丹参-当归治疗缺血性脑卒中作用机制网络药理学研究

目的探讨丹参-当归治疗缺血性脑卒中(CIS)的潜在作用机制。方法通过中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)、Swiss TargetPrediction数据库获取丹参和当归的活性成分及作用靶点,并通过检索PubMed、中国知网相关文献进行补充;通过GeneCards、人类孟德尔遗传数据库(OMIM)、DisGeNET数据库获取CIS的潜在靶点;将丹参-当归治疗CIS的共有靶点导入String 11.0平台,构建活性成分与疾病靶点蛋白的蛋白相互作用(PPI)网络,利用Cytoscape 3.8.2软件构建疾病-药物-活性成分-靶点可视化网络;将共有靶点导入DAVID数据库进行基因本体论(GO)功能富集和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析,并利用Cytoscape 3.8.2软件构建活性成分-核心靶点-通路网络;利用AutoDock软件对疾病-药物-活性成分-靶点网络中度值排名前6的核心靶点和活性成分进行分子对接验证。结果共检索到82种活性成分,其中丹参65个、当归17个,潜在作用靶点787个,疾病靶点671个,共有靶点76个。度值排名前6的活性成分为丹参醇B、丹参新醌D、木犀草素、阿魏酸、藁本内酯、丹参酮ⅡA,核心靶点为MAPK14,MAPK1,AKT1,PTGS2,EGFR,JAK2。共获得GO功能条目2545个,其中生物学过程2244个,细胞组成128个,分子功能173个,分别涉及对脂多糖的反应、膜筏、内肽酶活性等;KEGG信号通路152条,主要涉及PI3K-Akt信号通路、脂质和动脉粥样硬化、钙信号通路等。分子对接结果证明了6种活性成分与其相应核心靶点均有较好的结合活性。结论丹参-当归治疗CIS具有多成分-多靶点-多通路的调控特点,其作用机制可能与抗炎、抗氧化应激、抗神经细胞凋亡、调节自噬功能等有关。

7576张含丹参-当归药对的门诊中药饮片处方回顾性分析

目的:了解江苏省中西医结合医院南部院区/南京市溧水区中医院(以下简称“该院”)含丹参-当归药对的门诊中药饮片处方情况,探究该药对的临床配伍应用规律,为该药对的合理使用提供参考。方法:采用回顾性分析方法,统计2020—2022年该院使用丹参-当归药对的7576张门诊中药饮片处方,对患者的性别、年龄、处方药味数、金额、疗程、涉及科室及病症、使用剂量、常用的配伍比例及配伍饮片等相关内容进行统计分析。结果:7576张含丹参-当归药对的门诊中药饮片处方中,女性患者处方数约为男性患者处方数的3.21倍(5776张vs.1800张),>30~40岁患者居多。单张处方的中药饮片味数多集中在16~20味,开具的疗程均<30 d。丹参的使用剂量为《中华人民共和国药典》规定的10~15 g的处方有6490张,占85.67%;当归的使用剂量为《中华人民共和国药典》规定的6~12 g的处方有6608张,占87.22%。处方数排序居前3位的科室依次为国医堂、妇科及脑病科,治疗的病证以冲任失调、心脾两虚及气滞血瘀证为主。单张处方中丹参用量大于等于当归用量,丹参与当归的配伍比例以1∶1为多,高频配伍饮片为茯苓、川芎、炒白芍。结论:基于处方用药分析,该院含丹参-当归药对的门诊中药饮片处方基本合理,为丹参-当归药对的使用剂量范围及配伍规律研究提供了数据支持,有利于促进临床合理用药。

