胃癌中E-cadherin和DAPK基因启动子异常甲基化的研究

目的:检测胃癌中死亡相关蛋白激酶(death-associated protein kinase,DAPK)基因和上皮钙粘蛋白(epithelialcadherill,E-cadherin)基因启动子区CpG岛甲基化状态,并探讨两个基因甲基化改变的特点及其与临床病理特征、患者一般资料之间的关系。方法:采用目前常用的甲基化特异性PCR(Methylation-specific PCR,MSP)方法检测41例胃癌组织和20例正常对照组织中DAPK、E-cadherin基因启动子区甲基化状态并进行统计分析。结果:41例胃癌组织中DAPK、E-cadherin基因启动子区甲基化阳性率分别为68.3%(28/41)和46.3%(19/41),20例正常对照组织中未检测到DAPK、E-cadherin基因启动子区发生甲基化,两个基因在胃癌组织中的甲基化率明显高于正常对照组织(P<0.05),但DAPK和E-cadherin基因启动子甲基化在胃癌的发生中无协同性(相关性和一致性)。胃癌组织中一个基因发生甲基化的检出率为78.0%(32/41);胃癌组织中DAPK基因启动子区甲基化与淋巴结转移、分化程度相关(P<0.05),而E-cadherin基因启动子区甲基化则与淋巴结转移和浸润深度有相关性(P<0.05),两个基因启动子区异常甲基化与被检查者肿瘤的大小、肿痛的部位等临床病理特征以及被检者的性别、年龄不具有相关性。结论:DAPK、E-cadherin基因启动子区甲基化是胃癌发生、发展过程中的频发事件,通过检测胃粘膜组织中两个基因启动子区甲基化状况,可能会对胃癌的早期诊断及判断预后提供一定的参考价值;联合检测两个基因甲基化状态优于各单个基因检测。

甲状腺乳头状癌及其临床病理特征与Braf蛋白表达、BRAF V600E基因突变之间的关系

目的:观察甲状腺乳头状癌临床病理特征和BRAF V600E基因突变、BRAF蛋白表达的相关性。方法:临床选择2019年7月~2020年2月在深圳市龙岗中心医院就诊的原发性甲状腺乳头状癌患者100例,对其临床病理信息进行收集,PCR扩增后测序,分析甲状腺乳头状癌临床病理特征和BRAF V600E基因、Braf蛋白表达之间的关系。结果:BRAF V600E基因突变、Braf蛋白表达情况与肿瘤复发/远处转移、肿瘤分期、肿瘤大小、年龄等因素密切相关,差异有统计学意义(P<0.05);100例甲状腺乳头状癌出现钙化者为47例(47.0%),通常具有粗大片状钙化、砂砾样钙化,研究发现BRAF基因突变状态与钙化类型、是否出现钙化无明显相关性。结论:甲状腺乳头状癌的临床病理指标与BRAF V600E基因突变、Braf蛋白表达密切相关,是评估甲状腺乳头状癌的相关预后因子之一。

E-cadherin和p16基因蛋白在鼻咽癌中的表达及意义

目的：探讨Ｅ－钙粘素（Ｅ－ｃａｄｈｅｒｉｎ）和ｐ１６基因与鼻咽癌发生发展的关系。方法：采用免疫组化方法检测７４例鼻咽癌组织和２０例炎性鼻咽部组织中Ｅ－ｃａｄｈｅｒｉｎ和ｐ１６基因蛋白的表达。结果：炎性组织Ｅ－ｃａｄｈｅｒｉｎ和 ｐ１６显著高于鼻咽癌组织（ Ｐ＜ ０． ０５）； Ｅ－ｃａｄｈｅｒｉｎ和 ｐ１６保留表达与临床分期、病灶大小无关（ Ｐ＞ ０． ０５），但在颈淋巴结转移组显著低于无颈淋巴结转移组（Ｐ＜ ０．０５）。结论：本实验结果提示 Ｅ－ｃａｄｈｅｒｉｎ和 ｐ１６基因可能与鼻咽癌的转移潜能有关，其确切作用有待于进一步研究。

