染料木黄酮抑制DU145细胞的作用及其机制研究

目的: 研究大豆异黄酮主要成分染料木黄酮 (GEN)对离体培养DU145前列腺癌细胞的生长抑制作用及其机制。方法: DU145前列腺癌细胞接受不同浓度的GEN处理,克隆形成试验用于测定DU145细胞的生存曲线及IC50;DNA ladder和DAPI(4-6-二氨基-2-苯基吲哚)染色法用于检测细胞凋亡;流式细胞仪和免疫印迹法分别用于观察细胞周期改变和相关蛋白表达。结果: 克隆形成试验显示: GEN能抑制离体培养DU145细胞的生长,其作用于DU145细胞的IC50约为30 mmol。GEN 处理24h后,早发细胞凋亡仅见于高浓度GEN处理组,72 h后凋亡亦见于较低浓度GEN组。流式细胞仪显示GEN可导致DU145细胞G2/M期阻滞;细胞周期相关蛋白分析显示随着GEN浓度的提高,p21cip1蛋白表达稳步上升,周期素B1呈双相改变,cdc-2则变化较小。结论: GEN可抑制离体培养DU145前列腺癌细胞的生长,其作用机制可能与GEN诱导细胞凋亡和细胞周期阻滞有关,后者同时伴有细胞周期相关蛋白表达的改变。

抑制Hedgehog信号通路对前列腺癌DU125细胞增殖及凋亡的影响

目的研究Hedgehog(Hh)信号通路阻断剂环王巴明对前列腺癌Dul45细胞增殖及凋亡的影响。方法体外培养DU145细胞,以10、50、100μmol/L的环王巴明作用24 h,MTT法检测环王巴明对DU145细胞增殖的影响,流式细胞技术检测环王巴明对DU145细胞凋亡的影响,RT-PCR检测环王巴明对DU145细胞Gli-1 m RNA表达的变化,Westernblot检测环王巴明对DU145细胞Gli-1蛋白表达的变化。结果 MTT检测结果表明10μmol/L环王巴明组(85.01±2.61)%、50μmol/L环王巴明组(76.71±3.13)%和100μmol/L环王巴明组(69.10±4.11)%细胞活性较空白对照组(99.97±0.21)%降低(P<0.05);流氏细胞技术检测结果表明10μmol/L环王巴明组(15.12±0.21)%、50μmol/L环王巴明组(24.97±0.24)%和100μmol/L环王巴明组(31.26±0.26)%细胞总凋亡率较空白对照组(2.56±0.28)%升高(P<0.05);RT-PCR检测结果表明10μmol/L环王巴明组(0.69±0.06)%、50μmol/L环王巴明组(0.69±0.06)%和100μmol/L环王巴明组(0.69±0.06)%Gli-1m RNA表达水平较空白对照组(0.92±0.11)%降低(P<0.05);Western blot检测结果表明10μmol/L环王巴明组(0.79±0.06)%、50μmol/L环王巴明组(0.59±0.05)%和100μmol/L环王巴明组(0.41±0.04)%Gli-1蛋白表达水平较空白对照组(0.94±0.11)%降低(P<0.05)。结论 Hedgehog信号通路阻断剂环王巴明可以抑制DU145细胞增殖、诱导DU145细胞凋亡,其作用机制可能与下调GLi-1表达有关。