天麻-丹参药对治疗高血压作用机制的网络药理学分析及实验验证

目的基于网络药理学方法及动物实验验证探讨天麻-丹参药对治疗高血压的作用机制。方法(1)通过TCMSP、BATMAN及TCMIP数据库筛选天麻-丹参药对活性成分及其作用靶点;通过Drugbank、Genecard、TTD、Disgenet数据库检索获得高血压疾病相关靶点;对药对的活性成分作用靶点与高血压疾病相关靶点取交集(共同靶点),所得交集靶点即为天麻-丹参药对治疗高血压的潜在作用靶点。将天麻-丹参药对活性成分及其作用靶点导入Cytoscape 3.9.1软件,构建“中药-活性成分-靶点”网络,筛选关键活性成分;构建潜在作用靶点的蛋白互作(PPI)网络,筛选潜在核心靶点;使用Metascape平台对潜在作用靶点进行GO功能及KEGG通路富集分析。选择关键活性成分与潜在核心靶点进行分子对接验证。(2)将30只雄性自发性高血压大鼠(SHR)随机分为模型组、西药组(坎地沙坦酯,0.72 mg·kg^(-1))及天麻-丹参药对低、中、高剂量组(2.25、4.50、9.00 g·kg^(-1)),另选雄性WKY大鼠为空白组,每组6只,每日1次,连续灌胃给药8周。分别在给药前及药物干预2、4、6、8周后检测大鼠尾动脉收缩压;采用HE染色法观察胸主动脉组织病理变化;Western Blot法检测腹主动脉中GRP78、CHOP、Caspase-12蛋白表达水平。结果(1)共得到天麻-丹参药对活性成分83个,筛选出天麻-丹参药对治疗高血压的潜在作用靶点(交集靶点)158个;5个关键活性成分:对羟基苯甲酸、4-羟基苄胺、丹参酮Ⅰ、丹参酮、γ-谷甾醇;6个潜在核心靶点:IL6、TNF、CASP3、JUN、PTGS2、IL1B;GO功能富集分析得到1826条生物学过程条目、89条细胞组分条目、199条分子功能条目;KEGG通路富集分析获得186条通路,主要涉及神经活性配体-受体相互作用、钙信号通路、炎症应答(如TNF和MAPK信号通路)、血管保护(如HIF-1和cAMP信号通路)、氧化应激(如PI3K-Akt信号通路)等信号通路;丹参酮Ⅰ、丹参酮对6个潜在核心靶点均有较强的结合力,γ-谷甾醇对IL6、CASP3、JUN、PTGS2、IL1B具有较强的结合力。(2)与空白组比较,模型组大鼠的收缩压显著升高(P<0.01);胸主动脉内皮损伤明显,内皮细胞形态异常,可见肿胀、脱落细胞,组织内膜排序紊乱,内膜结构不完整,出现内膜增厚;腹主动脉中GRP78、CHOP、Caspase-12蛋白表达量显著升高(P<0.01)。与模型组比较,给药组大鼠的收缩压均显著下降(P<0.01);胸主动脉损伤减轻,内皮细胞形态、内膜结构及厚度等均得到不同程度改善;腹主动脉中GRP78、CHOP、Caspase-12蛋白表达量显著降低(P<0.01)。结论天麻-丹参药对可能是通过对羟基苯甲酸、丹参酮、γ-谷甾醇等关键活性成分,作用于IL6、TNF、CASP3、JUN、PTGS2、IL1B等核心靶点,调控TNF信号通路、MAPK信号通路、PI3K-Akt信号通路、PERK信号通路等关键信号通路,发挥改善血管内皮功能障碍、抑制内质网应激及降血压的作用。

基于网络药理学探讨“丹参-葛根”药对治疗缺血性脑卒中的机制

目的:探讨“丹参-葛根”药对治疗缺血性脑卒中的成分、靶点、活性、通路,为探讨中药药对的分子作用机制提供科学依据。方法:通过网络药理学平台,分析“丹参-葛根”药对的活性成分、作用靶点及通路,探讨中药药对的分子作用机制。结果:预测到关键成分16个,相关核心靶标28个,相关通路30个,药对发挥作用的成分有丹参环庚三烯酚酮、柳杉酚、弥罗松酚、齐墩果酸、刺五加苷A、琥珀酸、熊果酸、黄芩苷、花生油酸、鼠尾草酚、胡萝卜(甾醇)苷、葛根皂醇B甲酯、大豆素、染料木素、刺芒柄花素、槐花皂苷Ⅲ等;核心靶标主要集中在COX family,ATP family,PTGS2等,涉及的主要通路有趋化因子信号通路、Toll受体信号通路、氧化磷酸化、cGmp-pkg信号通路等,显示“丹参-葛根”治疗缺血性脑卒中可能与抗氧化、抗炎保护等有关。讨论:“丹参-葛根”所含成分可能通过抑制炎性反应、抗氧自由基等来治疗缺血性脑卒中。

