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薄荷EβF合成酶基因的克隆及功能分析
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作者 刘迪 甄军波 +2 位作者 刘琳琳 冯晓晴 迟吉娜 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2024年第3期96-103,共8页
EβF合成酶基因在植物体内合成[反]-β-法尼烯,用于抵御蚜虫侵害。为探明薄荷中该基因的表达模式和功能,从薄荷叶片中克隆得到1个新的EβF合成酶基因McβFS1,并对其进行生物信息学分析和表达模式分析。构建过表达载体,利用农杆菌介导的... EβF合成酶基因在植物体内合成[反]-β-法尼烯,用于抵御蚜虫侵害。为探明薄荷中该基因的表达模式和功能,从薄荷叶片中克隆得到1个新的EβF合成酶基因McβFS1,并对其进行生物信息学分析和表达模式分析。构建过表达载体,利用农杆菌介导的浸花法转化拟南芥,并进行蚜虫生物测定。结果表明,McβFS1基因CDS序列全长1 650 bp,编码549个氨基酸。编码蛋白分子质量为63.85 ku,等电点为5.23,无跨膜结构域。二级结构预测其α-螺旋、β-转角、延伸链结构和无规则卷曲所占比例分别为69.58%,3.10%,4.01%和23.32%。系统进化分析结果显示,该基因编码的氨基酸序列与胡椒薄荷的Q5W283.1序列相似度达91.47%,亲缘关系较近,但序列差异较大,是一个新的EβF合成酶基因。荧光定量PCR结果显示,McβFS1在根、茎、叶、花中均有表达,且在叶中的表达量显著高于根、茎中的表达。蚜虫的选择性分析表明,转基因拟南芥对蚜虫具有较强的趋避性。 展开更多
关键词 薄荷 eβf合成酶 蚜虫 生物信息学分析 表达分析
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[反]-β-法尼烯(EβF)合成酶基因在玉米中的转化与筛选
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作者 邢小龙 常纪苹 +2 位作者 付忠军 胡德升 胡彦民 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2017年第1期1-4,共4页
为获得转基因抗虫玉米,将[反]-β-法尼烯(EβF)合成酶基因导入玉米,并进行鉴定和筛选。在[反]-β-法尼烯(EβF)合成酶基因的两端分别添加Nco I和Bam H I酶切位点,并进行人工合成。将EβF合成酶基因与植物表达载体p FGC5941连接,经双酶... 为获得转基因抗虫玉米,将[反]-β-法尼烯(EβF)合成酶基因导入玉米,并进行鉴定和筛选。在[反]-β-法尼烯(EβF)合成酶基因的两端分别添加Nco I和Bam H I酶切位点,并进行人工合成。将EβF合成酶基因与植物表达载体p FGC5941连接,经双酶切和测序鉴定。结果表明:重组表达载体p FGC5941-EβF构建成功;载体p FGC5941-EβF转化农杆菌EHA105后用玉米芽尖侵染法将EβF合成酶基因导入玉米自交系郑58中,对转化植株进行除草剂抗性筛选以及EβF合成酶基因和bar基因的PCR鉴定后,共得到18株转基因阳性植株。 展开更多
关键词 [反]-β-法尼烯(eβf)合成酶基因 玉米 表达载体构建 转基因植株
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薄荷Eβf合成酶基因(Tspa11)的克隆、序列分析与表达特性
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作者 刘一钒 王丹丹 李晓红 《西北林学院学报》 CSCD 北大核心 2020年第3期90-94,共5页
为克隆薄荷Eβf合成酶基因(Tspa11)、分析蛋白质结构特性与理化性质,确定其在薄荷不同组织的表达量差异,本试验以薄荷为材料,采用RT-PCR技术扩增获得Tspa11基因cDNA序列,采用生物信息学软件分析编码蛋白质的结构特性,MEGA7.0软件邻接法... 为克隆薄荷Eβf合成酶基因(Tspa11)、分析蛋白质结构特性与理化性质,确定其在薄荷不同组织的表达量差异,本试验以薄荷为材料,采用RT-PCR技术扩增获得Tspa11基因cDNA序列,采用生物信息学软件分析编码蛋白质的结构特性,MEGA7.0软件邻接法构建氨基酸同源性系统进化树;采用实时定量PCR技术分析Tspa11在薄荷不同组织(种子、根、茎、叶、花)的差异表达情况。结果表明,得到Tspa11基因序列长度为1929 bp,最大开放阅读框为71~1723 bp,共编码550个氨基酸,分子量为63.74 ku,理论等电点(pI)5.21,偏酸性;表明Eβf合成酶是一种稳定的疏水性蛋白。NCBI保守结构域在线分析表明,Eβf合成酶基因编码的氨基酸具有Isoprenoid_Biosyn_C1 Superfamily的保守结构域(E-value:1.32e-03),蛋白氨基端位于膜内;氨基酸同源性分析,夏枯草Eβf合成酶基因与薄荷Tspa11亲缘关系最近,构成了一个小分支,同源性高达90%;夏枯草Tspa11基因在同条件下种子的基因表达量极显著地高于其他组织(P<0.01),根部表达量最低。 展开更多
