新时期水稻新品种保护和DUS测试现状与问题探讨

分析了1999—2022年我国水稻新品种保护申请量和授权量,阐述了我国新品种保护和DUS测试的发展现状,剖析了该行业存在的问题,进而提出了加强水稻新品种保护和优化DUS测试的对策建议,以期为新时期我国水稻新品种保护和DUS规范测试提供有益参考。

菊花新品种DUS测试指南测试性状的选择

随着我国菊花育种活跃度的不断提升,菊花品种的形态多样性不断丰富,迫切需要提高菊花DUS测试指南适用性。本研究连续2年对210份形态多样的菊花品种进行观测统计,以NY/T 2228—2012《植物新品种特异性、一致性和稳定性测试指南菊花》涉及的68个性状及本研究群体中发现的9个多样性性状或表达状态为观测依据,对现有菊花品种DUS测试指南做出优化,建议在2012年版测试指南中增加9个测试性状,剔除1个选测性状,并调整2个性状的名称表述,旨在提高菊花新品种鉴定的效率。

谷子DUS测试标准品种指纹图谱的构建与应用

谷子遗传资源多样性的研究对谷子基础研究与育种实践具有重要意义。选择高质量的SSR标记对DUS(Distinctness-特异性、Uniformity-一致性和Stability-稳定性)测试标准品种进行遗传多样性分析,不仅能够解析标准品种的遗传信息,也有助于对新育成品系进行分子水平的遗传多样性分析。研究利用高质量的20个SSR标记对30份不同地理来源的谷子DUS测试标准品种进行遗传多样性分析,并构建其指纹图谱;同时,利用该指纹图谱的SSR标记对22份春谷区和30份夏谷区区试品种进行遗传多样性分析,旨在为谷子品种资源利用与遗传改良奠定理论基础。结果表明,20对SSR标记在DUS测试品种平均每对引物检出的等位变异数为9.15个,20个位点的平均多态性信息含量(PIC)为0.77。利用上述SSR标记对来自春谷区与夏谷区的共计52份谷子区试品种进行分子鉴定,春谷区的聚类分析结果显示,22份春谷区区试品种分为3个主要的类群;而夏谷区的聚类分析结果显示,30份谷子夏谷区区试品种分为4个类群,但难以区分春谷、夏谷区区试品种。研究结果厘清了谷子DUS测试标准品种和区试品系间的遗传相似性。

基于DUS测试性状的冀北地区马铃薯品种遗传多样性分析

本研究通过马铃薯DUS测试性状,对适合在冀北地区种植的39个马铃薯品种展开遗传多样性分析以及性状的表型分析。结果表明,共检测到44个DUS测试性状的209个等位变异,平均每个性状检测到4.75个。多样性指数大于1的性状有34个,包括30个数量性状和4个假质量性状。多样性指数小于1的性状有10个,包括6个数量性状、2个假质量性状和2个质量性状。相关性分析表明,块茎表皮颜色,芽眼基部颜色与复叶主脉上表面花青甙显色强度高度相关。聚类分析将39个品种分成3组,每个组群具有各自独特的表型特征,各组特征性状与DUS测试指南指导分组性状一致。研究表明,DUS测试性状数量多,多样性也较高,可对马铃薯品种资源进行较为全面的客观评价。

二维扩散方程的Du Fort-Frankel差分格式

文章对水质污染分析模型的数值求解技术展开研究,深入细致地探索扩散方程的新型差分格式,应用Du Fort-Frankel差分格式对二维扩散方程进行离散,使用泰勒展开式,提出该类差分格式具有二阶精度,指出该类差分格式与原二维扩散方程是相容的,并验证了该类差分格式的收敛性和绝对稳定性。

公爵世家:KTM的DUKE故事

在摩托车诸多车型中,与骑手们关系最密切、流行度最广的,当属街车。在街车阵列,KTM的公爵(DUKE)家族以劲爆火辣的动力、强壮矫健的车架以及热烈大胆的造型风格,在众多竞争对手中独树一帜,受到很多骑手的喜爱。从1994年首款DUKE面世,至今公爵已满30周年,发展为强大的家族,排量涵盖了125mL~1300mL,发动机类型包括了单缸、并列双缸、V型双缸,成为街车阵列中极具竞争力的符号。