几种中药的化学振荡指纹图谱

应用振荡技术 ,采用KBrO3 MnSO4 H2 SO4 丙酮振荡器 ,得到了解表药柴胡、葛根、连翘 ,祛风湿药木瓜、独活、五加皮和理血药鸡血藤、丹参、虎杖的振荡指纹图谱。结果表明 。

黄芪-丹参药对改善肝损伤化学成分及作用机制研究进展

肝损伤已经成为严重损害人类健康的疾病之一,药物使用不当、饮酒过量、环境污染等因素均会对肝细胞产生损害,其持续发展会导致肝纤维化、肝硬化、肝癌等严重不良后果。黄芪-丹参药对中含有黄芪总皂苷、黄芪总多糖、丹参总酚酸、丹参总多糖、丹参酮等多种化学成分,两种药单独应用或者联合应用可治疗化学性肝损伤、免疫性肝损伤、急性肝损伤及其并发症等多种疾病。该文通过查阅国内外有关黄芪-丹参药对在改善肝损伤方面发挥作用的化学成分和具体机制相关文献,梳理了黄芪-丹参多种化学成分通过多靶点、多指标发挥改善肝损伤作用,阐述其治疗肝损伤的作用机制,发现中药在调理人体健康、治疗慢性疾病的独特优势,以期为黄芪-丹参药对的开发研究提供参考。

高效液相色谱法测定三七-丹参药对不同配比水煎液中3种成分溶出率的变化

目的采用HPLC法研究三七-丹参药对不同配比水煎液中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1和人参皂苷Rb1 3种成分溶出率的变化规律。方法采用ZORBAX SB-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈-水,梯度洗脱;流速1 mL·min-1;检测波长203 nm;柱温35℃。结果三七-丹参药对配伍比例为2∶1时,3种成分的总溶出率最高,而配伍比例为1∶3时溶出率最低。药对配伍比例为1∶2时,丹参对三七皂苷R1、人参皂苷Rg1的溶出率影响最大,而3∶1时对溶出率影响最小。配伍比例为2∶1时,丹参对人参皂苷Rb1溶出率影响最大,而1∶3时对溶出率影响最小。结果显示,丹参、三七合煎可影响三七有效成分的溶出,可能两者合煎产生了新的化合物。结论三七-丹参不同的配伍比例会影响3种成分的溶出,以2∶1配比时最利于3种成分的溶出,2∶1是最佳配伍比例。

基于肠道菌群的丹参-红花药对抗心肌缺血机制探讨

目的探讨丹参-红花药对抗心肌缺血的机制。方法将60只SD雄性大鼠随机分为空白对照组(A组,等体积纯净水)、模型组(B组,等体积纯净水)、复方丹参滴丸组(C组,73 mg/kg)及丹参-红花低、中、高剂量组(D_(1)组、D_(2)组、D_(3)组,原药材4,8,16 g/kg),各10只,各组大鼠灌胃给予相应药物或纯净水,每天1次,连续7 d。于第6天、第7天灌胃给药1 h后,除A组外,其余各组均皮下注射盐酸异丙肾上腺素(85 mg/kg)以复制急性心肌缺血大鼠模型。观察大鼠心肌病理形态、心肌细胞凋亡情况,采用酶联免疫吸附法检测大鼠心肌酶水平;采用多指标综合指数法计算各组总效应值和偏最小二乘回归分析(PLS-DA)得分,筛选效果最佳的剂量组进行肠道菌群多样性分析。结果D_(3)组的综合指数最高(7.68),其次是D_(2)组(7.18),D_(3)组和D_(2)组PLS-DA得分差异较小,选用D_(2)组进行肠道菌群多样性分析;与B组比较,D_(2)组放线菌门、TM7菌门、厚壁菌门/拟杆菌门、乳杆菌属、棒状杆菌属、葡萄球菌属和SMB53菌属的相对丰度显著升高(P<0.05或P<0.01),拟杆菌门、软壁菌门、脱铁杆菌门、颤螺菌属和罗斯氏菌属的相对丰度显著降低(P<0.05或P<0.01)。结论丹参-红花药对可能通过调节肠道菌群而发挥抗心肌缺血的作用。

