欲望,根据小鼠的生理状况对小鼠进行脑组织中MAO-A和5-HT含量检测发现空白组和实验组差异极显著(P<0.01)。通过Ames试验检测贯筋藤凝乳剂的遗传毒性,根据结果发现在12500μg/皿的情况下出现抑制微生物生长的情况,而在2500μg/皿的剂量下统计每组菌落数差异不著性(P>0.05)。结论贯筋藤凝乳剂的LD50剂量大于10000 mg/kg,并根据Ames试验确定贯筋藤凝乳剂在最高2500μg/皿不具有致突变作用。

贯筋藤多糖的提取及其单糖组分分析

以云南西北部地区的野生植物贯筋藤鲜茎为原料,通过水提醇沉法研究提取工艺参数,并对其理化性质、提取率、含量、单糖组成进行研究。贯筋藤多糖呈灰白色粉末状,溶于水,不溶于有机溶剂,碘-碘化钾反应呈阴性,说明提取物为非淀粉性多糖。确定提取工艺参数为浸提温度75℃、浸提时间60min、料液比1∶25(g/mL),多糖得率7.04%,总糖含量为16.7%,气相色谱-质谱(gaschromatography-mass spectrometry,GC-MS)检测分析结果贯筋藤多糖由5种单糖组成,葡萄糖80.3%、半乳糖11.7%、甘露糖3.98%、阿拉伯糖3.69%、岩藻糖0.349%,其中葡萄糖和半乳糖是主要成分。

逐级盐析结合双水相法纯化贯筋藤凝乳酶

为了高效制备贯筋藤凝乳酶,利用逐级盐析结合双水相萃取对贯筋藤凝乳酶进行纯化,研究成相物质、聚乙二醇(PEG)/盐最佳纯化配比及酶用量对酶凝乳纯化的影响,应用SDS-PAGE电泳技术检测贯筋藤凝乳酶的纯度。结果表明:当硫酸铵饱和度区间为20%~40%,贯筋藤粗酶比活力较高,为167.846 MCA/mg;当PEG相对分子质量为6000且质量分数为20.57%、盐相为硫酸铵且质量分数为14.74%,酶用量为1.0 m L时,贯筋藤凝乳酶活力提高1.87倍。电泳图显示贯筋藤凝乳酶纯度较高,分子量约为25 kDa。利用双水相法分离纯化可获得高纯度的贯筋藤凝乳酶,可为贯筋藤凝乳酶后续规模化生产及应用提供参考价值。

贯筋藤提取物对小鼠免疫活性的影响

【目的】用醋酸泼尼松灌胃处理小鼠建立免疫抑制动物模型,以贯筋藤为材料,考察贯筋藤提取物对正常小鼠及免疫低下小鼠免疫功能的影响.【方法】采用乙醇辅助超声萃取的方法制备贯筋藤粗提物,将小鼠按体质量随机分为空白组、贯筋藤醇提物组、贯筋藤料渣醇提物组、模型组、贯筋藤醇提物+醋酸泼尼松组、贯筋藤料渣醇提物+醋酸泼尼松组6组.空白组灌胃给予同样体积的羧甲基纤维素钠溶液,模型组除给予一定体积的羧甲基纤维素钠溶液外还给予一定量的醋酸泼尼松,连续灌胃给药2周,通过小鼠碳粒廓清试验,测定小鼠体质量、廓清指数、吞噬指数、免疫器官(胸腺和脾脏)等指标.【结果】与空白组相比,贯筋藤醇提物处理均能明显提高正常小鼠脾脏指数、胸腺指数、巨噬细胞吞噬指数和廓清指数,且有统计学差异(P<0.05);与模型组相比,贯筋藤提取物对免疫抑制小鼠免疫器官(胸腺和脾脏)指数、巨噬细胞的廓清指数和吞噬指数均有显著增强作用,且有统计学差异(P<0.05或P<0.01);模型组与空白组比较,小鼠体质量显著下降且有统计学差异(P<0.01),廓清指数明显降低且有统计学差异(P<0.05),吞噬指数有所降低但无统计学差异(P>0.05).【结论】贯筋藤醇提物对小鼠免疫功能有一定的促进作用.

贯筋藤新型凝乳剂的研究

利用云南特色植物资源贯筋藤,开发一种新型凝乳剂。以贯筋藤茎秆为原材料,提取其有效凝乳成分,优化提取工艺,并对生产的贯筋藤凝乳剂进行感官和理化性质测定,探究其应用于羊奶乳饼标准化生产及其加工的乳饼质量。结果表明,贯筋藤凝乳剂生产的最佳工艺是：贯筋藤→敲断→20倍水浸泡（60℃,30 min）→过滤→离心（5 000 r/min,15 min）除杂→旋转蒸发浓缩至10%→凝乳剂。提取的凝乳剂呈红棕色,有轻微的焦糖味和涩味,其密度为1.012 g/mL,能溶于水,不溶于甘油,与乙醇反应生成沉淀,具有较高的耐热性,有效耐热温度可达85℃,pH为8.6-8.8。将其应用于乳饼标准化生产的最适凝乳温度是85℃,最适添加量为原料奶的1.5%,加工的乳饼感官总分为26.8,成品率为14.89%,两指标均显著高于传统酸凝乳饼。贯筋藤植物凝乳剂活性高,加工的乳饼质量优,是一种新型的凝乳剂,具有较高开发价值。