紫云英植物新品种特异性、一致性和稳定性(DUS)测试指南的研制

本指南遵循国际植物新品种保护联盟及我国对植物新品种特异性、一致性和稳定性测试指南制定标准的相关规定,以国内外164份紫云英种质资源为材料,进行多年多点种植试验,最终确定了33个测试性状,包括生长习性、开花期等30个必测性状和越冬性等3个选测性状作为紫云英DUS测试性状;同时规定了测试性状的分级代码和判定标准;筛选了23个品种作为测试指南的标准品种,最终形成了紫云英新品种的DUS测试指南。

金鱼草DUS测试数量性状分析与分组性状判定

【目的】验证国际植物新品种保护联盟(UPOV)发布的金鱼草品种特异性、一致性和稳定性(DUS)测试指南中数量性状在我国的适应性,为建立金鱼草种质数量性状的科学评价方法、研制适应我国生态气候的金鱼草DUS测试指南奠定基础。【方法】以UPOV发布的金鱼草新品种测试指南(TG/221/1)为标准,对40份金鱼草种质开展种植试验,对植株、叶、花等部位的13个主要数量性状进行数据采集,应用SPSS软件对采集数据进行变异程度、数量性状分级和主成分分析。【结果】11个指南性状与2个非指南性状种间变异系数为16.9%~65.9%,种内变异系数为5.3%~12.2%,符合指南性状的选择标准;通过最小显著差法得到13个性状的表达状态分级,可作为金鱼草种质鉴定和DUS指南研制的参考;通过主成分分析法得到4个重要因子并新增了2个指南分组性状。【结论】通过金鱼草种质数量性状数据分析,初步确定了各性状不同分级的数值范围,验证了UPOV指南在我国的适应性并对其中花序长度的分级数量进行优化,新增主茎长度和主茎一级分枝数量作为指南分组性状候选,为我国金鱼草指南的研制提供支持。

基于DUS测试性状的玉米自交系多样性分析和评价

运用基于玉米DUS测试性状对襄阳市农业科学院玉米团队14份玉米骨干自交系进行多样性分析和评价,以期为玉米自交系高效利用提供依据与参考。基于DUS测试表型性状多样性分析结果表明:14个自交系共37个性状的多样性一般,各性状多样性指数都未超过2.00,需进一步加强种质资源改良与创新,以丰富种质资源多样性。从这些自交系各性状的表现来看,株型选择上偏中秆紧凑型;但生育期方面偏中晚熟,早熟自交系基本没有,在进行夏播选育或早熟品种的选育方面使用这些自交系需慎重。基于DUS测试表型性状的自交系多样性分析结果表明:在遗传相似系数阈值为0.844时,14个自交系可以分为四大类,聚类结果与系谱来源一致,其中Ⅲ类中自12(XY90418)和IV类中自15(XY06/XY7298)选系单独聚为一类,与其他类群距离较远,可能与其他自交系存在杂种优势。另外,根据聚类结果,需要注意2个自交系杂交改良选育自交系时,后代分离方向不确定性。根据聚类结果,也说明轮回亲本不同,分别聚在不同类,所以在回交时轮回亲本和后代的选择上还是要紧跟选育目标——类优良轮回亲本,并进行目标性状的选择,以达到回交选育的目的。

花生DUS测试中主要数量性状变异和概率分布研究

为了对农业农村部植物新品种DUS测试(原阳)分中心测试花生性状表达状态的全面了解,根据191份花生测试品种的主要数量性状的调查数据进行变异系数分析及分级。结果表明,7个性状中百仁重变异系数最,大20.17%,变幅为43.09~115.26 g;出仁率变异系数最小,为6.37%,变幅为58.07%~80.50%;其他性状变异系数均大于10.00%。7个性状符合或近似符合正态分布,按照极值大于等于2倍LSD_(0.05)进行等距分级;该分级标准下各性状的多样性指数变化范围为1.079~1.843,均大于1.000,能较全面地反映花生各数量性状在不同分级代码的分布特点。

