Isolation of a novel antifungal peptide from the bark of Eucommia ulmoides Oliv

A novel Eucommia antifungal peptide, named EAFP3, was isolated from the bark of Eucommia ul- moides by NaC1 extract, gel filtration and reverse phase high performance liquid chromatography. The molecular mass of EAFP3 is 4157.3 Da, and its partial amino acid sequence is -. LYQQLIAGITLNK.-. EAFP3 exerts an inhibitory activity against Candida albicans in vitro and the drug concentration required for 50% growth inhibition （IC50） is 31.25μg/mL.

超声提取法对杜仲不同“发汗”品经不同加工炮制后总黄酮成分的影响研究

目的:比较杜仲生品及不同发汗品经四种不同炮制方法对杜仲总黄酮成分的影响,为杜仲加工炮制提供依据。方法:将杜仲生品及不同发汗品经姜制、酒制、盐制、蜜制四种炮制后制备各样品,用芦丁作对照品,采用紫外分光光度法,于510 nm波长处,分别测定不同发汗品经四种炮制后超声提取物中的总黄酮含量。结果:杜仲生品及不同发汗品不同炮制方法对杜仲总黄酮的含量有影响,烘至半干后“发汗”品(E5)酒制品总黄酮含量最高。结论:若以杜仲总黄酮为主的药理作用进行临床应用时,建议杜仲采取烘至半干“发汗”后采用酒制处理的加工炮制方法。

基于CiteSpace的杜仲防治骨质疏松症研究可视化分析

目的:通过CiteSpace 6.2对杜仲防治骨质疏松症的相关文献进行可视化分析,探索该领域近20年的发展状况、研究热点及动态前沿。方法:检索中国知网(CNKI)2003年1月1日至2023年4月30日有关杜仲防治骨质疏松症的文献,以发文单位、作者、关键词为基础构建可视化知识图谱。结果:共纳入文献395篇,发文量总体呈上升趋势,2003—2013年发文量较少,2014年开始逐渐增加,2021年发文量最多,为28篇。主要发文机构有山东中医药大学、南京中医药大学、河南中医药大学、浙江中医药大学、北京中医药大学、武汉市中医医院。发文量较多的作者为张贤、张艳红、谭湘陵、蔡建平、谢焕松、夏树林。结合关键词共现分析、突现分析和聚类分析得到的结果显示,主要研究热点为杜仲、骨质疏松、骨密度、成骨细胞、杜仲叶、骨代谢、淫羊藿。结论:杜仲防治骨质疏松症研究已经从单纯的临床试验逐步转向更深入的作用机制研究。在对杜仲防治骨质疏松症的临床安全性和有效性探讨方面,需要开展更为规范的临床研究以提供高级别循证证据。同时,仍需进一步明确杜仲防治骨质疏松症的作用机制及杜仲与骨质疏松症相关的中医临床证候学之间的联系,以指导临床用药。

王济华运用角药治疗类风湿关节炎经验

王济华教授认为,类风湿关节炎早期多因外感风、寒、湿三邪,三者之间相互促进、互相转化,风寒表邪入里日久或郁而化热;病程日久多虚实夹杂,肝肾亏虚、气血不足,同时兼有寒湿痹阻、痰瘀互结。故王教授治疗痹证早期以祛邪散寒为主,兼顾清热利湿、化痰散结,中晚期则偏于滋养气血、补益肝肾。王济华教授运用角药治疗痹证颇有心得,组方精妙、配伍严谨,常用角药川芎-延胡索-白芍行气活血、柔筋止痛;忍冬藤-络石藤-青风藤清热通络、祛风除湿;半夏-陈皮-竹茹燥湿化痰、理气和中;白术-薏苡仁-茯苓益气健脾、利湿消肿;桑寄生-续断-杜仲滋补肝肾、强筋壮骨;酸枣仁-合欢皮-首乌藤宁心安神、解郁除烦。王教授临证时,追求阴阳调和平衡、气机升降有度,临床用药有药简力专、增效减负之功。