Snail基因及其蛋白、E-cadherin蛋白在胃癌中的表达及其临床意义

目的观察Snail mRNA及其蛋白、E-cadherin蛋白在胃癌组织中的表达及其与胃癌临床病理特征的关系,并探讨它们在胃癌发生、发展中的作用及其临床应用价值。方法收集96例手术切除胃癌标本,同时取80例癌旁组织作为对照。应用免疫组织化学S-P法检测胃癌组织、癌旁组织中snail蛋白、E-cadherin蛋白的表达;运用原位分子杂交技术检测胃癌组织、癌旁组织中Snail mRNA的表达。结果(1)Snail蛋白在胃癌组织阳性率(83.3%)显著高于癌旁组织(41.25%)(P<0.05);高、中分化组Snail蛋白阳性表达率显著低于低分化组(P<0.05);Snail蛋白的阳性表达率在乳头状腺癌、管状腺癌及低分化腺癌与黏液癌之间差异有显著性(P<0.05);Snail蛋白的表达与胃癌浸润深度、淋巴结转移及远处转移有关(P<0.05),与性别、年龄、肿瘤大小、肿瘤部位及临床分期无关(P>0.05);(2)胃癌组织中snail mR-NA的阳性率(76%)显著高于癌旁组织(30%)(P<0.05);高、中分化组Snail mRNA阳性表达率显著低于低分化组(P<0.05);Snail mRNA的阳性表达率在乳头状腺癌、管状腺癌及低分化腺癌与黏液癌之间差异有显著性(P<0.05);Snail mRNA的表达与浸润深度及淋巴结转移有关(P<0.05),与性别、年龄、肿瘤大小、肿瘤部位、临床分期及远处转移无关(P>0.05);(3)E-cadherin蛋白在胃癌组织阳性率(37.5%)显著低于癌旁组织(100%)(P<0.05);高、中分化组E-cadherin蛋白阳性率显著高于低分化组(P<0.05);E-cadherin蛋白阳性率在乳头状腺癌、管状腺癌及低分化腺癌与黏液癌之间差异有显著性(P<0.05);E-cadherin蛋白的表达与胃癌浸润深度、淋巴结转移、临床分期及远处转移有关(P<0.05),与性别、年龄、肿瘤大小、肿瘤部位均无关(P>0.05);(4)胃癌组织中snail mRNA和snail蛋白的表达呈正相关(r=0.594,P<0.05);Snail蛋白和E-cadherin蛋白的表达呈负相关(r=-0.234,P<0.05)。结论(1)E-cadher-in蛋白低表达与Snail蛋白高表达可能是胃黏膜恶性转变以及胃癌发生浸润转移的重要生物学标志;联合检测E-cadherin蛋白与Snail蛋白对预测胃癌浸润转移有重要意义。(2)Snail蛋白可能在转录水平上调控E-cadherin蛋白的表达。

胃癌发展相关阶段中E-cadherin基因启动子甲基化及蛋白表达的研究

为了研究E cadherin基因启动子甲基化在胃癌发生及发展阶段中的作用 ,我们采用甲基化特异性PCR和免疫组化的方法对异型增生 (2 3例 )、早期胃癌 (2 0例 )和进展期胃癌 (2 0例 )石蜡标本进行启动子甲基化状态及蛋白表达的分析。结果表明E cadherin基因启动子在异型增生、早期胃癌和进展期胃癌中均有甲基化 ,其阳性率分别为78 3% ,80 %和 90 % ,经χ2 检验各病例组与正常组 (30 % )比较均有差异 (P <0 0 5 ) ,但各病例组间没有差异 (P >0 0 5 ) ;进展期胃癌E cadherin蛋白表达全部阴性 ,早期胃癌 70 %阴性 ,异型增生中无蛋白阴性 ,在早期胃癌和进展期胃癌 34例蛋白表达阴性的标本中 31例有启动子甲基化 (91 2 % ) ,蛋白表达与启动子甲基化呈明显负相关 (P <0 0 1)。表明E cadherin启动子甲基化是胃癌发生的早期事件 ,也是胃癌发生。

