八角莲含药血清对人肝癌细胞SMMC-7721的抑制作用研究

目的:观察八角莲提取物(DVE)含药血清的体外抗肝癌作用。方法:以Wistar大鼠含药血清为药物,用MTT法观察DVE含药血清对人肝癌细胞(SMMC-7721细胞)增殖的抑制作用。结果:DVE组对SMMC-7721细胞有较强的抑制作用,与索拉菲尼组相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论:DVE含药血清体外有较强的抑制SMMC-7721细胞增殖作用。

八角莲不同部位鬼臼毒素分布的毛细管区带电泳研究

建立了一个简单灵敏的分离测定鬼臼毒素的高效毛细管区带电泳方法,并用该方法研究了八角莲的不同部位中鬼臼毒素的分布情况.结果表明,在未涂层石英毛细管（57 cm×75 μm i.d.,有效长度50 cm）中,以25 mmol/L的硼砂（pH 10.8）缓冲溶液为电解质,鬼臼毒素可与八角莲不同部位中的其它组分得到有效分离.方法对鬼臼毒素的测定范围为1.5 ～ 171.0 mg/L,相对迁移时间和峰面积的RSD值分别为1.50%和0.82%（n=8）.对八角莲的根、茎、叶、须乙醇提取物进行单独测定,发现鬼臼毒素在八角莲不同部位中的分布是不均匀的,其中根部最多,而叶中最少.

三种江边一碗水的比较鉴别(Ⅱ)

目的:鉴定市场中的江边一碗水来源,为拟定质量标准和鉴别真伪提供参考。方法:采用薄层色谱法对市场中6批江边一碗水进行比较鉴别。结果:江边一碗水分别为小檗科植物南方山荷叶Diphylleia sinensis Li.、八角莲Dysosma versipellis(Hance.)M.Cheng及六角莲Dysosma pleiantha(Hance)Woods.的干燥根茎。根据其生药学特征,分别编制了三种江边一碗水的原植物、性状、显微鉴别和薄层色谱鉴别检索表。结论:采用薄层色谱鉴别和编制检索表鉴别三种来源的江边一碗水,方法简便、可靠。

八角莲不同部位鬼臼毒素和4'-去甲鬼臼毒素含量的测定

利用反相高效液相色谱法建立了同时分离和测定4＇-去甲鬼臼毒素和鬼臼毒素的方法.所选用的色谱柱为Waters Spherisorb ODS2 （5 μm,4.6 mm i.d×250 mm）,流动相组成为甲醇-水（体积比为65：35）,检测波长为207 nm.在该色谱条件下,4＇-去甲鬼臼毒素质量浓度在0.222 4～ 556 μg/mL、鬼臼毒素质量浓度在0.596 8～1 492 μg/mL范围内线性关系良好,相关系数分别为0.999 8和0.999 9.该方法应用于中药八角莲的叶、茎、须和根中这2个组分的含量分析.

中国八角莲属植物的研究进展

八角莲属小檗科八角莲属植物,为我国特有药用植物。近年来,随着经济社会的发展,已有不少研究集中在八角莲的分布与生物生态特征、化学成分、栽培研究、药用价值等方面。八角莲属植物的药效显著、用途很广,对其研究及野生资源采摘越来越多,导致该属植物分布及其数量急剧减少,因此对八角莲属植物的开发利用与保护亟待加强。

HPLC法测定4种八角莲中鬼臼毒素的含量

建立高效液相色谱法测定４种八角莲中鬼臼毒素含量的方法，考察不同溶剂及提取方法对含量测定结果的影响。方法Ｈｅｗｌｅｔ－Ｐａｃｋａｒｄ１１００高效液相色谱仪，ＷｈａｔｍａｎＰａｒｔｉＳｈｅｒｅＣ１８色谱柱，流动相：甲醇－０．１ｍｏｌ／Ｌ磷酸氢二钾（５０∶５０），检测波长：２９０ｎｍ。样品用８０％的甲醇水溶液超声波振荡提取结果标准曲线方程Ｙ＝０．２２５＋４３８．９５Ｘ，ｒ＝０．９９９７（ｎ＝３）。结论超声波法优于传统的回流提取法，本方法简便快速，准确度高。