杜仲含药血清诱导骨髓间充质干细胞定向分化的实验研究

目的研究补肾中药杜仲含药血清对骨髓间充质干细胞(BMSCs)增殖及定向分化的影响。方法将第4代MSCs以5×106接种于9块96孔板,3组,每组8孔;2块6孔板,每板3孔,2 d后换液,加入诱导液。分为空白组、地塞米松组、杜仲组。空白组加入含10%胎牛血清(FBS)的L-DMEM培养基继续培养,地塞米松组在基础培养基加入诱导剂(含β甘油磷酸钠10mmol/L,地塞米松0.1μmol/L,维生素C 50 mg/L),杜仲组为含10%杜仲含药血清的L-DMEM培养基。分别自加诱导液第1天起,采用MTT法测量96孔板细胞数,每天1块板;在第10天取出1块6孔板做ALP染色;第20天做6孔板茜素红染色。结果杜仲含药血清组OD值呈现出明显的上升趋势,而空白组和地塞米松组无明显上升趋势;第10天杜仲组及地塞米松组ALP染色阳性,第13天起可见白色钙结节,第20天茜素红染色阳性。结论杜仲含药血清能促进骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化,并刺激细胞增殖。

杜仲叶与皮有效成分含量的比较研究

本文就杜仲叶和皮总成分、药用成分（绿原酸、桃叶珊瑚甙和松脂醇二葡萄糖甙）及营养成分（维生素、氨基酸、微量元素）的含量进行了比较分析。分析结果认为，杜仲叶含量丰富，除维生素含量基本相当外。

杜仲总黄酮对成骨细胞增殖及Ⅰ型胶原蛋白表达的影响

目的了解杜仲总黄酮对新生大鼠颅骨体外培养成骨细胞的增殖及合成胶原蛋白的影响。方法杜仲总黄酮以质量浓度10,100,200和400μg·mL-1分别加入从2 d的SD大鼠颅骨分离培养的成骨细胞中,用MTT法评价对成骨细胞增殖的影响;采用激光共聚焦扫描显微镜检测Ⅰ型骨胶原蛋白的表达情况。结果与对照组比较,质量浓度10200μg·mL-1的杜仲总黄酮能明显促进成骨细胞的增殖（P〈0.05）,但并不能显著地促进成骨细胞合成Ⅰ型胶原蛋白。

杜仲含药血清诱导骨髓间充质干细胞定向分化蛋白质组学研究

目的研究杜仲含药血清诱导骨髓间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSCs)向成骨细胞定向分化过程的蛋白表达差异,分析杜仲诱导MSCs向成骨细胞分化的可能调控机制。方法对杜仲含药血清干预前、干预后第2天、第7天,第14天的细胞提取总蛋白,通过双向电泳分离、PDQuest-7.3.0胶图分析软件进行分析找出差异蛋白,并进行质谱分析、数据库查询建立功能蛋白质组。结果双向电泳分离得到641个蛋白点,选取其中75个点进行质谱分析,经数据库查询得到6个功能蛋白。结论实验认为补肾中药杜仲可能通过上调波形蛋白、核纤层蛋白A的表达促进细胞分化,下调钙网织蛋白表达,释放细胞内钙,参与钙结节的形成,与体内骨矿化过程有关。过氧化物歧化酶、膜联蛋白A6与细胞的活力有关,调节着细胞的分裂增殖与分化,但是否与定向成骨细胞分化有着密切关系尚有待进一步研究。

杜仲原生皮与再生皮中松脂醇二葡萄糖苷的含量比较

目的:为了评价杜仲再生皮质量,测定了杜仲三次再生皮中降压有效成分松脂醇二葡萄糖苷(P inores-inol d iglucoside,PDG)含量。方法:采用HPLC法,色谱柱为国产YWG C18柱(46×250 mm,10μm),以甲醇-水(30∶75)为流动相,流速1.0 m l/m in,柱温为室温,检测波长为277 nm,进样量为10μl。结果:第一次剥皮后的再生皮中PDG含量略高于原生皮;第二次剥皮后的再生皮中PDG含量与剥皮前的一次再生皮相当;第三次剥皮后的再生皮中PDG含量明显低于剥皮前的二次再生皮。结论:为了保证药材质量,杜仲剥皮再生可进行两次,每次间隔时间不少于5年,第三次剥皮后的再生皮中PDG含量有待提高。