不同配伍配比对丹参-川芎药对中10个有效成分含量的影响

目的:建立丹参-川芎药对中丹参素钠、绿原酸、迷迭香酸、阿魏酸、丹酚酸B、洋川芎内酯Ⅰ、阿魏酸松柏酯、洋川芎内酯A、藁本内酯及丹参酮Ⅱ_(A)10个成分的含量测定方法,考察不同配伍比例及配伍方式对丹参-川芎药对中10个主要活性成分溶出量的影响。方法:色谱柱:Agilent ZORBAX SB-C;柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈(A)-0.5%甲酸水溶液(B),梯度洗脱;检测波长:265,280,320 nm;进样量:20μl;柱温:35℃;流速:1.0 ml·min^(-1)。测定丹参-川芎药对的单煎液、单煎合并液(1∶1)以及不同配比的合煎液(3∶1,2∶1,1∶1,1∶2,1∶3)中上述10个主要活性成分的含量。结果:合煎液中各成分提取率明显大于单煎液和单煎合并液中提取率,且在丹参-川芎药对配比为1∶1时多种成分含量最高。结论:丹参-川芎(1∶1)的配伍比例以及合煎的配伍方式有利于10个成分在水煎液中的溶出。

丹参-葛根药对成分、药理及临床应用的研究进展

丹参-葛根是《施今墨对药》中收载的常用药对,能够活血化瘀,祛瘀生新。丹参-葛根药对的主要有效成分包含丹参酮ⅡA、隐丹参酮、丹参酮Ⅰ、丹酚酸B、葛根素等,具有保护心肌、改善脑缺血再灌注损伤、抑制动脉粥样硬化、调节免疫、抗炎、抗氧化等药理作用,在临床应用广泛,多用于冠心病、糖尿病周围神经病变、急性脑梗死等的治疗,并且取得了良好的疗效,未来具有较大的研究和开发潜力。本综述结合国内外相关文献,从化学成分、药理作用、临床应用这3个方面对丹参-葛根药对的研究情况进行系统总结、分析,以期为此药对治病的科学内涵的阐释及进一步研究、应用提供依据。

浙派裘氏妇科治疗子宫内膜异位症的共性规律及常用药对分子机制的研究

[目的]通过对浙江省裘氏妇科流派治疗子宫内膜异位症(endometriosis,EMs)的中医思辨特征、共性规律的研究,总结裘氏妇科诊疗EMs的群体共性规律,并且基于网络药理学研究共性规律中的常用药对的分子机制,以期传承浙派裘氏妇科临证用药经验,提高临床疗效。[方法]临床随诊在省内具有一定影响力的4位裘氏妇科传承人张萍青、吴燕平、王幸儿、张婷,规范采集和录入临床诊疗信息,建立名中医医案数据库,采用聚类分析、关联规则分析等技术,对各名中医的用药特点、辨证规律等进行数据分析挖掘,总结其共性规律。通过中药系统药理学数据库与分析平台(Traditional Chinese Medicine Systems Pharmacology Database and Analysis Platform,TCMSP)挖掘常用药对的活性成分及作用靶标,通过GeneCards数据库挖掘EMs的相关靶点,筛选出常用药对治疗EMs的靶标,利用Cytoscape软件构建活性成分-EMs靶标网络。利用生物学信息注释数据库进行基因本体(gene ontology,GO)生物过程与京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)代谢通路富集分析,预测常用药对治疗EMs的分子机制。[结果]EMs临床常见证型包括瘀热互结证、肾虚血瘀证、气滞血瘀证。针对不同证型,4位医家辨证论治,同中存异,治疗瘀热互结证均以苦寒类的清热药及活血化瘀药为主,治疗肾虚血瘀证使用最多的药物均为补虚药及活血化瘀药,针对气滞血瘀证使用最多的药物均为理气药及活血化瘀药。其中丹参-赤芍药对是裘氏妇科治疗EMs的常用药对,通过TCMSP数据库共筛选出该药对的67种活性成分及78个治疗EMs的靶标,丹参-赤芍药对通过影响信号转导和转录活化因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)、蛋白激酶B1(protein kinase B1,PKB1)、转录因子激活蛋白-1(activator protein-1,AP-1/JUN)、丝裂原活化蛋白激酶1(mitogen activated protein kinase 1,MAPK1)、核转录因子-κB p65(nuclear factor-κB p65,NF-κB p65/RELA)等关键靶点,调控磷脂酰肌醇3-激酶-蛋白激酶B(phosphatidylinositol 3-kinase-protein kinases B,PI3K-PKB)信号通路、白细胞介素-17(interleukin-17,IL-17)信号通路、缺氧诱导因子-1(hypoxia inducible factor-1,HIF-1)信号通路等治疗EMs。[结论]4位裘氏妇科传承人治疗EMs,均以“肾虚”为本,“瘀”“热”互结为标,以苦寒、甘温之品补肾虚、化瘀血、清瘀热、行气滞,且善用药对。丹参-赤芍药对为裘氏妇科的常用药对,与裘笑梅先生清化逐瘀治疗EMs的学术思想相吻合。网络药理学揭示了该药对治疗EMs的分子机制,为进一步药效物质基础分析和分子机制研究提供了依据。

