Quality Standard of Oxyria sinensis Hemsl

[Objectives]To establish the quality standard of Oxyria sinensis Hemsl.[Methods]The method in Chinese Pharmacopoeia(2020 edition)was used to determine the moisture,total ash,acid-insoluble ash and alcohol-soluble extracts of O.sinensis.The qualitative identification of medicinal materials was carried out by microscopic identification method and thin layer chromatography(TLC).The contents of hyperoside and isoquercitrin were determined by high performance liquid chromatography(HPLC).[Results]The total amount of moisture,total ash,acid-insoluble ash,alcohol-soluble extract,hyperoside and isoquercitrin of 12 batches of medicinal materials were 8.56%-11.53%,11.26%-15.48%,1.62%-2.56%,17.75%-26.09%,and 0.036%-0.42%,respectively.The microscopic features were obvious,and pores,fibers,calcium oxalate clusters,calcium oxalate square crystals,cork cells could be observed.Fluorescent spots of the same color were displayed at the positions corresponding to the hyperoside reference substance.[Conclusions]Establishing relatively complete quality standards for O.sinensis medicinal materials can provide a reference for the quality control of medicinal materials.

贯筋藤酶解核桃分离蛋白及其体内抗疲劳作用

为了研究核桃蛋白酶解物的抗疲劳作用,为其功能性产品的开发和利用提供科学依据。本文以超临界萃取的核桃粕为原料,提取核桃分离蛋白(WPI),使用贯筋藤蛋白酶酶解WPI,以水解度为指标,研究最佳酶解条件制备核桃肽,并研究不同分子量的核桃蛋白酶解物对小鼠运动性疲劳的缓解作用。将小鼠随机分为五组,每日经口灌胃受试样品,干预周期为一个月,最后进行负重及力竭游泳实验,测定血清尿素氮(BUN)、乳酸(LA)、肝糖原(HG)、肌糖原(MG)、谷胱甘肽过氧化氢酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)含量。SDS-PAGE凝胶电泳表明贯筋藤蛋白酶对WPI有明显的降解作用;单因素实验结合响应面试验表明,当料液比为9:100、pH9.6、酶添加质量9.4%、酶解时间180 min、酶解温度63℃时,水解度最高达30.1%;HE染色显示,使用贯筋藤蛋白酶提取的酶解物对小鼠无任何毒副作用;与其他组相比,分子量小于3000 Da的核桃蛋白酶解物干预小鼠的LA和BUN含量有所降低,HG和MG含量提高,延长负重游泳时间较为显著(P<0.05),核桃蛋白酶解物干预的各组小鼠血清中SOD酶、GSH-Px酶活性显著提高(P<0.05)。表明核桃蛋白酶解物可以缓解小鼠运动性疲劳,而小分子量的核桃蛋白酶解物效果更显著,这可能是通过调节体内抗氧化活性实现的。

苦绳中木脂素类化学成分的分离与结构鉴定

为明确苦绳Dregea sinensis Hemsl中的主要化学成分,采用AB-8大孔吸附树脂、硅胶、Sephadex LH-20葡聚糖凝胶和反相制备液相等色谱方法从苦绳中首次分离得到5个木脂素类化合物.通过一维和二维核磁共振波谱、有机质谱等方法确定它们分别为4′,4″-二羟基-3,3′,3″,5,5′,5″-六甲氧基-7,9′:7′,9-二环氧-4,8″-氧-8,8′-倍半新木脂素-7″,9″-二醇(1),4′,4″-二羟基-3,3′,3″,5,5′-五甲氧基-7,9′:7′,9-二环氧-4,8″-氧-8,8′-倍半新木脂素-7″,9″-二醇(2),(+)-异落叶松树脂醇(3),赤式-愈创木酚基甘油基-β-O-4′-松柏醇(4),diasyringaresinol(5).

