广东省中山市登革Ⅰ型病毒的分离鉴定及E/NS1基因序列分析

目的分离鉴定中山市2007年及2012年流行的登革病毒，从分子水平分析其地域来源和系统进化情况。方法用C6／36细胞分离10份2007年登革病毒特异性IgM抗体阳性血清和4份2012年登革病毒核酸阳性血清中的病毒，采用Realtime—PCR对毒株进行血清型鉴定，RT—PCR扩增毒株E／NSl基因并进行序列测定，分析其与不同区域流行株和国际标准株的同源性和系统进化情况。结果共分离鉴定到6株登革I型病毒，其中2株为2007年流行株，4株为2012年流行株，分别命名为2007ZSDenguel-2和2012ZSDenguel-4。2012ZSDenguel-2与柬埔寨、越南等东南亚国家近年流行的登革I型毒株相似性高（大于99．0％），进化距离最短（0．011～0．012）。2012ZSDengue3—4，2007Z—SDenguel-2与广东省珠海市2007年流行和新加坡、日本、泰国等亚洲国家近年流行的登革I型毒株相似性高（大于99．0％），进化距离最短（0．007～0．024）。中山流行株与登革I型国际标准株、非洲和美洲流行株相似性在90．0％～94．0％之间，进化距离较远（0．065--0．108）；与登革Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ型国际标准株NGC、I-187、I-t241相似性约为68．0％、66．0％、71．0％，进化距离最远（0．369--0．505）。结论中山市2007年及2012年流行株为登革I型病毒，可能属于东南亚国家输入性毒株，但输入源头有所不同。