不同变异类型杜仲皮中几种主要活性成分含量的比较

采用反相高效液相色谱法测定了不同变异类型杜仲皮中几种关键活性成分的含量,结果表明:4种变异类型杜仲皮中5种不同活性成分的含量及组成比有较大差异,其中京尼平苷酸(GPA)、京尼平苷(GP)、松脂素二糖苷(PDG)、绿原酸(CA)含量以及5种成分的总含量以光皮型和浅纵裂型杜仲皮较高,而龟裂型和深纵裂型活性成分总体含量较低。若遴选优质杜仲药用资源,可首先考虑从优良光皮型和浅纵裂型杜仲群体中开展选育工作。

杜仲不同部位总黄酮含量及抗氧化活性研究

目的:比较杜仲皮、叶、雄花及籽中总黄酮含量与抗氧化活性。方法:采用紫外分光光度法测定各部位总黄酮含量;以半数清除/还原浓度(IC_(50))值为评价指标,对各部位样品进行清除2,2′-联氮基双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)(ABTS^+)、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基试验以及对铜离子(Cu^(2+))的还原能力试验,并以维生素C为阳性对照。结果:杜仲不同部位总黄酮含量由高到低为叶>雄花>皮>籽,其中除杜仲皮与籽总黄酮含量比较差异无统计学意义外(P>0.05),其余各部位间比较差异均有统计学意义(P<0.05);各样品对ATBS^+、DPPH自由基清除作用由强到弱为叶>雄花>籽>皮,其中除杜仲叶与雄花比较各指标差异无统计学意义外(P>0.05),其余各部位间比较差异均有统计学意义(P<0.05);各样品对Cu^(2+)还原能力由强到弱为叶>雄花>皮>籽,其中叶、雄花与皮、籽比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:杜仲叶与雄花部位总黄酮含量较高、抗氧化活性较强,可进行相应的开发利用以弥补传统药用部位杜仲皮资源的不足。

不同处理方法对杜仲皮及叶中多种活性成分含量的影响

对杜仲皮和杜仲叶采用不同处理方法进行干燥,并考察这些处理方法对杜仲皮及叶中的几种活性成分含量的影响。经过微波处理后,叶中绿原酸、总黄酮和桃叶珊瑚苷的质量分数分别为2.129%、7.005%和4.420%,是晒干处理的5.14倍、1.52倍和17.06倍;皮中京尼平苷酸和桃叶珊瑚苷的质量分数分别为5.393%和4.242%,分别是晒干处理的1.09倍和1.78倍。结果表明微波杀青后50℃烘干处理杜仲皮及叶能够有效的减少活性成分的损失,是一种比较好的处理方法。

细辛、杜仲及其合剂对亚急性衰老小鼠睾丸及血清睾酮影响的实验研究

目的研究细辛、杜仲及其合剂对亚急性衰老小鼠睾丸、精子及血清睾酮的影响。方法选昆明系雄性小鼠,用D-半乳糖制备衰老模型。应用光镜、电镜技术检测细辛、杜仲及其合剂治疗前后衰老小鼠睾丸及精子的形态学改变;放射免疫技术检测血清睾酮的变化。结果衰老小鼠睾丸重量减轻,生精细胞缺如,精子密度及活动率下降,血清睾酮含量明显降低(模型组与青年组比较:P<0.01);用药后,睾丸重量增加,生精小管增粗,生精细胞增多,生精过程活跃,精子密度及活动率明显提高,血清睾酮含量增加(P<0.05)。合剂组的作用优于杜仲组和细辛组(P<0.05)。结论细辛,杜仲及其合剂可改善衰老小鼠的生精功能,明显抑制衰老小鼠血清睾酮含量的下降,具有一定延缓衰老的作用。

杜仲内树皮化学组成及抽提成分的研究(英文)