不同施氮量对小麦DUS测试性状表达的影响

基于探究不同肥力水平对小麦(Triticum aestivum L.)性状表达的影响,为小麦DUS测试工作提供参考,以4份普通小麦品种为试验材料,设置5个施氮量处理,对32个DUS测试性状的表达进行分析。结果表明,不同施氮水平对芒长的表达影响较大,表现出2个代码差异,而质量性状、假质量性状及其他目测型数量性状的表达无差异或相差1个代码;方差分析结果显示,施氮量对不同测量型性状在品种间的影响程度不同,各性状在不同肥力下均表现出显著差异(P<0.05),其中旗叶长、旗叶宽和穗长的表达受施氮量的影响较大,株高、小穗数、穗粒数等性状的表达受影响程度较小,不育小穗数的表达基本无影响。

中国和UPOV、日本葡萄品种DUS测试指南比较分析

葡萄新品种已成为推动产业发展的重要因素。开展植物特异性(Distinctness)、一致性(Uniformity)和稳定性(Stability)(简称DUS)测试是新品种保护的技术基础和品种能否授权的科学依据,DUS测试指南是指导测试单位开展DUS测试工作的技术标准,也是审批机关开展新品种实质性审查的技术规范。通过对中国、国际植物新品种保护联盟(International Union For The Protection Of New Varieties Of Plants,简称UPOV)和日本的葡萄品种DUS测试指南在繁殖材料、测试方法、DUS判定标准、测试性状等方面的差异进行了分析,为进一步完善我国葡萄品种DUS测试指南提供参考。比较分析结果表明,三者在提交繁殖材料的质量和形式要求、测试周期、测试地点、附加测试、带星号性状等方面基本一致,在提交繁殖材料的数量要求、DUS判定标准、测试性状、基本性状、分组性状、选测性状、技术问卷性状等方面的要求不尽相同。

基于DUS测试性状的黄淮海地区玉米自交系的遗传多样性及群体结构分析

基于玉米DUS测试指南中的39个基本性状,对100份黄淮海地区测试玉米自交系和9份代表自交系的遗传多样性和群体结构进行分析,为黄淮海地区玉米种质资源的高效利用、育种效率的提高提供理论依据。结果表明,109份玉米自交系各性状总体的平均等位变异数为5.026,变幅为1~9;平均有效等位变异数为2.919,变幅为1.000~6.053;平均Shannon指数为1.133,变幅为0.000~1.928。支持根显色强度(Chr.22)的遗传多样性最高,其次为花丝显色强度(Chr.9),第一叶顶端性状(Chr.1)遗传多样性最低,有48.72%的性状有效等位变异数大于2.919,61.54%的性状Shannon指数大于1.133。聚类分析结果表明,黄淮海地区玉米种质遗传背景相对较丰富,将109份材料聚成5类,除D类群包含9份自交系,数量最少外,其余4个类群包含自交系数量基本相同,D类群在其他各类群中遗传相似系数占比较少。各类群间的遗传距离介于0.200~0.665,其中,D类群与B类群的遗传距离最大(0.665),其次是D类群与C类群(0.586);C类群与B类群的遗传距离最小(0.200),其次是E类群与A类群(0.212)。