贯筋藤鲜茎中凝乳酶的提取工艺研究

以云南西北部地区的野生植物贯筋藤的鲜茎为原料,在单因素的试验基础上,采用L9(33)正交试验方法,以贯筋藤鲜茎中凝乳酶活力为评价指标,研究了不同的预处理方式、料液比、浸泡时间、浸泡温度对其提取工艺的影响,确定了贯筋藤鲜茎中凝乳酶的最佳提取条件和提取率。结果表明,贯筋藤鲜茎中凝乳酶的提取最佳条件为料液比1∶20(g∶m L),提取时间40 min,提取温度65℃,在此条件下得到的凝乳酶活力为260.984 SU/m L,提取率为31.35%。

苦绳的甾体成分

从苦绳（ＤｒｅｇｅａｓｉｎｅｎｓｉｓＨｅｍｓｌ．）中分离到两个新化合物∶苦绳甙元乙（ｄｒｅｓｉｇｅｎｉｎＢ，１）和苦绳甙Ｉ（ｄｒｅｓｉｏｓｉｄｅＩ，２）。经光谱和化学反应确定其结构为∶２０Ｏ（２甲基丁酰基）托曼托甙元［２０Ｏ（２ｍｅｔｈｙｌｂｕｔｙｒｙｌ）ｔｏｍｅｎｔｏｇｅｎｉｎ］和二氢肉珊瑚甙元３ＯβＤ吡喃黄夹糖基（１－４）βＤ吡喃夹竹桃糖基（１－４）βＤ吡喃磁麻糖甙［ｄｉｈｙｄｒｏｓａｒｃｏｓｔｉｎ３ＯβＤｔｈｅｖｅｔｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ（１－４）βＤｏｌｅａｎｄｒｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ（１－４）βＤｃｙｍａｒｏｐｙｒａｎｏｓｉｄｅ］。

珍稀植物伯乐树一年生更新幼苗的死亡原因和保育策略

伯乐树(Bretscheneidera sinensis Hemsl.)是我国特有珍稀的孑遗植物和国家一级重点保护野生植物,在研究被子植物的系统发育、古地理和古气候等方面具有重要科学价值。研究发现伯乐树1年生更新幼苗的高死亡率是其天然更新困难的主要原因之一。采用分区试验监测了不同生境下1年生更新幼苗的生长动态;分析了幼苗死亡的共同原因,探讨了土壤酸碱度和不同光照环境对其生长的影响,并提出有效的保育策略以促进其种群更新。结果表明,伯乐树作为多年生木本植物,其根尖并无根毛分化,因此对环境的营养要求较高,并极易受到各种因素影响而导致死亡。1年生更新幼苗死亡的原因主要包括三方面,分别表现在土壤透气性较低时,幼苗易腐烂致死;在夏季炎热天气易受干旱胁迫致死;茎叶内含有黑芥子酶细胞,作为菜青虫发育的必要场所而易被啃噬致死等。幼苗较适于弱酸性土壤(5.0 6.5),并据中国土壤规律主要分布在长江以南地区。不同光环境下对夏季时幼苗的存活率和生长量存在显著区别,表现在全光环境下易造成幼苗的死亡,而极度弱光环境会导致生长迟缓,只有适度遮荫有利于幼苗的形态生长,其中自然遮荫下的生长量各项指标(苗高、地茎、叶片数和侧枝数等)和幼苗成活率达到最优。据此,在保育策略上建议采取适当的水肥管理和适度遮荫等措施,如在大田中遮网1层或在中等郁闭度的林下自然遮荫。

野生贯筋藤花的营养特性分析

以野生贯筋藤花为材料,采用相关国家标准规定方法,研究其常规、微量营养成分以及重金属。结果表明,野生贯筋藤花中水分含量为90.67%,蛋白质含量为2.55%,脂肪含量为3.33%,灰分含量为2.07%;野生贯筋藤花富含维生素和矿物质,每100 g中有硫胺素0.134 mg、核黄素0.050 5 mg、VC 63.3 mg;钙、磷、钾、铁、锌、铜含量分别为768、594、5 240、13.7、2.98、1.64 mg/kg。此外,野生贯筋藤花还含有丰富的赖氨酸等必需氨基酸和黄酮类成分,且重金属污染小,绿色无污染。野生贯筋藤花营养丰富、食用价值高、开发潜力较大。