关键词 薄荷 eβf合成酶基因 抗蚜基因 生物信息学分析 聚类分析
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Expression of an(E)-β-farnesene synthase gene from Asian peppermint in tobacco affected aphid infestation 被引量:7
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作者 Xiudao Yu Yongjun Zhang +3 位作者 Youzhi Ma Zhaoshi Xu Genping Wang Lanqin Xia 《The Crop Journal》 SCIE CAS 2013年第1期50-60,共11页
Aphids are major agricultural pests that cause significant yield losses in crop plants each year.(E)-β-farnesene(EβF) is the main or only component of an alarm pheromone involved in chemical communication within aph... Aphids are major agricultural pests that cause significant yield losses in crop plants each year.(E)-β-farnesene(EβF) is the main or only component of an alarm pheromone involved in chemical communication within aphid species and particularly in the avoidance of predation. EβF also occurs in the essential oil of some plant species, and is catalyzed by EβF synthase. By using oligonucleotide primers designed from the known sequence of an EβF synthase gene from black peppermint(Mentha × piperita), two cDNA sequences, MaβFS1 and MaβFS2, were isolated from Asian peppermint(Mentha asiatica). Expression pattern analysis showed that the MaβFS1 gene exhibited higher expression in flowers than in roots, stems and leaves at the transcriptional level. Overexpression of MaβFS1 in tobacco plants resulted in emission of pure EβF ranging from 2.62 to 4.85 ng d-1g-1of fresh tissue. Tritrophic interactions involving peach aphids(Myzus persicae), and predatory lacewing(Chrysopa septempunctata) larvae demonstrated that transgenic tobacco expressing MaβFS1 had lower aphid infestation. This result suggested that the EβF synthase gene from Asian peppermint could be a good candidate for genetic engineering of agriculturally important crop plants. 展开更多
关键词 eβf synthase gene MeNTHA asiatica MYZUS persicae NICOTIANA tabacum
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田间释放E-β-法尼烯对黄山贡菊蚜虫的生态调控作用 被引量:4
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作者 周海波 刘玉军 陈龙胜 《山东农业科学》 2019年第3期101-104,共4页
