基于代谢组学探讨大黄-附子药对治疗阳虚便秘模型大鼠的配伍机制

目的结合代谢组学技术观察大黄-附子药对治疗阳虚便秘模型大鼠的效果,探讨其机制和关键代谢通路。方法将40只SD大鼠随机分为空白对照组、模型对照组、大黄单煎组、附子单煎组、大黄-附子合煎组,每组8只。除空白对照组外,其余各组建立阳虚便秘大鼠模型。空白对照组和模型对照组予煮沸后的超纯水灌胃,其余各组予相应药物煎液灌胃(药物浓度均为1 g生药/mL),各组灌胃剂量均为1 mL/200 g体质量,共计给药4 d。观察各组大鼠的体温、小肠推进率和血清胃动素(MTL)水平;苏木精-伊红染色观察大鼠结肠组织病理改变;基于液相色谱-质谱联用技术对大鼠代谢产物进行模式识别与分析,鉴定差异代谢物并分析其富集的代谢通路。结果与模型对照组比较,大黄-附子合煎组大鼠在给药4 d后,肛温[(38.17±0.60)℃比(36.07±0.25)℃,P<0.05]、额温[(35.77±0.06)℃比(35.27±0.15)℃,P<0.05]、小肠推进率[(73.58±2.47)%比(43.56±2.79)%,P<0.01]、血清MTL[(350.96±15.91)pg/mL比(280.97±25.13)pg/mL,P<0.05]明显升高,差异有统计学意义。各组大鼠结肠病理显示,大黄-附子合煎组与空白对照组的肠壁厚度最为接近。代谢组学分析结果:大黄-附子合煎组与模型对照组大鼠代谢谱明显分离,最终筛选出尿嘧啶、牛磺酸、磷酸胆碱、三甲胺、2-羟基丁酸、丙酸、乙醇、色氨酸、肌氨酸、异丁酸盐、甘氨酸11种内源性差异代谢物,主要富集于甘氨酸、丝氨酸和苏氨酸代谢通路,乙醛酸和二羧酸代谢通路,苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸的生物合成代谢通路。结论大黄-附子药对对阳虚便秘大鼠模型有确切疗效,可能通过上调血清MTL和影响甘氨酸、丝氨酸和苏氨酸代谢通路,乙醛酸和二羧酸代谢通路,苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸的生物合成代谢通路发挥治疗作用。

药对连翘与栀子配伍前后主要化学成分变化研究

目的建立同时检测连翘、栀子主要有效成分的HPLC方法,考察药对连翘与栀子配伍前后主要化学成分的变化情况。方法采用高效液相色谱法对连翘、栀子的单味药提取液及连翘、栀子药对提取液中连翘苷和栀子苷的含量进行了测定。结果各成分提取量在单药煎液与药对煎液中变化不明显,药对提取液中栀子苷和连翘苷含量与单味药提取液比较,栀子苷在96.89%到98.24%之间,连翘苷在96.34%到102.67%之间(n=3)。结论建立了同时检测连翘、栀子主要有效成分的HPLC方法,为评价煎液中连翘苷和栀子苷质量提供依据,为进一步体内试验提供数据参考。

在急性肝损伤状态下蒙药地格达-4味汤、栀子加肋柱花药对及栀子单味药中栀子苷血清含量的动态观察

目的:通过血清药物化学方法,追踪观察单味药、药对及全方中入血指标性化学成分栀子苷在急性肝损伤大鼠体内的动态变化,揭示栀子单味药在地格达-4味汤中的作用和地位,并初步探讨地格达-4味汤保肝效应的有效成分。方法:色谱条件:Dimaonsil C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:甲醇-0.1%磷酸水溶液(22:78);流速:1 m L·min-1;柱温:30℃;波长:238nm;选择急性肝损伤大鼠为研究对象,地格达-4味汤、栀子加肋柱花药对及栀子单味药为示例药物观察给药后不同时间点的血清中栀子苷含量变化。结果:栀子与肋柱花药对相应时间点血中栀子苷含量均高于单味栀子和全方;地格达-4味汤全方相应时间点血中栀子苷含量均低于单味栀子及药对。结论:经方法学考察,本试验方法简单、易行,实验结果可靠,可用于含栀子苷血清的测定;栀子与肋柱花组合产生了增强栀子苷含量的作用而栀子与肋柱花、瞿麦、胡黄连组合产生了消弱栀子苷含量的作用。

栀子-茵陈药对提取工艺研究

目的:筛选栀子-茵陈药对的最佳提取工艺。方法:采用正交试验和多指标综合加权评分法,以浸膏得率、总黄酮、环烯醚萜苷含量为评价指标,优选栀子-茵陈药对的最佳提取工艺。结果:最佳提取工艺为栀子-茵陈以质量比2∶1的比例均匀混合后加入10倍量水,浸泡2h,提取3次,每次1.5h。结论:该提取工艺稳定可靠,所得指标成分含量高,为栀子-茵陈药对的深入研究奠定了基础。

越鞠丸治疗抑郁症及其中医内涵研究进展

抑郁症是严重影响国人健康的重大疾病,研究显示,中成药越鞠丸具有独特的快速持久抗抑郁作用。最近,在越鞠丸快速改善帕金森症伴随抑郁上有若干新的发现。从配伍角度,研究揭示栀子-川芎组合为越鞠丸发挥抗抑郁作用的关键药对。关于越鞠丸常规剂量下的抗抑郁作用的基础与临床研究仍然受到关注。临床研究结果支持其单独或联合使用西药改善抑郁症及相关中医证候的药效。新的研究发现特定剂量条件下越鞠丸抗抑郁作用的有效性,对气郁体质的抑郁症患者改善作用也首次得到临床研究证据支持。进一步深入探讨越鞠丸治疗抑郁症的科学基础与临床特点将有助于提高其临床应用水平。