不同树龄茶树套种滇龙胆对药材矿质元素含量的影响

采用电感耦合等离子体原子发射光谱法（ICP-AES）测定滇龙胆（Gentiana rigescens Franch.ex Hemsl.）与不同树龄（3年、4年、5年、9年、12年和15年）茶树（Camellia sinensis）套种后其根、茎、叶3个部位及生长土壤中7种矿质元素（B、Ca、Cu、Fe、Mn、Ni和Zn）的含量。结果显示,滇龙胆中矿质元素平均含量高低顺序为Ca（5 238±2 111）μg/g、Fe（622±238）μg/g、Mn（379±301）μg/g、Cu（75±9.1）μg/g、Zn（46±13）μg/g、B（17±4.9）μg/g、Ni（5.6±3.1）μg/g,与土壤矿质元素含量变化趋势基本一致。根部的B、Ca、Fe、Mn、Ni元素在树龄15年茶树-滇龙胆套种后含量最高,分别为18、3 797、1 050、254、11μg/g,Cu、Zn元素在树龄12年的茶树-滇龙胆套种中含量最高,分别为244、38μg/g。相同营养器官不同树龄的茶树-滇龙胆套种后矿质元素含量具有差异,以根部的Cu、Mn元素含量差异显著,变化范围分别为19~244μg/g和79~254μg/g,分别相差12.8倍和3.2倍;树龄15年、9年的茶树-滇龙胆套种后茎部的Cu含量分别为177、11μg/g,相差16.1倍;树龄3年、5年的茶树-滇龙胆套种后叶部的Cu含量分别为325、11μg/g,相差29.5倍。不同树龄的茶树-滇龙胆套种后根部与土壤矿质元素的相关性以及生物富集系数不同,树龄15年的茶树-滇龙胆套种后根部对Ca、Cu、Mn、Ni、Zn元素的富集能力较强,生物富集系数分别达21.0、3.3、2.2、1.8和4.7。说明茶树复合种植可改变土壤矿质元素的分布,自身生物学特性与复合种植的生态环境共同影响了滇龙胆对矿质元素吸收与运输的能力。

濒危植物伯乐树遗传多样性的初步研究

利用ISSR和RAPD分子标记技术对23份伯乐树材料进行遗传多样性研究。结果表明,筛选出的13条ISSR和10条RAPD引物分别得到79条和57条扩增带,其中多态性条带分别为50条和33条,多态性条带比率分别为63.29%和57.89%;ISSR和RAPD检测的有效等位基因数分别为1.4036和1.3601,基因多样性为0.2305和0.2115,Shannon信息指数为0.3405和0.3145;分析表明23份伯乐树之间具有比较丰富的遗传变异。对比ISSR和RAPD在PCR反应中的稳定性和检测变异的能力表明,对于试验条件的稳定性而言,ISSR优于RAPD,且总的来说ISSR能检测到比RAPD更多的遗传变异。另外,本研究推断人类活动的干扰和生境的片断化是导致伯乐树濒危现状的主要因素之一。

云南苦绳化学成分的研究

采用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱、半制备型HPLC等方法从云南苦绳中分离纯化了6种化学成分。通过红外光谱、一维核磁共振波谱、二维核磁共振波谱、质谱等方法确定其化学结构为二十烷酸(1)、α,γ-二棕榈酸甘油脂(2)、β-谷甾醇(3)、4ɑ-甲基-胆甾-7-烯-3-β-醇(4)、3,4'-二甲氧基-4,9,9'-三羟基-苯并呋喃木脂素-7'-烯(5)、松脂素(6)。化合物1～6均为首次从云南苦绳根茎中分离得到。

大果飞蛾藤的化学成分研究

目的研究大果飞蛾藤(Porana sinensis Hemsl．)的化学成分。方法采用体积分数为70％的乙醇热回流提取,依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取,通过反复硅胶柱色谱分离得到9个化合物,通过波谱解析和理化常数进行结构鉴定。结果分离并鉴定了9个化合物:东莨菪素(1),东莨菪苷(2),2,5-二甲氧基苯醌(3),伞形花内酯(4),咖啡酸乙酯(5),N-反式-阿魏酰酪胺(6),N-反式-香豆酰酪胺(7),β-谷甾醇(8)和β-胡萝卜苷(9)。结论大果飞蛾藤中主要含有苯丙素类成分,化合物3,4,6 和7首次从该属植物中分离得到。