研究了杜仲内树皮及其抽提物的一般物、矿物质、脂肪酸与单糖的化学组成。结果表明，碳水化合物（92．97％）、钙（5．1769mg／g）、α-亚麻酸（27．4％）及葡萄糖（130．51mg／g）分别是杜仲内树皮的一般物、矿物质、脂肪酸与单糖的主要组成成分。采用Sephadex LH-20柱色谱及薄层色谱等方法，从其70％丙酮提取物水溶性部分分到5种化合物，经波谱分析及理化性质化舍物分别鉴定为：紫云英苷（1）、异槲皮苷（2）、槲皮素-3-O-木糖葡萄糖苷（3）、异绿原酸A（4）、异绿原酸C（5）。化合物3—5为首次从该植物中分得。

杜仲皮、杜仲雄花醇提取物对模型小鼠气道变应性炎症的影响

目的观察杜仲皮、杜仲雄花醇提物对鸡卵清蛋白(OVA)所致小鼠气道变应性炎症的影响,探讨其作用机制。方法实验第0、7日,OVA腹腔注射致敏,继而滴鼻激发21 d,建立小鼠气道变应性炎症模型。实验小鼠随机分为正常组、模型组、杜仲皮醇提物组(杜仲皮组)、杜仲雄花醇提物组(杜仲雄花组)和地塞米松组,各给药组给予相应药物灌胃。肺组织行HE、PAS染色,观察支气管及周围肺组织病理改变,ELISA检测小鼠血清OVA-Ig E、白细胞介素(IL)-4、干扰素-γ(IFN-γ)、IL-13水平,免疫组化检测小鼠肺组织细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶9(MMP9)、组织金属蛋白酶抑制剂1(TIMP1)表达,流式细胞术检测小鼠外周血Th17+细胞表达,RT-PCR检测小鼠肺组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-6 m RNA表达。结果模型组小鼠肺组织可见嗜酸性粒细胞及其他炎症细胞浸润,支气管痉挛,黏液分泌增加,杜仲皮组和杜仲雄花组小鼠肺组织病理明显改善。与正常组比较,模型组小鼠血清OVA-Ig E、IL-4、IL-13水平升高,IFN-γ水平降低(P<0.05,P<0.01),肺组织ICAM-1、VEGF、MMP9表达增强,TIMP1表达降低(P<0.01),外周血IL-17^+细胞增加,肺组织TNF-α、IL-6 m RNA表达均升高(P<0.01);与模型组比较,杜仲皮组和杜仲雄花组小鼠血清OVA-Ig E、IL-4、IL-13水平明显下调(P<0.01),ICAM-1、VEGF表达明显下调(P<0.05,P<0.01),TIMP1表达升高,外周血IL-17+细胞降低,肺组织IL-6 m RNA表达降低(P<0.05,P<0.01),杜仲皮组还可诱导IFN-γ分泌(P<0.01),下调TNF-αmRNA表达(P<0.05),杜仲雄花组MMP9表达明显下调(P<0.05)。结论杜仲皮、杜仲雄花醇提物可能通过降低模型小鼠OVA-Ig E产生,抑制Th2类细胞因子分泌,下调Th17细胞,抑制促炎细胞因子表达,对气道变应性炎症有一定抑制作用。

不同产地杜仲树皮含胶特性的变异规律

为了弄清杜仲树皮含胶特性的地理变异规律 ,为杜仲高产胶产业化基地的选择提供科学依据 ,选择我国主要杜仲产地和主要引种区共 16个产地作为研究对象。采用选择典型样株和随机取样的方法 ;含胶率的测定采用杜仲胶综合提取法 ;利用SAS软件进行统计分析。结果表明 ,不同产地 10a生杜仲胸径、树皮厚度和树皮含胶率均存在极显著差异。北方产区杜仲胸径和树皮厚度普遍高于南方产区 ;在纬度相似的地区 ,东部产区高于西部产区。杜仲皮的含胶率大体上随着纬度的增加而呈逐步减小趋势 ,南方产区杜仲皮的含胶率一般比北方产区高。海拔越高、年降雨量越大、年均气温越高、无霜期越长 ,越有利于杜仲皮内杜仲胶的形成和积累 ,树皮含胶率越高。