HPLC优选栀子-大黄药对的提取工艺研究

目的优选出最佳的栀子-大黄药对提取工艺。方法采用正交试验结合高效液相测定法,以栀子苷、大黄素、大黄酸含量为评价指标。结果醇提工艺优于水提工艺,优化工艺为10倍量60%乙醇,提取1.0h,提取2次。结论 HPLC法结合正交试验优选出药对的最佳提取工艺稳定可靠,可为栀子-大黄药对的进一步研究提供参考。

基于网络药理学联合转录组学研究大黄-天南星治疗缺血性脑卒中的分子生物学机制

目的:采用生物信息技术探寻大黄-天南星药对治疗缺血性脑卒中的分子生物学机制。方法:在中药系统药理学分析平台(TCMSP)检索大黄-天南星药对的全部有效成分及作用靶点,通过相关基因库检索缺血性脑卒中的相关疾病基因,在利用STRING数据库生成药对的PPI网络,最后对核心靶点进行GEO数据库一组数据集转录组学分析。结果:获得22个活性化合,筛选得到大黄-天南星药对的潜在靶点37个,关键靶点共8个,其中CASP9、CASP3和CASP8在PPI网络靶标体现出较高的中心度;GEO数据库中转录组学微阵列芯片数据集GSE97537中交集基因的达量进行了统计分析CASP9、CASP3和CASP8的表达量,差异具有统计学意义(P=0.001)。结论:大黄-天南星对药可能是通过抑制CASP3,CASP8和CASP9通路进而抑制细胞凋亡而发挥治疗缺血性脑卒中作用。

生熟大黄药对对顺铂所致肾损伤小鼠的影响

目的:探讨生熟大黄药对对顺铂所致肾损伤小鼠的影响。方法:将40只小鼠随机分为生熟大黄高、中、低剂量组及模型对照组、空白对照组,每组8只,生熟大黄高、中、低剂量组及模型对照组以顺铂4mg/kg单次腹腔注射制作肾损伤模型,空白对照组不作特殊处理,生熟大黄高、中、低剂量组分别在给顺铂的同时予浓度分别为60mg/mL、120mg/mL及240mg/mL的生熟大黄水煎液灌胃,模型对照组给予同体积生理盐水灌胃,给药2周后取小鼠肾脏及血清。通过肾脏HE染色切片观察其肾小管及其上皮细胞形态改变。ELISA检测血清肌酐、尿素氮及血清胱抑素C的含量。结果:生熟大黄各治疗组与模型对照组比较血清肌酐、尿素氮及血清胱抑素C均下降,差异具有统计学意义(P<0.05)。肾脏的HE染色的病理学观察:生熟大黄水煎液能减轻顺铂所致肾小管上皮细胞的空泡化、基底膜增厚及皱缩,同时改善肾间质的炎性浸润。结论:生熟大黄药对对小鼠顺铂所致肾损伤具有改善作用。

气相色谱-质谱联用技术结合直观推导式演进特征投影法分析药对栀子-连翘及其单味药的挥发油成分

目的检测湖南产栀子、连翘及药对栀子-连翘中的挥发油成分。方法利用GC-MS联用技术结合化学计量学分辨新方法——直观推导式演进特征投影法分析栀子、连翘及其药对的挥发性化学成分。结果从栀子、连翘及其药对的挥发油中分别鉴定了18种、28种和27种化合物,分别占总挥发油相对含量的87.77%、96.94%和96.84%,三者共有挥发性化学组分12种。结论药对栀子-连翘的挥发性化学成分基本来自其组成的2种单味药,但来自连翘的物质占多数,并且化合物的含量发生较大的变化。

HS-SPME-GC-MS分析黄芩-栀子药对中的挥发性成分

目的分析比较黄芩-栀子药对及其单味药的挥发性成分。方法采用顶空固相微萃取(HSSPME)与气相色谱-质谱(GC-MS)联用的方法,测定黄芩-栀子药对及其单味药的挥发性成分,通过单因素试验,确定最佳萃取条件,采用面积归一法测定各成分含量。结果最终测定最佳条件为称量黄芩-栀子药对混合16目粗粉0.8 g,萃取温度100℃,平衡时间10 min,解析时间3 min。在药对及单味药中共检测出98种成分,在黄芩-栀子药对中鉴定出45种成分,占挥发性成分总量的97.59%;在黄芩中鉴定出50种成分,占挥发性成分总量的91.86%;在栀子中鉴定出40种成分,占挥发性成分总量的95.36%。结论黄芩和栀子配伍后,药对中挥发性成分的种类和含量较单味药相比在一定限度上发生了变化,两药配伍可能具有协同增效或减毒的作用,为后续研究包含黄芩-栀子药对的复方提供参考。

黄芩-栀子药对治疗上焦病探析

药对是组成方剂的最小固定配伍形式,具有协同增效,减少毒性和不良反应的效果。黄芩-栀子是清热泻火解毒的代表性药对,临床应用广泛。黄芩与栀子单独运用均具有清热泻火的功效,二者配伍使用,具有泻火宁心、清热泻肺、解毒护脑的功效,能够多途径泻火散热,清彻上焦火热。本文系统梳理历代文献中关于黄芩与栀子配伍运用治疗上焦病的实例,综合分析黄芩-栀子药对配伍相须为用的理论基础,以期拓展黄芩-栀子药对的临证运用范围,为药对的配伍研究提供思路。