广西产丁公藤原植物的调查及商品丁公藤主流品种的鉴定

目的为准确使用丁公藤这一传统中药提供鉴别依据。方法原植物调查,商品丁公藤药材的收集和鉴定,并结合研究文献和实物标本。结果广西所产的丁公藤原植物为《中国药典》规定的丁公藤属(ErycibeRoxb.)的光叶丁公藤E.schmidtii,而市场流通的商品丁公藤主要为飞蛾藤属(PoranaBurm.f.)的大果飞蛾藤P.sinen-sis和近无毛飞蛾藤P.sinensisvar.delavayi,光叶丁公藤已只限于当地山区草医应用。结论大果飞蛾藤和(或)近无毛飞蛾藤已成为商品丁公藤的主流品种及事实上的《中国药典》载丁公藤的代用品。建议加快对这一代用品的深入研究。

伯乐树cpDNA-PCR反应体系的优化与引物筛选

伯乐树为国家一级保护植物,在研究被子植物的系统发育和古地理、古气候等方面具有重要的科学价值。cpDNA-PCR反应是在分子水平上确定伯乐树系统分类的基础。建立了伯乐树cpDNA-PCR反应体系,对影响扩增反应的因素(Mg2+浓度、dNTP浓度、引物浓度以及模板DNA浓度)进行了优化,得到了伯乐树cpDNA-PCR扩增反应的最佳体系,并筛选出了适合伯乐树分子谱系地理研究的非编码区序列和引物。伯乐树cpDNA-PCR最佳反应体系为:30μL反应体系含有10×PCR buffer、2.9 mmol Mg2+、120 mmol dNTP、上下游引物各11μmol、DNA模版30 ng以及3个单位的Taq酶。适合于伯乐树分子谱系地理学研究的3对引物及其退火温度为PipetB1411F-PipetD738R(52℃)、psbA-trnHGUG(59℃)、trnL-trnF(56℃)。

施用有机肥对小花南芥和中华山蓼生长生理和Pb/Zn累积特征的影响

采用盆栽试验,模拟Pb和Zn(1000mg·kg-1)胁迫条件下,不同猪粪施用量对小花南芥和中华山蓼生长、生理和Pb、Zn累积特征的影响。结果表明:施用猪粪对土壤pH值的影响不明显,土壤CEC有增加的趋势。土壤中铁锰氧化物结合态没有显著的变化,小花南芥土壤水溶态和可交换态、有机物结合态显著增加。中华山蓼土壤中水溶态和可交换态没有显著的变化,而有机物结合态显著增加。Pb和Zn胁迫下,施用猪粪促进植物根的生长、生物量、叶绿素含量和相对电导率的增加(Pb胁迫下施用猪粪对中华山蓼生物量影响不显著除外)。施用猪粪导致小花南芥中Pb、Zn的含量、累积量、富集系数和转移系数增加,特别是猪粪14g·kg-1处理小花南芥中Pb、Zn的含量和累积量最高。施用猪粪导致中华山蓼中Pb含量和累积量增加,Zn含量和累积量下降,富集系数和转移系数则没有显著的变化。因此,施用猪粪能促进小花南芥和中华山蓼的生长和生理代谢,增加Pb、Zn在小花南芥、Pb在中华山蓼中的含量和累积量,适宜的施用量为猪粪14g·kg-1。

广东省南昆山伯乐树群落特征及其保护策略

在广东省南昆山自然保护区内调查了中国特有珍稀植物伯乐树种群的分布格局、龄级结构和伴生群落的物种组成。结果表明:该种群的分布范围狭窄且集中;龄级不完整,Ⅱ、Ⅲ级幼树少见,结构呈衰退型;伴生群落呈典型的亚热带植物区系的特点,其组成不稳定、优势种不显著。建议将伯乐树幼树作为就地保护的重点,适当去除周围的罗浮槭、羊角杜鹃和黄樟等速生树种,以创造有光照和水肥条件的生境;对于Ⅳ级以上成株,应注意拟赤杨和华润楠等空间生态位相近树种的数量和密度,适当疏剪枝条,以帮助成株占据较好的空间位;同时再积极引入异龄的伯乐树幼苗,促进种群恢复和发展。