肝细胞肝癌中转录辅抑制因子CtBP1与其靶基因E-cadherin的表达

目的探讨转录辅抑制因子CtBP1在肝细胞肝癌中的表达状况及对其靶基因E-cadherin表达的影响。方法采用免疫组化方法检测肝细胞肝癌组织芯片中CtBP1及E-cadherin的表达。结果 CtBP1在肝细胞肝癌组织中表达阳性率为79.69%(204/256),其表达与分化程度相关(P=0.049);E-cadherin在肝细胞肝癌组织表达率为20.31%(52/256),与肿瘤分级相关(P=0.027);CtBP1在肝细胞肝癌组织中表达与E-cadherin呈负相关(P=0.036)。结论在肝细胞肝癌组织中,CtBP1和E-cadherin可以作为肿瘤诊断的分子标记;同时转录辅抑制因子CtBP1对其靶基因E-cadherin的表达有抑制作用。

胃癌E-cadherin基因启动子CpG岛甲基化的研究

背景与目的:目前认为CpG岛甲基化导致转录抑制是恶性肿瘤发生的重要机制之一。E-cadherin能抑制肿瘤细胞的浸润和转移,被公认为是浸润、转移抑制基因。低分化胃癌常表现有E-cadherin基因失活。我们通过检测胃癌及癌旁组织中E-cadherin基因启动子CpG岛甲基化水平,初步探讨胃癌的发病机制。方法:采用特异性甲基化PCR(MSP)法检测51例胃癌组织及37例癌旁组织中的E-cadherin基因启动子CpG岛甲基化水平,采用免疫组织化学染色法检测E-cadherin表达。结果:健康对照组织中未检测到CpG岛甲基化,4例(10.8%)癌旁组织检测到CpG岛甲基化,32例(62.7%)胃癌组织中检测到CpG岛甲基化。低分化腺癌(72.2%,26/36)CpG岛甲基化显著高于高分化腺癌(33.3%,6/15)(P<0.01),T1/T2期(55.6%,10/18)与T3/T4期胃癌(66.7%,22/33)的CpG岛甲基化率无显著性差异(P>0.05)。32例CpG岛甲基化胃癌中27例(84.5%)E-cadherin表达下调,19例非甲基化胃癌中5例(26.3%)E-cadherin表达下调。未发现E-cadherin基因CpG岛甲基化与幽门螺杆菌感染有关。结论:胃癌、尤其是低分化腺癌广泛存在E-cadherin基因启动子CpG岛甲基化,启动子CpG岛甲基化可能参与胃癌的早期过程,E-cadherin基因CpG岛甲基化与幽门螺杆菌感染无相关关系。

结直肠腺癌发病基因fbxl20和E—cadherin的相关性研究

目的研究fbxl20与E—cadherin基因与结直肠癌临床病理特征的关系及其表达水平间的相关性。方法收集50例结直肠腺癌组织及对照癌旁组织，用半定量PCR技术检测fbxl20及E—cad．herin基因的表达水平并进行相关性分析。结果fbxl20基因在结直肠腺癌组织中的表达水平显著高于癌旁组织（0．479±0．141 vs．0．296±0．121，P=0．001）；E—cadherin基因在结直肠腺癌组织中的表达水平显著低于癌旁组织（0．440±0．026vs．0．741±0．059，P=0．000）；fbxl20与E—cadherin基因在本研究50例结直肠腺癌组织中的表达水平无相关性（r=-0．165，P=0．251）。但是，在低分化和高分化肿瘤组织及D期肿瘤组织中，fbxl20与E—cadherin基因的表达水平呈负相关（r=-0．600，P=0．008；r=-0．784，P=0．017；r=-0．643，P=0．032）。结论E—cadherin基因在结直肠腺癌组织中的低表达可能与fbxl20基因的高表达有关，且结直肠腺癌晚期肿瘤的高迁移性及高侵袭性可能与E—cadherin有关。

