合欢树不同部位挥发油成分及其气相色谱-四极杆飞行时间串联质谱分析

目的:分析合欢树不同药用部位(合欢花、合欢米及合欢皮)中的挥发性成分及其相对含量。方法:采用同时蒸馏-萃取方法提取合欢花、合欢米及合欢皮的挥发油,并运用气相色谱-四极杆飞行时间串联质谱(GC-Q/TOF-MS)技术对其化学成分进行分析,通过NIST 14.L数据库进行化合物检索与鉴别,采用面积归一法确定各成分的相对含量。结果:从合欢花、合欢米及合欢皮挥发油中分别鉴定出主要成分80、61及42种,分别占其挥发性成分总量的96.44%、97.67%及93.36%。合欢皮的脂肪族化合物相对百分含量高于合欢米、合欢花;合欢皮的芳香族化合物、萜类化合物相对百分含量与数量明显低于合欢花和合欢米。合欢花、合欢米及合欢皮三者共有成分11种;合欢花特有成分25种,合欢米特有成分10种,合欢皮特有成分27种。结论:本研究采用GC-Q/TOF-MS技术对合欢花、合欢米及合欢皮中的挥发性成分进行比较分析,可为植物合欢的合理开发和利用提供科学依据。

合欢不同部位的代谢组学分析

目的:通过代谢组学方法探讨合欢非药用部位的药用价值,以缓解其资源压力。方法:采用非靶向代谢组学的方法对合欢花及非药用部位合欢叶、茎中的代谢物进行筛选,结合生物信息学工具对其进行多元统计分析,分析代谢物之间相关性和不同部位代谢物的差异性。结果:合欢代谢物主要为脂肪酸、萜、糖、氨基酸、亚麻酸、胺、醇和多元醇、黄酮等类化合物,合欢的茎、叶和花中共有的代谢物主要有萜、黄酮和氨基酸等类成分,黄酮和黄酮醇生物合成、天门冬氨酸和谷氨酸代谢被认为是形成合欢不同组织差异代谢物的重要富集代谢途径。结论:合欢茎和叶中含有类似合欢花中的代谢物,茎、叶可能被用来代替合欢花作为药用资源,为合欢不同部位代谢物的研究和利用生物技术合成次生代谢产物提供参考。

合欢类药材的基原、功效考证及质量标准探讨

目的合欢类药材应用历史悠久,混淆种类多,缺乏科学的质量评价与控制方法。对《中华人民共和国药典》收载的合欢类药材,包括合欢皮、合欢花进行基原、产地、品质及功效进考证,以正本清源,为正确应用中药“合欢皮”“合欢花”提供科学依据。方法对合欢类药材及原植物从名称、形态、功效、产地等方面进行文献和历代本草调查考证,对历版《中华人民共和国药典》收载的合欢类药材的道地性及质量评价方法进行评价。结果合欢类药材药典收载的为合欢皮和合欢花,其基原为豆科合欢属植物合欢Albizia julibrissin Durazz,始载于《神农本草经》。合欢存在同名异物和同物异名现象。古代草本多以合欢花入药,现以花和皮同时入药。合欢花用于解郁安神,以槲皮苷作为质控指标成分。合欢皮除解郁安神外,还可活血消肿,以(-)-丁香树脂酚-4-O-β-D-呋喃芹糖基-(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖苷作为质控指标成分。但是,目前仍缺乏与合欢花和合欢皮功效相关联的质控标准。结论通过本草考证明确了合欢类药材的基原及应用历史,探讨合欢皮与合欢花的质量标准修订建议,为保证合欢类药材的安全有效应用提供科学依据。