牛奶乳饼加工工艺优化及其营养成分分析

以贯筋藤蛋白酶、新鲜荷斯坦牛奶等为原料,通过单因素筛选和响应面试验优化凝乳剂配方、凝乳工艺,研究优化工艺乳饼的产品质量。结果表明,新型凝乳剂的最佳配方为贯筋藤蛋白酶液(蛋白酶质量分数0.15%)添加量17.95%,柠檬酸添加量0.023 3%,氯化钙添加量0.009 85%;最佳凝乳温度为83.25℃。优化工艺乳饼感官评分为(85.7±1.32)分,高于传统酸水工艺(P<0.05);水分、粗蛋白、粗脂肪含量分别为(52.94±1.03)%、(20.09±0.57)%、(22.54±0.48)%,灰分、钙、磷含量较传统酸水工艺提高(P<0.05);游离氨基酸、游离脂肪酸总量分别为(77.64±5.80)、(1 953.76±53.53)mg/100 g;维生素含量丰富,脂溶性VA、VE含量提高(P<0.05)。2种工艺加工乳饼微观结构存在差异,传统酸水乳饼呈现片状或团状结构,优化工艺乳饼呈现三维网状结构。优化工艺乳饼色泽鲜亮、质地均匀,具有乳饼特有的滋气味和植物清香,较传统酸水工艺产品质量进一步提高,是一种风味独特的高营养产品。

滇产苦绳甾体成分的研究

从滇产苦绳(Dregea sinensis var.corrrugata)的根茎中分得两个新的C_(21)-甾体甙元,命名为苦绳甙元Ⅰ及Ⅱ(drevogenin Ⅰ,Ⅱ),经光谱分析和化学反应证明,甙元Ⅰ的结构为C/D顺式5α-H,3β,8β,14β,17β四羟基-12β-O-异戊酰基-20-O-异戊酰基娠烷(C/D cis 5α-H,3β,8β,14β,17βtetrahydroxy一12β-O-isovaleryl-20-O-isovaleryl-pregnane)。甙元Ⅱ的结构为C/D顺式5α-H,3β-14β,17β三羟基-12-β-O-乙酰基-20-O-苯甲酰基娠烷(C/Dcis 5α-H,3β,14β,17βtrihydroxy-12β-O-acetyl-20-0-benzoyl-pregnane)。

云南会泽废弃铅锌矿区和非矿区中华山蓼根际真菌镉耐性研究

采用常规、含Cd2+和含Pb2+的马丁氏培养基,对云南省会泽县废弃铅锌矿区和非矿区中华山蓼(Oxyria sinensis Hemsle)根际真菌进行分离,将分离的菌株接种到含不同浓度(0、0.05、0.5和5mmol·L-1)Cd2+的马铃薯葡萄糖培养液中,研究和比较了废弃铅锌矿区和非矿区中华山蓼根际真菌的镉耐性。结果表明,Cd2+显著抑制铅锌矿区和非矿区中华山蓼根际真菌的生长;Cd2+对常规、含Cd2+和含Pb2+的马丁氏培养基分离的铅锌矿区中华山蓼根际真菌的EC50平均值和最大值均明显大于非矿区,表明铅锌矿区中华山蓼根际真菌对Cd2+的耐性强于非矿区,采用含Cd2+培养基,从铅锌矿区中华山蓼根际分离出的真菌Cd2+耐性最强。

孑遗植物伯乐树的花粉和柱头特征研究

伯乐树是单种科植物和第三纪孑遗植物,零星分布于中国华南地区和越南北部,由于种群规模锐减被列为国家一级保护植物。本试验从传粉生物学角度研究其花粉的类型、活力变化、贮藏方法及柱头可授性,结果表明伯乐树雌蕊先熟,柱头在初开期迅速伸长,能有效避免自花传粉;柱头从小蕾期到盛开期间可授性逐渐增强,盛花期间的柱头表面具有粘液。花粉系非淀粉型,具典型虫媒特征;花粉粒初期在小蕾期活力极低,直至盛花期才具有较强的活力,体外萌发的适宜蔗糖浓度为20%。其花粉粒外壁较薄,对外界变化敏感,低温是保存其活力的必要条件,-20℃贮藏下的花粉活力可延长190 h。由于同一种群的花期较集中,对灾害天气的抗风险能力较弱,建议在盛花期搜集贮藏花粉以进行人工辅助授粉。

伯乐树播种育苗技术探讨

通过采集广东梅州当地自然生长的伯乐树种子实施播种育苗,总结了伯乐树种子采集时间、方法、育苗程序、苗期管理,苗期一年生长量情况,为珍稀濒危植物伯乐树的繁育与保护提供了科学参考。