甲基化特异性PCR法检测胰腺癌组织E-cadherin基因甲基化

目的:探讨胰腺癌组织E-cadherin(E-cad,上皮钙粘附素)5’-CpG岛异常甲基化情况;进一步讨论DNA异常甲基化在临床早期诊断、预后中的应用。方法:应用甲基化特异性PCR(MSP)检测27例胰腺癌组织和9例良性胰腺组织E-cad基因甲基化情况。结果:①在9例胰腺良性肿瘤及正常胰腺组织中,E-cad基因非甲基化PCR扩增均为阳性,未见甲基化PCR扩增。②在27例胰腺癌组织E-cad基因甲基化PCR扩增阳性9例(33.33%,9/27),其中完全甲基化6例,部分甲基化3例;而非甲基化PCR扩增阳性为18例(66.67%,18/27)。③E-cad基因异常甲基化与性别、年龄大小、肿瘤大小之间均无显著性差异(P>0.05),但与肿瘤的组织学分级相关。结论:在胰腺癌组织中E-cad基因异常甲基化是胰腺癌组织区别于其它胰腺良性病变的生物学标志之一。

胃癌组织中E-cadherin基因启动子异常甲基化状态观察

目的观察胃癌组织中E-cadherin基因启动子异常甲基化状态。方法采用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)技术检测54例胃癌及其癌旁正常组织中的E-cadherin基因启动子异常甲基化状态,并分析E-cadherin基因启动子异常甲基化状态与胃癌临床病理参数的关系。结果胃癌组织中的E-cadherin基因启动子异常甲基化发生频率为48.10%(26/54),明显高于癌旁正常组织中的11.11%(6/54)。E-cadherin基因启动子异常甲基化频率与胃癌分化程度、病理类型、浸润深度以及淋巴结转移、临床分期有关(P均<0.05)。结论胃癌组织中E-cadher-in基因启动子异常甲基化频率较高,并与胃癌浸润、转移有关。

血清β-catenin、E-cadherin水平与糖尿病肾病患者钙磷代谢、颈动脉钙化的关系

目的探讨血清E-钙黏蛋白(E-cadherin)、β-连环蛋白(β-catenin)水平与糖尿病肾病患者钙磷代谢、颈动脉钙化的关系。方法选择2019年5月至2022年11月该院收治的112例糖尿病肾病患者作为研究组,并根据双侧颈动脉彩超检查结果分为颈动脉钙化组(n=44)和非颈动脉钙化组(n=68),另选同期于该院接受体检的90例体检健康者为对照组。检测并比较各组血清E-cadherin、β-catenin及钙磷代谢水平,采用Pearson相关分析血清E-cadherin、β-catenin水平与糖尿病肾病患者钙磷代谢的关系,采用受试者工作特征(ROC)曲线评估血清E-cadherin、β-catenin对糖尿病肾病患者颈动脉钙化的预测价值,采用多因素Logistic回归分析糖尿病肾病患者颈动脉钙化的影响因素。结果研究组糖化血红蛋白、血磷、钙磷乘积、甲状旁腺激素(iPTH)、肌酐、碱性磷酸酶、β-catenin水平均高于对照组,E-cadherin水平低于对照组(P<0.05)。颈动脉钙化组血磷、血钙、钙磷乘积、iPTH、肌酐、碱性磷酸酶、β-catenin水平均高于非颈动脉钙化组,E-cadherin水平低于非颈动脉钙化组(P<0.001)。Pearson相关分析显示,糖尿病肾病患者血清E-cadherin与血磷、血钙、钙磷乘积、iPTH、肌酐、碱性磷酸酶均呈负相关(r=-0.453、-0.654、-0.365、-0.490、-0.411、-0.377,均P<0.05),血清β-catenin水平与血磷、血钙、钙磷乘积、iPTH、肌酐、碱性磷酸酶均呈正相关(r=0.444、0.345、0.421、0.398、0.651、0.622,均P<0.001)。ROC曲线分析显示,血清E-cadherin、β-catenin及二者联合预测糖尿病肾病颈动脉钙化的曲线下面积分别为0.844(95%CI 0.795~0.894)、0.853(95%CI 0.801~0.901)、0.901(95%CI 0.851~0.952)。多因素Logistic回归分析显示,血清E-cadherin(OR=3.789,95%CI 2.055~6.983)、β-catenin(OR=4.104,95%CI 1.795~9.385)、钙磷乘积(OR=2.998,95%CI 1.895~4.743)、iPTH(OR=2.713,95%CI 1.787~4.118)均是糖尿病肾病患者颈动脉钙化的影响因素(P<0.05)。结论糖尿病肾病患者β-catenin水平升高,E-cadherin水平降低,二者与患者钙磷代谢、颈动脉钙化密切相关,可作为评估糖尿病肾病患者颈动脉钙化的有效指标,同时二者联合对颈动脉钙化的预测价值更高。