对鬼臼“同名异物”的疏分

《神农本草经》始记载的"鬼臼",因以根状茎入药,自古来源复杂。但南北朝陶弘景已知鬼臼"有两种",且将马目毒公分出。而《本草纲目》却不以为然,而且将唐、宋文献中与鬼臼相关的许多植物名作鬼臼的异名;当代《中华本草》,又以这些名称和明、清文献中与"鬼臼"有关的植物名称,均作"八角莲"的异名,使"鬼臼"来源仍很杂乱。经考证确认:今小檗科鬼臼属植物Dysosma versipellis(Hance)M.Cheng ex Ying当系鬼臼正品;羞天花、八角盘、金星八角指同属植物D.majorensis(Gagnep.)Ying,以及D.veitchii(Hemsl.et Wils.)Fu ex Ying;宋代诗文中的"琼田草""唐婆镜",应是叶面有光泽的D.pleiantha(Hance)Woodson;"木律草"原描述"有二种",形态杂乱,可疏分为D.difformis(Hemsl.et Wils.)T.H.Wang和D.majorensis(Gagnep.)Ying,而花"青白色"者,则当系山荷叶属植物Diphylleia sinensis H.L.Li,它也是马目毒公、旱荷叶、山荷叶的原植物。在分类粗放的古代,它们均与"鬼臼"混同。

八角莲愈伤组织和组培品及野生品中鬼臼毒素的HPLC分析

八角莲为中国特有珍稀植物,有很高的药用价值,其所含的鬼臼毒素是具有一定药效活性的环木脂内酯,具有杀虫、抗风湿、抗病毒、抗肿瘤等活性.试验以八角莲叶、叶柄、根为外植体诱导愈伤组织,将组培苗炼苗移栽,成功建立八角莲的组培-移栽体系,同时采用高效液相色谱技术(HPLC)测定并比较八角莲3种愈伤组织、组培苗和野生植株中鬼臼毒素的含量差异.结果显示,以八角莲叶、叶柄、根为外植体,成功诱导出3种愈伤组织;野生八角莲叶中鬼臼毒素含量最高为(7.27±0.75)mg·g-1DW;愈伤组织培养60d,鬼臼毒素含量为(1.98±0.32)mg·g-1DW.通过组织培养可在不破坏野生资源的前提下生产鬼臼毒素,从而为开发鬼臼毒素类抗癌药物提供大量原料.

濒危药用植物八角莲内生真菌分离鉴定及抗菌活性研究

目的考察广西八角莲[Dysosma versipellis(Hance)M.Cheng]内生真菌的多样性并筛选具有抗菌活性的菌株。方法采用琼脂块法筛选具有抗菌活性的内生真菌;应用ITS-rDNA法鉴定所有分离的内生真菌,并对具有强抗菌活性的菌株进行形态学观察。结果从八角莲根茎叶中共获得19株真菌,其中根12株,叶5株,茎2株;鉴定结果表明,这19株真菌分属于8目13属。抗菌活性筛选发现DV04对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、大肠杆菌(Escherichia coli)和白色念珠菌(Candida albicans)均有较强的抗菌活性,鉴定结果显示,该菌株属于Leptodontidium属暗色有隔真菌(DSE)真菌。结论八角莲中存在丰富的内生真菌,DV04菌株可作为抗菌活性候选菌株进行深入研究。

基于ITS2序列的5种鬼臼类中药材DNA条形码鉴定研究

目的通过分析5种鬼臼类中药材八角莲、南方山荷叶、桃儿七、小八角莲和六角莲的ITS2(internal transcribed spacer2)条形码序列,探讨鬼臼类药材鉴定新方法。方法共收集26份样品,以ITS2作为条形码序列,对各鬼臼类中药材提取基因组DNA,PCR扩增ITS2序列并进行双向测序。所得序列经Codon Code Aligner拼接并剪切后,采用MEGA5.1软件进行序列对比分析,计算遗传距离,分析比较种内、种间序列差异,并构建系统邻接树。结果 5种药材种间存在明显差异,各个种的种内最大遗传距离均小于种间最小遗传距离;构建的系统树各个种不同样本均分别聚在一起,表现出单系性。结论ITS2序列作为DNA条形码可较好地用于鬼臼类中药材DNA条形码的鉴定研究。