丹参-葛根药对中7种成分的含量测定及其配伍影响考察

目的:建立HPLC法同时测定丹参-葛根药对中7种成分(葛根素、大豆苷、大豆苷元、丹酚酸B、隐丹参酮、丹参酮Ⅰ和丹参酮Ⅱ_(A))的含量,考察药对不同配比情况下7种成分溶出率的变化。方法:采用Diamonsil(Ⅱ)C_(18)ODS(250 mm×4.6 mm, 5μm)色谱柱,以乙腈-0.1%磷酸溶液为流动相,梯度洗脱;检测波长为250 nm;流速:1.0 ml·min^(-1);柱温:30℃;进样量:10μl。结果:7种成分在一定质量范围内与峰面积的线性关系良好(r≥0.999 3),平均加样回收率为98.3%~99.2%,RSD≤1.0%(n=6)。按不同比例配伍(7∶3、2∶1、1∶1、4∶3、3∶4、1∶2)的药对,7种成分溶出率均低于单味药材提取液,但配伍比例为1∶1时7种成分溶出率高于其他配伍比例。结论:所建立的含量测定方法简便、准确、重复性好。丹参-葛根药对1∶1配伍最有利于有效成分溶出。

Mechanism of'Invigorating Qi and Promoting Blood Circulation'Drug Pair Ginseng-Danshen on Treatment of Ischemic Heart Disease Based on Network Pharmacology

Objective:Using network pharmacology to explore the mechanism of the'invigorating qi and promoting blood circulation'drug pair Ginseng-Danshen(Salvia miltiorrhiza)on treatment of ischemic heart disease(IHD).Methods:The chemical constituents of ginseng and Danshen drug pair were identified by searching the Traditional Chinese Medicine Systems Pharmacology Database and Analysis Platform(TCMSP),and the potential targets of the pair were identified.The pharmacodynamics of the pair was analyzed using network pharmacology.The targets of IHD were identified by database screening.Using protein-protein interaction network,the interaction targets of Ginseng-Danshen on IHD were constructed.A"constituent-target-disease"interaction network was constructed using Cytoscape software,Gene Ontology(GO)term enrichment analysis and biological pathway enrichment analysis were carried out,and the mechanism of improving myocardial ischemia by the Ginseng-Danshen drug pair was investigated.Results:Seventeen active constituents and 53 targets were identified from ginseng,53 active constituents and 61 targets were identified from Danshen,and 32 protein targets were shared by ginseng and Danshen.Twenty GO terms were analyzed,including cytokine receptor binding,cytokine activity,heme binding,and antioxidant activity.Sixty Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes(KEGG)signaling pathways were analyzed,including phosphatidylinositol 3-kinase-serine-threonine kinase(PI3 K-AKT)signaling pathway,p53 signaling pathway,interleukin 17 signaling pathway,tumor necrosis factor signaling pathway,and the advanced glycation end product(AGE)-the receptor for AGE(RAGE)signaling pathway in diabetic complications.Conclusion:The specific mechanism of Ginseng-Danshen drug pair in treating IHD may be associated with improving the changes of metabolites inbody,inhibiting the production of peroxides,removing the endogenous oxygen free radicals,regulating the expression of inflammatory factors,reducing myocardial cell apoptosis and promoting vascular regeneration.