肺癌E-cadherin基因启动子CpG岛甲基化与蛋白表达的关系及其意义

背景与目的:目前认为CpG岛甲基化导致转录抑制是恶性肿瘤发生的重要机制之一。E-cadherin能抑制肿瘤细胞的浸润和转移,被公认为是浸润、转移抑制基因。本研究检测肺癌组织中E-cadherin基因启动子CpG岛甲基化的状况,并探讨基因异常甲基化与蛋白表达的关系及其意义。方法:采用甲基化特异性PCR技术,检测22例肺癌组织,相应的癌旁组织和9例正常肺组织中E-cadherin基因启动子CpG岛甲基化的状况。采用免疫组化S-P法相应检测了E-cadherin蛋白的表达。结果:肺癌中E-cadherin基因启动子CpG岛完全甲基化率为13.6%(3/22),部分甲基化率为27.3%(6/22),总甲基化率为40.9%(9/22),显著高于相应癌旁组织中该基因的甲基化率9.1%(2/22)(P<0.05)。9例正常肺组织中未检测到此基因的甲基化(0/9)。22例癌组织中E-cadherin蛋白表达减弱或缺失率59.1%(13/22),显著高于相应癌旁组织蛋白表达减弱缺失率27.3%(6/22)。肺癌组织中发生甲基化者蛋白表达率及强度明显低于未甲基化者。结论:肺癌组织中存在E-cadherin基因启动子CpG岛的异常甲基化,E-cadherin基因启动子CpG岛的异常甲基化可能是E-cadherin蛋白表达下调的主要原因。

食管鳞癌中hMLH1、E-cadherin、p16^INK4a基因启动子甲基化及其意义

背景与目的:目前认为抑癌基因启动子甲基化导致转录抑制是恶性肿瘤发生的重要机制之一,hMLH1、E-cadherin及p16INK4a基因在多种恶性肿瘤中都已被证实存在较高频率的甲基化。本研究通过检测食管鳞癌组织及癌旁组织中hMLH1、E-cadherin、p16INK4a基因启动子甲基化的发生情况,探讨hMLH1、E-cadherin、p16INK4a基因启动子甲基化在食管鳞癌发生发展中的作用。方法:采用酚-氯仿法提取105例食管鳞癌组织及癌旁组织的基因组DNA,应用甲基化特异性PCR对所提DNA进行hMLH1、E-cadherin、p16INK4a基因甲基化检测。采用EnVison免疫组织化学二步法对癌组织中上述3种基因蛋白表达进行检测。结果:癌组织中E-cadherin、hMLH1、p16INK4a基因启动子甲基化的阳性率分别为57.1%(60/105)、20.9%(22/105)和50.5%(53/105),而癌旁食管组织中相应的3个基因的甲基化率分别为10.5%(11/105)、1.9%(2/105)和7.6%(8/105),均显著低于癌组织。E-cadherin(P=0.021)及p16INK4a(P=0.026)基因甲基化与蛋白表达缺失密切相关,而hMLH1基因甲基化与蛋白表达无显著相关性。E-cadherin基因启动子甲基化与淋巴结转移有关(P=0.016),p16INK4a基因启动子甲基化与低分化癌有关性(P=0.024)。hMLH1基因甲基化与各项临床病理特征均无关。结论:食管鳞癌中p16INK4a基因启动子甲基化与相应蛋白表达缺失密切相关,且在低分化癌中更多见;E-cadherin基因启动子甲基化与相应蛋白质表达缺失有相关性,并且有淋巴结转移多见的显著特征,这2个基因的甲基化位点与食管鳞癌密切相关。hMLH1基因甲基化可能并不直接参与食管鳞癌的发生、发展。