不同变异类型杜仲皮及再生皮中木脂素类成分含量比较

为分析比较不同类型杜仲皮和再生皮中木脂素类活性成分的差异性,利用高效液相色谱法分别测定了深纵裂型、浅纵裂型、龟裂型、光皮型杜仲皮及再生皮中9种木脂素类活性成分的含量。结果表明:木脂素类主要药用活性成分松脂素二糖苷、丁香素二糖苷及9种活性成分总含量均以光皮型杜仲皮中最高;不同类型杜仲皮中木脂素类活性成分组成比都以松脂素二糖苷最高,以丁香素最低。研究表明光皮型、浅纵裂型杜仲皮和再生皮中9种木脂素类成分的含量相对较高,杜仲再生皮中木脂素类成分与杜仲原生皮相比没有明显差异。

杜仲树皮含胶特性的个体变异规律

采用选择典型样株和随机取样的方法,对杜仲皮含胶特性的个体变异规律及其与若干宏观性状的相关性进行了系统研究。结果表明,不同无性系的胸径、树皮厚度、树皮含胶率的差异均达到了极显著水平。杜仲无性系树皮的含胶率与木栓层厚度和木栓层占树皮厚度的百分比呈极显著的负相关关系,与胸径的大小呈显著的负相关关系。胸径生长量越大,木栓层越厚,杜仲胶的积累相对越少;杜仲胶密度与树皮含胶率和树皮密度呈极显著的正相关关系。

土壤水分对杜仲剥皮再生的影响

分别对12和25年生杜仲进行Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级供水处理,研究不同水分条件对杜仲愈伤组织和再生皮生长的影响.结果表明：供水改善了林地水分条件,土壤平均含水量和贮水量增大,25年生杜仲消耗土壤水分较多,土壤含水量较12年生杜仲林地的低.杜仲剥皮后,供水能加快愈伤组织的形成,剥皮后第5 d,处理Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ均有微绿色的愈伤组织出现,较对照提前5 d左右;剥皮后25 d,12和25年生的愈伤组织厚度分别达到1.00和0.94mm,生长速度分别为0.040和0.037 mm·d-1,分别较对照增加47.1%和80.8%.供水能显著促进杜仲再生皮的生长,剥皮后5个月,12和25年生杜仲Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级供水处理的再生皮厚度分别较对照增加5.0%、22.5%、75.8%、71.7%和18.5%、29.3%、80.7%、95.0%.6月份是杜仲再生皮生长的关键期,供水对再生皮生长最有利.杜仲水分利用效率在Ⅲ级供水处理时最大,12和25年生分别较对照提高39.3%和37.4%.生长季中,土壤含水量应保持在160～170 g·kg-1.

杜仲水提液对嗜酸乳杆菌生长及发酵产物的影响

制备5种不同质量浓度的杜仲水提液添加到MRS培养基中对嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)CICC6005进行培养,旨在探究不同质量浓度的杜仲水提液对L.acidophilus CICC6005增殖情况及对发酵过程中胞外和胞内蛋白含量变化的影响,并对其蛋白组分进行分析。发酵所得胞外和胞内蛋白分别用三氯乙酸-丙酮沉淀法和试剂盒法获得,采用Sephadex G-100凝胶层析分离技术对胞外和胞内蛋白分离纯化,用二喹啉甲酸法和十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳分别测得各组分蛋白的含量及分子质量。结果显示:当培养基中添加的杜仲水提液质量浓度为0.125 0 g/m L时,对菌体增殖有明显的促进作用,菌体生物量最大(4.38×108 CFU/m L),同时在此质量浓度时菌体胞外和胞内蛋白含量也达到最大值;胞外和胞内蛋白经过Sephadex G-100凝胶层析分离后均得到2个明显的蛋白峰,胞外蛋白两组分分子质量分别为67、31 ku,胞内蛋白两组分分子质量分别为57、17 ku。综上,添加适宜质量浓度的杜仲水提液对L.acidophilus CICC6005的增殖起到了一定的促进作用,并对其发酵产物组成产生了一定的影响。