丹参葛根药对治疗2型糖尿病的药效学研究

目的研究丹参葛根药对对2型糖尿病大鼠的降糖作用。方法采用高糖高脂饲料喂养结合小剂量链脲佐菌素(STZ)注射诱导2型糖尿病大鼠模型。造模成功后,将大鼠随机分为模型组(M组)、二甲双胍组(Y组)、丹参葛根低剂量组(L组)、丹参葛根高剂量组(H组),并设正常对照组(Z组)。灌胃(ig)给药4周,每周测量大鼠体质量和空腹血糖(FBG),观察高、低剂量丹参葛根药对对2型糖尿病大鼠药效学指标的影响作用,包括一般状态观察、空腹血糖水平及各组大鼠血脂指标、肝肾功能指标,并对大鼠肾脏以及胰腺组织HE染色后观察组织学变化。结果丹参葛根药对高、低剂量均能显著降低2型糖尿病大鼠的血糖水平以及血清碱性磷酸酶(ALP)、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白(LDL-D)、肌酐(Cr)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)的含量,与模型组相比差异有统计学意义(P<0.05),且大鼠肾脏和胰腺组织的病理状况明显改善。结论丹参葛根药对能够有效降低2型糖尿病大鼠的空腹血糖、血脂及肝肾功能指标,有效改善肾脏、胰脏病变。

一测多评法测定丹参-红花药对不同配伍比例中5种成分含量

目的:建立一测多评法(QAMS)同时测定丹参-红花药对不同配伍比例中羟基红花黄色素A、丹酚酸B、隐丹参酮、丹参酮Ⅰ、丹参酮Ⅱ的含量。方法:采用GL Sciences ODS C(250 mm×4.6 mm, 5μm)色谱柱,流动相为乙腈-0.2%磷酸水溶液,梯度洗脱,流速为1.0 ml·min^(-1),柱温为30℃。以丹参酮Ⅱ为内标物,计算羟基红花黄色素A、丹酚酸B、隐丹参酮、丹参酮Ⅰ的相对校正因子,并测定其含量。结果:羟基红花黄色素A、丹酚酸B、隐丹参酮、丹参酮Ⅰ、丹参酮Ⅱ在各自范围内线性关系良好(r>0.999 0),平均加样回收率为95.90%~103.45%,RSD为0.50%~2.08%(n=6)。一测多评法计算结果与外标法实测值无明显差异。结论:所建立的一测多评法可用于丹参-红花药对中5种成分含量的同时测定。

大黄-丹参药对对慢性肾衰竭大鼠结肠黏液屏障功能的影响

目的研究大黄-丹参药对对慢性肾衰竭(CRF)模型大鼠结肠黏液屏障功能的影响。方法70只雄性Wistar大鼠随机分为假手术组、模型组、尿毒清颗粒组(2.5 g·kg^(-1))和大黄-丹参药对高、低剂量组(生药6.0、3.0 g·kg^(-1)),每组14只。除假手术组外,其余各组大鼠采用5/6肾切除法制备CRF模型。连续ig给药12周后,腹主动脉取血测定血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、白细胞介素(IL)-1β、IL-6和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;剖取残存肾脏和结肠组织,HE和Masson染色观察大鼠肾组织形态学和纤维化改变;阿利新蓝-过碘酸-雪夫(AB-PAS)染色观察结肠黏液层厚度和杯状细胞数量变化;免疫组化观察大鼠结肠组织黏蛋白2(Muc2)阳性表达;采用实时荧光定量(qRT-PCR)法和蛋白免疫印记(Western blotting)法检测大鼠结肠组织Muc2的mRNA和蛋白表达情况。结果与假手术组相比,模型组大鼠血清Scr、BUN、IL-1β、IL-6和TNF-α水平明显升高(P<0.01);肾组织中肾小球硬化、肾小管扩张,肾间质可见炎性细胞浸润和纤维化,纤维化评分显著增加(P<0.01);结肠黏液层变薄,杯状细胞减少;结肠组织Muc2阳性表达降低,结肠组织Muc2的mRNA和蛋白表达水平均降低(P<0.01)。与模型组比较,大黄-丹参药对高、低剂量组能显著降低模型大鼠血清Scr、BUN、IL-1β、IL-6和TNF-α水平(P<0.01);肾组织形态明显改善,肾纤维化评分显著降低(P<0.01);结肠黏液层厚度增加,杯状细胞增多;结肠组织Muc2阳性表达升高,结肠组织Muc2的mRNA和蛋白表达水平明显升高(P<0.01)。结论大黄-丹参药对能够有效保护CRF大鼠的残存肾功能,延缓CRF进展;其机制可能与恢复CRF大鼠结肠黏液屏障功能,改善机体炎症状态有关。

