蛇莓提取物中咖啡酸、紫云英苷和翻白叶苷A的含量测定

建立蛇莓提取物中咖啡酸、紫云英苷和翻白叶苷A的含量测定方法。采用HPLC法,Hypersil ODS-C18(250×4.6 mm,5μm),乙腈(A)-0.15%三氟乙酸水溶液(B)进行梯度洗脱;检测波长:330 nm,流速:1 mL·min^(-1);柱温35℃。咖啡酸、紫云英苷和翻白叶苷A分别在5.91~236.4μg·mL^(-1)、4.18~167.2μg·mL^(-1)、3.548~141.9μg·mL^(-1)范围内线性关系良好,平均回收率分别为98.19%、98.99%和99.00%。该方法准确、方便快捷,可操作性高,可用于蛇莓提取物的质量控制。

高效液相色谱法同时测定蛇莓提取物中4种成分的含量

目的建立同时测定蛇莓提取物中香草酸、异槲皮苷、染料木素及山柰酚的高效液相色谱法(HPLC),为蛇莓相关产品的深入开发提供实验依据。方法采用HPLC法,Kromasiol-100 C 18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),乙腈(A)-0.05%磷酸(B)进行梯度洗脱:0~10 min,10%42%A;10~16 min,42%60%A;16~30 min,60%80%A;30~35 min,80%90%A,检测波长:350 nm,流速:1 mL·min^-1;柱温30℃。结果香草酸、异槲皮苷、染料木素及山柰酚分别在3.095~123.8,7.06~282.4,3.83~153.2和5.0925~203.7μg·mL^-1范围内线性关系良好(r=0.9999,0.9998,0.9997,0.9999),精密度实验RSD分别为1.42%,1.05%,1.26%,1.13%,重复性实验RSD分别为1.37%,1.21%,1.44%,1.16%,稳定性实验RSD分别为1.29%,1.43%,1.18%及1.35%,上述结果均良好;平均回收率分别为99.09%,98.95%,98.65%和99.33%,RSD分别为1.25%,1.42%,1.44%,1.38%(n=6)。蛇莓提取物中香草酸、异槲皮苷、染料木素及山柰酚含量分别为5.904,17.535,9.011,10.788 mg•g-1。结论该方法简便快捷、准确可靠,重复性高,可为蛇莓提取物的质量评价与控制提供实验依据。

蛇莓的抗氧化活性研究

目的研究蛇莓醇提取物的体外抗氧化活性。方法采用紫外分光光度法测定不同提取物中总酚和总黄酮的含量。采用清除DPPH自由基、ABTS自由基、铁氰化钾还原法、螯合Fe^(2+)评价法比较不同浓度醇提取物的抗氧化活性,并考察总酚、总黄酮含量与抗氧化活性的关系。结果蛇莓醇提取物具有较好的抗氧化活性,本研究提取蛇莓总酚、总黄酮含量高达17.8%和35.6%。结论蛇莓具有较强的抗氧化活性,作为天然抗肿瘤资源,临床应用广泛、疗效较好。相关系数表明,总酚含量与抗氧化能力有较好的相关性,提示乙醇可以作为蛇莓抗氧化活性物质提取的优选溶剂。

蛇莓水提物的体外抗菌活性及抗菌机制

为研究蛇莓水提物的体外抗菌活性及其作用机制,采用牛津杯法和肉汤稀释法检测了蛇莓水提物对不同菌株的体外抗菌活性;利用光学显微镜和透射电镜观察了亚抑菌浓度(0.5MIC)作用下,蛇莓水提物对金黄色葡萄球菌ATCC25923和大肠杆菌ATCC25922形态和超微结构的影响。结果显示,蛇莓水提物(400mg/mL)对金黄色葡萄球菌等5种标准菌株和不同临床菌株均有显著的抗菌活性;蛇莓水提物对金黄色葡萄球菌ATCC25923,大肠杆菌ATCC25922,沙门菌C79-13,藤黄微球菌CMCC28001和铜绿假单胞菌ATCC9027的最低抑菌浓度(MIC)分别是1.56,25,6.25,3.13和25mg/mL,最低杀菌浓度值是MIC的2倍;在亚抑菌浓度(0.5MIC)作用12h后,金黄色葡萄球菌集聚成团,大肠杆菌呈长菌丝;药物作用后菌体超微结构发生了明显改变,金黄色葡萄球菌细胞质壁严重分离,胞质空腔化。大肠杆菌表面粗糙,质壁分离和胞质空腔化不及金黄色葡萄球菌严重。结果提示,蛇莓水提物对不同菌种有较强的抑菌活性,主要作用于细菌细胞壁或细胞膜发挥抗菌活性。