基于网络药理学的合欢花抗抑郁作用机制研究

在对合欢花中的化学成分进行鉴定基础上,采用网络药理学方法预测合欢花抗抑郁的化学成分和作用机制。通过超高液相色谱-高分辨质谱联用技术(UHPLC-HRMS)对合欢花中化学成分进行表征,利用SwissTargetPrediction和Similarityensembleapproach数据库筛选合欢花活性成分的潜在作用靶点,同时利用DisGeNET数据库得到抑郁症相关的靶点,采用jvenn绘制韦恩图得到疾病与药物的共有靶点;通过STRING数据库构建PPI网络并筛选关键靶点,采用DAVID 6.8数据库对关键靶点进行KEGG通路富集分析及基因本体(GO)功能注释。结果表明,合欢花发挥抗抑郁作用主要成分为木犀草素、槲皮素、异鼠李素、腺苷、槲皮素-3-O-α-L-呋喃阿拉伯糖苷、槲皮素-3-O-α-D-吡喃木糖苷、槲皮素-3-O-α-D-呋喃阿拉伯糖苷、山奈酚-3-O-葡萄糖鼠李糖苷、金丝桃苷、槲皮苷,这些活性成分作用于MAPK1、MMP2、PTGS2、TNF、AR、EGFR、AKT1、MMP9、IGF1R核心靶点后通过HIF-1、MAPK、C-type lectin receptor(CLRs)、AGE-RAGE、IL-17及EGFR络氨酸激酶抑制剂抵抗通路中发挥抗抑郁作用。研究结果表明,合欢花抗抑郁作用是通过多成分、多靶点和多通路共同作用的结果,该研究为合欢花抗抑郁活性作用机制深入研究提供参考。

合欢花挥发油化学成分及提取液抑菌作用研究

采用水蒸气蒸馏法提取合欢(Albizzia julibrissin Durazz.)花挥发油,并用气相色谱-质谱(GC-MS)法进行分析,利用滤纸片法进行抑菌试验。结果表明,合欢花挥发油中共鉴定出16种成分,包括二十一烷(24.762%)、植酮(22.968%)、二十八烷(16.118%)、二十四烷(8.438%)和棕榈酸甲酯(6.689%)。合欢花提取液对鳗弧菌、哈维氏弧菌、灿烂弧菌、高卢弧菌、巨大芽孢杆菌均有抑制作用,其作用随浓度升高而增强。

碱胁迫对合欢种子萌发及幼苗生理指标的影响

为探求碱胁迫影响合欢幼苗生长的生理机制,采用可见分光光度法测定合欢幼苗体内丙二醛含量(MDA)、可溶性糖含量、脯氨酸含量及过氧化氢酶(POD)、超氧化物歧化酶(SOD)活性等生理指标.结果表明,合欢树种的耐碱能力较强,半致死浓度为78.30 mmol?L-1,致死浓度为147.33 mmol?L-1.随着Na2CO3处理浓度的增加,种子萌芽率、发芽指数、活力指数逐步下降,幼苗叶片中MDA、膜相对透性、脯氨酸和可溶性糖含量增加,SOD、POD活性呈先升后降的变化趋势,且随着胁迫时间的延长,MDA、膜相对透性逐步增加,脯氨酸、可溶性糖含量、SOD、POD活性变化无规律.在Na2CO3胁迫初期,膜脂过氧化作用成为主要破坏因素,随着胁迫时间的延长,膜脂过氧化作用受碱胁迫效应的影响逐步降低,而对质膜透性破坏的影响加强;POD、SOD受胁迫效应的影响较小,成为次要保护因素;可溶性糖、脯氨酸调节渗透压成为碱胁迫初期的主要保护因素;随着胁迫的发展,可溶性糖受胁迫效应的影响逐步降低,而对脯氨酸的影响不断加强.