“丹参-三七”药对作用机制的网络药理学探讨

目的：探讨＂丹参-三七＂药对的物质基础,预测其作用方向。方法：在中药系统药理学分析平台（TCMSP）检索＂丹参＂和＂三七＂所有的分子、靶点和相关疾病,使用cytoscape 3.2.1软件构建＂活性成分-作用靶点＂和＂作用靶点-相关疾病＂的网络模型,对药对物质基础和机制进行预测和研究。结果：通过口服利用度（oral bioavailability,OB）和类药性（drug-likeness,DL）筛选得到73个活性成分,145个靶点和325中相关疾病。自由度（degree）值较高的活性成分有槲皮素（87）,β-谷固醇（51）和1,2,5,6-四氢丹参酮（46）等,degree值较高的靶点有雌激素受体（63）,雄激素受体（59）,前列腺素G/H合成酶2（56）等,Degree值较高的疾病有癌（16）,肺转移性骨肉瘤（12）,心血管疾病（10）,乳腺癌（9）和胰腺癌（9）等。结论：该文对＂丹参-三七＂药对的物质基础和机制进行初步预测,为更深层次的研究和临床提供思考方向。

基于凋亡通路探讨枸杞子-丹参对rd10小鼠视网膜感光细胞的干预机制

目的:观察枸杞子-丹参对rd10小鼠视网膜感光细胞凋亡的影响与机制。方法:将40只rd10小鼠随机平均分为5组,空白组灌胃0.9%氯化钠溶液;对照组灌胃维生素A溶剂;枸杞组灌胃枸杞子中药配方颗粒溶液;丹参组灌胃丹参中药配方颗粒溶液;枸杞加丹参组(杞参组)灌胃枸杞子加丹参中药配方颗粒溶液;8只C57小鼠为野生组,灌胃0.9%氯化钠溶液。给药28d后,TUNEL法检测视网膜感光细胞凋亡情况,Western Blot法检测rd10小鼠视网膜Caspase-8、Caspase-12、Caspase-3、αB-crystallin蛋白表达情况。结果:杞参组小鼠视网膜组织中感光细胞凋亡量显著低于对照组、枸杞组、丹参组(P<0.05)。杞参组小鼠视网膜Caspase-8、Caspase-12、Caspase-3蛋白相对表达量显著低于对照组、枸杞组、丹参组(P<0.05),αB-crystallin蛋白相对表达量高于对照组、枸杞组、丹参组(P<0.05)。结论:枸杞子-丹参可通过抑制凋亡通路,降低rd10小鼠视网膜感光细胞的凋亡,维持视网膜正常功能结构,从而保护视功能。

基于PI3K/PDK1/Akt信号通路研究丹参-红花药对对寒凝血瘀型心肌缺血大鼠的保护作用及机制

目的 研究丹参-红花药对对异丙肾上腺素(isoprenaline hydrochloride,ISO)诱导的心肌缺血大鼠的保护作用及其机制。方法 大鼠随机分为对照组、模型组、复方丹参滴丸(73 mg/kg)组和丹参-红花低、中、高剂量(4、8、16 g/kg)组,给予相应药物干预7 d。于第6天开始ig药物1 h后,大鼠于0℃的冰浴中寒冷刺激4 min,sc ISO(85 mg/kg),连续2 d。采用2,3,5-氯化三苯基四氮唑(2,3,5-triphenyltetrazolium chloride,TTC)染色法测定各组大鼠心肌梗死面积;采用TUNEL法检测各组大鼠心肌细胞凋亡情况;采用苏木素-伊红(HE)染色法观察各组大鼠心肌组织病理变化;采用ELISA法检测各组大鼠血浆中肌酸激酶同工酶(creatine kinase,CK)、天冬氨酸转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)、CK-肌红蛋白(myoglobin,MB)活性及心肌肌钙蛋白-Ⅰ(cardiac troponin-Ⅰ,CTn-Ⅰ)、CTn-T、C反应蛋白(C-reaction protein,CRP)、MB、N末端利钠肽前体(N-terminal pro-brain natriuretic peptide,NT-proBNP)和B型脑利钠肽(B-brainnatriureticpeptides,BNP)水平;采用Westernblotting检测各组大鼠心肌组织中磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)、磷酸化PI3K(phosphorylated PI3K,p-PI3K)、磷酸肌醇依赖性蛋白激酶1(pyruvate dehydrogenase kinase isozyme 1,PDK1)、蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)、p-Akt、内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,e NOS)、p-eNOS、B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、核因子-κB p65(nuclear factor-κB p65,NF-κB p65)、p-NF-κB p65、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)、细胞色素C(cytochrome C,Cyt C)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(cystein-asparate protease-3,Caspase-3)和Caspase-9蛋白表达。结果 丹参-红花药对显著抑制ISO诱导的心肌缺血模型大鼠的心肌梗死面积(P<0.01);改善心肌组织病理变化;显著抑制心肌细胞的凋亡(P<0.05、0.01);显著降低血浆中心肌酶活性以及心肌蛋白水平(P<0.05、0.01);显著上调心肌组织中Bcl-2、PDK1、p-eNOS、p-PI3K和pAkt蛋白表达水平(P<0.05、0.01),降低Bax、Cyt C、剪切型Caspase-3(cleaved Caspase-3)、cleaved Caspase-9和p-NF-κB p65蛋白表达水平(P<0.05、0.01)。结论 丹参-红花药对能够通过调控PI3K/PDK1/Akt信号通路,从而发挥对ISO诱导的心肌缺血的保护作用。