不同方式提取的蛇莓抽提物体外抑菌与抗氧化活性的评价

为比较不同方式提取的蛇莓抽提物的活性差异,采用牛津杯法和微量肉汤二倍稀释法检测蛇莓抽提物的抑菌活性,以FRAP法、ABTS法、DPPH法、超氧阴离子自由基(O_(2)^(-)·)清除法评估抗氧化活性,通过测定NO和MDA含量、SOD活性、i NOSm RNA表达变化评价蛇莓多糖抗脂质过氧化作用。结果显示,蛇莓多糖无抑菌活性,蛇莓醇提物的抑菌效果为7/11,蛇莓水提物的抑菌效果为5/11,蛇莓醇提物和蛇莓水提物均对化脓隐秘杆菌的生长呈高度抑制,最小抑菌浓度为0.98 mg/m L;蛇莓多糖的ABTS和DPPH自由基清除能力与Vc间无显著差异性(P>0.05),高于蛇莓醇提物和水提物差异极显著(P<0.01);蛇莓多糖能抑制LPS所诱导的RAW264.7细胞中产生NO和MDA、i NOS m RNA的表达(P<0.01),显著增强总SOD活力(P<0.01)。结果提示,蛇莓多糖虽然没有其醇提物和水提物的显著抑菌活性,但其抗氧化活性优于蛇莓醇提物和水提物,且能降低LPS诱导的巨噬细胞脂质过氧化反应损伤,蛇莓提取物有防治畜禽细菌感染性疾病前景。

蛇莓提取物调控锌指蛋白217的表达对膀胱癌细胞增殖、凋亡的影响

目的探讨蛇莓提取物对膀胱癌细胞增殖、凋亡的影响,及其作用。方法实验分为对照组(正常培养的T24细胞,未做任何处理)、实验1,2,3,4组(用质量浓度分别为0.05,0.10,0.20和0.30 mg·m L^(-1)的蛇莓提取物处理)、siNC组[转染锌指蛋白217(ZNF217)阴性对照质粒]、si-ZNF217组(转染ZNF217抑制表达载体质粒)、实验4+pc DNA3.1组(转染ZNF217阳性对照质粒,同时用0.30 mg·m L^(-1)的蛇莓提取物处理)、实验4+pc DNA3.1-ZNF217组(转染ZNF217过表达载体质粒,同时用0.30 mg·m L^(-1)的蛇莓提取物处理)。用噻唑蓝(MTT)法检测细胞存活率,用流式细胞术检测细胞凋亡率,用实时荧光定量聚合酶链反应检测ZNF217 mRNA的表达水平。结果对照组、实验1,2,3,4组、si-NC组、si-ZNF217组、实验4+pc DNA3.1组和实验4+pc DNA3.1-ZNF217组的细胞存活率分别为(100.01±6.64)%,(98.16±6.53)%,(90.12±5.38)%,(70.69±4.62)%,(52.31±4.03)%,(100.00±7.12)%,(56.35±5.25)%,(52.16±3.94)%和(83.53±3.10)%,细胞凋亡率分别为(8.41±0.86)%,(9.10±0.90)%,(14.12±1.01)%,(18.23±1.35)%,(22.17±1.61)%,(8.31±0.84)%,(20.16±1.35)%,(22.10±1.41)%和(11.16±1.01)%,ZNF217 mRNA表达水平分别为1.00±0.05,0.98±0.05,0.81±0.05,0.60±0.04,0.34±0.03,1.01±0.05,0.24±0.02,0.75±0.06和0.33±0.03,实验2,3,4组的上述指标与对照组相比,si-ZNF217组的上述指标与si-NC组相比,实验4+pc DNA3.1-ZNF217组的上述指标与实验4+pc DNA3.1组相比,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论蛇莓提取物可能通过下调ZNF217的表达,从而抑制膀胱癌细胞增殖,促进细胞凋亡。

响应面法优化蛇莓花色苷浸提工艺及稳定性研究

目的用响应面法优化乙醇浸提蛇莓花色苷的工艺条件并研究其稳定性。方法在单因素试验基础上,选取乙醇体积分数、液料比、提取时间、提取温度为自变量,花色苷提取率为响应值,采用Box-Behnken设计试验及响应面法分析,优化浸提工艺。研究pH值、温度、有机酸、氧化剂对花色苷稳定性的影响。结果优化的最佳工艺为乙醇体积分数80%,液料比10∶1,提取时间93 min,提取温度36℃,在该最优条件下得到花色苷提取率为1.126%。稳定性实验表明蛇莓花色苷在酸性、低温条件下稳定性好,添加柠檬酸和没食子酸可增强其稳定性,而在氨基乙酸、H2O2中稳定性差。结论响应面法优化所得工艺科学合理、切实可行,可用于蛇莓花色苷的提取;对蛇莓花色苷操作时应注意条件以保持其稳定性。