中药合欢花抗抑郁活性部位的初步筛选研究

目的合欢花抗抑郁作用有效部位的筛选。方法采用小鼠强迫游泳药理实验对合欢花水提物和醇提物及其各萃取部位进行抗抑郁活性筛选。结果合欢花醇提物与水提物的石油醚和醋酸乙酯萃取部位与对照品安拿芬尼类似,均能显著缩短小鼠游泳的不动时间。结论合欢花醇提物与水提物及其石油醚和醋酸乙酯萃取部位对“行为绝望”动物模型有较明显的抗抑郁作用,提示非极性成分及中等极性成分可能为合欢花抗抑郁作用的活性物质。

合欢花化学成分的研究(Ⅱ)

从合欢花甲醇提取物的石油醚和乙酸乙酯部分分离得到7个化合物,经化学方法和波谱法鉴定为:二十四烷酸(1)、二十八烷醇(2)、α-菠甾醇(3)、山奈酚(4)、槲皮素(5)、α-菠甾醇-3-O--βD葡萄糖苷(6)、山奈酚-3-O--αL鼠李糖苷(7)。除二十四烷酸以外,以上化合物均为首次从该植物中获得。

可见分光光度法测定碱胁迫中合欢幼苗的生理指标

为检测合欢幼苗的抗碱胁迫能力,文章试验利用可见分光光度法测定了碱胁迫下合欢幼苗体内的丙二醛、可溶性糖、脯氨酸含量及POD、SOD活性,分析这些生理指标在不同处理浓度、不同处理时间下的变化规律,探求碱胁迫下合欢幼苗的抗逆生理机制。随着Na2CO3处理浓度的增加,幼苗叶片中MDA和可溶性糖含量,均呈递增趋势,当处理浓度低于75mmol.L-1,两者含量变化较平缓,而浓度高于75mmol.L-1时,则含量急剧增加,各处理间差异显著;脯氨酸含量也呈递增趋势,当处理浓度低于100mmol.L-1,变化较平缓,浓度高于100mmol.L-1时,含量则急剧增加,各处理间差异显著;SOD和POD活性变化趋势一致,都呈单峰曲线变化,但两者活性最大值所对应的处理浓度不同,分别为50和75mmol.L-1。此外,随着胁迫时间的延长,同一浓度处理的丙二醛含量逐步增加,而脯氨酸、可溶性糖含量、SOD、POD活性变化较复杂,无明显规律性。

合欢皂苷J_(20)的结构鉴定

目的：研究合欢皮的化学成分及活性。方法：用现代色谱法分离合欢皮皂苷，用化学和现代波谱法，主要是二维核磁共振技术鉴定结构。结果及结论：分离并鉴定了一个新三萜皂苷，结构为３Ｏ［βＤ吡喃木糖基（１→２）αＬ吡喃阿拉伯糖基（１→６）βＤ吡喃葡糖基］２１Ｏ｛（６Ｓ）２反式２羟甲基６甲基６ＯβＤ吡喃木糖基２，７辛二烯酰基｝金合欢酸２８ＯβＤ吡喃葡糖基（１→３）［αＬ呋喃阿拉伯糖基（１→４）］αＬ吡喃鼠李糖基（１→２）βＤ吡喃葡糖基酯，命名为合欢皂苷Ｊ２０（ＪｕｌｉｂｒｏｓｉｄｅＪ２０）。

合欢皮化学成分的分离鉴定

目的 :研究合欢皮的化学成分。方法 :用色谱法和波谱方法对合欢皮的化学成分进行分离和结构鉴定。结果 :共得到 5个化合物 :(- ) 丁香树脂酚 4 O β D 呋喃芹糖基 (1→ 2 ) β D 吡喃葡萄糖苷 (1)、(6R) 2 反式 2 ,6 二甲基 6 O β D 吡喃鸡纳糖基 2 ,7 辛二烯酸 (2 )、(6S) 2 反式 2 ,6 二甲基 6 O β D 吡喃鸡纳糖基 2 ,7 辛二烯酸(3 )、5 ,5′ dimethoxy 7 oxolariciressinol(4)和 ( ) 丁香树脂酚 (5 )。 结论 :化合物 2 ,3和