为评价E-β-法尼烯(E-β-farnesene,EβF)对黄山贡菊蚜虫及自然天敌的生态调控作用,本研究将EβF加入缓释剂中配成一定浓度的溶液,并将其释放到黄山贡菊田中,利用昆虫诱捕器并结合田间观察,调查蚜虫及其自然天敌种群数量的变化情况。结... 为评价E-β-法尼烯(E-β-farnesene,EβF)对黄山贡菊蚜虫及自然天敌的生态调控作用,本研究将EβF加入缓释剂中配成一定浓度的溶液,并将其释放到黄山贡菊田中,利用昆虫诱捕器并结合田间观察,调查蚜虫及其自然天敌种群数量的变化情况。结果表明,EβF能够有效降低黄山贡菊无翅蚜虫的种群数量(2015:P<0.01,2016:P<0.01),而对有翅蚜虫种群数量的影响并不显著;对瓢虫类(2015:P<0.05,2016:P<0.05)、食蚜蝇类(2015:P<0.01,2016:P<0.05)天敌有较好的吸引作用。该结果证实,EβF对黄山贡菊蚜虫及自然天敌具有良好的生态调控作用,可以作为黄山贡菊蚜虫综合治理的潜在措施,以降低化学农药的施用。 展开更多
关键词 黄山贡菊 e-β-法尼烯(eβf) 蚜虫 自然天敌
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Synthesis and biological activities of(E)-β-farnesene analogues containing 1,2,3-thiadiazole 被引量:3
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作者 Jing-Peng Zhang Yao-Guo Qin +3 位作者 Ya-Wen Dong Dun-Lun Song Hong-Xia Duan Xin-Ling Yang 《Chinese Chemical Letters》 SCIE CAS CSCD 2017年第2期372-376,共5页
In order to discover novel compounds with high-activity to control aphid,a series of novel(E)-β-farnesene analogues containing 1,2,3-thiadiazole were designed and synthesized,and their structures were confirmed by ... In order to discover novel compounds with high-activity to control aphid,a series of novel(E)-β-farnesene analogues containing 1,2,3-thiadiazole were designed and synthesized,and their structures were confirmed by IR,^1H NMR,^13C NMR,and HRMS(ESI).The stability of representative compounds was studied by HPLC and -1H NMR techniques.Repellent activity results indicated that compounds 8h and 8j displayed 60.3%and 62.0%repellent rates,respectively.The aphicidal bioassay results showed that most analogues exhibited considerable aphicidal activity against Myzus persicae.Especially,analogues 81,8s and 8t exhibited high activity with LC50 values of 33.4 μg/mL,50.2 μg/mL and 61.8 μg/mL,respectively,which were higher than the lead compound(E)-β-farnesene,but lower than commercial insecticide pymetrozine with a LC50 of 7.1 μg/mL 展开更多
关键词 eβf analogues 1 2 3-Thiadiazole Synthesis Stability Repellent activity Aphicidal activity
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新型肉桂醛衍生物的设计合成与抗虫活性研究 被引量:1
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作者 左赛杰 张梦飞 +7 位作者 张淑萍 周凯慧 李明敏 杨涵 李菁 郑玉光 赵京山 周莉 《中华卫生杀虫药械》 CAS 2021年第3期202-206,共5页