组织中MMP-9、E-cadherin与子宫内膜样癌伴MELF浸润方式及肿瘤侵袭程度的关系

目的分析子宫内膜样癌组织中基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)-9、E-钙黏蛋白(E-cadherin)与微囊性、伸长及碎片状(microcystic,elongation,and fragmentation,MELF)浸润方式及肿瘤侵袭程度之间的关系,探讨能够识别子宫内膜样癌伴MELF浸润的指标,抑制肿瘤侵袭能力。方法回顾性分析在河北北方学院附属第一医院接受手术治疗的112例子宫内膜样癌患者临床资料,全部患者均顺利完成改良根治性子宫切除术,并获得肿瘤标准,根据病理检查结果对112例患者进行分组,分为MELF组和N-MELF组。统计112例患者一般临床资料,血液检查项目包括肿瘤标志物,免疫组织化学检查项目包括组织中MMP-9、E-cadherin,根据检查结果,构建Logistic回归模型,分析组织中MMP-9、E-cadherin及相关指标与子宫内膜样癌MELF浸润方式及肿瘤侵袭程度的关系。结果研究中112例子宫内膜样癌患者,评估为MELF浸润患者21例(18.75%);MELF浸润患者病理等级低级别,国际妇产科联盟(International Federation of Gynecology and Obstetrics,FIGO)ⅣA期,淋巴脉管间隙浸润(lymphatic vascular space,LVSI)、组织中MMP-9阳性患者占比多于N-MELF浸润患者,E-cadherin阳性患者占比少于N-MELF浸润患者,人附睾蛋白(humanepididymisprotein 4,HE4),甲壳质酶蛋白(human cartilageglycopmtein,YKL-40)水平高于N-MELF患者,差异有统计学意义(P<0.05)。多元Logistic回归分析提示,组织中E-cadherin表达率低、MMP-9表达率高,MELF浸润与子宫内膜样癌FIGO分期进展有关(P<0.05)。结论子宫内膜样癌发生MELF浸润与组织中MMP-9、E-cadherin有关,MMP-9表达率高和E-cadherin表达率低能够通过导致MELF浸润发生,从而增强肿瘤侵袭能力。

E-cadherin、β-catenin、γ-catenin基因在胃癌组织中表达与侵袭转移的相关性

目的探讨上皮型钙粘蛋白(E-cadherin)、连接素-β(β-catenin)及连接素-γ(γ-catenin)基因在胃癌组织中表达与侵袭转移的关系。方法采用免疫组织化学SP方法对60例胃癌、20例癌前病变(包括10例肠化生胃粘膜和10例异型增生胃粘膜)及20例正常组织进行E-cadherin、β-catenin、γ-catenin基因表达情况的检测。结果正常胃粘膜及肠化生胃粘膜组织中E-cadherin、β-catenin、γ-catenin的细胞膜均呈清晰的棕褐色染色;胃异型增生组织中,E-cadherin及β-catenin在同1例细胞膜表达基本丢失,γ-catenin表达未见异常,即在异型增生胃粘膜三者异常表达率为10%(1/10),在胃癌原发灶为80%(48/60),与胃癌Ming分型、TNM分期、淋巴结转移密切相关(P<0.05)。E-cadherin、β-catenin、γ-catenin基因异常表达率分别为61.67%、55.00%、58.33%。结论E-cadherin、β-catenin、γ-catenin基因异常表达导致细胞间粘附性下降,影响了细胞接触性生长抑制等信号的传导,从而参与细胞的恶性转化,与胃癌的生长类型、侵袭转移密切相关,是判断胃癌生物学行为的良好指标。