基于网络药理学和分子对接研究丹参-赤芍药对治疗结直肠癌的作用机制

目的 基于网络药理学和分子对接技术探究丹参-赤芍药对治疗结直肠癌(colorectal cancer,CRC)的作用机制,并进一步运用体外细胞实验进行验证。方法 通过TCMSP数据库筛选出丹参-赤芍药对活性成分及其对应的靶点,通过检索GeneCards、OMIM、PharmGkb、TTD、DrugBank数据库检索获得CRC相关靶点,将丹参-赤芍活性成分靶点与CRC靶点取交集,采用Cytoscape 3.8.2软件构建“药物-成分-疾病-靶点”网络,运用STRING数据库构建蛋白质-蛋白质相互作用(protein-protein interaction,PPI)网络,运用R语言进行基因本体(gene ontology,GO)功能及京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)通路富集分析;选取关键靶点及核心活性成分,使用AutoDock软件进行分子对接。通过体外细胞实验验证网络药理学结果,分别采用MTT及划痕实验检测丹参-赤芍药对对HCT116细胞增殖及迁移能力的影响,采用qRT-PCR及Western blotting检测丹参-赤芍药对对网络药理学核心靶点表达的影响。结果 网络药理学预测显示,丹参-赤芍药对活性成分206个,共有352个对应的靶基因,CRC疾病相关靶点9143个,得到交集靶点283个。通过PPI网络筛选得到丹参-赤芍药对治疗CRC的关键治疗靶点3个:雌激素受体1(estrogen receptor 1,ESR1)、黏着连接蛋白β1(catenin β1,CTNNB1)和视网膜母细胞瘤基因1(retinoblastoma 1,RB1)。GO功能和KEGG通路分析显示,关键靶点涉及磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol-3-kinase,PI3K)-蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)信号通路、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)信号通路、p53信号通路、缺氧诱导因子-1(hypoxia-inducible factor-1,HIF-1)、细胞凋亡等。分子对接结果显示关键靶点与重要活性成分结合构象稳定,筛选出丹参-赤芍药对治疗CRC的核心活性成分主要是黄芩苷、芍药内酯苷、苯甲酰芍药苷等。MTT及划痕实验表明,丹参-赤芍药对对HCT116细胞增殖和迁移能力具有明显的抑制作用(P<0.05、0.01);丹参-赤芍药对显著抑制ESR1和CTNNB1 m RNA表达水平(P<0.05、0.01),显著上调RB1m RNA表达水平(P<0.05);显著下调ESR1、β-catenin、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(cystein-asparate protease-3,Caspase-3)和聚腺苷酸二磷酸核糖转移酶(poly-ADP-ribose polymerase,PARP)蛋白表达水平(P<0.05、0.01),显著上调RB1蛋白表达水平(P<0.05、0.01)。结论 丹参-赤芍药对可能作用于ESR1、CTNNB1和RB1等靶点,通过PI3K-Akt信号通路、TNF信号通路、p53信号通路、HIF-1信号通路等相关通路,从而抑制CRC细胞的增殖和迁移能力。