合欢皮提取物抑制血管生成作用的研究

本文采用体外细胞培养法和体内鸡胚尿囊绒膜模型、荷瘤模型检测合欢皮提取物抑制人微血管内皮细胞(HMEC-1)的增殖、迁移活性,观察合欢皮提取物的抑制血管生成情况。发现合欢皮提取物能显著抑制HMEC-1的增殖(IC50为30μg/mL)和迁移,并且呈明显的剂量依赖性。在体内同时具有抑制鸡胚尿囊膜和肿瘤组织中血管生成的作用。

植物源抗烟草花叶病毒活性物质的初步筛选

利用半叶枯斑法,测定了13科18种植物蛋白粗提液对烟草花叶病（TMV）的抑制效果。结果表明,不同植物蛋白粗提液对TMV侵染心叶烟的抑制效果存在差异,6种植物蛋白粗提液对TMV的抑制效果达到50%以上,其中菠菜和合欢最高,分别达到了97.44%和96.92%。进一步通过（NH4）2SO4盐析,对菠菜和合欢蛋白粗提液抗病毒活性成分进行了初步分离,并测试（NH4）2SO4盐析的不同蛋白组分对TMV的抑制效果。结果显示,菠菜蛋白粗提液盐析后的两个蛋白组分都表现出很高的抗病毒活性,而合欢蛋白粗提液只在40%~80%饱和度盐析的蛋白组分具有较强的抗病毒活性。

合欢花水提物对抑郁模型大鼠学习记忆及海马CREB表达的影响

目的:观察合欢花水提物对抑郁模型大鼠学习记忆能力及海马CREB表达的影响。方法:SD大鼠40只,随机分为空白组、模型组、氟西汀组和合欢花组,每组10只。采用孤养加慢性轻度不可预见性应激结合方法构建抑郁模型,氟西汀或合欢花水提物灌胃治疗21 d。空白组给予生理盐水。用药结束后,采用体重测定、旷场试验、糖水实验评估各组大鼠的抑郁情况。Morris水迷宫测试各组大鼠的学习记忆能力。ELISA法检测海马组织中cAMP含量。免疫组化法检测海马CREB的表达情况。结果:与模型组相比,合欢花组和氟西汀组抑郁症状明显改善。水迷宫结果显示:与空白组比较,模型组大鼠的逃避潜伏期(EL)明显延长,平台所在象限的游泳时间百分比和穿越站台次数明显减少(P<0.01);与模型组比较,氟西汀组和合欢花组EL明显缩短,游泳时间百分比和穿越站台次数增加(P<0.05或P<0.01);但氟西汀组和合欢花组以上指标的差异不明显(P>0.05)。海马cAMP含量及CREB平均光密度检测结果显示:与空白组比较,模型组大鼠海马cAMP含量、CREB的平均光密显著降低(P<0.01);与模型组相比,氟西汀组和合欢花组上述指标明显升高(P<0.01);而氟西汀组和合欢花组上述指标无统计学差异(P>0.05)。结论:合欢花水提物可以改善抑郁模型大鼠的抑郁症状提高抑郁大鼠学习记忆能力,其机制可能与提高海马CREB的表达影响cAMP-CREB通路有关。

合欢皮提取物对黑曲霉抑菌活性的研究

采用滤纸片法和生长速率法,测定了合欢皮乙醇提取物对4种常见菌种的抑菌活性;结果表明:合欢皮乙醇提取物对金黄色葡萄球菌的最低抑制浓度(MIC)为20mg/mL,对黑曲霉的抑制中浓度(EC50)为12.43mg/mL,即对黑曲霉抑菌效果较好。再进一步采用生长速率法,测定了合欢皮4种萃取物对黑曲霉(Aspergillus niger)的抑菌活性。4种萃取物中,正丁醇相对黑曲霉抑菌效果最好,其EC50为7.68mg/mL。结论:合欢皮乙醇提取物对黑曲霉的有效抑菌成分主要集中于正丁醇相,对于开发天然食品防腐剂有很大价值与潜力。