2018—2020年福建地区猪瘟病毒E0基因遗传变异分析

为了了解2018—2020年福建地区猪瘟病毒流行及遗传变异情况,收集福建省不同地区临床发病猪的血液和肺脏、脾脏、淋巴结等组织样本1464份,采用RT-nPCR的方法对样品进行CSFV检测,对部分CSFV阳性样品E0基因进行克隆测序。结果显示,CSFV总体阳性率为1.9%(29/1464),并获得13株CSFV E0基因序列。同源性分析发现所得13株CSFV E0基因之间的同源性在82.2%-99.7%,其中11株CSFV E0基因与1.1亚型代表毒株HCLV的核苷酸同源性为99.0%~99.9%,与Shimen株的核苷酸同源性94.1%~95.0%;1株与2.1c型参考毒株HNSD-2012核苷酸同源性为98.2%;1株与2.1d亚型毒株CSFV/JPN/2018核苷酸同源性为99.6%。遗传进化分析发现,10株CSFV与HCLV、C-ZJ-2008、Shimen和Brescia处于同一分支,属于1.1亚型;1株CSFV与HNSD-2012等位于同一分支,属于2.1c亚亚型;1株与CSFV/JPN/2018等位于同一分支,属于2.1d亚亚型。氨基酸序列分析发现,13株毒株与HCLV等代表毒株在重要的Rnase活性位点高度保守,其中2株2.1亚型毒株与HCLV毒株相比,其在第35位非关键氨基酸残基上发生由G→E的突变。结果表明福建地区CSFV流行情况趋向多样化,提示仍需加强对CSFV流行及遗传变异的持续监测,为猪瘟的诊断及有效防控奠定基础。

E-cadherin基因启动子C-160A SNP与胃癌的相关性

目的探讨E-cadherin基因启动子区C-160A与胃癌易感性之间的联系。方法通过聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法,分析150例健康人群(对照组)和150例胃癌患者(胃癌组)的E-cadherin启动子区-160位点SNP情况。结果胃癌组E-cadherin基因启动子区-160位点基因型和等位基因型分布与对照组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。根据吸烟状况、上消化道恶性肿瘤家族史和术后病理分期分层分析发现,无论吸烟与否,在胃癌患者和健康个体中,E-cadherin-160基因型及等位基因型分布均有显著性差异(P<0.05),而无论吸烟状况、上消化道恶性肿瘤家族史和病理分期状态,E-cadherin-160基因型及等位基因型在胃癌患者中的分布未呈现出显著性差异(P>0.05)。结论 E-cadherin C-160A多态性基因型和等位基因型与胃癌的易感性相关,E-cadherinC-160A多态性与胃癌患者吸烟状况、上消化道肿瘤家族史和术后病理分期之间无相关性。

K-ras基因突变通过调节E-cadherin/β-catenin/p120蛋白复合体形成和RhoA蛋白活性对结肠癌细胞株Caco-2转移的影响

目的观察K-ras基因突变通过调节E-cadherin/β-catenin/p120蛋白复合体形成和RhoA蛋白活性对结肠癌细胞株Caco-2转移的影响,探讨其促进结肠癌转移的相关机制。方法将培养的结肠癌细胞株Caco-2分别给予空白质粒phr-GFP转染(对照组)、K-ras基因突变型质粒phr-K-ras(Val12)转染(转染组)、phr-K-ras(Val12)质粒转染+丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)途径特异性抑制剂PD98059处理(MAPK抑制组)和phr-K-ras(Val12)质粒转染+磷脂酰肌醇3激酶(PI-3K)途径特异性抑制剂LY294002处理(PI-3K抑制组),Transwell细胞迁移实验检测细胞迁移率,细胞免疫荧光检测E-cadherin、β-catenin蛋白表达及其在细胞内定位,Western blot检测细胞内p120蛋白的表达,免疫沉淀检测与E-cadherin结合的β-catenin蛋白水平,Pull-down实验检测RhoA蛋白活性。结果转染组Caco-2细胞的迁移率为(19.8±5.6)%,明显高于对照组的(14.0±4.2)%(P=0.001)和MAPK抑制组的(15.8±1.2)%(P=0.044),但与PI-3K抑制组的(17.5±2.8)%差异无统计学意义(P=0.095)。细胞免疫荧光检测结果显示,转染组细胞膜上的E-cadherin和β-catenin蛋白表达减少。Western blot检测结果显示,转染组和PI-3K抑制组细胞内p120总蛋白表达减少。免疫沉淀检测结果显示,转染组和PI-3K抑制组细胞内与E-cadhenn结合的β-catenin蛋白水平下降。Pulldown实验检测结果显示,转染组细胞内的RhoA蛋白活性增加。结论K-ras基因突变可以促进结肠癌细胞株Caco-2的转移,其可能是通过MAPK途径减少E-cadherin/β-catenin/p120蛋白复合体形成,增强RhoA蛋白活性来实现的。