重楼皂苷Ⅰ对去势抵抗性前列腺癌DU145细胞增殖及凋亡的影响

目的 探讨重楼皂苷Ⅰ(PPⅠ)对去势抵抗性前列腺癌(CRPC)细胞株DU145细胞增殖的影响及其诱导细胞凋亡的分子机制。方法采用MTT法检测PPⅠ对CRPC细胞株DU145细胞增殖能力的影响,使用流式细胞仪检测DU145细胞的凋亡率,同时应用Western blot检测PPⅠ对DU145细胞p-ERK1/2、ERK1/2、特异性蛋白1(SP1)及Zeste基因增强子同源物2(EZH2)蛋白表达的影响;通过加入ERK1/2抑制剂(PD98059)检测PPⅠ对SP1表达的影响,通过转染SP1、EZH2过表达质粒分别检测PPⅠ对SP1、EZH2表达的影响;采用双荧光素酶报告基因检测EZH2启动子活性,并探讨ERK1/2、SP1和EZH2之间的关系。设未加药组为空白组。结果MTT法检测结果显示,PPⅠ能抑制DU145细胞体外生长,与空白组相比,细胞存活率从给药浓度0.4μmol·L^(-1)开始明显下降,且呈时间和剂量依赖性,差异有统计学意义(P<0.01)。流式细胞仪检测结果显示,PPⅠ能诱导DU145细胞早期凋亡,与空白组相比,细胞早期凋亡率从给药浓度0.4μmol·L^(-1)开始明显增加,差异有统计学意义(P<0.05)。Western blot结果显示,PPⅠ以时间依赖性方式促进p-ERK1/2和ERK1/2蛋白的激活和表达(P<0.05),以剂量依赖性方式抑制SP1、EZH2蛋白的表达(P<0.05);抑制ERK1/2磷酸化能逆转PPⅠ对SP1表达的下调作用,SP1过表达可逆转PPⅠ对EZH2蛋白表达的下调作用,然而EZH2过表达不能逆转PPⅠ对SP1表达的下调作用,与PPⅠ组相比,ERK1/2抑制剂+PPⅠ组SP1表达上调(P<0.05),PPⅠ+SP1过表达质粒组EZH2蛋白表达上调(P<0.05),而PPⅠ+EZH2过表达质粒组SP1表达差异无统计学意义(P>0.05)。双荧光素酶报告基因检测结果显示,SP1过表达可逆转PPⅠ对EZH2启动子活性的下调,与PPⅠ组相比,PPⅠ+SP1过表达质粒组EZH2启动子活性上调(P<0.05)。结论PPⅠ可通过介导ERK1/2通路抑制SP1和EZH2蛋白表达,从而诱导CRPC DU145细胞早期凋亡,进而抑制细胞生长。

蚕豆DUS标准品种在重庆的性状表达差异性分析

为构建重庆蚕豆DUS测试标准品种群体,完善蚕豆DUS测试技术,为西南地区蚕豆品种保护和登记提供完善和准确的理论支撑,2019—2020年对蚕豆DUS测试指南中的17份标准品种进行田间测试,采用符合系数(COC)分析标准品种在重庆地区的性状表现与指南描述的差异性,评价蚕豆标准品种在重庆地区表达的准确性及稳定性。结果表明,17个标准品种有6个品种符合系数大于0.990 0,占35.3%,64.7%的品种符合系数小于0.990 0;36个测试性状中有22个性状的符合系数大于0.990 0,占61.1%,其中质量性状符合系数最高(0.999 0),其次为假质量性状(0.996 0),数量性状符合系数最低(0.976 0);对符合系数小于或等于平均值的8个性状的标准品种进一步优化,重新筛选出了对应的标准品种,但仍有部分性状没有筛选到合适的标准品种,建议加强已知品种和种质资源收集,筛选出适宜重庆测试区的标准品种。

野牛草属植物新品种DUS测试指南研制

野牛草(Buchloe dactyloides)是原产于北美草原的多年生暖季型牧草,自引种至我国后一直广泛栽植于我国西北及华北地区,其种属资源丰富,育种潜力巨大,但国际植物新品种保护联盟(International Union for the Protection of New Varieties of Plants,UPOV)及我国均无野牛草特异性、一致性和稳定性(Distinctness,uniformity,stability,DUS)测试指南。为了合理利用与保护野牛草种质资源,本研究依据UPOV以及我国相关文件规定标准,经过连续多年对8个进口商业品种、7个自主培育新品种、41个多年稳定品系共56份野牛草种质资源性状进行观测,系统性研究了野牛草表型性状的分布特点,确定了28个测试性状,包括雄花长度、种包千粒重等24个必测性状和枯黄期等4个辅助测试性状的判定标准,并在此基础上研制适应我国野牛草的DUS测试指南内容。本指南为我国野牛草性状测试、新品种的授权提供了测试技术的支撑,对今后野牛草新品种选育具有重大意义。

基于DUS测试性状的花生品种遗传多样性分析

利用NY/T 2237-2012中31个测试性状对原阳分中心参与测试的119份花生品种(待测品种及其对应近似品种)进行遗传多样性分析;采用PopGen 32软件对119参试品种进行遗传多样性分析。结果表明,22个性状共检测到97个等位变异,平均每个测试性状检测到4.41个,平均有效等位变异数为2.41,Shannon’s多样性指数(H’)为0.91。相关性分析表明,主茎高度与侧枝长度为极显著正相关,相关系数为0.79。荚果长度和百仁重为显著正相关,相关系数为0.63,与出仁率呈极显著负相关,相关系数为-0.65。针对该地区测试工作建议由侧枝长代替主茎高度,百仁重代替荚果长。UPGMA聚类分析显示,在阈值为0.65时可以将119份品种分为3个族群,但是通过主成分分析可以更直观地对119份材料的遗传相似性的判断。综合分析说明,参与测试的花生品种具有较丰富的形态多样性。