目的发现具有杀虫、驱虫活性的新型肉桂醛衍生物。方法以肉桂醛和蚜虫报警信息素(反)-β-法尼烯(EβF)的基本母核为基础,采用骨架迁跃原理设计、合成了一类2,5-二取代肉桂醛衍生物,并测定其对棉铃虫、大豆蚜虫和粉尘螨的毒杀活性,以及... 目的发现具有杀虫、驱虫活性的新型肉桂醛衍生物。方法以肉桂醛和蚜虫报警信息素(反)-β-法尼烯(EβF)的基本母核为基础,采用骨架迁跃原理设计、合成了一类2,5-二取代肉桂醛衍生物,并测定其对棉铃虫、大豆蚜虫和粉尘螨的毒杀活性,以及对蚜虫的驱避活性。结果通过1H-NMR、FTIR和ESI-HRMS表征了目标化合物的结构;杀虫活性实验表明目标化合物对棉铃虫、大豆蚜虫和粉尘螨都具有一定的毒杀作用,500 mg/L剂量下对害虫的致死率为53.4%~92.1%,其中杀虫活性最强的为2-氯-5-硝基肉桂醛(化合物4);蚜虫行为实验表明,在2 mg/L剂量时,2-甲基-5-异丙基肉桂醛(化合物5)及2-甲基-4-甲氧基-5-异丙基肉桂醛(化合物6)具有一定的蚜虫驱避活性。结论2-甲基-5-异丙基肉桂醛及其结构类似物同时具有较好的杀虫活性。2位和5位的取代基变为硝基或卤素后,杀虫活性提高,但蚜虫驱避活性下降。 展开更多
关键词 肉桂醛 (反)-β-法尼烯 杀虫活性 驱避活性
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两种麦田蚜茧蜂对蚜虫外激素行为反应的比较研究 被引量:3
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作者 王璐 王康 +1 位作者 董洁 刘勇 《应用昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期223-229,共7页
【目的】麦长管蚜Sitobion avenae(Fabricius)是我国冬小麦产区的重要害虫,燕麦蚜茧蜂Aphidius avenae Haliday和烟蚜茧蜂A.gifuensis Ashmead是麦田寄生蜂优势种。试验比较了2种蚜茧蜂对蚜虫报警外激素(Eβf)和性外激素(NEP)的嗅觉行... 【目的】麦长管蚜Sitobion avenae(Fabricius)是我国冬小麦产区的重要害虫,燕麦蚜茧蜂Aphidius avenae Haliday和烟蚜茧蜂A.gifuensis Ashmead是麦田寄生蜂优势种。试验比较了2种蚜茧蜂对蚜虫报警外激素(Eβf)和性外激素(NEP)的嗅觉行为反应,为蚜虫外激素在害虫控制中的科学应用提供理论依据。【方法】本文以四臂嗅觉计测定了燕麦蚜茧蜂和烟蚜茧蜂对蚜虫报警外激素及性外激素的嗅觉行为趋向及反应阈值。【结果】烟蚜茧蜂雌蜂对高浓度的Eβf(1μg·μL^(-1)、0.1μg·μL^(-1))具有显著的正趋向反应(P<0.01),而燕麦蚜茧蜂雌蜂对低浓度的Eβf(0.01μg·μL^(-1)和0.001μg·μL^(-1))具有显著的正趋向反应(P<0.01)。0.1μg·μL^(-1) Eβf对2种蚜茧蜂雌蜂都有显著吸引作用(烟蚜茧蜂雌蜂:P<0.01;燕麦蚜茧蜂雌蜂:P<0.05)。烟蚜茧蜂雌蜂对设定浓度的NEP具有显著的趋向反应(1μg·μL^(-1)和0.01μg·μL^(-1):P<0.01;0.1μg·μL^(-1)和0.001μg·μL^(-1):P<0.05),而燕麦蚜茧蜂对此没有明显的嗅觉行为反应。从嗅觉行为反应的选择系数看,烟蚜茧蜂雌蜂对1μg·μL^(-1)的Eβf或1μg·μL^(-1) NEP的选择系数最高而燕麦蚜茧蜂雌蜂对0.01μg·μL^(-1)的Eβf选择系数最高。【结论】Eβf和NEP可以作为麦田操纵寄生性天敌行为反应的信号化合物。烟蚜茧蜂可利用Eβf或NEP作为寄主搜寻和定位的化学线索,而燕麦蚜茧蜂仅可利用Eβf作为寄主搜寻和定位的化学线索。 展开更多
关键词 燕麦蚜茧蜂 烟蚜茧蜂 反-β-法尼烯(eβf) 假荆芥内酯(NeP) 嗅觉行为
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[反]-β-法尼烯合成酶基因在植物抗蚜分子育种中的应用 被引量:5
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作者 贾殿勇 高世庆 +3 位作者 段鹏飞 陈吉宝 田风霞 喻修道 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期12-23,共12页
蚜虫是重要的农业害虫,每年造成数以亿计的经济损失。[反]-β-法尼烯[(E)-β-farnesene,EβF]是绝大多数蚜虫报警信息素的主要成分,可使蚜虫产生骚动、从植株上脱落,并吸引蚜虫天敌,有效控制蚜虫危害。EβF合成酶是催化合成EβF的关键酶... 蚜虫是重要的农业害虫,每年造成数以亿计的经济损失。[反]-β-法尼烯[(E)-β-farnesene,EβF]是绝大多数蚜虫报警信息素的主要成分,可使蚜虫产生骚动、从植株上脱落,并吸引蚜虫天敌,有效控制蚜虫危害。EβF合成酶是催化合成EβF的关键酶,目前该基因已从薄荷、香橙、花旗松、黄花蒿、洋甘菊等植物中得到分离鉴定。植物中表达EβF合成酶基因以催化法呢基焦磷酸(Farnesyl diphosphate,FPP)合成EβF是控制蚜虫危害的重要策略。文中概括了当前植物抗蚜转基因研究现状,综述了植物EβF合成酶基因及其在植物抗蚜分子育种中的应用。针对当前转基因植物的EβF生成量较低等问题,展望了EβF合成酶基因在植物抗蚜分子育种中的应用前景和研究策略。 展开更多
关键词 蚜虫 蚜虫报警信息素 [反]-β-法尼烯 eβf合成酶基因 植物分子育种
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