HPLC测定合欢花中槲皮苷的含量

目的测定合欢花中槲皮苷的含量。方法采用高效液相色谱法，Agilent-C18柱（250mm×4．6mm，5μm），流动相为乙腈-0．1％磷酸溶液（25：75），检测波长为256nm，流速为1．0mL·min^-1。结果槲皮苷进样量在0．1204—2．408μg内呈良好的线性关系，平均回收率为99．2％，RSD=1．3％（n=6）。结论该方法快速简便，稳定可靠，专属性强。

合欢内生菌H8的分离、鉴定及其抗菌代谢物质研究

为了寻找结构新颖，高效的农用抗菌活性物质，以药用植物合欢叶为试验材料，分离筛选出一株内生细菌H8。采用对峙培养法与琼脂扩散法进行抑菌试验，结果表明：H8菌株、发酵液、无菌发酵液及其活性组分对苹果腐烂病菌、苹果轮纹病菌等6种供试植物病原菌均具有较强的抑菌活性，抑菌带宽度可达20．5～34．5 mm。经形态观察、生理生化试验和16S rDNA系统进化分析，鉴定其为死谷芽孢杆菌（Bacillus vallismortis）。采用液-液萃取、薄层层析及硅胶柱层析，对内生菌H8的代谢液提取分离，得6个组分，对抑菌活性高的2个组分硅烷化衍生后，经GC-MS检测，确定代谢液中有脂肪酸、芳香酸、环二肽等28种活性化合物。

合欢皮总皂苷对雄性小鼠的抗生育作用研究

目的探讨合欢皮总皂苷对雄性小鼠的抗生育作用。方法将60只健康的雄性性成熟昆明小鼠随机分成3个试验组和1个对照组,各试验组小鼠灌胃540 mg·(kg·d)-1,270 mg·(kg·d)-1和135 mg·(kg·d)-1的合欢皮总皂苷水溶液,对照组自由饮水,灌胃1周后按雌雄比2∶1合笼,继续对雄鼠灌胃至19 d,采集雄性小鼠的血液并测定血液生化指标,剖检灌胃雌性小鼠,统计雌性小鼠的怀孕率,测定雄性小鼠睾丸与附睾的脏器系数及附睾精子活力,并固定睾丸和附睾,研究其组织学变化。结果与对照组相比较,雄性小鼠灌胃合欢皮总皂苷后,导致雌性小鼠的怀孕率降低,睾丸脏器系数和附睾精子活率极显著降低(P<0.01),精子畸形率极显著升高(P<0.01)。光学显微镜下,试验组小鼠睾丸和附睾均有一定程度的损失,睾丸生精细胞排列疏松,间质减少,可见曲细精管内有多核巨噬细胞浸润,各级生精细胞脱落。附睾具正常的管腔结构,但能明显观察到管腔内精子几乎消失。结论合欢皮总皂苷对雄性小鼠具有抗生育作用,主要通过影响精子的生成及破坏生精组织而达到。

合欢皮多糖提取工艺优化及BP神经网络模型

优化合欢皮多糖微波辅助提取工艺和建立BP神经网络模型。以多糖得率为指标,选取微波辐射时间、液固比和溶剂pH为自变量,采用Box-Behnken试验设计,结合响应面分析法(RSA),建立回归方程;在此基础上,建立BP神经网络(BPNN)模型。优化条件下的总多糖实际得率为3.648%,BPNN模型相对误差为1.042%,小于Box-Behnken设计模型相对误差(1.452%)。该BPNN模型预测性能良好,对工艺研究的开发具有一定的实用价值。

反相高效液相色谱法测定合欢不同部位中槲皮苷的含量

目的建立合欢不同部位中槲皮苷的含量测定方法。方法样品用甲醇超声提取40min，提取物用流动相溶解。Diamonsil C18柱（4．6mm×250mm），甲醇-水-冰醋酸（45：55：1．5）为流动相，检测波长为256nm。结果槲皮苷在2．545—20．36μg／ml浓度范围内线性关系良好（r=0．9999），平均加样回收率为98．09％，RSD为O．5％。结论此方法简便可靠，可为合欢花药材的质量控制提供借鉴。