miR-200c/ZEB1/E-cadherin轴在胆管癌转移侵袭中的作用及对胆管癌预后评估的价值

目的:探讨微小RNA-200c(miR-200c)/锌指转录因子(ZEB1)/E-钙黏蛋白(E-cadherin)在胆管癌(HCCA)转移、侵袭中的作用及对HCCA预后评估的临床价值。方法:选取2020年08月至2022年12月间我院收治的胆管癌患者36例为研究对象,同时选取胆管良性疾病患者(胆总管结石或胆管良性狭窄)20例作为对照。采用原位杂交、实时荧光定量PCR检测miR-200c在HCCA患者组织及血清中的表达;生存曲线分析miR-200c表达与总生存期的相关性;Transwell实验检测细胞的迁移及侵袭能力;免疫印迹检测ZEB1及E-cadherin蛋白的表达。体内研究构建裸鼠成瘤实验,采用免疫组化检测ZEB1及E-cadherin蛋白的表达;Tunel技术检测组织中的凋亡情况。受试者工作特征(ROC)曲线评估生物标志物对胆管癌预后的诊断效能。结果:miR-200c低表达于HCCA组织及血清中;生存曲线分析显示,miR-200c表达与患者的总生存期呈正相关性,TNM分期与患者的总生存期呈负相关性;miR-200c mimics抑制了胆管癌细胞的迁移和侵袭能力,并降低ZEB1表达而诱导E-cadherin表达;转染ZEB1逆转miR-200c的作用效应,促进胆管癌细胞的迁移和侵袭特性,抑制胆管癌细胞的凋亡。CA199、CEA和miR-200c联合检测诊断胆管癌预后的ROC曲线下面积为0.892,灵敏度0.8611,特异度0.8000。结论:miR-200c/ZEB1/Ecadherin轴参与胆管癌的转移侵袭;CA199、CEA和miR-200c联合检测对胆管癌预后的诊断效能良好,对临床胆管癌的治疗策略具有重要指导价值。

nm23-H1和E-Cadherin基因蛋白在胆囊癌组织中的表达

目的 :探讨nm2 3 H1和E Cadherin(E Cad)基因蛋白在胆囊癌组织中的表达与组织类型、病理分级和转移的关系 ,及nm2 3 H1和E Cad基因蛋白表达的相关性。方法 :应用催化信号放大系统免疫组化方法 ,检测 5 2例胆囊腺癌、2 0例胆囊腺瘤和 10例慢性胆囊炎组织中nm2 3 H1和E Cad表达水平。结果 :在胆囊癌中nm2 3 H1和E Cad阳性表达率分别为 5 1.9%和 4 2 .3% ,均明显低于胆囊腺瘤和慢性胆囊炎 (P <0 .0 5 )。nm2 3 H1和E Cad表达与胆囊癌的组织类型、病理分级和转移密切相关 (P <0 .0 5 )。两基因蛋白表达在胆囊癌组织中呈正相关 (P <0 .0 5 )。结论 :nm2 3 H1和E Cad基因与胆囊癌的转移密切相关 。