基于DUS测试的不同品种黄瓜性状研究

为优化黄瓜DUS测试中符合系数、变异系数、F检验和相关性分析方法的应用,明确试验黄瓜品种的特异性和稳定性,观察测量3个黄瓜品种植株、叶片和果实性状,对黄瓜群体目测性状和个体测量性状表达差异性进行分析研究,采用不同的方法对测试性状进行综合评价。结果表明,21个群体目测性状中有14个性状的符合系数为1,生长势、果实棱、刺毛密度和瘤数量存在不同程度的差异。雌花节率、果实瓜把长度的变异系数幅度分别为0.18~0.27、0.12~0.19,品种之间存在较大差异。F检验和相关性分析得出,第一雌花节位、雌花节率、主蔓节间长度、果实纵径、果实纵径/横径、果实棱呈现出显著性差异。利用F检验得出品种间的产量呈现显著性差异。综合分析可以判定,品种1(新改良烟台地黄瓜)和品种2(中农烟地1号)具有特异性和稳定性。

中性粒细胞胞外诱捕网通过上调DU145人前列腺癌细胞IL-8表达促进前列腺癌细胞增殖、 侵袭及迁移

目的研究中性粒细胞胞外诱捕网(NET)对人前列腺癌细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响及其相关机制。方法收集28例前列腺癌患者肿瘤组织,免疫组织化学染色法检测肿瘤及癌旁组织中白细胞介素8(IL-8)、淋巴细胞抗原6G(LY6G)、瓜氨酸化组蛋白H3(H3CIT)的表达情况。提取患者外周血中性粒细胞,体外用佛波酯(PMA)刺激形成NET。将纯化后的NET与DU145人前列腺癌细胞共孵育,通过核糖核酸测序(RNA-seq)检测NET刺激后DU145细胞上调的基因,并采用实时定量PCR和Western blot法进行验证。使用注释、可视化和整合发掘数据库(DAVID)对上调基因进行基因与基因组百科全书(KEGG)和基因本体(GO)分析。采用CCK-8法检测DU145细胞增殖能力,Transwell^(TM)实验检测细胞侵袭能力,划痕实验检测细胞迁移能力。敲低DU145细胞IL-8表达后,再次检测DU145细胞增殖、侵袭和迁移能力的改变情况。结果肿瘤组织IL-8、LY6G、H3CIT表达水平明显高于癌旁组织。NET刺激后,DU145细胞IL-8等638个基因表达上调,这些基因与磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)信号通路以及细胞增殖、侵袭功能相关。NET能促进DU145细胞的增殖、侵袭和迁移。沉默IL-8后,NET对DU145细胞的促增殖、侵袭和迁移能力下降。结论NET通过上调DU145细胞IL-8的表达,促进肿瘤细胞的增殖、侵袭和迁移。

积雪草酸对前列腺癌细胞DU145的作用研究

目的研究积雪草酸(AA)对前列腺癌DU145细胞增殖和凋亡的影响。方法以不同浓度AA进行药物干预DU145细胞,MTT法检测细胞活力变化;显微镜观察细胞形态改变;Hoechst染色及Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡;Western Blot法检测细胞线粒体凋亡相关蛋白表达变化;试剂盒检测细胞Caspase 3活性变化。结果与空白组比较,AA能够有效抑制前列腺癌DU145细胞的增殖,显著诱导细胞凋亡(P<0.01),显著提升细胞Bax、Cleaved Caspase 3、Cyt-C蛋白表达和Bax/Bcl-2比值(P<0.05,P<0.01),显著降低Bcl-2蛋白表达(P<0.05,P<0.01),显著促进细胞Caspase 3活化(P<0.05,P<0.01)。与AA组比较,Caspase 3抑制剂Z-VAD-FMK能够显著抑制AA诱导的细胞Caspase 3活化(P<0.05),显著逆转AA诱导的细胞增殖抑制(P<0.05,P<0.01)。结论AA能够通过抑制DU145细胞增殖及诱导线粒体途径凋亡发挥抗前列腺癌作用。